尿液微量蛋白4項(xiàng)檢測對糖尿病腎病的早期診斷價(jià)值

李艷 張家明 卓少賢 黃彩云

論 著

尿液微量蛋白4項(xiàng)檢測對糖尿病腎病的早期診斷價(jià)值

李艷 張家明 卓少賢 黃彩云

目的探討尿微量白蛋白（MA）、尿轉(zhuǎn)鐵蛋白（TRF）、α1-微球蛋白（α1-MG）及β2-微球蛋白（β2-MG）的定量檢測對糖尿病腎病（DN）的早期診斷價(jià)值。方法根據(jù)尿蛋白定性試驗(yàn)將65例2型糖尿病患者分為尿蛋白定性陽性組和陰性組，采用免疫比濁法定量檢測65例2型糖尿病患者及30例健康體檢人員的MA、TRF、α1-MG及β2-MG水平，并對結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)和分析。結(jié)果尿蛋白定性陽性組和尿蛋白定性陰性組患者的MA（mg/L：28.6±4.4、11.3±1.9比6.9±1.1）、TRF（mg/L：3.5±0.9、1.3±0.4比1.1±0.3）、α1-MG（mg/L：28.1±6.3、9.4±2.0比8.2±1.9）及β2-MG（mg/L：4.77±0.71、1.58±0.39比0.94±0.22）均明顯高于正常對照組，且尿蛋白陽性組的這4項(xiàng)微量蛋白水平又明顯高于尿蛋白陰性組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＜0.05）；MA、TRF、α1-MG及β2-MG單項(xiàng)檢測對2型糖尿病患者診斷的陽性率分別為41.5%、44.6%、38.5%及33.8%，聯(lián)合檢測這4項(xiàng)微量蛋白的陽性率可高達(dá)90.5%。結(jié)論尿MA、TRF、α1-MG及β2-MG是DN的早期診斷的敏感指標(biāo)，聯(lián)合檢測這4項(xiàng)指標(biāo)對提高DN的早期診斷以及鑒別其病變部位有重要意義。

尿微量蛋白； 糖尿病腎??； 早期診斷

糖尿病（DM）是一組以高血糖為主要特征的代謝性疾病，長期存在的高血糖容易導(dǎo)致各種組織特別是眼、心、腎、神經(jīng)等慢性損害。糖尿病腎病（DN）是糖尿病最常見且最嚴(yán)重的并發(fā)癥。流行病學(xué)調(diào)查表明，合并腎損害的糖尿病患者比未合并腎損害患者病死率高達(dá)30倍。DN患者早期發(fā)病較為隱匿，無明顯表現(xiàn)，且病情進(jìn)展較慢，容易被忽略，一般尿常規(guī)難以檢出，一旦檢測出臨床蛋白尿，腎損害已經(jīng)較嚴(yán)重，且難治愈。可見，為了盡早預(yù)防糖尿病腎損害，如能在患者尿微量蛋白（MA）陽性出現(xiàn)之前就能預(yù)先檢測出并早期診斷、及時(shí)治療，對延緩DN患者的病情進(jìn)展及提高其生活質(zhì)量意義重大。

1 資料與方法

1.1 研究對象 收集湛江中心人民醫(yī)院2016年3月至2017年3月期間診治的2型糖尿病患者65例，其中男性37例，女性28例；年齡35～78歲，平均年齡（51.3±19.2）歲；病史2～15年。所有病例均符合1999年世界衛(wèi)生組織（WHO）糖尿病專家委員會(huì)提出的糖尿病診斷標(biāo)準(zhǔn)，排除其他代謝并發(fā)癥和急性感染，且無腎毒性藥物治療史或其他原因引起的腎臟疾病。根據(jù)尿蛋白定性實(shí)驗(yàn)將65例患者分成尿蛋白陽性組（n＝33）和尿蛋白陰性組（n＝32）。另選健康體檢者30例作為本研究的正常對照組，其中男性17例，女性13例；年齡29～75歲，平均年齡（50.8±18.5）歲。3組的性別和年齡比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＞0.05），具有可比性。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 尿蛋白定性實(shí)驗(yàn) 留取患者晨尿，用桂林優(yōu)利特-500（URIT-500）尿液分析儀和與之配套的尿11項(xiàng)試紙條檢測尿蛋白定性試驗(yàn)，尿蛋白（+）～（++++）為陽性。

1.2.2 尿蛋白定量實(shí)驗(yàn) 留取患者晨尿，離心后取上清液；用免疫比濁法在貝克曼DXC800上檢測尿蛋白四項(xiàng)指標(biāo)的水平，使用四川新健康成生物股份有限公司的α1-微球蛋白（α1-MG）測定試劑盒、β2-微球蛋白（β2-MG）測定試劑盒、轉(zhuǎn)鐵蛋白（TRF）測定試劑盒及MA測定試劑盒進(jìn)行檢驗(yàn)，嚴(yán)格按照說明書操作。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 所有數(shù)據(jù)用SPSS 20.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行方差分析，計(jì)量資料用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，組間的兩兩比較用t檢驗(yàn)，P＜0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組患者和健康體檢者的尿微量蛋白4項(xiàng)水平測定結(jié)果比較 2型糖尿病不論蛋白定性陰性組還是陽性組患者的MA、TRF、α1-MG及β2-MG水平都明顯高于正常對照組（均P＜0.05）；而且蛋白定性陽性組患者的MA、TRF、α1-MG及β2-MG水平又顯著高于蛋白定性陰性組患者（P＜0.01）。見表1。

2.2 4項(xiàng)尿微量蛋白單項(xiàng)及聯(lián)合檢測陽性率 單項(xiàng)檢測MA、TRF、α1-MG及β2-MG的陽性診斷率分別為41.5%、44.6%、38.5%、33.8%，多項(xiàng)聯(lián)合檢測的陽性率比單項(xiàng)檢測有不同程度的增高，4項(xiàng)指標(biāo)聯(lián)合檢測的陽性診斷率最高，達(dá)到90.8%。見表2。

表1 尿蛋白陽性或陰性兩組患者和正常對照組的尿微量蛋白4項(xiàng)測定結(jié)果

表1 尿蛋白陽性或陰性兩組患者和正常對照組的尿微量蛋白4項(xiàng)測定結(jié)果

注：與正常對照組比較，aP＜0.01，bP＜0.05；與蛋白陰性組比較，cP＜0.01

表2 65例2型糖尿病患者4項(xiàng)尿微量蛋白單項(xiàng)檢測及聯(lián)合檢測的陽性率

3 討論

MA在早期DN的診斷中很重要且是判斷DN預(yù)后的重要指標(biāo)，DN、高血壓腎病等會(huì)造成腎臟的固有細(xì)胞損傷，使腎臟固有細(xì)胞結(jié)構(gòu)發(fā)生改變，功能隨結(jié)構(gòu)變化而變化，所以尿液中會(huì)檢測到MA。正常時(shí)濾過膜表面覆蓋一層帶負(fù)電荷的蛋白多糖，使白蛋白等帶負(fù)電荷的較大分子不易通過，一旦有腎小球病變，腎小球?yàn)V過膜中的電荷屏障將受到一定影響，濾出攜帶負(fù)電荷的蛋白質(zhì)增多而出現(xiàn)蛋白尿。

有研究指出利用一個(gè)時(shí)間段多次篩檢出患者尿白蛋白陽性，對于判斷DN早期腎損傷有重要意義［1］。高科等［2］研究認(rèn)為MA在早期DN組和臨床DN組比在單純糖尿病組及健康對照組均明顯增高，且異常率隨著患者腎臟損傷程度的加重不斷升高，說明在腎損傷早期即已有尿MA經(jīng)腎小球?yàn)V出。翟凱齊等［3］的研究顯示尿MA可作為預(yù)測過敏性紫癜（HSP）患兒早期腎損傷的敏感指標(biāo)。李東千［4］研究顯示，隨著糖尿病病程的增加，患者尿MA陽性檢出率呈現(xiàn)明顯上升趨勢；病程長達(dá)20年以上的患者，尿MA檢測的陽性率可達(dá)100%。可見隨著糖尿病患者病程的延長，腎小球的損害日益加重，尿MA也不斷增多。TRF的等電點(diǎn)高出白蛋白一個(gè)單位，故能更敏感地反映電荷屏障受損。翟玉娥等［5］應(yīng)用受試者工作特征曲線（ROC曲線）對210例糖尿病患者進(jìn)行研究評(píng)價(jià)，結(jié)果顯示尿TRF與尿MA水平呈顯著正相關(guān)，尿TRF診斷DN的曲線下面積（AUC）為0.721，認(rèn)為尿TRF可作為DN的早期診斷標(biāo)志物。本研究結(jié)果顯示，2型糖尿病蛋白定性陰性組及陽性組患者的MA、TRF均明顯高于對照組，差異比較具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，蛋白定性陽性組患者的MA、TRF水平又顯著高于蛋白定性陰性組患者，差異比較也具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。說明2型糖尿病患者容易出現(xiàn)早期腎損害，而且MA、TRF的排出量隨著腎小球的損害程度加重而增多。

α1-MG是肝細(xì)胞和淋巴細(xì)胞產(chǎn)生的一種糖蛋白，相對分子質(zhì)量為26 000～33 000，α1-MG有游離型及與免疫球蛋白結(jié)合型、白蛋白結(jié)合型，結(jié)合型不能通過腎小球?yàn)V膜，而游離型可自由透過腎小球?yàn)V膜，原尿中α1-MG絕大部分被腎小管重吸收降解，正常人尿中含量極微。而糖尿病的腎小管早期由于炎癥、缺血等使腎小管上皮細(xì)胞結(jié)構(gòu)受到破壞，從而使近曲小管重吸收α1-MG的能力降低，尿中α1-MG含量增高。王鋒等［6］檢測60例DN患者（又分微量蛋白尿組、臨床蛋白尿組、腎功能不全組，每組20例）尿液α1-MG對DN小管間質(zhì)病變的診斷價(jià)值，并與20例正常對照組對比分析，結(jié)果顯示微量蛋白尿組、臨床蛋白尿組、腎功能不全組的尿液α1-MG水平均顯著高于對照組（均P＜0.01），且尿液α1-MG與血肌肝（SCr）呈正相關(guān)，相關(guān)系數(shù)＝0.37（P＜0.01），提示檢測尿液α1-MG水平可判斷DN的小管間質(zhì)損害。

β2-MG是由人體有核細(xì)胞，特別是淋巴細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞產(chǎn)生的一種小分子球蛋白，相對分子質(zhì)量僅為118 000，β2-MG可以從腎小球自由濾過，約99.9%被近端腎小管上皮細(xì)胞重吸收并分解破壞，故而正常情況下β2-MG由尿排出的量極低。若腎小管上皮細(xì)胞受損影響了重吸收功能，β2-MG排泄率增加，如糖尿病、急性腎小管損傷或壞死、慢性間質(zhì)性腎炎、慢性腎功能衰竭（CRF）、腎移植排斥反應(yīng)期等。徐泳等［7］研究認(rèn)為C肽和β2-MG等腎臟相關(guān)蛋白水平可反映糖尿病腎損傷情況，且對于臨床治療的監(jiān)測也具有重要價(jià)值。李孟蘭等［8］通過研究多項(xiàng)生化指標(biāo)在166例2型糖尿病患者早期腎損傷中的診斷價(jià)值，發(fā)現(xiàn)DN早期患者及糖尿病患者尿中的β2-MG含量均明顯高于正常對照組患者，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＜0.05），提示尿β2-MG是DN患者早期腎損傷的良好指標(biāo)。本研究結(jié)果顯示，2型糖尿病蛋白定性陰性組及陽性組患者的α1-MG、β2-MG水平均明顯高于對照組，同時(shí)蛋白定性陽性組患者的α1-MG及β2-MG水平又顯著高于蛋白定性陰性組患者，差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義?？梢娫贒N腎小管損害早期時(shí)，α1-MG及β2-MG水平已明顯升高，尿α1-MG及β2-MG可作為診斷DN早期腎損害的敏感指標(biāo)。

本研究結(jié)果顯示，尿蛋白定性陽性組及陰性組患者的尿MA、TRF、α1-MG及β2-MG水平比健康對照組均明顯升高，且尿蛋白定性陽性組又明顯高于尿蛋白定性陰性組。可見在DN早期，腎小球及腎小管都有可能受到損害，而且患者腎臟功能受損程度越嚴(yán)重，其尿MA、TRF、α1-MG及β2-MG水平升高就越明顯。表2結(jié)果顯示，單項(xiàng)檢測MA、TRF、α1-MG及β2-MG的陽性診斷率分別為41.5%、44.6%、38.5%、33.8%，多項(xiàng)聯(lián)合檢測的陽性率比單項(xiàng)檢測有不同程度的增高，4項(xiàng)指標(biāo)聯(lián)合檢測的陽性診斷率最高，達(dá)到90.8%。說明檢測MA、TRF、α1-MG及β2-MG水平對診斷DN患者早期腎損害及判斷其腎受損部位和受損程度均有一定的參考價(jià)值，聯(lián)合檢測這4項(xiàng)指標(biāo)可明顯提高DN患者早期腎損害的診斷率，減少漏診。

綜上所述，尿MA、TRF、α1-MG及β2-MG水平可作為診斷DN患者早期腎損傷較敏感的指標(biāo)，4項(xiàng)指標(biāo)聯(lián)合檢測有助于提高DN早期腎損傷的診斷率，并對患者腎臟受損部位的判斷及病情監(jiān)測均有一定的臨床應(yīng)用價(jià)值。

1 劉蕊.尿白蛋白檢測的臨床應(yīng)用及注意的問題［J］.實(shí)用檢驗(yàn)醫(yī)師雜志，2014，6（3）：129-132.

2 高科，陶娟，范寧，等.聯(lián)合檢測三種生化指標(biāo)對糖尿病腎病早期診斷的臨床價(jià)值分析［J］.現(xiàn)代檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2016，31（4）：117-120.

3 翟凱齊，張麗娜，張漢濤.血清胱抑素C與尿微量白蛋白聯(lián)合檢測在兒童過敏性紫癜早期腎功能損傷中的臨床價(jià)值［J］.實(shí)用檢驗(yàn)醫(yī)師雜志，2015，7（2）：97-99.

4 李東千.尿微量白蛋白檢測在早期糖尿病腎病診斷中的應(yīng)用價(jià)值［J］.四川醫(yī)學(xué)，2013，34（7）：1083-1084.

5 翟玉娥,李慧,鄭紅英，等.不同尿蛋白成分測定對早期糖尿病腎病的診斷價(jià)值[J].青島大學(xué)醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2013，49（6）：539-541.

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7 徐泳，姜大勇，毛志華.探討C-肽及腎臟相關(guān)蛋白對糖尿病腎病患者早期診斷的臨床意義［J］.實(shí)用檢驗(yàn)醫(yī)師雜志，2014，6（3）：168-172.

8 李孟蘭，童華誠，沈亞芳.多項(xiàng)生化指標(biāo)聯(lián)合檢測在糖尿病腎病中的診斷價(jià)值［J］.檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)與臨床，2015，12（5）：633-635.

Diagnostic value of four urinary microalbumins detection in early diabetic nephropathy

Li Yan, Zhang Jiaming, Zhuo Shaoxian, Huang Caiyun.
Central People's Hospital of Zhanjiang, Zhanjiang 524037, Guangdong, China

ObjectiveTo investigate the diagnostic value of urine mircroalbumin (MA), transferritin(TRF), α1-microglobulin (α1-MG) and β2-mircroglobulin (β2-MG) for early diabetic nephropathy (DN).MethodsThe 65 diabetic patients were divided into positive group and negative group according to the experiment of urine micro protein qualitative. The levels of urine MA, TRF, α1-MG and β2-MG in 65 diabetic patients were measured by immunoturbidimetry. Levels of 30 healthy people were compared as the control group.ResultsIn the positive group and negative group, the levels of urine MA (mg/L: 28.6±4.4, 11.3±1.9 vs. 6.9±1.1), TRF (mg/L:3.5±0.9, 1.3±0.4 vs. 1.1±0.3), α1-MG (mg/L: 28.1±6.3, 9.4±2.0 vs. 8.2±1.9) and β2-MG (mg/L: 4.77±0.71,1.58±0.39 vs. 0.94±0.22) were higher than those of the control group; and the levels of the positive group were also higher than negative group (all P ＜ 0.05). The positive rate was MA 41.5%, TRF 44.6%, α1-MG 38.5% and β2-MG 33.8%. Total positive rate of combined detection of the four indicators was 90.8%.ConclusionMA,TRF, α1-MG and β2-MG in urine were sensitive indicators for early diagnosis of DN. Diagnosis with the four together might raise the positive rate of early diagnosis and evaluate the severity of the disease.

Urinary microalbumins; Diabetic nephropathy; Early diagnosis

2017-06-17）

（本文編輯：楊程伍 李銀平）

524037 廣東湛江，湛江中心人民醫(yī)院

李艷，Email：liyan3157213@163.com

10.3969/j.issn.1674-7151.2017.03.009

Corresponding author: Li Yan, Email: liyan3157213@163.com