中南大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物屏障環(huán)境運(yùn)行初期總結(jié)

丁燕霞，李 琳，朱莉莉，王姍妮，支文玲，王梅梅，俞遠(yuǎn)京，周智君，高常青

(中南大學(xué)湘雅醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)部，長(zhǎng)沙 410013)

教學(xué)管理

中南大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物屏障環(huán)境運(yùn)行初期總結(jié)

丁燕霞，李 琳，朱莉莉，王姍妮，支文玲，王梅梅，俞遠(yuǎn)京，周智君，高常青*

(中南大學(xué)湘雅醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)部，長(zhǎng)沙 410013)

目的對(duì)中南大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物屏障設(shè)施的初期運(yùn)行管理進(jìn)行總結(jié)。方法在實(shí)踐的基礎(chǔ)上，制訂了一系列的管理措施，分別對(duì)屏障設(shè)施運(yùn)行中人員、動(dòng)物和物品的管理、規(guī)章制度的完善和設(shè)施的消毒凈化進(jìn)行了修改完善。結(jié)果通過(guò)嚴(yán)格執(zhí)行各項(xiàng)管理措施，保證了實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的質(zhì)量，建立科學(xué)、優(yōu)質(zhì)、高效的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物服務(wù)平臺(tái)，更好的服務(wù)于本校的教學(xué)科研。結(jié)論只有通過(guò)嚴(yán)格的管理，才能保證實(shí)驗(yàn)動(dòng)物屏障設(shè)施的正常運(yùn)行。

屏障設(shè)施；管理；規(guī)章制度；實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

在高等醫(yī)學(xué)院校，研究生進(jìn)行畢業(yè)課題設(shè)計(jì)和各教研室承擔(dān)的科研課題大部分要涉及到嚙齒類(lèi)動(dòng)物，不僅需要清潔級(jí)以上標(biāo)準(zhǔn)的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，還需要相應(yīng)要求的標(biāo)準(zhǔn)動(dòng)物的實(shí)驗(yàn)環(huán)境。只有保證了實(shí)驗(yàn)動(dòng)物質(zhì)量，才能保證以實(shí)驗(yàn)動(dòng)物為實(shí)驗(yàn)材料的生命科學(xué)研究結(jié)果的穩(wěn)定性，科學(xué)性和可靠性[1]。中南大學(xué)嚴(yán)格按照國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行設(shè)計(jì)并施工新建了實(shí)驗(yàn)動(dòng)物大樓，包括一樓的普通環(huán)境和二、三、四樓的屏障環(huán)境。四樓屏障環(huán)境設(shè)施自2016年3月投入使用以來(lái)，為學(xué)校的教學(xué)、科研提供了優(yōu)質(zhì)高效服務(wù)，現(xiàn)將設(shè)施運(yùn)行八個(gè)月來(lái)遇到的問(wèn)題及解決辦法總結(jié)如下：

1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物屏障設(shè)施現(xiàn)狀

2015年新建一座4500 m2，獨(dú)棟四層樓的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)大樓，其中二、三、四層為雙屏障凈化面積2400 m2，屏障設(shè)施采取三走廊最佳方式，污物走廊兩端設(shè)有雙緩沖間，人員、污物、動(dòng)物流線，有效避免了交叉污染。將污物走廊作為潔凈區(qū)進(jìn)行控制。設(shè)置一更、二更、風(fēng)淋系統(tǒng)。輔助面積1500 m2，包括洗涮消毒室、實(shí)驗(yàn)室、儀器室、辦公室、機(jī)房、水凈化房。平面布局見(jiàn)圖1。在洗消間和清潔物品儲(chǔ)藏間之間，設(shè)有兩臺(tái)脈動(dòng)真空滅菌器一用一備，低溫紫外傳遞間、傳遞窗。

注：① 配電間；② 女一更；③ 女二更；④ 紫外滅菌間；⑤ 風(fēng)淋室；⑥ 代乳室；⑦ 動(dòng)物凈化間；⑧ 男一更；⑨ 男二更。圖1 屏障環(huán)境設(shè)施平面布局圖Note. ① Power distribution room; ② Women’s locker room I; ③ Women’s locker room II; ④ UV sterilization room; ⑤ Air shower room; ⑥ Milk room; ⑦ Animal purification room; ⑧ Men’s locker room I； ⑨ Men’s locker room II.Fig.1 Schematic plan view of the barrier housing facilities

2 運(yùn)行半年來(lái)遇到的問(wèn)題

2.1學(xué)生對(duì)屏障設(shè)施的認(rèn)識(shí)不足與屏障設(shè)施的管理要求相矛盾

進(jìn)出學(xué)部的主要人員是醫(yī)學(xué)和生命科學(xué)院的碩士、博士研究生及大學(xué)生創(chuàng)新實(shí)驗(yàn)團(tuán)隊(duì)和其他科研人員，動(dòng)物實(shí)驗(yàn)需要由他們自己完成。在完成動(dòng)物實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，這些學(xué)生幾乎每天都要進(jìn)屏障進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，甚至一天要進(jìn)去多次，由于屏障系統(tǒng)有其嚴(yán)格、規(guī)范的操作要求，實(shí)驗(yàn)者對(duì)屏障設(shè)施缺乏足夠的了解，如果管理員稍有疏忽就使屏障環(huán)境實(shí)驗(yàn)室淪為普通意義的實(shí)驗(yàn)操作場(chǎng)所，失去屏障系統(tǒng)具有的生物凈化的意義，從而無(wú)法滿足其操作本身所需要的條件[2]。

2.2學(xué)生實(shí)驗(yàn)時(shí)間的不固定性與設(shè)施的有效管理相矛盾

其一，學(xué)生科研具有流動(dòng)性和時(shí)間不確定性，他們進(jìn)入屏障環(huán)境的時(shí)間一般是在課余時(shí)間，而此時(shí)可能是屏障設(shè)施管理者的休息時(shí)間。其二，研究生人員時(shí)間的不固定性。醫(yī)學(xué)院的研究生在讀期間，不僅要完成科研任務(wù)，還要安排臨床實(shí)習(xí)，而很多醫(yī)院的安排與學(xué)生做實(shí)驗(yàn)的時(shí)間相沖突，因此很多學(xué)生會(huì)選擇中午或晚上做實(shí)驗(yàn)，這對(duì)屏障設(shè)施的有效管理是個(gè)考驗(yàn)。其三，學(xué)?？蒲腥藛T在做科研的同時(shí)需要承擔(dān)一定的教學(xué)任務(wù)，許多實(shí)驗(yàn)的進(jìn)行只能選擇在非上班時(shí)間[3]。鑒于上述原因，使得屏障系統(tǒng)管理人員對(duì)其進(jìn)行有效的管理和監(jiān)督遇到了困難。

2.3人員流動(dòng)性大，造成傳遞窗使用不規(guī)范

每天來(lái)設(shè)施做實(shí)驗(yàn)的人數(shù)眾多，最多可達(dá)120人次/天?？蒲蟹N類(lèi)的繁多使得設(shè)施內(nèi)實(shí)驗(yàn)物品無(wú)法配備齊全，實(shí)驗(yàn)必須品需要由學(xué)生自己帶入設(shè)施。但是由于每天人員流動(dòng)繁多，而傳遞窗只有一個(gè)，有些學(xué)生著急做實(shí)驗(yàn)，只是象征性地把實(shí)驗(yàn)物品放入傳遞窗，等穿好隔離服進(jìn)入屏障系統(tǒng)后就把物品取出，無(wú)法保證實(shí)驗(yàn)物品消毒的可靠性。這對(duì)屏障設(shè)施的潔凈度要求帶來(lái)了巨大的挑戰(zhàn)。

2.4實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的飼養(yǎng)要求不同與設(shè)施服務(wù)的高效性相矛盾

屏障系統(tǒng)內(nèi)多項(xiàng)實(shí)驗(yàn)同時(shí)進(jìn)行時(shí)，如糖尿病造模、外科手術(shù)、腫瘤模型建立及轉(zhuǎn)基因動(dòng)物飼育等，由于不同實(shí)驗(yàn)對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物護(hù)理的要求不同，且實(shí)驗(yàn)人員與飼養(yǎng)管理人員缺少溝通，偶爾導(dǎo)致加錯(cuò)飼料、漏加飲水造成死亡等現(xiàn)象，這與設(shè)施為學(xué)?？蒲刑峁﹥?yōu)質(zhì)服務(wù)的高效性相矛盾。

3 屏障系統(tǒng)的規(guī)范化管理

3.1建立標(biāo)準(zhǔn)完善的屏障環(huán)境操作規(guī)程

根據(jù)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物管理的統(tǒng)一要求和實(shí)驗(yàn)動(dòng)物平臺(tái)管理的需要，學(xué)部特制定了各項(xiàng)規(guī)章制度和操作規(guī)程，使每個(gè)工作人員有章可循，以高標(biāo)準(zhǔn)、嚴(yán)要求來(lái)規(guī)范和衡量工作，為屏障環(huán)境質(zhì)量管理提供了可靠的保證。包括人員、動(dòng)物進(jìn)出屏障系統(tǒng)標(biāo)準(zhǔn)操作程序；物品消毒、進(jìn)出屏障系統(tǒng)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程；屏障系統(tǒng)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物接收、檢疫操作規(guī)程；傳遞窗使用操作規(guī)程；高溫高壓滅菌器使用操作規(guī)程；大、小鼠飼養(yǎng)管理操作規(guī)程；設(shè)施內(nèi)環(huán)境清潔、消毒滅菌操作規(guī)程。各項(xiàng)操作規(guī)程一旦建立必須嚴(yán)格地執(zhí)行。

3.2規(guī)范實(shí)驗(yàn)人員的管理

我們要求所有申請(qǐng)進(jìn)入屏障環(huán)境實(shí)驗(yàn)室的實(shí)驗(yàn)人員均須持有實(shí)驗(yàn)動(dòng)物從業(yè)人員資格證書(shū)且在實(shí)驗(yàn)前必須經(jīng)過(guò)學(xué)部的培訓(xùn)，了解屏障設(shè)施的特點(diǎn)和要求，尤其是人員進(jìn)入屏障設(shè)施的流程，加強(qiáng)對(duì)于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物屏障系統(tǒng)環(huán)境的認(rèn)識(shí)[4]。培訓(xùn)過(guò)程中實(shí)驗(yàn)人員會(huì)在培訓(xùn)老師的帶領(lǐng)下進(jìn)入學(xué)部三樓未投入使用的屏障環(huán)境，熟悉屏障系統(tǒng)環(huán)境內(nèi)的各個(gè)功能區(qū)的分布，以減少實(shí)驗(yàn)過(guò)程中在屏障環(huán)境內(nèi)的不必要走動(dòng)。經(jīng)過(guò)培訓(xùn)且只有培訓(xùn)合格后才能申請(qǐng)錄指紋進(jìn)入設(shè)施實(shí)驗(yàn)。同時(shí)，科研人員進(jìn)學(xué)部做實(shí)驗(yàn)之前，需要提交《中南大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物福利倫理審查申請(qǐng)表》和《實(shí)驗(yàn)動(dòng)物委托飼養(yǎng)服務(wù)協(xié)議》寫(xiě)明課題所需動(dòng)物種類(lèi)，數(shù)量，進(jìn)行哪些操作以及實(shí)驗(yàn)人員等，明確雙方的權(quán)利和義務(wù)，經(jīng)學(xué)部倫理審查委員會(huì)審核通過(guò)后由導(dǎo)師簽字方可進(jìn)入設(shè)施實(shí)驗(yàn)[5]。為避免無(wú)指紋實(shí)驗(yàn)人員進(jìn)入設(shè)施，屏障設(shè)施門(mén)禁處有老師專(zhuān)門(mén)對(duì)進(jìn)出設(shè)施人員進(jìn)行監(jiān)督檢查，有效的杜絕了實(shí)驗(yàn)不相關(guān)人員進(jìn)入屏障設(shè)施。

在屏障設(shè)施里，學(xué)部工作人員會(huì)對(duì)進(jìn)入屏障設(shè)施的實(shí)驗(yàn)人員進(jìn)行監(jiān)督指導(dǎo)，以減少實(shí)驗(yàn)人員的不當(dāng)操作。同時(shí)學(xué)部在工作日運(yùn)行的8:00～19:00中均有工作人員在屏障實(shí)驗(yàn)設(shè)施內(nèi)，以確保同學(xué)在有需要時(shí)可以及時(shí)得到解決。要求實(shí)驗(yàn)人員在工作時(shí)間進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，如果確實(shí)需要在非工作時(shí)間進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，則必須提前申請(qǐng)，學(xué)部會(huì)安排工作人員對(duì)其進(jìn)行監(jiān)督管理。在一個(gè)工作日內(nèi)能完成的工作決不允許拖到第二天，這樣使實(shí)驗(yàn)人員合理的安排時(shí)間，減少進(jìn)去屏障設(shè)施的次數(shù)，大大降低了環(huán)境污染的機(jī)會(huì)[6]。

3.3加強(qiáng)工作人員的管理

每一位工作人員在進(jìn)入工作崗位前必須參加學(xué)部組織的進(jìn)入屏障設(shè)施的培訓(xùn)，養(yǎng)成無(wú)菌觀念和衛(wèi)生習(xí)慣[7]，同時(shí)學(xué)部定期對(duì)屏障設(shè)施內(nèi)的管理人員進(jìn)行培訓(xùn)考核，考核成績(jī)直接與當(dāng)月的工資掛鉤。制訂了實(shí)驗(yàn)室工作人員職責(zé)，明確和規(guī)范屏障環(huán)境動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室各類(lèi)人員職責(zé)，責(zé)任到人，規(guī)范了動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室的管理，讓工作人員熟悉學(xué)部的各項(xiàng)規(guī)章制度。對(duì)于屏障設(shè)施管理人員，除了熟練掌握各項(xiàng)操作規(guī)程之外，還要學(xué)習(xí)有關(guān)動(dòng)物設(shè)施和動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的相關(guān)文件，不斷提高對(duì)屏障環(huán)境實(shí)驗(yàn)室的認(rèn)識(shí)水平和實(shí)驗(yàn)操作技能，從而指導(dǎo)學(xué)生實(shí)驗(yàn)；要建立合理的培訓(xùn)計(jì)劃，不斷加強(qiáng)業(yè)務(wù)學(xué)習(xí)，學(xué)習(xí)國(guó)內(nèi)外先進(jìn)技術(shù)和管理經(jīng)驗(yàn)，不斷提高實(shí)驗(yàn)室工作人員的管理水平和業(yè)務(wù)素質(zhì)，使之成為一個(gè)稱(chēng)職的管理人員和專(zhuān)業(yè)技術(shù)人員[8]；明確分工，加強(qiáng)管理，定期檢查個(gè)人分管工作，與崗位責(zé)任和績(jī)效考核掛鉤[9]；另外平時(shí)要讓工作人員全面輪崗培訓(xùn)，使相互之間能夠互為替代互為備用，這樣可以確保屏障環(huán)境內(nèi)各個(gè)崗位不至于空缺無(wú)人。

3.4規(guī)范實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的管理

學(xué)部的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物是由動(dòng)物生產(chǎn)公司統(tǒng)一運(yùn)送。動(dòng)物到達(dá)學(xué)部后，有老師專(zhuān)門(mén)負(fù)責(zé)檢查動(dòng)物的外包裝是否完好，如發(fā)現(xiàn)包裝盒破損等情況，拒絕此類(lèi)動(dòng)物傳入屏障內(nèi)，以免對(duì)屏障設(shè)施造成污染。如未發(fā)現(xiàn)包裝盒破損，則對(duì)包裝盒進(jìn)行消毒，然后傳入屏障。外購(gòu)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物必須來(lái)自于具有相應(yīng)生產(chǎn)許可證的正規(guī)單位。公司需先提交電子版的質(zhì)量合格證和檢疫合格證，審核通過(guò)后方可發(fā)貨。運(yùn)輸過(guò)程必須符合國(guó)標(biāo)規(guī)定。動(dòng)物到達(dá)學(xué)部后，需提交紙質(zhì)版的質(zhì)量合格證明。動(dòng)物進(jìn)入屏障后，經(jīng)檢疫合格后方可放入IVC籠具中飼養(yǎng)，對(duì)于檢疫不合格的動(dòng)物，退回廠家處理。

不同的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物采取單獨(dú)飼養(yǎng)的方式，轉(zhuǎn)基因動(dòng)物，免疫缺陷動(dòng)物，大鼠，小鼠等都有其專(zhuān)門(mén)的飼養(yǎng)間[10]。對(duì)于需要不同護(hù)理方式的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，我們采取不同顏色籠卡的管理辦法。如正常飼養(yǎng)的動(dòng)物用白色的籠卡；特殊需要的，如制作糖尿病模型的動(dòng)物需要單獨(dú)飼喂高脂飼料，制作腸炎模型的需要單獨(dú)飼喂飲水，測(cè)定動(dòng)物飲食飲水量等的就需要自己添加飼料飲水等情況，則用藍(lán)色的籠卡，并標(biāo)明注意事項(xiàng)；做完手術(shù)的動(dòng)物需要飼養(yǎng)員特殊觀察其狀態(tài)以便及時(shí)通知實(shí)驗(yàn)人員做出相應(yīng)的處理，那么這類(lèi)動(dòng)物用紅色的籠卡。動(dòng)物的分類(lèi)管理在一定程度上減少了工作人員的失誤，取得了很好的效果。

3.5物品的管理

進(jìn)入屏障環(huán)境的一切物品都要滅菌消毒，根據(jù)進(jìn)入屏障設(shè)施的各種物品的不同特性，選擇不同的消毒方法[11]。物品消毒的總原則是能高溫高壓消毒的物品不要用紫外線照射消毒，如籠具、墊料、飲水、工作服、離心管，手術(shù)器械等都可經(jīng)過(guò)雙扉脈動(dòng)真空高壓滅菌器經(jīng)121℃，30 min高溫處理達(dá)到滅菌目的。拖鞋可經(jīng)消毒液浸泡后經(jīng)由紫外線照射滅菌傳入。對(duì)于不耐紫外線照射的生物制品，用酒精棉球擦拭其外表面消毒后，再用高壓滅菌過(guò)的錫箔紙包裹，放在裝有消毒液的冰水中，經(jīng)傳遞窗紫外照射30 min后傳入屏障系統(tǒng)。為嚴(yán)格控制進(jìn)入屏障內(nèi)物品的消毒質(zhì)量，學(xué)部派老師負(fù)責(zé)管理傳遞窗的使用，嚴(yán)格執(zhí)行傳遞窗使用實(shí)名登記制度，規(guī)范進(jìn)入設(shè)施內(nèi)物品的消毒程序。屏障內(nèi)部工作人員也會(huì)定期在傳遞窗周?chē)膊椋绨l(fā)現(xiàn)有操作不當(dāng)?shù)幕蛭锲废痉绞讲徽_的就立即制止。

3.6屏障設(shè)施的消毒凈化

每天工作結(jié)束后，用0.5%的過(guò)氧乙酸或5%的84消毒液[12]依次對(duì)地面、實(shí)驗(yàn)操作臺(tái)、工作車(chē)等用具進(jìn)行擦拭；每周一次用消毒液擦拭墻壁、門(mén)、飼養(yǎng)籠架、天花板等，并在每天工作結(jié)束后對(duì)屏障內(nèi)個(gè)房間進(jìn)行空氣噴霧消毒。每季度更換一次消毒液，使微生物數(shù)量減少的同時(shí)也避免了細(xì)菌耐藥性的產(chǎn)生[13]。每月對(duì)設(shè)施中各區(qū)域空氣落菌數(shù)進(jìn)行監(jiān)測(cè)，以此來(lái)檢驗(yàn)屏障環(huán)境內(nèi)的消毒效果，根據(jù)檢測(cè)結(jié)果來(lái)評(píng)判飼養(yǎng)人員的工作態(tài)度，并且與績(jī)效掛鉤。

4 結(jié)語(yǔ)

屏障環(huán)境設(shè)施運(yùn)行的成本高，責(zé)任重大，加強(qiáng)科學(xué)管理，避免因操作不規(guī)范造成屏障設(shè)施和實(shí)驗(yàn)動(dòng)物遭受微生物污染的事故發(fā)生，確保屏障設(shè)施的潔凈度，以便獲取較可靠的研究結(jié)果。同時(shí)屏障環(huán)境開(kāi)放性實(shí)驗(yàn)室的管理還涉及到很多問(wèn)題，需要在實(shí)際管理運(yùn)行中不斷調(diào)整、改進(jìn)、完善，希望在執(zhí)行過(guò)程中及時(shí)提出合理的建議，以便不斷探索，不斷磨礪，為中南大學(xué)教學(xué)、科研、醫(yī)療出成果出人才而努力奮斗。

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ApreliminarysummaryofthemanagementoflaboratoryanimalbarrierhousingfacilitiesatCentralSouthUniversity

DING Yan-xia， LI Lin， ZHU Li-li， WANG Shan-ni， ZHI Wen-ling， WANG Mei-mei， YU Yuan-jing， ZHOU Zhi-jun， GAO Chang-qing*

(Department of laboratory Animals, Xiangya School of Medicine, Central South University, Changsha 410013, China)

ObjectiveTo summarize the initial operation and management of the laboratory animal barrier housing facilities at Central South University.MethodsBased on practice, a series of measures have been worked out to improve the management of personnel, animals and items, implement of rules and regulations，and disinfection and purification of the facilities during the operation of barrier system.ResultsThrough strictly carrying out the management measures, we have ensured the quality of laboratory animals and have established a scientific, high-quality and efficient service platform of laboratory animals to serve the teaching and research at Central South University.ConclusionsOnly through strict management, we can ensure the normal operation of the laboratory animal barrier housing facilities.

Barrier housing facilities; Management; Rules and regulations; Laboratory animals

R-33

A

1671-7856(2017) 09-0083-04

10.3969.j.issn.1671-7856.2017.09.016

2016-11-10

湖南省科技廳計(jì)劃(編號(hào)：2016DK2004)；中南大學(xué)實(shí)驗(yàn)室研究項(xiàng)目(中大資字[2015] 12號(hào))。

丁燕霞(1991-)，女，碩士，研究方向：實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。E-mail: 963305645@qq.com

高常青(1973-)，男，副研究員，博士，研究方向：實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。E-mail: cgao851@126.com