頭孢拉定的結(jié)晶工藝過程及影響結(jié)晶的因素探析

程忠宇

摘 要：頭孢拉定為第一代半合成頭孢菌素，抗菌作用與頭孢氨芐相似。頭孢拉定耐酸可以口服，吸收好，血藥濃度較高。頭孢拉定適用于敏感菌所致的急性咽炎、扁桃體炎、中耳炎、支氣管炎和肺炎等呼吸道感染、泌尿生殖道感染及皮膚軟組織感染等。本文對頭孢拉定的結(jié)晶工藝過程及影響結(jié)晶的因素進(jìn)行分析。

關(guān)鍵詞：頭孢拉定；結(jié)晶；工藝

頭孢拉定（Cephradine， Velosef）別名：頭孢握定、頭孢雷定、己環(huán)胺菌素、先鋒瑞丁、頭孢拉丁、頭孢環(huán)己烯等。頭孢拉定為第一代半合成頭孢菌素，抗菌作用與頭孢氨芐相似。頭孢拉定耐酸可以口服，吸收好，血藥濃度較高。頭孢拉定適用于敏感菌所致的急性咽炎、扁桃體炎、中耳炎、支氣管炎和肺炎等呼吸道感染、泌尿生殖道感染及皮膚軟組織感染等[1-2]。結(jié)晶方法一般為兩種，一種是蒸發(fā)結(jié)晶，一種是降溫結(jié)晶。降溫結(jié)晶的原理是溫度降低，物質(zhì)的溶解度減小，溶液達(dá)到飽和了，多余的即不能溶解的溶質(zhì)就會(huì)析出[3-4]。頭孢拉定的結(jié)晶過程屬于降溫結(jié)晶。本文對頭孢拉定的結(jié)晶工藝過程及影響結(jié)晶的因素進(jìn)行分析。

1 儀器與試藥

STI-501Plus梯度高效液相色譜儀（賽智科技（杭州）有限公司）；CC-304Bvpc單加熱型高溫不銹鋼槽（北京賽美思儀器設(shè)備有限公司）；日本島津AUW220電子天平、分析天平（福州精科儀器儀表有限公司）；RT2加熱制冷循環(huán)器 （惟沃技術(shù)（中國）有限公司）；屹譜儀器U-1810準(zhǔn)雙光束紫外可見分光光度計(jì)（屹譜儀器制造（上海）有限公司）；必能信超聲波清洗器-CPX2800-C（必能信超聲（上海）有限公司）；HQ-50高端試劑級(jí)超純水機(jī)（鄭州華新電氣公司）。頭孢拉定對照品由中國藥品生物制品檢定所提供。乙腈（上海杰星生物科技有限公司）、三乙胺（鄒平縣天鹿化工有限公司）、甲醇（上海杰星生物科技有限公司）、醋酸鈉（上海業(yè)坦化工科技有限公司）、鹽酸（鄒平縣天鹿化工有限公司）、氨水（鄒平縣天鹿化工有限公司）、醋酸（鄒平縣天鹿化工有限公司）、氫氧化鈉（鄒平縣天鹿化工有限公司）、硝酸（鄒平縣天鹿化工有限公司）、硫酸（鄒平縣天鹿化工有限公司）。

2 實(shí)驗(yàn)

2.1 結(jié)晶體系的選擇

分別選擇鹽酸-氨水、鹽酸-三乙胺、鹽酸-氫氧化鈉、硝酸-三乙胺、硫酸-三乙胺為結(jié)晶體系。結(jié)果表明采用鹽酸-三乙胺結(jié)晶體系時(shí)頭孢拉定收率最高。

2.2 結(jié)晶初始溫度的選擇

分別選擇32攝氏度、30攝氏度、28攝氏度、26攝氏度、24攝氏度、22攝氏度為結(jié)晶初始溫度。結(jié)果表明選擇28攝氏度頭孢拉定收率最高。

2.3 結(jié)晶結(jié)束溫度的選擇

分別選擇12攝氏度、10攝氏度、8攝氏度、6攝氏度、4攝氏度、2攝氏度為結(jié)晶結(jié)束溫度。結(jié)果表明選擇6攝氏度頭孢拉定收率最高。

2.4 最佳結(jié)晶條件

最佳結(jié)晶條件為：采用鹽酸-三乙胺結(jié)晶體系，結(jié)晶初始溫度為28攝氏度，結(jié)晶結(jié)束溫度為6攝氏度。

3 含量測定方法

3.1 色譜條件：分別考察水-甲醇-3.86%醋酸鈉溶液-4%醋酸溶液（1564：400：30：6），水-甲醇-3.86%醋酸鈉溶液-4%醋酸溶液（1500：400：40：1），乙腈-0.05mol.L-1磷酸二氫鉀溶液（用磷酸調(diào)節(jié)pH值至2.0）（30：70），乙腈-0.05mol·L-1磷酸二氫鉀緩沖液（含三乙胺0.5%，磷酸調(diào)pH至3.0）（40：60）不同比例的流動(dòng)相，結(jié)果以水-甲醇-3.86%醋酸鈉溶液-4%醋酸溶液（1564：400：30：6）為流動(dòng)相，供試品各峰分離效果最好，故選用水-甲醇-3.86%醋酸鈉溶液-4%醋酸溶液（1564：400：30：6）為流動(dòng)相。依據(jù)查閱文獻(xiàn)及考查的結(jié)果，確定色譜條件如下[5]。色譜柱為安捷倫Cl8規(guī)格為（4.6mm×250mm，5um）；水-甲醇-3.86%醋酸鈉溶液-4%醋酸溶液（1564：400：30：6）為流動(dòng)相；檢測波長為254nm。理論板數(shù)按頭孢拉定峰計(jì)算應(yīng)不得低于2000。

3.2 供試品溶液的制備

取樣品，精密稱取，加20毫升流動(dòng)相超聲處理10分鐘，放冷，濾過，濾液置50ml量瓶中，用流動(dòng)相分次洗滌容器和殘?jiān)?，洗液濾人同一量瓶中，加流動(dòng)相溶液至刻度，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。

3.3 對照品溶液的制備

精密稱取頭孢拉定對照品約5mg，用流動(dòng)相溶解并稀釋成每1ml中含100μg的溶液，作為對照溶液。

3.4 準(zhǔn)曲線的制備

制備濃度為50、100、150、200、250、300、350、400、450、500μg·mL-1的對照品溶液，分別精密吸取10μL注入HPLC，記錄色譜圖。以峰面積積分值A(chǔ)（μg）為橫坐標(biāo)，進(jìn)樣量為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，計(jì)算回歸方程。試驗(yàn)表明，頭孢拉定對照品在50～500μg·mL-1范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。

3.5 精密度試驗(yàn)

依照2.3項(xiàng)下制備對照品溶液，精密吸取頭孢拉定對照品溶液10μL重復(fù)進(jìn)樣6次，測定峰面積積分值，對照品峰面積積分值的RSD為0.71%。結(jié)果表明，本實(shí)驗(yàn)精密度良好。

3.6 回收率試驗(yàn)

采用加樣回收試驗(yàn)，取已知含量的同一批供試品各6份，精密稱定，分精密添加一定量的頭孢拉定對照品，按供試品制備所述方法制備供試品溶液，測定含量（同時(shí)測定樣品含量），計(jì)算回收率。6次測定的平均回收率為99.1%，RSD為0.96%。

4 討論

在化學(xué)里面，熱的飽和溶液冷卻后，溶質(zhì)以晶體的形式析出，這一過程叫結(jié)晶。實(shí)驗(yàn)過程發(fā)現(xiàn)溫度高于30攝氏度時(shí)溶液顏色會(huì)變深，可能是因?yàn)闇囟壬弋a(chǎn)生副反應(yīng)造成的。說明溫度高于30攝氏度以后溶液的雜質(zhì)會(huì)增加。實(shí)驗(yàn)過程溫度要控制在30攝氏度一下。最佳結(jié)晶條件為：采用鹽酸-三乙胺結(jié)晶體系，結(jié)晶初始溫度為28攝氏度，結(jié)晶結(jié)束溫度為6攝氏度。

參考文獻(xiàn)

[1]孫惠娟，裴保香，郭代紅.2003-2007年醫(yī)院頭孢菌素類藥物應(yīng)用分析[J].中華醫(yī)院感染學(xué)雜志，2008（12）.

[2]呂塔星，陳峰濤，裘志梅.頭孢拉定的藥理及臨床應(yīng)用[J].黑龍江醫(yī)藥，2000（03）.

[3]楊薌鈺，錢剛，張相洋，段學(xué)志，周興貴.溶劑和雜質(zhì)對三水乳酸鋅晶體生長形貌的影響（英文）[J].Chinese Journal of Chemical Engineering，2014（02）.

[4]趙茜，高大維，陳永泉，李秉滔.紅霉素溶析結(jié)晶過程中原溶劑對其晶習(xí)及純度的影響研究[J].中國抗生素雜志，1999（06）.

[5]付麗娟，江江.柱前衍生HPLC法同時(shí)測定注射用頭孢拉定原料中的3種成分[J].藥物分析雜志，2001（02）.