自身免疫性溶血性貧血引起ABO定型困難1例

洪俊

【中圖分類號】R155.3 【文獻標識碼】A 【文章編號】2095-6851（2017）09--01

自身免疫性溶血性貧血是由自身抗體引起的一類常見病征，多見于血液病、風濕免疫病等病種。病人紅細胞由于被自身抗體致敏造成長期貧血，為了改善臨床癥狀，該類患者長期依賴輸血，但自身抗體會造成實驗室交叉配血困難。近期我們實驗室收到一例疑難配血標本，送檢臨床醫(yī)院最初鑒定為A型，經我們實驗室檢查診斷為自身免疫性溶血性貧血，但我們在檢測過程中發(fā)現(xiàn)患者ABO正反定型不一致，現(xiàn)報道如下。

一、材料與方法。

血型分型試劑單克隆抗-A、抗-B（批號：20151123）、抗-D（批號：20151815）、反定型細胞（批號：20175318）、抗體篩選細胞（批號：20177020）、抗體鑒定譜細胞（批號：20170503）均購自上海血液生物醫(yī)藥有限責任公司。AB型血漿由本實驗室提供，酸放散試劑盒由上海血液中心血型參比室提供。血型定型、抗體篩選、抗體鑒定、放散試驗均按文獻[1]提供方法操作。

二、血型血清學檢查。

1.血型鑒定：

患者ABO血型鑒定結果見表1?；颊逺hD血型為RhD陽性。

2.直接抗人球蛋白試驗

患者紅細胞直接抗人球蛋白試驗結果見表2.

3.抗體篩選試驗。

患者血清用抗體篩選試劑盒鑒定，結果見表3.

4.抗體鑒定。

用酸放散試劑盒制備患者紅細胞放散液?；颊哐?、酸放散液用商品譜細胞鑒定抗體特異性，反應結果見表4。由表4可知該患者血清中有不規(guī)則抗體，但抗體特異性不明確，結合紅細胞放散液的特異性可知患者紅細胞被自身抗體所致敏。

1+w 2+ /

5. 經熱放散處理的患者紅細胞正定型

患者紅細胞經56℃5分鐘熱放散處理后再次鑒定ABO正定型，結果見表5.

三、討論

自身免疫性溶血性貧血（AIHA）可分為四種主要類型：溫自身免疫性溶血性貧血（WAIHA）、冷凝集素綜合征（CAS）、混合型自身免疫性溶血性貧血（mixed-typed AIHA）和陣發(fā)性寒冷性血紅蛋白尿（PCH）。某些患者溶血性貧血的臨床證據(jù)是存在的，但是DAT為陰性，通常在血清和放散液中不能測得自身抗體，可能有幾種原因導致DAT是陰性。1.）當進行DAT試驗用鹽水洗滌細胞時，低結合親和力的抗體可能從紅細胞上分離下來；用低離子強度鹽水或生理鹽水37℃或4℃洗滌可幫助抗體維持在細胞上。2.）用常規(guī)方法測定，可能太少抗體分子結合在紅細胞上；但可用如下方法證實，如紅細胞流式儀、酶連抗球蛋白試驗、固相法或直接polybrene法。

紅細胞膜表面由于唾液酸的存在而使紅細胞帶負電荷，紅細胞帶有負電荷可避免其發(fā)生自發(fā)聚集，使紅細胞保持最大的表面積，增加氧的轉移能力和氣體擴散。紅細胞懸浮在電解質溶液內，陽離子被紅細胞的負電荷所吸引，紅細胞被擴散的雙層離子云所圍繞。離子云如同紅細胞的一部分隨著紅細胞移動，離子云的外沿稱為修剪表面或滑面。紅細胞的有效電荷稱為Zeta電位，是由這個面決定的，它使紅細胞之間保持靜電排斥。由于靜電使紅細胞間保持一定距離，IgG分子的跨距太短，不能給兩個細胞搭起橋來。膠體介質能提高介電常數(shù)，從而降低Zeta電位，使已致敏的紅細胞靠攏而現(xiàn)凝集。

該患者直抗陽性，顯示患者紅細胞被IgG類抗體、C3d補體成分致敏?；颊哐逯锌贵w特異性不明確，可能是自身抗體或、和同種抗體 ?；颊呒t細胞酸放散液無特異性，顯示患者紅細胞被IgG類自身抗體致敏。正是由于該IgG類自身抗體的致敏，使患者紅細胞與抗-B標準血清發(fā)生了正常不應有的弱凝集；而患者紅細胞的鹽水對照不凝集，與無抗體特異性的AB型血漿發(fā)生凝集，進一步驗證了Zeta電位理論，即抗-B標準血清作為一種蛋白介質提高了介質的介電常數(shù)，從而降低了Zeta電位，導致了IgG類自身抗體致敏的紅細胞發(fā)生凝集?；颊呒t細胞經56℃5分鐘熱放散后，與抗-B標準血清不再發(fā)生凝集。

參考文獻

丁蘇鄂.常用血清學檢查技術[M]//劉達莊.免疫血液學.上海：上?？茖W技術出版社，2002，194-234.endprint