高效液相色譜—示差折光測定口香糖中山梨糖醇和麥芽糖醇的含量

何紅春+李紅梅

摘 要：目的：建立一種高效液相色譜-示差折光測定口香糖中山梨糖醇和麥芽糖醇含量的實驗方法。方法：色譜柱采用Waters NH2柱（250mm×4.6mm，5μm），以乙腈∶水=70∶30為流動相，采用示差折光檢測器測定口香糖中山梨糖醇和麥芽糖醇的含量。結(jié)果：采用本實驗檢測方法，山梨糖醇和麥芽糖醇的線性范圍為1.6～6.4mg/mL，該方法的最小檢出限0.1mg/mL，加標回收率為92.46%～101.08%，方法的相對標準偏差0.88%～1.96%。結(jié)論：該方法精密度好、回收率和準確度高，適用于口香糖中山梨糖醇和木糖醇的定量分析。

關(guān)鍵詞：口香糖；山梨糖醇；麥芽糖醇；高效液相色譜；示差折光檢測

中圖分類號 TS247 文獻標識碼 A 文章編號 1007-7731（2017）17-0127-03

Abstract：[Objective]A high performance liquid chromatography method for separation and determination of sorbitol and maltitol in chewing gum with sticky rice was established. [Method] The analytical column was Waters NH2 （ 250mm×4.6mm，5μm），the mobile phase was acentonitrile-water （70∶30，V/V），the samples were determined by an refractive index detector detector. [Result]The calibration curves had good linearity in the range of 1.6～6.4mg/mL for sorbitol and maltitol，the detection limit for sorbitol and maltitol was 0.1mg/mL，the average recoveries of sorbitol and maltitol were 92.46%～101.08% ，RSD = 0.88%～1.96%.[Conclusion] The method was a convenient，rapid and effective method for qualitatively analysis of sorbitol and maltitol in chewing gum.

Key words：Chewing gum；Sorbitol；Maltitol；HPLC；Refractive index detector

糖醇[1-11]是一種多元醇，含有2個以上的羥基，糖醇雖然不是糖但具有某些糖的屬性。木糖醇與蔗糖的甜度相當(dāng)，麥芽糖醇與蔗糖的甜度接近，這2種糖醇是蔗糖最好的替代品，可以簡單的替代蔗糖。木糖醇的生產(chǎn)原料是富含半纖維素的農(nóng)林廢棄物玉米芯等，資源較為豐富，且不會造成與食糧爭原料的現(xiàn)象，發(fā)展?jié)摿^大。所以糖醇一直是各個國家研究的對象，是國際食品和衛(wèi)生組織批準的安全性食品之一。在我國GB2760-2014《食品安全國家標準 食品添加劑使用標準》中規(guī)定食品中糖醇類是按生產(chǎn)需要適量使用[12]。由于糖醇不含醛基，沒有還原性，所以不能采用滴定法測定；在紫外區(qū)域也沒有吸收峰，所以也不能用紫外測定其含量。為此，本實驗利用高效液相色譜-示差折光方法對口香糖中山梨糖醇和麥芽糖醇含量的測定進行了研究。

1 材料與方法

1.1 材料和儀器 口香糖樣品（超市購買）、山梨糖醇對照品（德國Dr.Ehrenstorfer）、麥芽糖醇對照品（德國Dr.Ehrenstorfer）；乙腈，默克化工技術(shù)（上海）有限公司。 E2695高效液相色譜儀，Waters公司；2414示差折光檢測器，Waters公司；Synergy超純水機，美國密理（MILLIPORE）公司。

1.2 實驗方法

1.2.1 色譜條件選擇 色譜柱：Waters NH2柱（250mm×4.6mm，5μm），流動相：乙腈∶水=70∶30；檢測池溫度：35℃；柱溫：35℃；進樣量10μL；流速1.0mL/min。

1.2.2 標準溶液配制 準確稱取山梨糖醇和麥芽糖醇對照品，用流動相溶解配制成1.6，2.4，3.2，4.8，6.4mg/mL的混標溶液，搖勻，經(jīng)0.45μm濾膜過濾，取濾液備用，作為對照品溶液。

1.2.3 樣品溶液配制 準確稱取2g左右切碎的樣品，置于50mL離心管中，加入40mL水，漩渦混勻5min，置于80℃水浴鍋中加熱20min，取出后9000r/min離心10min，取上清液過0.22μm濾膜，上機測試。

2 結(jié)果與分析

2.1 線性關(guān)系的考察 精密吸取2種糖醇混合對照品溶液10μL，注入高效液相色譜儀，記錄色譜圖。以對照品峰面積為縱坐標，以對照品溶液濃度（mg/mL）為橫坐標，繪制標準曲線，得到回歸方程跟相關(guān)系數(shù)見圖1。由圖1可知，2種糖醇在1.6～6.4mg/mL線性關(guān)系良好，并以信噪比等于3為標準，測得2種糖醇的檢出限為0.1mg/mL。

2.2 精密度試驗 精密吸取混合對照品溶液10μL重復(fù)進樣6次，記錄色譜圖峰面積，并測定峰面積的平均值和相對標準偏差，測定結(jié)果見表1。連續(xù)6次實驗結(jié)果顯示，山梨糖醇和麥芽糖醇精密度實驗相對標準偏差為1.26%、1.45%，本實驗測定山梨糖醇和麥芽糖醇精密度良好，具有良好的準確度。

2.3 重復(fù)性實驗 由表2可知，取同一樣品，按照供試樣品溶液制備方法重復(fù)測定6次，記錄色譜圖，測定結(jié)果見表2。重復(fù)性實驗山梨糖醇相對標準偏差為1.20%，麥芽糖醇相對標準偏差為1.73%。用本方法測山梨糖醇和麥芽糖醇含量重復(fù)性良好。endprint

2.4 回收率實驗 在上述優(yōu)化好的條件下，分別在口香糖樣品中添加標樣，進行添加回收率和精密度實驗。測定結(jié)果見表3，回收率在92.46%～101.08%，重復(fù)測定7次，計算各組分的相對標準偏差在0.88%～1.96%。表明高效液相色譜-示差折光法能夠滿足實際樣品的測定需求。

2.5 樣品測定 取6批口香糖按1.3.3方法制備樣品溶液，精密吸取樣品供試液10μL，對照品混合溶液10μL，分別注入高效液相色譜儀，以外標法計算含量，見表4，樣品中山梨糖醇跟麥芽糖醇含量見表4。山梨糖醇和麥芽糖醇對照品及樣品的HPLC色譜圖見圖2、圖3，從圖2和圖3可知，通過上述條件對照品和樣品都能夠達到很好的基線分離，山梨糖醇和麥芽糖醇出峰時間分別在7.7min和10.8min，結(jié)果令人滿意。

3 討論

糖醇類易溶于水，所以前處理可以才用水提取的方法，但是復(fù)雜食品中糖醇類的測定前處理要去除蛋白質(zhì)、脂肪等凈化后才能上儀器測定，另外對照品的糖醇類吸濕性較高，所以在稱量對照品時候需要注意快速準確，盡量減小誤差。本實驗針對口香糖中山梨糖醇和麥芽糖醇含量的測定具有良好的準確度、精密度和回收率，適用于口香糖中山梨糖醇和麥芽糖醇含量的測定。

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[12]GB 2760-2014食品安全國家標準 食品添加劑使用標準[S].

（責(zé)編：張宏民）endprint