尿液培養(yǎng)念珠菌的菌群分布與藥敏分析

答 嶸，吳友偉，石 紅，劉萬(wàn)靜，王 偉

(西安交通大學(xué)第一附屬醫(yī)院：1.檢驗(yàn)科；2.神經(jīng)外科，西安 710061)

·經(jīng)驗(yàn)交流·

尿液培養(yǎng)念珠菌的菌群分布與藥敏分析

答 嶸1，吳友偉1，石 紅1，劉萬(wàn)靜1，王 偉2△

(西安交通大學(xué)第一附屬醫(yī)院：1.檢驗(yàn)科；2.神經(jīng)外科，西安 710061)

目的 通過(guò)分析尿液培養(yǎng)中念珠菌菌群分布與藥敏試驗(yàn)結(jié)果，探討泌尿系念珠菌感染的臨床特點(diǎn)。方法 回顧性分析該院2012年11月至2016年3月臨床患者尿液培養(yǎng)為念珠菌的實(shí)驗(yàn)室資料，采用WHONET5.6軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析。結(jié)果 共包含非重復(fù)分離菌株286株，其中白色念珠菌為120株(41.96%)，光滑念珠菌74株(25.87%)，熱帶念珠菌72株(25.17%)，以及近平滑念珠菌11株(3.85%)。最常見(jiàn)于重癥監(jiān)護(hù)病房患者，共60株(20.98%)。白色念珠菌與光滑念珠菌多見(jiàn)于女性。近平滑念珠菌對(duì)氟康唑敏感率為100.00%，白色念珠菌、光滑念珠菌、熱帶念珠菌均出現(xiàn)不同程度耐藥。結(jié)論 泌尿系念珠菌感染多見(jiàn)于重癥患者，白色念珠菌最常見(jiàn)，非白色念珠菌需引起重視。

尿液培養(yǎng)；念珠菌；菌群分布；藥敏試驗(yàn)

泌尿系感染是臨床常見(jiàn)病癥，由于免疫受損患者不斷增加、廣譜抗生素的濫用、侵入性裝置或操作的增加，真菌所致的泌尿系統(tǒng)感染逐漸增多。在住院患者中，一旦存在微生物的定植，泌尿系統(tǒng)是最常發(fā)生感染的解剖結(jié)構(gòu)。泌尿系感染雖然多由細(xì)菌感染引起，但是患者罹患真菌感染，或真菌雖未引起感染但是定植泌尿系統(tǒng)是臨床醫(yī)生面臨的一個(gè)棘手的問(wèn)題。尿液培養(yǎng)是泌尿系感染病原學(xué)診斷的金標(biāo)準(zhǔn)，念珠菌在泌尿系真菌感染中最常見(jiàn)[1]。本研究回顧性分析本院尿液培養(yǎng)念珠菌生長(zhǎng)的473份標(biāo)本的病原學(xué)分布與藥敏分析結(jié)果，為預(yù)防與治療念珠菌泌尿系感染提供臨床依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 一般資料 本研究回顧性分析2012年11月至2016年3月本院臨床送檢尿液標(biāo)本中分離培養(yǎng)念珠菌的種類與藥敏試驗(yàn)結(jié)果。

1.2 方法

1.2.1 儀器與材料 微生物鑒定系統(tǒng)包括VITEK MS全自動(dòng)快速質(zhì)譜微生物檢測(cè)系統(tǒng)(法國(guó)生物梅里埃公司)，ATB鑒定藥敏系統(tǒng)(法國(guó)生物梅里埃公司)，API ID32C鑒定試劑盒，ATBFUNGUS 3藥敏試劑盒。培養(yǎng)基包括血瓊脂平板(法國(guó)生物梅里埃公司)，麥康凱平板(法國(guó)生物梅里埃公司)，沙保羅平板(法國(guó)生物梅里埃公司)。采用ATCC MYA2950光滑念珠菌進(jìn)行、ATCC 64677光滑念珠菌、ATCC 6258克柔念珠菌進(jìn)行質(zhì)量控制。

1.2.2 標(biāo)本采集與處理 臨床無(wú)菌采集尿液標(biāo)本立即送檢至檢驗(yàn)科。條碼掃描后，在生物安全柜中定量接種至培養(yǎng)基，37℃培養(yǎng)箱孵育。經(jīng)過(guò)5 d培養(yǎng)后無(wú)真菌生長(zhǎng)，此標(biāo)本即為陰性。

1.2.3 病原菌鑒定和藥敏試驗(yàn) 生長(zhǎng)的陽(yáng)性菌落按照操作規(guī)程用全自動(dòng)快速質(zhì)譜微生物檢測(cè)系統(tǒng)或API ID32C鑒定試劑盒進(jìn)行鑒定，ATBFUNGUS 3藥敏試劑盒檢測(cè)其對(duì)抗真菌藥的敏感性。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用世界衛(wèi)生組織細(xì)菌耐藥性監(jiān)測(cè)網(wǎng)提供的WHONET5.6軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析。

2 結(jié) 果

2.1 菌種分布 本研究共包括分離株473株，其中非重復(fù)分離株為286株。白色念珠菌最多，為120株(41.96%)，其次為光滑念珠菌74株(25.87%)、熱帶念珠菌72株(25.17%)、近平滑念珠菌11株(3.85%)、克柔念珠菌3株(1.05%)、鏈狀念珠菌2株(0.70%)、釀酒酵母2株(0.70%)、杜氏念珠菌1株(0.35%)、中間念珠菌1株(0.35%)。

2.2 科室分布 尿液培養(yǎng)念珠菌陽(yáng)性標(biāo)本患者最常見(jiàn)于重癥監(jiān)護(hù)病房60株(20.98%)，其次為神經(jīng)內(nèi)科35株(12.24%)、腎內(nèi)科26株(9.09%)、呼吸內(nèi)科22株(7.69%)、干部病房21株(7.34%)、感染性疾病科19株(6.64%)、神經(jīng)外科19株(6.64%)、泌尿外科18株(6.29%)、內(nèi)分泌科14株(4.90%)、肝膽外科11株(3.85%)，其他41株(14.39%)。

2.3 年齡分布 白色念珠菌在各個(gè)年齡組均最常見(jiàn)，20～60歲年齡組中所占比例低于常見(jiàn)念珠菌的40.00%，而非白色念珠菌占60.00%以上(表1)。

表1 尿液培養(yǎng)常見(jiàn)念珠菌在不同年齡患者分布比例(%)

2.4 性別分布 白色念珠菌(女56.70%，男43.30%)與光滑念珠菌(女77.00%，男23.00%)多見(jiàn)于女性，熱帶念珠菌(女47.20%，男52.70%)與近平滑念珠菌(女9.10%，男90.90%)多見(jiàn)于男性。

2.5 藥敏試驗(yàn)結(jié)果分析 尿液培養(yǎng)念珠菌陽(yáng)性標(biāo)本氟康唑藥敏試驗(yàn)結(jié)果按照NCCLS M27-A 1997折點(diǎn)，MIC ≤8 μg/mL為敏感(S)，MIC 16～32 μg/mL為劑量依賴型敏感(SDD)，MIC≥64 μg/mL為耐藥(R)。見(jiàn)表2。

表2 尿液培養(yǎng)念珠菌氟康唑藥敏試驗(yàn)結(jié)果(%)

3 討 論

泌尿系感染在世界范圍內(nèi)廣泛存在，主要是由于微生物侵入到泌尿系統(tǒng)各器官引起。近年來(lái)，念珠菌引起的泌尿系感染明顯增多[2]。Borst等[3]報(bào)道荷蘭流行率為24%，Kobayashi等[4]報(bào)道巴西流行率為22.00%。國(guó)內(nèi)報(bào)道為15.87%～30.10%[5-6]，而且分離率逐年升高[7]。尿液培養(yǎng)是泌尿系統(tǒng)感染診斷的金標(biāo)準(zhǔn)，但是尿液中即使有真菌生長(zhǎng)也需排除污染，膀胱內(nèi)留置導(dǎo)尿管相關(guān)的膀胱定植，原發(fā)感染或播散性真菌病[8]。本研究對(duì)本院2012年11月至2016年3月的尿液培養(yǎng)真菌陽(yáng)性的標(biāo)本進(jìn)行回顧性分析，其中共包括分離株473株，而非重復(fù)分離株僅286株，提示真菌所致泌尿系統(tǒng)感染患者臨床多次送檢尿液培養(yǎng)均為陽(yáng)性且培養(yǎng)結(jié)果一致。真菌泌尿系感染最常由念珠菌引起[1]。本研究中尿液培養(yǎng)的所有真菌均為念珠菌，其中白色念珠菌為120株，達(dá)到全部非重復(fù)分離株的41.96%。光滑念珠菌為74株(25.87%)，熱帶念珠菌為72株(25.17%)，近平滑念珠菌11株(3.85%)。一項(xiàng)研究表明白色念珠菌為44.00%，光滑念珠菌為28.00%，熱帶念珠菌為17.00%，克柔念珠菌為5.50%[9]。Achkar等[10]在美國(guó)10家醫(yī)學(xué)中心進(jìn)行的另一項(xiàng)研究發(fā)現(xiàn)白色念珠菌是所有念珠菌中最常見(jiàn)的，可以達(dá)到52.00%，光滑念珠菌為16.00%，熱帶念珠菌為8.00%。邵峰等[11]研究發(fā)現(xiàn)泌尿系感染真菌中，白色念珠菌為50.40%，熱帶假絲酵母菌為16.20%，克柔念珠菌為6.30%，光滑念珠菌為5.40%。本研究結(jié)果與上述研究結(jié)果相似，提示白色念珠菌在真菌所致泌尿系統(tǒng)感染中為主要病原菌。所有已知的念珠菌種都能夠引起泌尿系統(tǒng)感染，白色念珠菌是最常見(jiàn)的菌種。但是在世界許多地方，非白色念珠菌已成為泌尿系統(tǒng)感染主要菌種,成為臨床感染新的威脅[12-13]。本研究顯示非白色念珠菌為166株，占非重復(fù)分離株的58.04%，提示非白色念珠菌在泌尿系統(tǒng)感染中不容忽視。

念珠菌已逐漸成為住院患者泌尿系統(tǒng)感染的主要病因，尤其是重癥患者[1]。本研究結(jié)果顯示尿液培養(yǎng)念珠菌陽(yáng)性的患者中前10位科室中涵蓋各個(gè)內(nèi)、外科，其中重癥監(jiān)護(hù)病房的患者所占比例最高，有60例，為20.98%。可能與其患者多為臥床患者，長(zhǎng)期留置導(dǎo)尿的患者較多，加之長(zhǎng)期臥床患者發(fā)生墜積性肺炎概率增高，長(zhǎng)期使用抗生素，導(dǎo)致菌群失調(diào)有關(guān)。本研究數(shù)據(jù)表明各個(gè)年齡分組中，白色念珠菌均為最常見(jiàn)的念珠菌，在20～60歲年齡組中所占比例低于常見(jiàn)念珠菌總數(shù)的40.00%，而非白念珠菌占60.00%以上，提示非白色念珠菌在青壯年泌尿系統(tǒng)感染中具有重要意義。本研究數(shù)據(jù)顯示白色念珠菌與光滑念珠菌多見(jiàn)于女性，而男性則常見(jiàn)熱帶念珠菌與近平滑念珠菌。

氟康唑是目前臨床應(yīng)用最為廣泛的抗真菌藥，能夠明顯促進(jìn)泌尿系中念珠菌的清除。其耐藥率處于波動(dòng)狀態(tài)，且在不同酵母菌耐藥率不同[14]。本研究對(duì)主要的4中念珠菌藥敏試驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行了分析，除近平滑念珠菌各非重復(fù)分離株均對(duì)氟康唑均敏感外，白色念珠菌、光滑念珠菌、熱帶念珠菌均出現(xiàn)不同程度的耐藥，尤其是熱帶念珠菌，氟康唑非敏感率超過(guò)20%。數(shù)據(jù)顯示光滑念珠菌與熱帶念珠菌對(duì)氟康唑敏感率較白色念珠菌低，提示臨床應(yīng)用氟康唑治療的選擇壓力會(huì)促進(jìn)非白色念珠菌的增加。因此，早期快速的病原學(xué)診斷對(duì)于臨床合理使用氟康唑具有重要指導(dǎo)意義。

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國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(81000767)；西安交通大學(xué)第一附屬醫(yī)院基金資助項(xiàng)目(2014YK30)。

答嶸(1975-)，副主任技師，博士，主要從事臨床微生物學(xué)的研究。

△通信作者，E-mail：wei_wangdoc@163.com。

10.3969/j.issn.1671-8348.2017.24.023

R446.5

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1671-8348(2017)24-3390-02

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2017-04-20)