超高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法測(cè)定飲用水中壬基酚、辛基酚

奚曄+夏天+詹銘

環(huán)境內(nèi)分泌干擾物（EDCs）是指來源于環(huán)境中，進(jìn)入人體后具有干擾體內(nèi)正常分泌物質(zhì)的合成、釋放、運(yùn)轉(zhuǎn)、代謝、結(jié)合等過程，激活或者抑制內(nèi)分泌系統(tǒng)功能從而破壞其維持機(jī)體穩(wěn)定性和調(diào)控作用的物質(zhì)。EDCs會(huì)對(duì)人體發(fā)育及生殖功能產(chǎn)生不良影響[1-2]。烷基酚是一種常用的工業(yè)化合物，也是一種重要的環(huán)境內(nèi)分泌干擾物。烷基酚成分中以壬基酚、辛基酚為主，不易降解。目前，文獻(xiàn)報(bào)道烷基酚的檢測(cè)方法主要有液相色譜-熒光檢測(cè)器法，液相色譜-紫外檢測(cè)器（LC-UV）法，衍生-氣相色譜/質(zhì)譜（GC/MS）法等[3-7]。其中液相色譜法難以排除基質(zhì)干擾的影響，氣相色譜法操作繁瑣。由于烷基酚類物質(zhì)的污染較普遍，普通試劑、塑料耗材中均能檢出，如果采用固相萃取技術(shù)，其本底污染較難控制。本研究建立液液萃取-超高效液相色譜/串聯(lián)質(zhì)譜法檢測(cè)水中壬基酚、辛基酚，進(jìn)行了萃取條件優(yōu)化，并對(duì)轄區(qū)內(nèi)自來水進(jìn)行檢測(cè)。本方法操作簡(jiǎn)單，干擾易控制，無需復(fù)雜衍生步驟。

1 材料與方法

1.1 儀器與試劑

儀器有超高效液相色譜/串聯(lián)質(zhì)譜（Waters Acquity UPLC H-class， Xevo TQD，Waters公司產(chǎn)品）；氮吹儀（Biotage公司產(chǎn)品）。試劑有二氯甲烷（農(nóng)殘級(jí)）、甲醇（LCMS級(jí)）、乙腈（LCMS級(jí)）、純水（HPLC級(jí)）均為MERCK公司產(chǎn)品，氯化鈉優(yōu)級(jí)純（國藥公司產(chǎn)品）。

壬基酚（NP）的三種異構(gòu)體：NP-1（支鏈壬基酚混合物CAS 84852-15-3）、NP-2（直鏈壬基酚混合物CAS 25154-52-3）、NP-3（4-正壬基酚CAS 104-40-5）；辛基酚（OP）的三種異構(gòu)體：OP-1（4-正辛基酚CAS1806-26-4）、OP-2（4-特辛基酚CAS 140-66-9）、OP-3（叔辛基苯酚混合物CAS27193-28-8）。

1.2 前處理

取200 mL水樣，加入5 g氯化鈉（優(yōu)級(jí)純，經(jīng)過凈化處理），加入6 moL/L鹽酸數(shù)滴調(diào)節(jié)酸度，用30 mL二氯甲烷分2次萃取，合并萃取液后用氮吹儀（40℃）濃縮，以乙腈∶[KG-*2]水（1∶[KG-*2]1）定容至1 mL。

1.3 儀器條件

超高效液相色譜/串聯(lián)質(zhì)譜：Waters超高效色譜柱（Acquity UPLC BEH C18，2.1×50 mm，1.7 μm ）；流動(dòng)相：A相為水（0.1%氨水），B相為乙腈（0.1%氨水），梯度洗脫程序如表1所示。進(jìn)樣量20 μL。離子源為電噴霧離子源，負(fù)離子模式（ESI—）；毛細(xì)管電壓為3.0 kV；離子源溫度為150℃；去溶劑氣溫度為500℃，去溶劑氣流速為900 L/h；錐孔氣流量為50 L/h。 MRM 模式采集數(shù)據(jù)，自動(dòng)優(yōu)化得到各目標(biāo)物質(zhì)譜參數(shù)見表2，MRM離子質(zhì)譜圖見圖1。

2 結(jié)果

2.1 標(biāo)準(zhǔn)品的選擇和配制

取適量NP、OP各異構(gòu)體配制儲(chǔ)備液，以甲醇稀釋定容，冷藏待用。臨用前用乙腈∶[KG-*2]水（1∶[KG-*2]1）稀釋成濃度系列：0、2.5、10.0、25.0、50.0、75.0、100 μg/L。

2.2 樣品前處理過程中的本底控制

烷基酚的實(shí)驗(yàn)室污染來源很多，試劑、器皿、洗滌劑、固相萃取小柱、管路以及其他塑料耗材等都會(huì)帶來污染。本實(shí)驗(yàn)研究采用液液萃取方法，對(duì)所用試劑、器皿嚴(yán)格控制本底污染，達(dá)到了較好的效果。

2.2.1 氯化鈉的凈化 實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)分析純和優(yōu)級(jí)純的氯化鈉均含有較高的烷基酚本底，因此，需要作凈化處理。本實(shí)驗(yàn)中以二氯甲烷浸沒氯化鈉，充分浸泡、攪拌30 min后棄去，重復(fù)3次，再500℃以上烘干備用。

2.2.2 分液漏斗的清洗 分液漏斗等玻璃器具盡可能專用，在使用洗滌劑清洗后，應(yīng)充分沖洗，使用前應(yīng)以適量二氯甲烷潤洗干凈。

2.2.3 其他耗材的本底控制 氮吹儀應(yīng)使用高純氮?dú)猓瑲饴窇?yīng)使用聚四氟乙烯管。采樣和分析用器皿都應(yīng)避免使用塑料制品。

2.3 方法的線性、精密度、檢出限和回收率

分別配制不同濃度NP、OP各異構(gòu)體的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，在上述實(shí)驗(yàn)條件下繪制校準(zhǔn)曲線。結(jié)果表明，方法的線性范圍廣（5-100 μg/L），相關(guān)性好（r>0.992）。以3 μg/L的標(biāo)準(zhǔn)溶液重復(fù)測(cè)定21次，按照公式DL=4.6σwb（σwb為平行測(cè)定批內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)偏差）計(jì)算得到檢出限。在空白水樣中分別加入混合標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)成0.05、0.25、0.45 μg/L 3個(gè)濃度水平，分3日測(cè)定，每日測(cè)定6次，計(jì)算精密度。在空白水樣中分別加入混合標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)成0.05、0.45 μg/L 2個(gè)濃度水平的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，測(cè)得回收率，結(jié)果見表3。

2.4 樣品測(cè)定

對(duì)轄區(qū)內(nèi)某季度95份管網(wǎng)水樣品、270件二次供水樣品進(jìn)行檢測(cè)，NP檢出率為15%，OP均未檢出。其中NP以NP-1為主，最高濃度為0.28 μg/L。

3 討論

建立了生活飲用水中NP、OP的液液萃取-超高效液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用的檢測(cè)方法，對(duì)樣品前處理參數(shù)進(jìn)行了優(yōu)化和驗(yàn)證，均得到了滿意的結(jié)果。本方法靈敏度高，本底污染可控，抗干擾能力強(qiáng)，滿足實(shí)驗(yàn)室定性、定量檢測(cè)的要求。

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（收稿日期：2015-05-26）