新疆藥桑葉中五種活性成分的薄層色譜鑒別

李 玲，朱衛(wèi)敏，張 琴，孫 蓮

(1.新疆醫(yī)科大學(xué)藥學(xué)院,新疆 烏魯木齊 830011;2.烏魯木齊職業(yè)大學(xué)，新疆 烏魯木齊 830002)

新疆藥桑葉中五種活性成分的薄層色譜鑒別

李 玲1，朱衛(wèi)敏1，張 琴2，孫 蓮1

(1.新疆醫(yī)科大學(xué)藥學(xué)院,新疆 烏魯木齊 830011;2.烏魯木齊職業(yè)大學(xué)，新疆 烏魯木齊 830002)

目的:建立新疆藥桑葉中同時(shí)鑒別五種活性成分的薄層色譜方法。方法：分析不同薄層板、檢視方式、展開劑、顯色劑對五種活性成分分離的影響。結(jié)果：在366nm下以V(甲苯)：V(乙酸乙酯)：V(甲醇)：V(甲酸)=10:3:5:3.5為展開劑在硅膠G高效板上展開，1%三氯化鋁為顯色劑，藥桑葉中蘆丁、槲皮素、異槲皮苷、紫云英苷和綠原酸五種成分均得到有效的分離，斑點(diǎn)圓整、清晰，比移值在0.2～0.8之間,符合薄層層析要求。結(jié)論：此試驗(yàn)為新疆藥桑葉的質(zhì)量控制提供快速的鑒別方法。

藥桑葉；活性成分；薄層鑒別

新疆藥桑是新疆獨(dú)有的桑品種之一，藥用價(jià)值極高[1]?，F(xiàn)代藥理研究證明藥桑葉具有降血糖、降血壓、抗菌和抗病毒等多種藥理活性，其中的黃酮類如蘆丁、槲皮素、異槲皮苷、紫云英苷，有機(jī)酸成分綠原酸均為活性成分[2-5]。本文采用薄層色譜法同時(shí)鑒別蘆丁、槲皮素、異槲皮苷、紫云英苷和綠原酸五種活性成分。方法操作簡單，為新疆藥桑葉的質(zhì)量控制提供快速的鑒別方法。

1 儀器與試劑

1.1 儀器

半自動(dòng)點(diǎn)樣儀(CAMAG LINOMAT 5)，薄層色譜數(shù)碼成像系統(tǒng)(CAMAGREPROSTAR 3)，超聲清洗儀(KQ5200DE型，昆山市超聲儀器有限公司)。硅膠H板、硅膠G板、硅膠G高效板、聚酰胺板、GF254板(青島海洋化工分廠)。

1.2 試劑

蘆丁(批號100080-200707)，槲皮素(批號100081-200907)，異槲皮苷(批號111809-201102)，紫云英苷(批號114201-200908)，綠原酸(批號110753-200413)均由中國藥品生物制品檢定所提供，甲苯、乙酸乙酯、甲酸、甲醇、無水乙醇、95%乙醇、磷鉬酸、香草醛、三氯化鋁均為分析純；藥桑葉藥材采自于新疆和田，經(jīng)生藥學(xué)帕麗達(dá)·阿布力孜教授鑒定為藥桑葉。

2 試驗(yàn)方法[6-16]

2.1 試樣溶液的制備

精密稱取過60目篩干燥的藥桑葉粉5.0 g，置于100 mL的錐形瓶中，加甲醇30 mL，超聲提取30 min，過濾，得供試品溶液，用0.22微米微孔濾膜過濾后備用。

2.2 對照品溶液的制備

精密稱取蘆丁、槲皮素、異槲皮苷、紫云英苷、綠原酸對照品各5.0 mg，置于10 mL容量瓶中，加甲醇溶解并定容，配成0.5 mg/mL的對照品溶液。用微量移液器吸取上述五種對照品溶液各200 μL制成混標(biāo)(蘆丁、槲皮素、異槲皮苷、紫云英苷、綠原酸濃度均為0.1 mg/mL)，用0.22微米微孔濾膜過濾后備用。

2.3 顯色劑的配制

(1) 1%三氯化鋁 稱取1g三氯化鋁溶于100mL95%乙醇中。

(2) 磷鉬酸試劑 稱取10g磷鉬酸，溶于100mL乙醇中；噴灑后120℃條件下加熱15min。

(3) 香草醛 稱取5g香草醛溶于100mL10%硫酸乙醇溶液。

3 薄層色譜鑒別[17-26]

在自動(dòng)點(diǎn)樣儀上給薄層板點(diǎn)樣，點(diǎn)樣量為2μL，吹干溶劑，放入已用展開劑預(yù)飽和30min的層析缸中，在室溫條件下，進(jìn)行上行展開，展距為8cm，揮干展開劑，用顯色劑顯色，計(jì)算比移值Rf。

3.1 薄層板的選擇

選取硅膠H板、硅膠G板、硅膠G高效板、聚酰胺板、GF254板按2.2步驟將各種薄層板放入展開劑中展開，考察不同薄層板的分離效果，結(jié)果見圖1。

3.2 檢視方法的選擇

分別在366nm，254nm及自然光下觀察展開效果，結(jié)果見圖3。

3.3 展開劑的選擇

將硅膠G高效板薄層板分別放入表1展開劑中展開，考察不同展開劑的展開效果，結(jié)果見圖4。

表1 不同展開劑和配比

3.4 顯色劑的選擇

選取2.3中顯色劑,考察使用不同顯色劑的效果。

4 結(jié)果與討論

4.1 不同薄層板的選擇

按照3.1中薄層板對藥桑葉中五種活性成分的進(jìn)行分離，效果見圖1。

圖1 不同薄層板對分離效果的影響

由圖1可以看出，藥桑葉中五種活性成分在不同薄層板的展開效果表現(xiàn)出明顯差別，其中在硅膠G高效板上的展開效果明顯好于其它。

4.2 檢視方法的選擇

按3.2步驟考察不同檢視方法的效果，見圖2。

圖2 不同檢視方法的效果

從圖2可以看出，當(dāng)在366nm下效果明顯好于其它。

4.3 展開劑的選擇

按3.3步驟考察不同展開劑對展開效果的影響，見圖3。

從圖3可以看出，當(dāng)展開劑為甲苯：乙酸乙酯：甲醇：甲酸，體積比為10:3:5:3.5時(shí)，展開效果最好。

圖3 不同展開劑對展開效果的影響

4.4 顯色劑的選擇

按3.4步驟考察不同顯色劑的效果，見圖4。

圖4 不同顯色劑的效果

從圖4可以看出，當(dāng)顯色劑為1%三氯化鋁時(shí)，斑點(diǎn)最清晰。

5 小結(jié)

在試驗(yàn)中，分析了不同薄層板、檢視方式、展開劑、顯色劑對五種活性成分分離的影響。在硅膠G高效板上，366nm下選取甲苯：乙酸乙酯：甲醇：甲酸為展開劑，體積比為10:3:5:3.5， 1%三氯化鋁為顯色劑時(shí)，藥桑葉中蘆丁、槲皮素、異槲皮苷、紫云英苷和綠原酸五種成分均得到有效的分離，斑點(diǎn)圓整、清晰，比移值在0.2～0.8之間,符合薄層層析要求，為藥桑葉的質(zhì)量控制提供快速的鑒別方法。

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(本文文獻(xiàn)格式：李 玲，朱衛(wèi)敏，張 琴，等.新疆藥桑葉中五種活性成分的薄層色譜鑒別[J].山東化工，2017，46(04)：78-79，83.)

Simultaneous Determination of Five Active Ingredients by Thin-Layer Chromatography in The Medicine Mori Folium of Xinjiang

LiLing1,ZhuWeimin1,ZhangQin2,SunLian1

(1.The Pharmacy college，Xinjiang Medical University, Urumqi 830011,China;2.Urumqi vocational university, Urumqi 830002,China)

The TLC method was established separate five active ingredient in the mori folium of Xinjiang. Method：The different plate, view mode, developing agent, Color rendering agent were analyzed on the separation of components in the effection of five kinds of active components. Result：In 366nm toluene, ethyl acetate: methanol, formic acid as expansion agent (10:3:5:3.5) on silica gel G board launched, 1% aluminum chloride as chromogenic agent, The rutin , quercetin, isoquercetin,astragalin and chlorogenic acid get effective separation. Conclusion：This test provides rapid identification method for quality control of medicine mulberry in Xinjiang.

the mori folium; active ingredient; TLC

2017-01-09

新疆醫(yī)科大學(xué)科研創(chuàng)新(XJC201316)

李 玲(1982— )，女，講師，主要從事新疆天然產(chǎn)物開發(fā)利用；孫 蓮(1961— )，女，教授，主要從事天然產(chǎn)物分析研究。

TQ460

B

1008-021X(2017)04-0078-02