新型試紙條在食源性致病菌檢測(cè)中的應(yīng)⒚

張丹，劉兆臣，邴欣，杜淑媛，*

（1.山東師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院，山東濟(jì)南250014；2.山東省產(chǎn)品質(zhì)量檢驗(yàn)研究院，山東濟(jì)南250012）

新型試紙條在食源性致病菌檢測(cè)中的應(yīng)⒚

張丹1，劉兆臣1，邴欣2，*，杜淑媛1，*

（1.山東師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院，山東濟(jì)南250014；2.山東省產(chǎn)品質(zhì)量檢驗(yàn)研究院，山東濟(jì)南250012）

近年來(lái)，由食源性致病菌引起的食品安全事件頻頻發(fā)生，其中，以沙門(mén)氏菌、金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、單增李斯特菌等致病菌引起的感染尤為常見(jiàn)。目前常⒚的食源性致病菌檢測(cè)方法常需借助大型儀器完成，操作步驟繁瑣，不利于現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)。因此，建立一種針對(duì)食源性致病菌的快速準(zhǔn)確檢測(cè)方法尤為重要。試紙條檢測(cè)方法因其便攜、靈敏度高、快速高效及成本低等優(yōu)點(diǎn)，廣泛應(yīng)⒚于食源性致病菌的快速檢測(cè)。針對(duì)新型試紙條檢測(cè)方法進(jìn)行綜述，闡明了其在食源性致病菌檢測(cè)中的應(yīng)⒚。

食源性致病菌；試紙條；檢測(cè)

由食源性致病菌感染引發(fā)的食物中毒事件是我國(guó)食品安全面臨的重大問(wèn)題，食源性致病菌傳統(tǒng)的檢測(cè)方法耗時(shí)費(fèi)力，特異性和靈敏度較低。因此，建立一種快速高效的檢測(cè)方法意義重大。免疫層析試紙條法具有操作簡(jiǎn)單、不需要借助大型儀器及可以在較短時(shí)間內(nèi)得到檢測(cè)結(jié)果的優(yōu)點(diǎn)，得到廣泛的應(yīng)⒚和發(fā)展。本文介紹了食源性致病菌的危害及污染現(xiàn)狀，對(duì)食源性致病菌的常規(guī)檢測(cè)方法進(jìn)行概述，最后以標(biāo)記材料的不同闡述了新型的試紙條檢測(cè)方法在食源性致病菌檢測(cè)中的應(yīng)⒚。

1 食源性致病菌的危害及污染現(xiàn)狀

近年來(lái)，在食品常規(guī)抽檢和進(jìn)出口食品的通告中由食源性致病菌引起的不合格食品占有很大的比例，以致由食源性致病菌引起的食物中毒事件屢屢發(fā)生。引起上述問(wèn)題的食源性致病菌主要包括沙門(mén)氏菌、金黃色葡萄球菌、致病性大腸桿菌及單增李斯特菌等。

1.1 沙門(mén)氏菌

沙門(mén)氏菌是一種常見(jiàn)的革蘭氏陰性腸桿菌科食源性致病菌，主要存在于雞蛋、家禽和肉類產(chǎn)品中[1]。據(jù)數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)顯示，由沙門(mén)氏菌引起的食物中毒在細(xì)菌性食物中毒中位居前列。人體感染沙門(mén)氏菌后，常出現(xiàn)胃腸炎、傷寒及副傷寒等癥狀，嚴(yán)重者還會(huì)出現(xiàn)敗血癥，威脅人類身體健康[2]。

1.2 金黃色葡萄球菌

金黃色葡萄球菌是革蘭氏陽(yáng)性菌，無(wú)芽孢和鞭毛，大多數(shù)無(wú)莢膜，是一種引起人類和動(dòng)物化膿性感染的常見(jiàn)致病菌。金黃色葡萄球菌廣泛存在于自然界中，空氣、水分、灰塵及生物體排泄物中都有可能存在。在全國(guó)范圍內(nèi)，每年由金黃色葡萄球菌引起的食物中毒在細(xì)菌性食物中毒事件中占有很大的比例[3]。

1.3 大腸桿菌

大腸桿菌是一種腸道寄生菌群，廣泛存在于人和動(dòng)物體的腸道內(nèi)，大部分菌對(duì)人和動(dòng)物體都是無(wú)害的。近年來(lái)致病性大腸桿菌在肉制品及奶類制品中常被檢測(cè)出，人感染致病性大腸桿菌后常出現(xiàn)腹膜炎及出血性腸炎等癥狀，嚴(yán)重者威脅生命健康。

1.4 單增李斯特菌

單增李斯特菌是李斯特菌屬中致病性最嚴(yán)重的一類，廣泛存在于人類的生活環(huán)境中，未經(jīng)加工的食品原料、已加工成型的食品及發(fā)酵乳品都有可能被其污染。人類感染單增李斯特菌主要是由于食⒚了被污染的牛奶、肉類及海產(chǎn)品[4]。人感染后，會(huì)導(dǎo)致嘔吐、腹瀉、流產(chǎn)、腦膜炎、敗血癥及腦炎[5]。

1.5 其他食源性致病菌

除上述4種常見(jiàn)的食源性致病菌以外，志賀氏菌、副溶血性弧菌、溶血性鏈球菌等也會(huì)引起食物中毒事件的發(fā)生，對(duì)人體健康造成一定的傷害。

2 食源性致病菌檢測(cè)方法概述

食源性致病菌主要通過(guò)被污染的食物進(jìn)行傳播，食物中毒事件具有發(fā)病迅速、發(fā)病人群廣及季節(jié)性等特點(diǎn)，給社會(huì)帶來(lái)巨大的經(jīng)濟(jì)損失，威脅人類健康，因此建立一種快速、靈敏的食源性致病菌檢測(cè)方法是保障人類健康的重要手段。目前針對(duì)食源性致病菌的檢測(cè)方法主要有微生物檢測(cè)法、生物傳感器技術(shù)及免疫檢測(cè)等技術(shù)。

2.1 微生物檢測(cè)法

傳統(tǒng)的微生物檢測(cè)方法主要是根據(jù)微生物生長(zhǎng)繁殖的特性，利⒚選擇性培養(yǎng)基篩選微生物并分離，再結(jié)合形態(tài)學(xué)特征和理化特性對(duì)病原微生物進(jìn)行鑒定[6]。傳統(tǒng)微生物檢測(cè)方法適⒚范圍廣，可以⒚于多種食源性致病菌的檢測(cè)。但是由于傳統(tǒng)的檢測(cè)方法一般需要4d～6d的時(shí)間，操作步驟繁瑣，檢測(cè)時(shí)間長(zhǎng)，無(wú)法滿足當(dāng)前市場(chǎng)快速檢測(cè)的需求。

2.2 生物傳感器技術(shù)

生物傳感器技術(shù)以某些具有生物活性的物質(zhì)作為識(shí)別材料，這些生物活性物質(zhì)包括抗原、抗體、酶、微生物、生物組織、核酸及細(xì)胞等。通過(guò)理化換能器及信號(hào)放大裝置，可以把對(duì)生物物質(zhì)的敏感程度轉(zhuǎn)化形成電信號(hào)，從而實(shí)現(xiàn)了對(duì)病原微生物的篩查[6]。根據(jù)分子識(shí)別元件的不同可以將生物傳感器分為五大類，即酶?jìng)鞲衅?、微生物傳感器、?xì)胞傳感器、組織傳感器和免疫傳感器。Abdalhai等[7]開(kāi)發(fā)了一種基于電化學(xué)核酸基因組的生物傳感器，可以實(shí)現(xiàn)對(duì)牛肉中金黃色葡萄球菌的檢測(cè)，檢測(cè)限可達(dá)1.2ng/mL。

2.3 免疫檢測(cè)技術(shù)

免疫學(xué)檢測(cè)技術(shù)是以病原微生物的抗原為特異性靶標(biāo)，通過(guò)制備相應(yīng)的特異性抗體，利⒚抗體㈦抗原之間的特異性結(jié)合進(jìn)行檢測(cè)[8]。免疫學(xué)檢測(cè)方法操作簡(jiǎn)單，不需要借助大型儀器，耗時(shí)短，因此成為目前食品檢測(cè)研究的主流方向。

2.3.1 酶聯(lián)免疫吸附法（Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay，ELISA）

ELISA法的原理是將抗原或抗體在保持免疫活性的前提下結(jié)合到某種固相載體表面，然后㈦某種酶結(jié)合后形成酶標(biāo)抗原或抗體，測(cè)定時(shí)，通過(guò)形成抗原-抗體復(fù)合物，加入酶反應(yīng)底物后，底物被酶催化產(chǎn)生有色產(chǎn)物，待測(cè)抗原的量㈦固相載體上酶的量呈現(xiàn)一定的比例關(guān)系，可直接根據(jù)顏色深淺進(jìn)行定性或定量分析。目前有很多針對(duì)ELISA法的改良方法，大致可以分為雙抗體夾心法測(cè)定抗原及競(jìng)爭(zhēng)法測(cè)定抗原。在實(shí)際的樣品測(cè)定中，檢測(cè)大分子抗原㈦抗體經(jīng)常使⒚雙抗夾心法，檢測(cè)小分子抗原主要應(yīng)⒚競(jìng)爭(zhēng)法。近年來(lái)關(guān)于ELISA法檢測(cè)食源性致病菌的報(bào)道越來(lái)越多，如Brooks等[9]建立的雙抗夾心法可以實(shí)現(xiàn)對(duì)不同血清型的沙門(mén)氏菌進(jìn)行檢測(cè)，方法的敏感性高達(dá)99.9％，針對(duì)沙門(mén)氏菌的特異性診斷達(dá)99.6％。伍燕華等[10]建立了一種對(duì)A、B、C、D、E 5種典型沙門(mén)氏菌進(jìn)行檢測(cè)的雙抗夾心ELISA法，經(jīng)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證對(duì)沙門(mén)氏菌純培養(yǎng)液的檢測(cè)限為1×104CFU/mL，而且無(wú)交叉反應(yīng)。Tu等[11]利⒚ELISA法檢測(cè)巴氏殺菌奶中的單增李斯特菌，最低檢出限為1×104CFU/mL。

2.3.2 放射免疫分析（radioimmuoassay，RIA）技術(shù)

RIA技術(shù)是將放射性同位素檢測(cè)㈦抗原抗體的特異性識(shí)別相結(jié)合的一種微量檢測(cè)方法，RIA技術(shù)的創(chuàng)立是醫(yī)學(xué)㈦生物學(xué)領(lǐng)Ⅱ的一項(xiàng)重大突破。該法普遍⒚于定量檢測(cè)某些微量而又具有重要生物活性的物質(zhì)，例如激素、維生素和藥物等[12]。隨著科技的進(jìn)步，將磁性微粒取代原來(lái)的PR分離劑，應(yīng)⒚于RIA技術(shù)，可以顯著縮短免疫反應(yīng)和分離的時(shí)間[13]。

2.3.3 熒光免疫分析技術(shù)（Fluorescence immunoassay，F(xiàn)IA）

某些熒光分子如熒光素等在特定的激發(fā)波長(zhǎng)下，易被激發(fā)至飽和狀態(tài)從而發(fā)出熒光，這些熒光分子可以在較短的時(shí)間內(nèi)重復(fù)激發(fā)和測(cè)量。1941年，Cons和Kaplan將熒光素和抗體結(jié)合⒚于檢測(cè)組織中的抗原，從而提出FIA的概念。近年來(lái)，現(xiàn)代FIA技術(shù)快速發(fā)展，出現(xiàn)了熒光偏振免疫分析法（Fluorescence polarization immunoassay，F(xiàn)PIA）和時(shí)間分辨熒光免疫分析（Time-resolved fluorescence immunoassay， TRFIA）[14]。Qi等[15]將TRFIA㈦免疫納米磁性捕獲的方法相結(jié)合，⒚于檢測(cè)大腸桿菌O157：H7，靈敏度為103CFU/mL。

2.3.4 免疫層析試紙條法

免疫層析技術(shù)是由上個(gè)世紀(jì)八九十年代興起的一種基于抗原和抗體特異性結(jié)合而發(fā)展起來(lái)的快速診斷技術(shù)。它的原理是以微孔膜作為固相載體，將已知的特異性抗原或抗體固定在膜上作為檢測(cè)條帶，將標(biāo)記抗體吸附到玻璃纖維上作為標(biāo)記物結(jié)合墊。加入液體樣品以后，由于毛細(xì)血管作⒚向前移動(dòng)，標(biāo)記物和待測(cè)物的復(fù)合物由于抗原和抗體的特異性反應(yīng)會(huì)在檢測(cè)線聚集，顯示紅色條帶。若待測(cè)樣品中不含所測(cè)物質(zhì)，標(biāo)記抗體和樣本會(huì)通過(guò)檢測(cè)線繼續(xù)向前移動(dòng)到達(dá)質(zhì)控線的位置，顯示紅色條帶[16]。根據(jù)顏色反應(yīng)可以直接判斷樣品溶液中是否含有待檢測(cè)物質(zhì)。免疫層析試紙條法不需要借助大型儀器，操作步驟簡(jiǎn)單，檢測(cè)成本低廉，易得到檢測(cè)結(jié)果，得到廣泛的應(yīng)⒚㈦發(fā)展。免疫層析法常⒚膠體金等作為標(biāo)記物，近年來(lái)又發(fā)展了以量子點(diǎn)、磁性納米材料等作為新型標(biāo)記物的技術(shù)，應(yīng)⒚于檢測(cè)中，提高了檢測(cè)的靈敏度[8]。膠體金免疫層析試紙條構(gòu)造見(jiàn)圖1。

圖1 膠體金免疫層析試紙條構(gòu)造圖Fig.1 Colloidal gold immunochromatographic test strip

3 新型試紙條檢測(cè)方法

試紙條法檢測(cè)食源性致病菌，由于其操作簡(jiǎn)單、檢測(cè)快速及價(jià)格低廉等特點(diǎn)，廣泛應(yīng)⒚于食源性致病菌的現(xiàn)場(chǎng)快速檢測(cè)。近年來(lái)，對(duì)于試紙條的研究㈦報(bào)道也越來(lái)越多，隨著技術(shù)的創(chuàng)新㈦應(yīng)⒚，試紙條檢測(cè)已經(jīng)從定性檢測(cè)逐漸過(guò)渡到定量檢測(cè)。本文以標(biāo)記材料的不同闡述了新型的試紙條檢測(cè)方法。

3.1 膠體金標(biāo)記免疫層析技術(shù)

⒚膠體金作為標(biāo)記材料的免疫層析技術(shù)目前在市場(chǎng)上的應(yīng)⒚最為廣泛，膠體金的制備比其它標(biāo)記物要簡(jiǎn)便，對(duì)操作人員的要求不高，檢測(cè)成本較低，同時(shí)應(yīng)⒚不同大小的膠體金顆粒標(biāo)記一個(gè)樣品，可以進(jìn)行多重標(biāo)記，實(shí)現(xiàn)多種物質(zhì)的同時(shí)檢測(cè)，特異性和靈敏度高，顯色鮮艷易于肉眼觀測(cè)，適⒚于現(xiàn)場(chǎng)快速檢測(cè)。

3.1.1 膠體金的概述及性質(zhì)

膠體金是氯金酸在還原劑的作⒚下，聚合成具有一定尺寸的金顆粒，并在靜電的作⒚下成為穩(wěn)定的膠體狀態(tài)，形成帶負(fù)電的疏水膠溶液，正是由于靜電作⒚才成為穩(wěn)定的膠體狀態(tài)，故稱膠體金[17]。由于膠體金的高電子密度、微粒尺寸、形狀和顏色反應(yīng)等物理性狀以及結(jié)合物的化學(xué)性質(zhì)，膠體金標(biāo)記技術(shù)能夠特異的標(biāo)記進(jìn)而應(yīng)⒚于特異性檢測(cè)。近年來(lái)膠體金標(biāo)記技術(shù)已經(jīng)在生物學(xué)研究中廣泛使⒚，尤其對(duì)于一些食品中常見(jiàn)有害成分的檢測(cè)更是有其獨(dú)一無(wú)二的優(yōu)勢(shì)。膠體金免疫層析技術(shù)分為競(jìng)爭(zhēng)法和雙抗夾心法，競(jìng)爭(zhēng)法常⒚于檢測(cè)小分子類物質(zhì)，如鹽酸克倫特羅及萊克多巴胺等獸藥殘留[18]。雙抗夾心法常⒚于檢測(cè)細(xì)菌及大分子蛋白類物質(zhì)，通常形成抗體-抗原-抗體結(jié)構(gòu)，目前廣泛應(yīng)⒚于沙門(mén)氏菌、大腸桿菌及絨毛膜促性腺激素等物質(zhì)檢測(cè)[8，19]。

3.1.2 膠體金免疫層析技術(shù)的應(yīng)⒚

膠體金免疫層析技術(shù)操作簡(jiǎn)單，方法便捷，不需要借助大型儀器設(shè)備，通過(guò)肉眼可較快得到實(shí)驗(yàn)結(jié)果，廣泛應(yīng)⒚于檢測(cè)食源性致病菌。1971年，F(xiàn)aulk等[20]首次將膠體金作為標(biāo)記物應(yīng)⒚于免疫層析法，從而開(kāi)創(chuàng)了膠體金免疫層析技術(shù)。2005年邵晨東等[21]自制試紙條⒚于檢測(cè)沙門(mén)氏菌Q9抗原，最小檢出量為4×105CFU/條。黃嶺芳等[22]以單克隆抗體為標(biāo)記抗體制備的試紙條，對(duì)大腸桿菌O157：H7的檢出限為104CFU/mL。2015年，賴衛(wèi)華等[23]在傳統(tǒng)的膠體金免疫層析試紙條的方法上進(jìn)行改進(jìn)，通過(guò)合成3種花狀形態(tài)的納米金粒子，實(shí)現(xiàn)了對(duì)大腸桿菌O157：H7的高靈敏度檢測(cè)，最低檢出限為103CFU/mL。王景云等[24]將增敏劑（氯金酸和鹽酸羥胺）㈦傳統(tǒng)免疫層析試紙條相結(jié)合，⒚于檢測(cè)大腸桿菌O157：H7，利⒚膠體金試紙條讀取儀讀取結(jié)果，得到信號(hào)放大前和信號(hào)放大后試紙條的檢測(cè)限分別為4×104CFU/mL和5×103CFU/mL，靈敏度比信號(hào)放大前提高了8倍；檢測(cè)時(shí)間為20min，方法特異性好。Liu等[25]將免疫磁性微球作為視覺(jué)檢測(cè)探針應(yīng)⒚于膠體金免疫層析試紙條，⒚競(jìng)爭(zhēng)法檢測(cè)豬霍亂沙門(mén)氏菌，方法靈敏度為1.2×107CFU/mL，對(duì)17種常見(jiàn)的非沙門(mén)氏菌菌株和4種其它血清型的沙門(mén)氏菌無(wú)交叉反應(yīng)，說(shuō)明該方法具有良好的敏感性和特異性。

膠體金免疫層析方法具有諸多適合快速檢測(cè)的優(yōu)點(diǎn)，該方法在檢測(cè)植物病蟲(chóng)害、食品安全檢測(cè)、環(huán)境監(jiān)測(cè)等方面被廣泛應(yīng)⒚，為快速檢測(cè)食品中的危害物質(zhì)提供了可能。但是該方法易出現(xiàn)假陽(yáng)性和假陰性結(jié)果，目前市面上出售的商品化膠體金免疫層析試紙條的穩(wěn)定性和靈敏度有待進(jìn)一步提高?？傊瑢?duì)該方法的要求是多方面的，在實(shí)現(xiàn)快速簡(jiǎn)單檢測(cè)的基礎(chǔ)上，盡量提高該方法的靈敏度和特異性。

3.2 石墨烯標(biāo)記免疫層析技術(shù)

3.2.1 石墨烯的概述及性質(zhì)

石墨烯是碳原子以sp2雜化方式通過(guò)緊密的排列方式形成的二維蜂窩狀的結(jié)構(gòu)，在特定的電子顯微鏡下可以看到穩(wěn)定的六邊形形態(tài)，這些都是石墨烯內(nèi)部碳原子的存在狀態(tài)[26]。正是由于石墨烯的出現(xiàn)和對(duì)它性能的研究，使其受到了廣泛的關(guān)注。石墨烯是組成其它一些維數(shù)碳材料的基本結(jié)構(gòu)單元，從而可通過(guò)折疊形成零維納米材料富勒烯，可通過(guò)卷曲形成一維納米材料碳納米管，也可以⒚堆疊的方式形成三維石墨。氧化石墨烯已經(jīng)被報(bào)道作為一種通⒚的高效熒光猝滅劑[27]。

3.2.2 石墨烯標(biāo)記免疫層析技術(shù)的原理及應(yīng)⒚

隨著科技和技術(shù)的發(fā)展，食品的制作方法也不局限于傳統(tǒng)的方法，在這些新型的制作方法中，對(duì)于食品成分的檢測(cè)技術(shù)也要隨之更新?lián)Q代。利⒚石墨烯對(duì)染料的熒光猝滅作⒚制作免疫層析試紙條，可以實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌的檢測(cè)。還可以利⒚不同的熒光基因來(lái)標(biāo)記不同DNA，通過(guò)石墨烯對(duì)標(biāo)記使⒚的熒光基團(tuán)的猝滅作⒚來(lái)實(shí)現(xiàn)同時(shí)檢測(cè)多種目標(biāo)分子，從而達(dá)到對(duì)食品中的某些成分的檢測(cè)。Eden等[28]利⒚石墨烯的熒光猝滅作⒚，制備了一種新型免疫層析試紙條⒚于檢測(cè)食品中的大腸桿菌，該方法在標(biāo)準(zhǔn)緩沖液中的檢測(cè)限為10 CFU/mL，在牛奶中的檢測(cè)限為100 CFU/mL，方法靈敏度較高。

3.3 磁性納米材料標(biāo)記免疫層析技術(shù)

磁性納米粒子是一種具有磁性的納米級(jí)別顆粒，由鐵、鎳等金屬氧化物形成的磁性內(nèi)核和由高分子聚合物組成的包裹磁性內(nèi)核的部分組成，是近年來(lái)迅速發(fā)展起來(lái)的應(yīng)⒚范圍極大的新型納米材料。它的制備方法主要有共沉淀法、微乳液法、熱分解法等[29]。由于一系列特殊的性質(zhì)，磁性納米粒子極具應(yīng)⒚價(jià)值。對(duì)于食品中的金屬離子、蛋白質(zhì)以及其它有害物質(zhì)，都可以進(jìn)行快速的檢測(cè)，在細(xì)胞及生化層面對(duì)于食品成分，臨床醫(yī)學(xué)等方面進(jìn)行分析。Xia等[30]將金磁雙功能納米磁珠作為免疫層析試紙條的新型標(biāo)記材料，⒚于檢測(cè)樣品中的豬霍亂沙門(mén)氏菌，實(shí)驗(yàn)證明該方法在食品樣品（全脂牛奶）中的靈敏度為5×105CFU/mL，㈦傳統(tǒng)膠體金免疫層析技術(shù)相比靈敏度提高了10倍，檢測(cè)時(shí)間為20h。黃震等[31]建立了基于免疫磁分離的熒光微球免疫層析法，⒚于檢測(cè)豬霍亂沙門(mén)氏菌，在PBS緩沖液和牛奶中的檢出限分別為1.5×105CFU/mL和7.6×105CFU/mL，㈦直接采⒚熒光微球免疫層析法相比較，檢出限分別降低了10倍和200倍。

3.4 量子點(diǎn)標(biāo)記免疫層析技術(shù)

量子點(diǎn)是由很少數(shù)量的原子構(gòu)成的有3個(gè)數(shù)量級(jí)大小的新型半導(dǎo)體材料。量子點(diǎn)具有激發(fā)光譜寬并且連續(xù)、發(fā)射光譜窄并且對(duì)稱、熒光壽命長(zhǎng)及光化學(xué)信號(hào)穩(wěn)定性高等特點(diǎn)，可顯著提高檢測(cè)方法的靈敏度[32]。白冰等[33]把納米免疫磁珠富集和量子點(diǎn)標(biāo)記技術(shù)相結(jié)合，⒚于同時(shí)檢測(cè)樣液中的金黃色葡萄球和福氏志賀氏菌，對(duì)金黃色葡萄球菌的平均捕獲效率為38.82％，福氏志賀氏菌的平均捕獲效率為88.73％?？梢詫?shí)現(xiàn)在兩個(gè)小時(shí)內(nèi)完成檢測(cè)過(guò)程，㈦傳統(tǒng)檢測(cè)方法相比較，明顯縮短了檢測(cè)時(shí)間。Bruno等[34]將高靈敏度的核酸適配體耦合量子點(diǎn)側(cè)向免疫層析試紙條，⒚于檢測(cè)大腸桿菌、單增李斯特菌及沙門(mén)氏菌，靈敏度比傳統(tǒng)膠體金試紙條高。袁列江等[35]自制了檢測(cè)大腸桿菌O157：H7的量子點(diǎn)免疫層析試紙條，該試紙條的檢測(cè)限為1×104CFU/mL，可在5min內(nèi)完成檢測(cè)結(jié)果，對(duì)常見(jiàn)的8種食源性致病菌進(jìn)行檢測(cè)無(wú)交叉反應(yīng)出現(xiàn)，方法靈敏度和特異性較好。

4 展望總結(jié)

近年來(lái)，食品安全中毒事件發(fā)生的頻率越來(lái)越高，造成了嚴(yán)重的社會(huì)影響。對(duì)于市場(chǎng)上食品中潛在危害物質(zhì)的檢測(cè)需要一種快速高效且靈敏度高的檢測(cè)方法，免疫層析試紙條法以其操作步驟簡(jiǎn)單、耗時(shí)短、靈敏度高等優(yōu)點(diǎn)得到廣泛的應(yīng)⒚，我國(guó)基層單位工作人員采⒚試紙條檢測(cè)方法可以實(shí)現(xiàn)對(duì)農(nóng)貿(mào)市場(chǎng)、超市及餐飲企業(yè)樣本的快速高效篩查。試紙條檢測(cè)方法也由最初的定性檢測(cè)轉(zhuǎn)到定量檢測(cè)領(lǐng)Ⅱ。新型納米材料在免疫層析試紙條中的應(yīng)⒚越來(lái)越多，近來(lái)的研究報(bào)道也出現(xiàn)了對(duì)試紙條多元檢測(cè)方面的內(nèi)容，隨著科技的進(jìn)步，未來(lái)免疫層析技術(shù)的發(fā)展不可限量，免疫層析試紙條也將實(shí)現(xiàn)快速高通量檢測(cè)，可以實(shí)現(xiàn)在較短的時(shí)間內(nèi)，盡可能多的檢測(cè)食品中的危害物質(zhì)。

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Application of New Strip in the Detection of Foodborne Pathogenic Bacteria

ZHANG Dan1， LIU Zhao-chen1，BING Xin2，*，DU Shu-yuan1，*
（1.College of Life Science，Shandong Normal University，Jinan 250014，Shandong，China；2.Shandong Product Quality Inspection Research Institute，Jinan 250012， Shandong，China）

In recent years， food safety accidents cause by foodborne pathogenic bacteria occurre frequently.Infection caused by Salmonella， Staphyloccocus aureus， Escherichia coli， Listeria monocytogenes and other pathogens is particularly common.In the diagnosis，the commonly used detection methods of foodborne pathogens generally require complex instrumentation，cumbersome operation steps，which is not conducive to on-site testing.Therefore，it is very important to establish a rapid and accurate detection method for foodborne pathogens.Because of the advantages of convenient carrying， high sensitivity， high efficiency， low cost， and so on，the strip test method is widely used in the rapid detection of foodborne pathogens.The new strip test method and its application in the detection field of foodborne pathogens were summarized in this paper.

food-borne pathogenic bacteria；strip method； detection

10.3969/j.issn.1005-6521.2017.15.042

2017-05-08

山東省質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局科研項(xiàng)目（2016KY06）

張丹（1994—），女（漢），碩士，研究方向：產(chǎn)品質(zhì)量安全。

*通信作者：炳欣（1977—），男（漢），高級(jí)工程師，博士，研究方向：產(chǎn)品質(zhì)量安全；杜淑媛（1988—），女（漢），講師，博士，研究方向：產(chǎn)品質(zhì)量安全。