黔東南地區(qū)健康成人HbA2和HbF參考范圍調(diào)查

李顯航，付善書，黃革

(黔東南州人民醫(yī)院檢驗科，貴州凱里556000)

黔東南地區(qū)健康成人HbA2和HbF參考范圍調(diào)查

李顯航，付善書，黃革

(黔東南州人民醫(yī)院檢驗科，貴州凱里556000)

目的建立黔東南地區(qū)健康成人HbA2和HbF參考范圍。方法采用Capillarys2毛細管電泳儀檢測6570例健康成人Hb，以x±1.96S建立HbA2參考范圍，以第95百分位點的值建立HbF參考范圍上限。結果HbA2參考范圍分別是男性：2.4%～3.2%、女性2.3%～3.1%，男女組間比較差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.01）；HbF參考范圍分別是男性：＜1.1%，女性：＜1.3%，男女組間比較差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.01）。101例驗證標本符合率為92.07%（93/101）。結論本研究所建立的參考范圍適用于黔東南地區(qū)大部分健康成人，對臨床診斷地貧有一定的參考價值。

HbA2；HbA；健康成人；參考范圍；黔東南

地中海貧血（thalassemia，以下簡稱“地貧”），又叫做海洋性貧血，是一種遺傳性溶血性疾病，主要分為α-地貧和β-地貧。在我國長江以南各省地貧基因攜帶率與發(fā)病率較高，多見于廣西、廣東、福建、海南、云南、貴州、四川等地區(qū)[1，2]。至今對于地貧治療尚無有效的方法，孕前篩查、風險夫婦的診斷及產(chǎn)前診斷的實施是目前控制地貧發(fā)生最為有效的措施，只要重視地中海貧血的產(chǎn)前篩查及產(chǎn)前診斷，可以大大減少重度地中海貧血患兒的出生[3-6]。地貧篩查較為理想的檢測方法通常是血紅蛋白（Hb）電泳[7]。由于地域、人群、檢測系統(tǒng)的原因，各地區(qū)建立的血紅蛋白組份的參考范圍有所不同。作者對法國Sebia公司生產(chǎn)的Capillarys2毛細管電泳儀檢測得到HbA2與HbF進行了分析，用于建立適合本地區(qū)人群的血紅蛋白電泳參考范圍。

1 材料與方法

1.1 一般資料從2014年至2016年在我院進行血常規(guī)與血紅蛋白電泳檢測的人群中選取血常規(guī)正常并且籍貫為黔東南州的檢測對象6570例做為調(diào)查組，其中男性3143例、女性3427例，年齡15～52歲，年齡中位數(shù)為28歲。調(diào)查組中用于HbA2分析的有5580例（男性2757例、女性2823例）；用于HbF分析的有990例（男性386例，女性604例）。另重新選取同時進行血紅蛋白電泳和地貧基因檢測的101例作為驗證組，對參考范圍進行驗證。

1.2 儀器與試劑本次研究采用法國Sebia公司生產(chǎn)的Capillarys2毛細管電泳儀及其原裝配套試劑對血紅蛋白進行檢測。每次實驗前用原裝配套室內(nèi)質控品對儀器進行背景定位與質控檢測，結果均在儀器要求范圍內(nèi)。檢測過程按照標準操作規(guī)程（SOP）進行。

1.3 試驗方法在檢測對象知情同意的情況下，采用EDTA-K2抗凝真空管采集檢測對象空腹靜脈血3ml兩管，充分混勻抗凝，并在48h內(nèi)完成血紅蛋白電泳檢測。

1.4 統(tǒng)計分析采用SPSS 18.0軟件進行結果統(tǒng)計分析。計數(shù)資料采用百分比統(tǒng)計；計量資料采用均值±標準差（x±s）表示；兩組數(shù)據(jù)間比較采用兩獨立樣本的t檢驗和兩獨立樣本的K-S檢驗，P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義；以95%血常規(guī)正常者的檢測結果計算HbA2參考范圍，即x±1.96S；取第95百分位點的值為HbF參考范圍上限。

表1 不同性別調(diào)查者HbA2參考范圍

2 結果

2.1 正態(tài)性檢驗顯示調(diào)查組HbA2結果近似正態(tài)分布，統(tǒng)計采用兩獨立樣本t檢驗，不同性別參考范圍分組比較結果見表1。調(diào)查組HbF結果為非正態(tài)分布，不同性別數(shù)據(jù)比較采用兩獨立樣本的K-S檢驗，不同性別參考范圍分組比較結果見表2。

2.2 選取101例標本對新參考范圍進行驗證，結果見表3。在101例標本中，使用新參考值驗證結果符合的標本共計93例，符合率為92.07%（93/ 101）。驗證不符合的共計8例，其中電泳結果正常但基因檢測結果異常的有6例，主要為靜止型α-地貧，本文未對基因型結果單個列舉。

表2 不同性別調(diào)查者HbF參考上限

表3 101例標本驗證結果

3 討論

目前對于地中海貧血的篩查方式有很多，但各有優(yōu)缺點。全自動毛細管電泳儀不僅能夠準確的測定地中海貧血和異常血紅蛋白，還能分離、定量Hb A2、Hb E、Hb F、HbH、Hb Bart's，這些都為臨床上診斷地中海貧血和異常血紅蛋白提供了重要的依據(jù)[8]。但是由于參考范圍除了存在實驗室的操作背景間的差異，而且也存在年齡、性別、民族和地域差異[9]。因此不同地區(qū)的實驗室應根據(jù)實際情況制定切合本地區(qū)的參考范圍。至今黔東南地區(qū)尚無毛細管電泳法檢測血紅蛋白HbA2與HbF的參考范圍，作者就本實驗室檢測得到的數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計分析建立了本地區(qū)HbA2與HbF的參考范圍，為黔東南地區(qū)血紅蛋白毛細管電泳篩查地貧提供相應的實驗室判斷依據(jù)。本研究結果顯示HbA2與HbF水平存在性別差異，HbA2的研究結果與李友瓊等人[10]的研究結果一致，但參考范圍略有不同，同時HbA2、HbF的參考范圍也有別于廣東深圳地區(qū)[11]。說明不同地區(qū)HbA2與HbF的參考范圍存在一定差異，所以建立適合本地區(qū)實際情況的參考范圍十分有必要。

在101例驗證標本中有92.07%（93/101）受檢對象符合本研究建立的參考范圍。8例不符合該范圍的標本中，有6例為毛細管電泳檢測正常、基因檢測異常；2例為毛細管電泳檢測異常、基因檢測正常。基因檢測異常的標本主要為靜止型α-地貧，說明該參考范圍對靜止型α-地貧還是存在一定的漏篩。由于驗證組樣本量不夠大，所以出現(xiàn)電泳異常、基因正常的標本例數(shù)過少，對其分析不具有研究意義。不過即便存在一定的漏篩，本研究所建立的參考范圍對黔東南地區(qū)大部分地貧基因攜帶者的篩查依舊適用，對臨床診斷地貧有一定的參考價值。

[1]徐湘民.地中海貧血預防控制操作指南[M].北京：人民軍醫(yī)出版社，2011：15-20.

[2]Zheng CG，Liu M，Du J，et al.Molecular spectrum of α-and βglobin gene mutations detected in the population of Guangxi ZhuangAutonomousRegion，People’sRepublicofChina[J]. Hemoglobin，2011，35(1)：28-39.

[3]沈寅琛.南寧地區(qū)14768例優(yōu)生與遺傳咨詢者的分析[J].中國優(yōu)生與遺傳雜志，2009，17(1)：120-124.

[4]朱慧明.24743例婚檢人群地中海貧血篩查情況分析[J].中國婦幼保健，2011，26(23)：3598-3599.

[5]周艷潔，謝丹尼.地中海貧血防治進展[J].中國計劃生育學雜志，2015，32(10)：709-713.

[6]游雪云，劉艷秋，吳敏.毛細管電泳在β地中海貧血中的應用研究[J].實驗與檢驗醫(yī)學，2014，32(5)：517-519.

[7]李友瓊，覃桂芳，陽文輝，等.毛細管電泳與血紅蛋白分析儀在血紅蛋白病檢測中的比較[J].臨床檢驗雜志，2012，30(11)：887-889.

[8]黃勁柏，吳志群，蘇明珍，等.全自動毛細管電泳儀在HbE病檢測中的應用評價[J].實驗與檢驗醫(yī)學，2015，33(1)：31-33.

[9]Adibi P，F(xiàn)aghih Imani E，Talaei M，et al.Population-based platelet reference values for an Iranian population[J].Int Lab Hem，2007，29(3)：195-199.

[10]李友瓊，勞忠嬋，覃桂芳，等.南寧地區(qū)健康成人HbA2和HbA參考范圍調(diào)查[J].國際檢驗醫(yī)學雜志，2012，33(17)：2083-2084.

[11]霍梅，吳文苑，劉妹，等.中國深圳地區(qū)孕婦毛細管血紅蛋白電泳篩查地中海貧血截斷值的探討[J].中國實驗血液學雜志，2016，24(2)：536-539.

R556.6+1，R446.11+1

A

1674-1129(2017)04-0616-02

10.3969/j.issn.1674-1129.2017.04.058

2017-02-23；

2017-05-31)

付善書