景德鎮(zhèn)地區(qū)婦女人乳頭狀瘤病毒感染與宮頸上皮病變關(guān)系的分析

劉小文，虞敏，歐陽冬英，祝笑秋，陳青霞，鄭毅明

(1、景德鎮(zhèn)市婦幼保健院檢驗(yàn)科，江西景德鎮(zhèn)333000；2、景德鎮(zhèn)市疾病預(yù)防控制中心，江西景德鎮(zhèn)333000；3、景德鎮(zhèn)市衛(wèi)生學(xué)校，江西景德鎮(zhèn)333000；4、景德鎮(zhèn)市婦幼保健院病理科，江西景德鎮(zhèn)333000)

景德鎮(zhèn)地區(qū)婦女人乳頭狀瘤病毒感染與宮頸上皮病變關(guān)系的分析

劉小文1，虞敏1，歐陽冬英2，祝笑秋3，陳青霞1，鄭毅明4

(1、景德鎮(zhèn)市婦幼保健院檢驗(yàn)科，江西景德鎮(zhèn)333000；2、景德鎮(zhèn)市疾病預(yù)防控制中心，江西景德鎮(zhèn)333000；3、景德鎮(zhèn)市衛(wèi)生學(xué)校，江西景德鎮(zhèn)333000；4、景德鎮(zhèn)市婦幼保健院病理科，江西景德鎮(zhèn)333000)

目的通過對(duì)景德鎮(zhèn)地區(qū)婦女生殖道人乳頭狀瘤病毒（Human papillomavirus，HPV）感染的狀況分析，探討其高危型HPV感染與人宮頸上皮病變的相關(guān)性，為本地區(qū)婦女HPV感染與宮頸癌的發(fā)病關(guān)系及其防治提供相關(guān)依據(jù)。方法利用導(dǎo)流雜交基因芯片技術(shù)對(duì)本地區(qū)5605例婦女的宮頸上皮細(xì)胞行HPV基因分型，并同時(shí)對(duì)高危型HPV感染陽性患者行TCT細(xì)胞學(xué)或陰道鏡下活檢組織學(xué)確診。結(jié)果人群高危型HPV陽性檢出率為15.5%，15個(gè)亞型均有檢出，排前五的亞型依次為HPV52、HPV16、HPV58、HPV53、HPV39，分布比例分別是20.70%、18.20%、12.40%、9.30%和7.70%；其陽性檢出率有隨宮頸上皮病變（CIN）程度加重而呈增高趨勢(shì)，由正常組織～CINⅢ+宮頸癌的陽性率分別為10.98%、51.69%、90.36%和100%，組間比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。結(jié)論當(dāng)?shù)嘏訦PV感染狀況的調(diào)查必將有助于臨床開展宮頸癌的篩查，也為以后有針對(duì)性的使用HPV預(yù)防和治療性的疫苗提供參考依據(jù)。

人乳頭狀瘤病毒；基因分型；宮頸上皮病變

婦女生殖道人乳頭狀瘤病毒（Human papillomavirus，HPV）感染是宮頸癌和癌前病變的主要原因，中外文獻(xiàn)資料均顯示，持續(xù)的高危型HPV感染更是子宮頸癌的高風(fēng)險(xiǎn)因素[1-4]。隨著分子生物學(xué)技術(shù)的不斷改進(jìn)與研究，HPV基因分型檢測(cè)已成為宮頸癌臨床篩查和防治的重要標(biāo)志物。本文采用導(dǎo)流雜交基因芯片技術(shù)檢測(cè)HPV亞型，通過分析本地區(qū)婦女高危型HPV感染狀況與其宮頸上皮細(xì)胞發(fā)生病變的關(guān)系，為本地區(qū)宮頸癌的防治提供相關(guān)線索和依據(jù)，結(jié)果報(bào)告如下。

1 材料與方法

1.1 研究對(duì)象景德鎮(zhèn)市及周邊地區(qū)2014年3月至10月來我院婦科就診的女性病人共5605例，年齡17～78歲。

1.2 標(biāo)本采集由婦科醫(yī)生采用專用宮頸刷取得含有宮頸上皮細(xì)胞的標(biāo)本置于裝有細(xì)胞保存液的專用管中送檢。

1.3 儀器與試劑TC-48/H基因擴(kuò)增儀（博日），HHM-2型凱普醫(yī)用核酸分子快速雜交儀和HPV基因分型檢測(cè)試劑盒均由潮洲凱普生物化學(xué)有限公司提供。

1.4 檢測(cè)方法

1.4.1 21型HPV基因分型嚴(yán)格按照試劑說明書操作，設(shè)置陰陽對(duì)照、先提取送檢標(biāo)本的HPVDNA，經(jīng)過PCR擴(kuò)增后，再采用導(dǎo)流雜交基因芯片技術(shù)進(jìn)行HPV基因分型，結(jié)果以膜條上出現(xiàn)清晰可見的藍(lán)紫色圓點(diǎn)判為陽性，不同位點(diǎn)代表不同亞型。21型包括16、18、31、33、35、39、45、51、52、53、56、58、59、66、68等15種高危型和6，11，42，43，44，CP8304等6種低危型，本文主要針對(duì)15種高危型進(jìn)行分析。

1.4.2 HPV高危型陽性感染患者同時(shí)用TCT細(xì)胞學(xué)或陰道鏡下活檢組織學(xué)行病理確診。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理數(shù)據(jù)輸入SPSS軟件數(shù)據(jù)庫，用SPSS 21.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，陽性感染率比較采用Pearson's卡方統(tǒng)計(jì)量進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 869例高危型HPV陽性患者基因型分布情況5605例行宮頸癌篩查的婦女中高危型HPV陽性檢出例數(shù)共869例，感染率為15.50%。在869例高危型HPV陽性患者中，15個(gè)亞型均有檢出，分布比例排前五的亞型依次為HPV52、HPV16、HPV58、HPV53、HPV39，分別是20.70%、18.20%、12.40%、9.30%和7.70%，結(jié)果見表1。

2.2 HPV分布構(gòu)成比病理結(jié)果為CINⅠ的患者高危型HPV感染主要見于HPV52（23.2%）、HPV16（21.3%）、HPV58（11.8%）、HPV18（8.5%）、HPV53（8.1%）；CINⅡ患者的高危型HPV感染主要見于HPV16（30.0%）、HPV52（19.1%）、HPV58（15.5%）、HPV51（6.4%）、HPV18（5.5%）；CINⅢ+宮頸癌患者的高危型HPV感染則主要見于HPV16（33.0%）、HPV58（13.6）、HPV18（12.6%）、HPV52（10.7%）、HPV39（6.8%）。結(jié)果見表2、3、4。

表1 869例高危型HPV陽性患者基因型分布情況

表2 CINⅠ患者的高危型HPV分布構(gòu)成比（%）

表3 CINⅡ患者的高危型HPV分布構(gòu)成比（%）

表4 CINⅢ+宮頸癌患者的高危型HPV分布構(gòu)成比（%）

2.3 四種高危HPV亞型在不同宮頸病變組織中的分布比較選取在CINⅠ、CINⅡ和CINⅢ+宮頸癌三組患者中均占有較高比例的HPV16、HPV18、 HPV52和HPV58四種高危型HPV進(jìn)行比較，發(fā)現(xiàn)容易感染的亞型還是HPV16和HPV52型，特別是隨著組織學(xué)病變程度越嚴(yán)重，HPV16型的感染率見長(zhǎng)，分別是21.3%、30.0%和33.0%（圖1）。分析四種高危HPV亞型在不同宮頸病變組織中的分布，HPV16在CINⅠ～CINⅢ+宮頸癌的宮頸病變組織中占26.41%，HPV52占19.10%，HPV58占13.21%，HPV18占8.73%，各組之間比較，差異有顯著性統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05，見表5）。在CINⅡ+的各組病變中，HPV16占31.45%（67/213），HPV52占15.02%（32/213），HPV58占14.55%（31/213），HPV18占8.92%（19/213）。據(jù)表5，HPV16較HPV585218等亞型致CINⅡ+的發(fā)生率明顯增高，經(jīng)比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2值依次為16.12、17.18、33.57，均P＜0.001）；其它亞型之間相比，致CINⅡ以上病變的發(fā)生率差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。

2.4 不同類型宮頸上皮病變患者的高危型HPV感染情況比較分析不同類型宮頸上皮病變患者感染高危型HPV的陽性率隨著組織學(xué)改變的程度加重而逐漸升高，由正常組織～CINⅢ+宮頸癌的陽性率分別為10.98%、51.69%、90.36%和100%，組間比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05，見表6）。

圖1 HPV四種亞型在CINⅠ、Ⅱ、Ⅲ及宮頸癌患者的陽性感染狀況

表5 四種高危HPV亞型在不同宮頸病變組織中的分布比較[n（%）]

表6 不同類型宮頸上皮病變患者的高危型HPV感染情況比較分析

3 討論

HPV是一類廣泛分布于人和動(dòng)物的無包膜小型DNA病毒，通過直接或間接接觸而傳播擴(kuò)散，人是唯一宿主。HPV具有嗜上皮性，感染后可引起人類黏膜組織良性增生及惡性腫瘤，1989年證實(shí)宮頸癌與HPV感染有直接關(guān)系。我們進(jìn)行HPV基因分型檢測(cè)目的之一是用于流行病學(xué)研究，了解地理分布人群的感染率以及各種型別的分布情況。本研究采用導(dǎo)流雜交基因芯片技術(shù)對(duì)景德鎮(zhèn)地區(qū)的婦女宮頸上皮細(xì)胞進(jìn)行HPV 15種高危型別的基因分型，陽性感染率15.50%，15個(gè)亞型均有檢出，主要的幾個(gè)亞型依次為HPV52（20.70%）、HPV16（18.20%）、HPV58（12.40%）、HPV53（9.30%）、HPV39（7.70%）、HPV51（6.60%）、HPV18（6.10%），這與廣西地區(qū)和本省萍鄉(xiāng)地區(qū)所做的研究略有差異，感染率低于他們，但亞型分布主要還是以HPV16、58、52為主[5，6]。這說明不同地區(qū)之間的HPV感染還是存在人群感染率與型別分布差異。

我們行HPV基因分型檢測(cè)目的之二是用于臨床宮頸癌篩查與治療監(jiān)測(cè)。2012年美國(guó)陰道鏡檢查與宮頸病理學(xué)會(huì)(ASCCP)指南明確高危型HPV檢測(cè)用于宮頸癌篩查，目的是發(fā)現(xiàn)CINⅡ+的高風(fēng)險(xiǎn)人群。本研究顯示，在CINⅡ+的各組病變中，HPV16、HPV52、HPV58和HPV18分別占31.45%、 15.02%、14.55%和8.92%。尤其HPV16較HPV585218等亞型致CINⅡ+病變的發(fā)生率明顯增高（P＜0.001），而其它亞型之間相比差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。本研究還表明，高危型HPV的陽性率隨著組織學(xué)改變的程度加重而逐漸升高，由正常組織～CINⅢ+宮頸癌的陽性率分別為10.98%、51.69%、90.36%和100%（P＜0.05）。有文獻(xiàn)指出，HPV檢測(cè)CINⅢ和宮頸浸潤(rùn)癌以及總體檢出率顯著高于TCT[7]，這進(jìn)一步證實(shí)歐洲和北美地區(qū)開展的大樣本人群分析結(jié)果，HPV DNA檢測(cè)用于宮頸病變篩查時(shí)，對(duì)于CINⅡ+以上病變的敏感性高達(dá)96%，而宮頸細(xì)胞學(xué)的敏感性僅為53%[8]。

總之，本組研究揭示了景德鎮(zhèn)地區(qū)女性宮頸常見的HPV感染亞型以及在不同宮頸疾病中HPV感染的特點(diǎn)，這對(duì)當(dāng)?shù)嘏訦PV感染狀況的調(diào)查必將有助于臨床開展宮頸癌的篩查，也為以后有針對(duì)性的使用HPV預(yù)防和治療性的疫苗提供參考資料和依據(jù)。

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R711.32，R446.62

A

1674-1129(2017)04-0606-04

10.3969/j.issn.1674-1129.2017.04.055

2016-11-28；

2017-06-15)