2890例孕前檢查婦女血清梅毒抗體的檢測在臨床運(yùn)用的比較分析

溫美，彭萍，文躍輝

(1、萍鄉(xiāng)市湘東區(qū)婦幼保健院檢驗(yàn)科，江西萍鄉(xiāng)337000；2、萍鄉(xiāng)市中醫(yī)院，江西萍鄉(xiāng)337000)

2890例孕前檢查婦女血清梅毒抗體的檢測在臨床運(yùn)用的比較分析

溫美1，彭萍1，文躍輝2

(1、萍鄉(xiāng)市湘東區(qū)婦幼保健院檢驗(yàn)科，江西萍鄉(xiāng)337000；2、萍鄉(xiāng)市中醫(yī)院，江西萍鄉(xiāng)337000)

目的孕前檢查的患者進(jìn)行梅毒患者檢測酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)（TP-ELISA）與甲苯胺紅不加熱實(shí)驗(yàn)（TRUST）檢測的結(jié)果進(jìn)行分析及臨床評價(jià)。方法對2890例標(biāo)本采用TRUST和TP-ELISA同步聯(lián)合檢測血清中的梅毒抗體，并用TPPA確認(rèn)實(shí)驗(yàn)對實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行分析。結(jié)果2890例標(biāo)本TP-ELISA與TRUST檢測，共檢測出陽性213例，TRUST陽性130例，TPELISA陽性184例，兩者均陽性為101例，TRUST陽性、TP-ELISA陰性29例，TRUST陰性、TP-ELISA陽性83例，兩者差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。采用TRUST和TP-ELISA分別檢測TPPA（密螺旋體顆粒凝集實(shí)驗(yàn)）確認(rèn)為150例陽性、150例陰性標(biāo)本，靈敏度分別為87.3%、90.6%，特異度分別為95.3%、97.3%。結(jié)論TP-ELISA法適用于梅毒篩查試驗(yàn)，大批量檢測血清梅毒抗體；TRUST法可作為病程觀察和療效判斷的指標(biāo)，因此用TP-ELISA結(jié)合TRUST同步聯(lián)合檢測血清梅毒抗體可以做到早發(fā)現(xiàn)、早診斷、早治療，從而能更好地控制梅毒的傳播。

梅毒；TRUST；TP-ELISA；TPPA

梅毒是一種由梅毒螺旋體引起的、主要經(jīng)性傳播的一種慢性病，人類是TP的唯一宿主[1，2]。梅毒的臨床表現(xiàn)存多樣性，其血液損害是其主要病理特征。梅毒的危害性極大，可導(dǎo)致多系統(tǒng)病變從而出現(xiàn)不可逆行損害，如神經(jīng)梅毒、心血管梅毒等；亦可經(jīng)胎盤傳播造成胎兒的感染，將出現(xiàn)畸形、早產(chǎn)，甚至死胎[3，4]。主要通過性傳播、危害較大，目前在我國發(fā)病率呈上升趨勢[5]，因此，應(yīng)及時(shí)早期進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室診斷并治療，對控制梅毒的傳播具有非常重要意義。目前大多數(shù)醫(yī)院檢測梅毒常用的方法為梅毒甲苯胺紅不加熱血清試驗(yàn)（TRUST）、梅毒螺旋體抗體酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（TP-ELISA），現(xiàn)將這兩種方法進(jìn)行比較。

1 材料與方法

1.1 標(biāo)本2890份血清標(biāo)本為2010年1月至2015年12月首次來萍鄉(xiāng)市湘東區(qū)婦保院婦科門診及住院就診的疑似梅毒患者及孕前體檢者。年齡16～60歲，平均30歲。

1.2 儀器與試劑360-酶標(biāo)儀、36W-360洗板機(jī)、微量震蕩儀、梅毒螺旋體抗體（Anti-TP）試劑均為上?？迫A生物技術(shù)有限公司產(chǎn)品，TRUST試劑由上海榮盛生物藥業(yè)有限公司提供，所有試劑均在有效期內(nèi)使用。

1.3 檢測方法所有實(shí)驗(yàn)均嚴(yán)格按照廠家試劑說明書進(jìn)行操作，每次實(shí)驗(yàn)均設(shè)陰陽性對照。

1.3.1 TRUST實(shí)驗(yàn)⑴分別加入50μl梅毒陽性和陰性對照均勻鋪在紙片卡2個(gè)圓圈中。⑵吸取待檢血清50μl（不需滅活）置于紙片卡的另一圓圈中。⑶用配套專用滴管或針頭垂直分別滴加TRUST試劑1滴于血清中。⑷按100r/min搖動8min，肉眼觀察結(jié)果。陽性結(jié)果再將待檢血清標(biāo)本用生理鹽水做倍比稀釋，然后按上述方法進(jìn)行稀釋試驗(yàn)，以呈現(xiàn)明顯凝集反應(yīng)的最高稀釋度作為該標(biāo)本的凝集效價(jià)。

1.3.2 梅毒螺旋體抗體（Anti-TP）實(shí)驗(yàn)是雙抗原夾心ELISA方法，用于檢測血清或血漿樣本中的梅毒螺旋體抗體；屬于梅毒螺旋體抗原實(shí)驗(yàn)，其原理是根據(jù)梅毒螺旋體破壞人體組織過程中在體內(nèi)釋放出一種抗原性心磷脂，能刺激機(jī)體產(chǎn)生反應(yīng)素，該反應(yīng)素與從牛心中提取的心磷脂在體外可發(fā)生抗原-抗體反應(yīng)。

1.3.3 TPPA是將特異性梅毒螺旋體抗原包被在明膠顆粒上，制備成致敏顆粒，該顆粒與血清中梅毒螺旋體特異性抗體結(jié)合后出現(xiàn)肉眼可見的凝集，根據(jù)凝集實(shí)驗(yàn)判斷陰陽性。

1.3.4 原始資料表經(jīng)過完整性、一致性和準(zhǔn)確性審核無誤后進(jìn)行數(shù)據(jù)錄入，應(yīng)用SPSS 20.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。計(jì)數(shù)資料用率表示，率的比較用χ2檢驗(yàn)以檢驗(yàn)水準(zhǔn)α=0.05，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 TP-ELISA法和TRUST法結(jié)果使用χ檢驗(yàn)對TP-ELISA法、TRUST法檢測2890例結(jié)果進(jìn)行分析，可得出TP-ELISA方法陽性檢出率明顯高于TRUST方法，結(jié)果見表1。

表1 2890例TP-ELISA法與TRUST法檢測結(jié)果比較

2.2 TRUST檢測TPPA確認(rèn)結(jié)果150例陽性標(biāo)本、150例陰性標(biāo)本，共300例標(biāo)本結(jié)果見表2。

表2 TRUST檢測TPPA確認(rèn)為150例陰性、150例陽性標(biāo)本結(jié)果

2.3 TP-ELISA檢測TPPA確認(rèn)結(jié)果150例陽性標(biāo)本、150例陰性標(biāo)本，共300例標(biāo)本結(jié)果如見表3。

表3 TP-ELISA檢測TPPA確認(rèn)為150例陰性、150例陽性標(biāo)本結(jié)果

2.4 TRUST、TP-ELISA實(shí)驗(yàn)靈敏度、特異度、漏診率、誤診率等真實(shí)值指標(biāo)結(jié)果見表4。

表4 TRUST、TP-ELISA實(shí)驗(yàn)真實(shí)性分析（%）

3 討論

梅毒是一類由梅毒螺旋體感染所致的，主要通過性傳播的，臨床表現(xiàn)復(fù)雜，病程長危害大的疾病，嚴(yán)重的會影響全身組織和器官。[6]TRUST實(shí)驗(yàn)室用正常牛心肌的心磷脂作為抗原，而不是用螺旋體作為抗原，來測定病人血清中的抗體；此實(shí)驗(yàn)的抗原不具有特異性，是利用交叉反應(yīng)檢測TP抗體，因此具有很高的假陽性率及誤診率。TP-ELISA實(shí)驗(yàn)是利用包被TP特異性抗原及酶標(biāo)記的TP抗原檢測血清中是否存在TP抗體；此實(shí)驗(yàn)具有很好的特異度和靈敏度，但是操作步驟多，操作過程中容易干擾實(shí)驗(yàn)結(jié)果。TPPA確認(rèn)實(shí)驗(yàn)是利用凝集反應(yīng)檢測TP抗體，利用抗原抗體反應(yīng)，操作步驟簡單，結(jié)果特異度和靈敏度均較高。

從以上的實(shí)驗(yàn)結(jié)果可以看出TRUST實(shí)驗(yàn)的特異度和靈敏度均低于TP-ELISA實(shí)驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)的穩(wěn)定性也較差，與李秀年、游曉敏等研究結(jié)果相似[7-9]；TRUST敏感度與特異性都有一定的局限性，梅毒患者經(jīng)治療后效果顯著時(shí)，TRUST的滴度會下降，甚至轉(zhuǎn)陰消失，TRUST法適用于療效觀察、梅毒復(fù)發(fā)和再感染的診斷，有助于判斷梅毒復(fù)發(fā)及再感染[10，11]。TP-ELISA實(shí)驗(yàn)因?yàn)槭抢肨P特異性抗原，特異度和靈敏度均較好[12]，但是由于是IgG抗體即使患者經(jīng)過足夠治療，仍能長期存在，甚至終身不消失，血清反應(yīng)持續(xù)存在陽性，因此TPELISA陽性只說明正在感染或曾經(jīng)感染過，不能判斷梅毒疾病活動與否，不能作為療效監(jiān)測手段[13，14]。從本次檢測數(shù)據(jù)中可以看出ELISA法假陽性率較高，假陰性率卻很低是篩查梅毒抗體非常好的一種方法。因此ELISA檢測法適合梅毒的篩查，對于梅毒的早期診斷更具有優(yōu)勢。

綜上所述，實(shí)驗(yàn)室合理選用不同方法進(jìn)行同步梅毒檢測，既可提高梅毒抗體檢出的陽性率，減少早期梅毒和潛伏梅毒的漏診和誤診，也可作為病程觀察及療效判斷的實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)，便于對早期梅毒及早晚期潛伏梅毒能得到及時(shí)有效的診斷和治療[15，16]。做到早發(fā)現(xiàn)、早診斷、早治療，早控制，能更好地控制梅毒的傳播。

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R759.1+54，R446.62

A

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2016-12-06；

2017-01-04)