黏液型銅綠假單胞菌在痰涂片中分布特點及臨床意義分析

王秀媛

(天津市寶坻區(qū)中醫(yī)醫(yī)院檢驗科，天津301800)

黏液型銅綠假單胞菌在痰涂片中分布特點及臨床意義分析

王秀媛

(天津市寶坻區(qū)中醫(yī)醫(yī)院檢驗科，天津301800)

目的通過痰標本涂片觀察細菌的生物膜及細菌的分布特點，判斷是否為黏液型銅綠假單胞菌，以此為臨床及早的提示細菌感染和合理的選擇抗生素治療。方法對2015年11月-2016年10月我院門診及住院患者1461例痰標本涂片革蘭染色進行觀察。結(jié)果66例痰液標本經(jīng)涂片革蘭染色可見被染成淡粉色生物膜包裹物，內(nèi)有聚集革蘭陰性桿菌，經(jīng)細菌鑒定儀分析65例為銅綠假單胞菌。結(jié)論通過痰液涂片能夠檢出黏液型銅綠假單胞菌。

痰涂片；黏液型銅綠假單胞菌；感染；抗生素

銅綠假單胞菌（Pseudomonas aeruginosa，PA）是臨床上常見的條件致病菌之一，特別是在由各種原因所致的人體抵抗力低下時引起皮膚感染、呼吸道感染、泌尿道感染、燒傷感染等，亦可導(dǎo)致菌血癥、心內(nèi)膜炎、囊性纖維變性，該菌引起的慢性肺部感染占有較大的比例[1]。PA從菌落形態(tài)上可分為黏液型和非黏液型，黏液型PA因其過量表達海藻鹽多糖聚合物，形成明顯的生物膜[2]，使得該菌在其感染部位的標本中有其特殊的分布特點，容易與其它革蘭陰性桿菌鑒別[3，4]。

1 材料與方法

1.1 標本來源2015年11月-2016年10月我院門診及住院患者1461例痰液標本。

1.2 儀器和試劑VITEK 2 COMPACT全自動微生物鑒定系統(tǒng)（法國生物梅里埃公司），奧林巴斯顯微鏡，血瓊脂平板（金章公司），革蘭染液（貝索生物技術(shù)有限公司）。

1.3 方法

1.3.1 將我院2015年11月-2016年10月門診及住院部收集的1461例痰液標本進行涂片和革蘭染色鏡檢，發(fā)現(xiàn)有66例痰液標本經(jīng)革蘭染色涂片，鏡下可見被沙黃染成淡紅色不規(guī)則片狀形態(tài)，里面黏附有聚集成群的革蘭陰性桿菌見圖1、圖2。

圖1痰涂片革蘭染色（×1000）

圖2 痰涂片革蘭染色（×1000）

1.3.2 將上述標本接種于血瓊脂平板觀察，18-24h可生長出邊緣不規(guī)則，小露滴樣菌落，有特殊氣味，48h呈黏稠、膠胨樣菌落，接種環(huán)不易挑起，疑似黏液型銅綠假單胞菌。

1．3.3將上述疑似菌落進行行細菌鑒定，65例均為銅綠假單胞菌。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法實驗數(shù)據(jù)按照非配對資料χ2檢驗處理。P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

通過痰液涂片和培養(yǎng)鑒定結(jié)果比較有明顯的一致性（P＜0.05）。見表1。

表1 痰標本涂片與培養(yǎng)鑒定結(jié)果的比較

3 討論

3.1 黏液型銅綠假單胞菌在病灶中及培養(yǎng)物中能產(chǎn)生大量的生物膜，主要成分是藻酸鹽多糖聚合物，并且將細菌包裹在其中[5，6]，生物膜是多糖聚合物，可通過革蘭染色呈淡粉色，其形態(tài)典型，通過這一典型的形態(tài)可以幫助我們能在涂片中明顯的的檢出黏液型銅綠假單胞菌[7，8]。

3.2 黏液型銅綠假單胞菌是囊性纖維化（cystic fibrosis，CF）慢性炎癥的主要致病菌[9，10]，其產(chǎn)生大量的生物膜，使得膜內(nèi)的細菌可逃逸抗生素的殺菌作用，由于生物膜的存在導(dǎo)致廣泛的耐藥性而成為潛在的感染源[11，12]，如果從CF患者痰液標本涂片中見到這種被藻酸鹽多糖聚合物包裹的PA，可以為臨床提示CF患者的慢性感染，也可為臨床醫(yī)生在選擇抗生素的種類和劑量方面提供重要的參考依據(jù)[13-15]。

[1]趙元勛，鄭燕青，任小英，等.重癥監(jiān)護使病原菌分布及耐藥性分析[J].實驗與檢驗醫(yī)學(xué)，2013，31（5）：434-436.

[2]唐佩，劉敏，林允照，等.銅綠假單胞菌生物膜形成調(diào)控機制的研究進展[J].浙江預(yù)防醫(yī)學(xué)，2015，27（1）：48-51.

[3]許宏濤.涂片檢查在臨床微生物檢驗中的應(yīng)用[J].中華檢驗醫(yī)學(xué)雜志，2016，39（5）：393-398.

[4]賀文芳，馬越云，周磊，等.微生物菌群在呼吸道疾病中的作用[J].中華檢驗醫(yī)學(xué)雜志，2016，39（4）：322-324.

[5]陳薇嬰.銅綠假單胞菌生物膜形成與眼部感染[J].實驗與檢驗醫(yī)學(xué)，2013，31（5）：471-473.

[6]Robertson DM，Parks QM，Young RL，et al．Disruption of contact lens-associated Pseudomonas aeruginosa biofilms formed in the presence of neutrophils[J]．Invest Ophthalmol Vis Sci，2011，52（5）：2844-2850.

[7]陳險峰，周庭銀．痰標本涂片革蘭染色鏡檢的臨床意義[J]．檢驗醫(yī)學(xué)，2013，28(6)：499-502．

[8]陳東科．加強形態(tài)學(xué)檢查提高細菌鑒定的準確性[J].實驗與檢驗醫(yī)學(xué)，2012，30（5）：419-421.

[9]李鏞，劉嘉琳，瞿洪平.銅綠假單胞菌在急性下呼吸道感染患者中生物被膜形成與群體感應(yīng)系統(tǒng)基因相關(guān)性分析[J].內(nèi)科理論與實踐，2012，7（6）：434-438.

[10]王文敏，徐志豪.銅綠假單胞菌生物被膜形成的調(diào)控及治療對策研究進展[J].浙江大學(xué)學(xué)報（醫(yī)學(xué)版），2010，39(1)：103-108.

[11]龐炎．黏液型銅綠假單胞菌耐藥性現(xiàn)狀探討[J]．吉林醫(yī)學(xué)，2013，34(11)：2055-2056．

[12]叢玉隆，王金良，李曉軍，等.實用檢驗醫(yī)學(xué)[M].第2版.北京：人民衛(wèi)生出版社，2013：922.

[13]李瑜珍，曾學(xué)輝，李忠新，等.痰黏液型銅綠假單胞菌的分離及耐藥性分析[J]．中華醫(yī)院感染學(xué)雜志，2014，24（5）：1059-1060，1066.

[14]Lu Q，Yu JL，Bao L，et al．Effects of combined treatment with ambroxol and ciprofloxacin on catheter-associated Pseudnmonas aeruginosa biofilms in a rat model[J]．Chemotherapy，2013，59(1)：51-56．

[15]劉春明.銅綠假單胞菌耐藥機制的研究進展[J]．中華醫(yī)院感染學(xué)雜志，2011，21（21）：4634-4637.

R378.99+1，R446.19，R44.5

A

1674-1129(2017)04-0527-02

10.3969/j.issn.1674-1129.2017.04.025

2017-01-05；

2017-05-02)