化學(xué)發(fā)光酶免疫分析法在乙肝病毒及核心抗體定性檢測(cè)中的應(yīng)用價(jià)值

李燕 蔡利超

（河南省鞏義市人民醫(yī)院檢驗(yàn)科 鞏義 451200）

化學(xué)發(fā)光酶免疫分析法在乙肝病毒及核心抗體定性檢測(cè)中的應(yīng)用價(jià)值

李燕 蔡利超

（河南省鞏義市人民醫(yī)院檢驗(yàn)科 鞏義 451200）

目的：分析化學(xué)發(fā)光酶免疫分析法在乙肝病毒（HBV）及核心抗體定性檢測(cè)中的應(yīng)用價(jià)值。方法：選取2014年10月～2016年11月我院收治的乙肝患者95例為研究對(duì)象，應(yīng)用化學(xué)發(fā)光酶免疫分析法與酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定法檢測(cè)患者HBV、核心抗體（抗HBcAb-IgM抗體、抗HBcAb-IgG抗體），比較兩種檢測(cè)方法的陽(yáng)性檢出率及診斷敏感度。結(jié)果：兩種方法檢測(cè)HBV陽(yáng)性率比較無(wú)顯著性差異（P＞0.05）；化學(xué)發(fā)光酶免疫分析法檢測(cè)抗HBcAb-IgM抗體、抗HBcAb-IgG抗體陽(yáng)性率及敏感度均高于酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定法（P＜0.05）。結(jié)論：化學(xué)發(fā)光酶免疫分析法在HBV及核心抗體定性檢測(cè)中具有較高的應(yīng)用價(jià)值，對(duì)核心抗體陽(yáng)性檢出率和檢測(cè)敏感度均較高。

乙肝病毒；化學(xué)發(fā)光酶免疫分析法；核心抗體

乙肝病毒（Hepatitis B virus，HBV）是一種DNA病毒，一旦感染，可誘發(fā)肝硬化、肝衰竭、急性肝炎、原發(fā)性肝癌等疾病，已成為全世界公共衛(wèi)生問題。因此，及時(shí)發(fā)現(xiàn)并準(zhǔn)確判斷HBV感染對(duì)乙肝預(yù)防及診療具有重要的臨床價(jià)值。段海萍等[1]學(xué)者指出，核心抗體可有效顯示近期伴有的慢性感染病毒、HBV感染活動(dòng)。核心抗體包括抗HBcAb-IgM抗體、抗HBcAb-IgG抗體，其中抗HBcAb-IgM抗體可維持6～8周，抗HBcAb-IgG抗體維持時(shí)間更長(zhǎng)。酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定法常用于檢測(cè)HBV、核心抗體，但由于無(wú)法定量分析，且對(duì)患者病情進(jìn)展、治療效果無(wú)法動(dòng)態(tài)觀察，容易影響預(yù)后[2]。本研究旨在探討化學(xué)發(fā)光酶免疫法在檢測(cè)HBV及核心抗體中的應(yīng)用價(jià)值。現(xiàn)報(bào)道如下：

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取我院2014年10月～2016年 11月收治的95例乙肝患者為研究對(duì)象。其中，男55例、女40例，病程1～11年、平均病程（6.252.33）年，年齡22～75歲、平均年齡（48.5416.42）歲。

1.2 方法

1.2.1 化學(xué)發(fā)光酶免疫分析法 抽取95例患者空腹靜脈血5 ml，離心取上清液（3 000 r/min）。HBV檢測(cè)：將血清標(biāo)本置于放有HBV核心抗原IgM及IgG微孔反應(yīng)條中，加入經(jīng)辣根過氧化酶標(biāo)記的抗HBcAb-IgG抗體及抗HBcAb-IgM抗體；1 h后，采用PBS沖洗5次共15 min；加入氫氧化鈉0.1 mol/L、魯米諾30 μmol/L，靜置10 min；加入3%過氧化氫100 ml，檢測(cè)發(fā)光強(qiáng)度，并記錄發(fā)光儀數(shù)據(jù)。核心抗體檢測(cè)：抗HBcAb-IgM抗體、抗HBcAb-IgG抗體檢測(cè)均按照試劑盒步驟進(jìn)行操作。

1.2.2 酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定法 HBV檢測(cè)方法：將血清標(biāo)本放入微孔反應(yīng)條，并設(shè)置空白對(duì)照、陽(yáng)性對(duì)照、陰性對(duì)照，使用封片封鎖，置于37 ℃水中；1 h后，打開微孔反應(yīng)條，使用洗滌液沖洗，并將試劑盒內(nèi)A液、B液置于反應(yīng)條各孔中，封板，置于37 ℃水中；30 min后加入終止液，測(cè)定OD值；若所測(cè)血清值≥臨界值，診斷為陽(yáng)性。臨界值=（陰性樣品平均A值+2×標(biāo)準(zhǔn)差）。核心抗體檢測(cè)：抗HBcAb-IgM抗體、抗HBcAb-IgG抗體檢測(cè)均按照試劑盒步驟進(jìn)行操作。

1.2.3 抗體檢測(cè)最低限評(píng)價(jià) 取2.5 mg/ml抗HBcAb-IgG抗體、抗HBcAb-IgM抗體陽(yáng)性血清，用陰性血清稀釋。以化學(xué)發(fā)光酶免疫分析法及酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定法分別檢測(cè)抗HBcAb-IgG抗體、抗HBcAb-IgM抗體水平。

1.3 觀察指標(biāo) 比較兩種方法檢測(cè)HBV、核心抗體（抗HBcAb-IgM抗體、抗HBcAb-IgG抗體）的陽(yáng)性率，并判斷兩種方法對(duì)核心抗體檢測(cè)的敏感度。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 以SPSS20.0軟件分析數(shù)據(jù)，計(jì)數(shù)資料用率表示，進(jìn)行χ2檢驗(yàn)，計(jì)量資料以（）表示，采用t檢驗(yàn)，P＜0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩種方法檢測(cè)陽(yáng)性率比較 兩種方法檢測(cè)HBV陽(yáng)性率比較無(wú)顯著性差異，P＞0.05；化學(xué)發(fā)光酶免疫分析法檢測(cè)抗HBcAb-IgM抗體、抗HBcAb-IgG抗體陽(yáng)性率高于酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定法，P＜0.05，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。見表1。

表 1 兩種方法檢測(cè)陽(yáng)性率比較[例（%）]

2.2 兩種方法檢測(cè)敏感度比較 酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定法檢出抗HBcAb-IgG抗體最低濃度為0.142 IU/ ml，抗HBcAb-IgM抗體最低濃度為0.134 IU/ml；化學(xué)發(fā)光酶免疫分析法檢出抗HBcAb-IgM抗體最低濃度為0.031 IU/ml，抗HBcAb-IgG抗體最低濃度為0.037 IU/ml?；瘜W(xué)發(fā)光酶免疫分析法檢測(cè)敏感度高于酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定法，P＜0.05，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

3 討論

HBV具有較高感染率，我國(guó)HBV感染率高達(dá)70%以上，乙肝表面抗原攜帶率為總?cè)丝诘?.18%[3]。HBV病毒可誘導(dǎo)人體對(duì)感染形成的持續(xù)性免疫出現(xiàn)耐受狀態(tài)，進(jìn)而導(dǎo)致慢性化，增加肝癌、肝硬化發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)。有學(xué)者指出[4]，化學(xué)發(fā)光酶免疫分析法相較于基礎(chǔ)酶免疫分析法，檢測(cè)敏感度可提升3～5個(gè)數(shù)量級(jí)，增加發(fā)光強(qiáng)度同時(shí)，延長(zhǎng)其發(fā)光時(shí)間，提高檢測(cè)敏感度。

研究結(jié)果顯示，化學(xué)發(fā)光酶免疫分析法HBV陽(yáng)性檢出率為96.84%，酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定法HBV陽(yáng)性檢出率為94.74%（P＞0.05）；化學(xué)發(fā)光酶免疫分析法檢測(cè)抗HBcAb-IgG抗體、抗HBcAb-IgM抗體陽(yáng)性率及敏感度均高于酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定法（P＜0.05）。說明兩種方法在HBV檢測(cè)中均具有較高的檢測(cè)價(jià)值，且化學(xué)發(fā)光酶免疫分析法在核心抗體檢測(cè)中具有更高的敏感度。究其原因，可能為化學(xué)發(fā)光酶免疫分析法試劑盒內(nèi)抗體不受突變影響，且能有效辨別逃逸變異株，最大程度減少人為因素影響，避免結(jié)果重復(fù)性。此外，核心抗體水平升高表明乙肝急性感染，核心抗體水平降低表明處于既往感染或恢復(fù)期內(nèi)，有助于降低漏診率及誤診率[5]。綜上所述，化學(xué)發(fā)光酶免疫分析法在HBV及核心抗體定性檢測(cè)中具有較高的應(yīng)用價(jià)值，對(duì)核心抗體陽(yáng)性檢出率和檢測(cè)敏感度均較高。

[1] 段海萍,王俠.化學(xué)發(fā)光酶免疫分析法在乙肝病毒及核心抗體定性檢測(cè)中的應(yīng)用分析[J].國(guó)際病毒學(xué)雜志,2016,23(1):57-59

[2] 楊梅,晏紅.化學(xué)發(fā)光免疫分析法檢測(cè)乙肝病毒感染性標(biāo)志物的臨床應(yīng)用[J].標(biāo)記免疫分析與臨床,2016,23(4):448-450

[3] 張利,于冬男.化學(xué)發(fā)光酶免疫分析法及ELISA檢測(cè)抗-HCV的結(jié)果比較[J].檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)與臨床,2016,13(1):18-20

[4] 周雙艷,趙克斌,楊澤華.化學(xué)發(fā)光微粒子免疫分析法與酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)血清乙型肝炎表面抗體的比對(duì)[J].中國(guó)藥物與臨床,2016,16(5):753-755

[5] 安哲,李思鵬,張妮,等.乙肝病毒e抗體檢測(cè)在乙肝病毒既往感染者中的臨床價(jià)值[J]. 現(xiàn)代預(yù)防醫(yī)學(xué),2015,42(10):1839-1840

R446.6

B

10.13638/j.issn.1671-4040.2017.06.064

2017-05-10）