三水區(qū)3244例新生兒α—地中海貧血的臍血篩查結(jié)果分析

唐永梅??余烈中

[摘要] 目的 分析三水區(qū)3244例新生兒α-地中海貧血的臍血篩查結(jié)果，了解本地區(qū)新生兒α-地中海貧血的罹患情況和類型分別。 方法 采用簡(jiǎn)單隨機(jī)抽樣方法抽取三水區(qū)2015年9月～2016年10月這一時(shí)間段內(nèi)出生嬰兒中的3244例，待胎兒娩出，在切斷臍帶時(shí)對(duì)胎盤端臍帶血液樣本進(jìn)行收集，采用電泳方式對(duì)HB Barts進(jìn)行檢測(cè)。 結(jié)果 在三水區(qū)3244例新生兒中，共檢測(cè)出α-地中海貧血患者284例，占比8.7%。在分型方面，靜止型為111例，占比39.2%、標(biāo)準(zhǔn)型為142例，占比50.2%、中間型為23例，占比8.1%、重癥型為7例，占比2.5%，基因檢測(cè)結(jié)果共檢測(cè)出α-地中海貧血患者294例，占比9.06%。在分型方面，靜止型為111例，占比39.2%、標(biāo)準(zhǔn)型為142例，占比50.2%、中間型為23例，占比8.1%、重癥型為7例，占比2.5%，在各型患兒的性別、發(fā)病例數(shù)等信息方面，對(duì)比差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。 結(jié)論 在臨床篩查新生兒α-地中海貧血中，HB Barts作為一項(xiàng)關(guān)鍵指標(biāo)能夠較好提高篩查成功率，測(cè)定其含量可作為臨床初步分型的參考，但作為優(yōu)生的最終依據(jù)還需通過(guò)基因的診斷，且血紅蛋白電泳檢測(cè)存在著一定的不足之處。對(duì)于α-地中海貧血的診療要進(jìn)行血常規(guī)、血紅蛋白電泳篩查結(jié)合基因檢測(cè)聯(lián)合運(yùn)用。

[關(guān)鍵詞] 三水區(qū)；α-地中海貧血；臍血

[中圖分類號(hào)] R722.8 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A [文章編號(hào)] 2095-0616（2017）12-147-03

Analysis on Cord Blood Screening Result of α-thalassemia of 3244 Beonates in Sanshui District

TANG Yongmei1 YU Liezhong2

1.Department of Laboratory，Sanshui District People's Hospital，F(xiàn)oshan 528100，China；2.Department of Laboratory，Sanshui District Maternal and Child Health Hospital，F(xiàn)oshan 528100，China

[Abstract] Objective To analyze cord blood screening results of α-thalassemia of 3244 neonates in Sanshui district to know the incidence and type of neonatal α-thalassemia in this district. Methods 3244 neonates who were born in Sanshui district from September 2015 to October 2016 were selected according to the simple random sampling method.After delivery， cord blood samples of placenta were collected when umbilical cord was cut.HB Barts was detected by electrophoresis method. Results Of 3244 neonates in Sanshui district，283 patients were detected with α-thalassemia accounting for 8.7%.In typing， there were 111 cases of the static type accounting for 39.2%，142 cases of the standard type accounting for 50.2%，23 cases of the intermediate type accounting for 8.1% and 7 cases of the severe type accounting for 2.5%. Comparative differences in gender，number of cases and other information of neonates with different types had no statistical significance （P>0.05）. Conclusion In the clinical screening of neonatalα-thalassemia， HB Barts as a key index can improve the success rate of screening.And determination of its content can be used as the reference of primary clinical type.But as the final basis of eugenics，gene diagnosis is also needed.And there are some disadvantages of electrophoresis analysis of hemoglobin.Diagnosis and treatment of α-thalassemia needs combination of blood routine， electrophoresis analysis of hemoglobin and gene diagnosis.

[Key words] Sanshui district；Alpha thalassemia；Cord blood

地中海貧血屬于一種遺傳性溶血性貧血疾病，常由珠蛋白基因缺失、肽鏈合成障礙引起，臨床主要表現(xiàn)為黃疸、肝脾腫大、貧血等癥狀，若為輕型，則一般不需進(jìn)行治療，若病情較重，則需盡早進(jìn)行治療，所以做好早期的篩查工作至關(guān)重要[1]。α-地中海貧血主要由α珠蛋白基因缺損引起，屬于地中海貧血類型中常見(jiàn)的一種，不僅給患者帶來(lái)較大困擾，而且也給家庭、社會(huì)帶來(lái)較大的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)[2]。隨著臨床對(duì)α-地中海貧血治療的重視度不斷加強(qiáng)，相應(yīng)的篩查工作也有了較大進(jìn)展，以期盡早預(yù)防，維護(hù)新生兒的健康[3]。本研究以3244例新生兒為研究對(duì)象，對(duì)臍血的篩查結(jié)果進(jìn)行分析，取得了較好效果，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

采用簡(jiǎn)單隨機(jī)抽樣方法抽取三水區(qū)2015年9月～2016年10月這一時(shí)間段內(nèi)出生嬰兒中的3244例，待所有新生兒家屬簽署了相應(yīng)的同意書(shū)后，收集、篩查新生兒的臍血樣本。男1630例，女1614例。

1.2 儀器及試劑

意大利Interlab G26全自動(dòng)瓊脂糖凝膠電泳儀及其配套試劑。美國(guó)icyclei-iQ全自動(dòng)基因擴(kuò)增儀、HEMA核酸蛋白凝膠圖像分析管理系統(tǒng)及配套試劑、Combi-SV120韓國(guó)FINEPCR 分子雜交箱、GSG-2000核酸/蛋白凝膠圖像分析管理系統(tǒng)。

1.3 樣本采集

待胎兒娩出，將臍帶切斷，對(duì)胎盤端臍帶血液樣本進(jìn)行收集，為3mL，之后采用EDTA—K2進(jìn)行抗凝處理。標(biāo)本采集后及時(shí)送檢，如當(dāng)天不能檢測(cè)，置2～8℃冰箱保存，次日檢測(cè)。

1.4 方法

1.4.1 電泳檢測(cè)方法 將臍血用生理鹽水反復(fù)洗滌3次，直至上層液無(wú)色透明，最后一次吸去上層生理鹽水，盡量吸去紅細(xì)胞表面殘留的生理鹽水，余下壓積紅細(xì)胞。取150μL裂解液于一試管中，加40μL壓積紅細(xì)胞，充分混勻，裂解20分鐘。按儀器操作進(jìn)行點(diǎn)樣、電泳、變性、染色、脫色、干燥、膠片掃描，最后進(jìn)行結(jié)果分析。

1.4.2 基因檢測(cè)方法 采用Gap-PCR方法，嚴(yán)格按操作說(shuō)明書(shū)檢測(cè)3.7，4.2，SEA 3 個(gè)缺失點(diǎn)，

1.5 觀察指標(biāo)

若監(jiān)檢測(cè)結(jié)果中存在HB Barts，則將新生兒視作α-地中海貧血患兒。對(duì)α-地中海貧血進(jìn)行分型處理，分型標(biāo)準(zhǔn)[5]見(jiàn)表1。

1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

數(shù)據(jù)處理采用統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件SPSS19.0，計(jì)數(shù)資料采取百分比（%）表示，采用χ2檢驗(yàn)。P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 電泳檢測(cè)結(jié)果

電泳檢測(cè)結(jié)果共檢測(cè)出α-地中海貧血患者284例，占比8.7%。在分型方面，靜止型為111例，占比39.2%、標(biāo)準(zhǔn)型為142例，占比50.2%、中間型為23例，占比8.1%、重癥型為7例，占比2.5%，在各型患兒的性別、發(fā)病例數(shù)等信息方面，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）

2.2 基因檢測(cè)結(jié)果

基因檢測(cè)結(jié)果共檢測(cè)出α-地中海貧血患者294例，占比9.06%。在分型方面，靜止型為111例，占比39.2%、標(biāo)準(zhǔn)型為142例，占比50.2%、中間型為23例，占比8.1%、重癥型為7例，占比2.5%，在各型患兒的性別、發(fā)病例數(shù)等信息方面，比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。

3 討論

本研究主要對(duì)三水區(qū)3244例新生兒α-地中海貧血的臍血篩查結(jié)果進(jìn)行分析，從相關(guān)結(jié)果可知，在3244例新生兒中，電泳結(jié)果檢出α-地中海貧血患者283例；在分型方面，靜止型為111例，占比39.2%、標(biāo)準(zhǔn)型為142例，占比50.2%、中間型為23例，占比8.1%、重癥型為7例，占比2.5%。基因檢測(cè)結(jié)果共檢測(cè)出α-地中海貧血患者294例，占比9.06%。在分型方面，靜止型為111例，占比39.2%、標(biāo)準(zhǔn)型為142例，占比50.2%、中間型為23例，占比8.1%、重癥型為7例，占比2.5%，由此可見(jiàn)，通過(guò)臍血篩查能夠較好篩查出α-地中海貧血患者，為臨床早期治療提供依據(jù)。

α-地中海貧血是一種染色體遺傳性疾病，以HB Barts含量不同為依據(jù)，可分型為靜止型、標(biāo)準(zhǔn)型、中間型、重型[6]。靜止型患者無(wú)明顯的臨床癥狀，只存在一些輕度的紅細(xì)胞形態(tài)變化；標(biāo)準(zhǔn)型患者存在血色素值異常、輕度貧血情況；中間型患者存在溶血性黃疸，3個(gè)月后患者會(huì)出現(xiàn)肝脾腫大、面色蒼黃等現(xiàn)象[7]。重型患者大都胎死腹中，或者出生后短時(shí)間內(nèi)死亡[8]。由于新生兒的黃疸可由多種因素引發(fā)，所以中間型患者在出生時(shí)的溶血性黃疸常被忽視，患兒的血色素為80-100g/L，若未及時(shí)發(fā)現(xiàn)并治療，將會(huì)嚴(yán)重危害患兒的健康。HB Barts屬于一種特殊的血紅蛋白，存在于新生兒的臍血中，屬于α-地中海貧血的關(guān)鍵檢測(cè)指標(biāo)。一般患兒出生4 ～ 11個(gè)月后HB Barts消失，靜止型、輕型患者在半歲后則趨近于健康人[9]。在對(duì)α-地中海貧血進(jìn)行檢測(cè)時(shí)，受檢測(cè)技術(shù)等因素的影響，難以檢出全部的α-地中海貧血患者，存在較多的缺陷[10]。從相關(guān)結(jié)果可知[11]，采用臍血的HB Barts進(jìn)行檢測(cè)則能較好篩查出大多數(shù)類型的α-地中海貧血患者，檢出率較高，能夠?yàn)棣?地中海貧血盡早治療提供依據(jù)，臨床應(yīng)用價(jià)值較高。

電泳的靈敏度約為85% ～ 95%[12]。電泳篩查有其諸多不足之處：Hb電泳對(duì)輕型α-地貧無(wú)診斷意義。樣品處理對(duì)檢驗(yàn)人員的依賴性大，對(duì)于血紅蛋白條帶的判讀主觀性強(qiáng)，重復(fù)性差，精確性差，質(zhì)量難以控制，存在一定的假陽(yáng)性和假陰性率，且涉及一些有害物質(zhì)的處理。臍血血紅蛋白電泳檢測(cè)技術(shù)是國(guó)際公認(rèn)的檢測(cè)α-地中海貧血的金指標(biāo)，可檢出目前基因診斷不能檢出的罕見(jiàn)型α-地中海貧血。很多認(rèn)為地中海貧血的基因診斷可以代替篩查，其實(shí)這是一種錯(cuò)誤的認(rèn)識(shí)[13]。地貧基因分析前需先進(jìn)行常規(guī)的篩查，如血常規(guī)、血紅蛋白電泳，尤其是血紅蛋白電泳檢查，如果漏診了容易遺傳給下一代。HB Barts 含量的測(cè)定為臨床初步分型提供參考，但作為優(yōu)生的最終依據(jù)還需通過(guò)基因的診斷，因?yàn)榭赡芎喜⒂笑碌刂泻Ｘ氀?，也受?shí)驗(yàn)人員和試劑的影響較大[14]。當(dāng)血常規(guī)檢查Hb正常或輕度下降，MCV下降和（或）MCH下降，但電泳沒(méi)有陽(yáng)性發(fā)現(xiàn)，這時(shí)候可能存在HbA2檢測(cè)誤差，這種情況要行地貧基因檢測(cè)；如果夫婦雙方有一方確定為α（或β）地中海貧血，另一方則需要進(jìn)行地貧基因檢測(cè)。但地貧基因分析也有一定局限性[15]，比如存在2%的誤診及漏診率，不能檢出非缺失α地中海貧血，只能檢測(cè)17種國(guó)內(nèi)常見(jiàn)的β地中海貧血基因，標(biāo)本有母體細(xì)胞污染時(shí)會(huì)影響結(jié)果的準(zhǔn)確性。

綜上所述，在臨床篩查新生兒α-地中海貧血中，HB Barts作為一項(xiàng)關(guān)鍵指標(biāo)能夠較好提高篩查成功率，測(cè)定其含量可作為臨床初步分型的參考，但作為優(yōu)生的最終依據(jù)還需通過(guò)基因的診斷，且血紅蛋白電泳檢測(cè)存在著一定的不足之處。對(duì)于α-地中海貧血的診療要進(jìn)行血常規(guī)、血紅蛋白電泳篩查結(jié)合基因檢測(cè)聯(lián)合運(yùn)用。

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（收稿日期：2017-05-08）