康樂鼻炎片中馬來酸氯苯那敏的含量測定法

劉荷英，程奇珍，易路遙

(江西省食品藥品檢驗所，江西南昌330029)

康樂鼻炎片是衛(wèi)生部藥品標準中藥成方制劑第十二冊收載的復方制劑，由蒼耳子、辛夷、白芷、馬來酸氯苯那敏等11味中西藥加工制成，用于外感風邪、膽經郁熱、脾胃濕熱而致的傷風鼻塞、鼻窒、鼻鼽、鼻淵。本文采用高效液相色譜法對馬來酸氯苯那敏的含量進行測定，方法專屬性好，準確度高，供試品溶液制備方法簡單，可有效對康樂鼻炎片進行質量控制。

1 儀器與試藥

高效液相色譜儀(島津LC－2010型);紫外分光光度計(UV2401型);精密天子天平(Sartorius BP211D型)。

馬來酸氯苯那敏對照品(中國藥品生物制品檢定所提供，含量99.7%，批號:100047－200606);康樂鼻炎片(每片含馬來酸氯苯那敏 0.66 mg，批號 100900，100901，100902，江西藥都仁和制藥有限公司提供);乙腈(色譜純);十二烷基硫酸鈉(分析純);磷酸(分析純)。

2 方法與結果

2.1 色譜條件與系統適用性 色譜柱:Diamonsil C18(4.6 mm ×150 mm，5 μm);流動相:乙腈 －0.5%十二烷基硫酸鈉(含0.1%磷酸)(50∶50);柱溫:25 ℃;流速:1.0 mL·min－1;進樣量:20 μL;檢測波長:262 nm。理論板數按氯苯那敏峰計算應不低于2 000，馬來酸氯苯那敏峰的分離度應符合要求。為了考察干擾組分的干擾情況，分別吸取對照品溶液、供試品溶液及陰性對照溶液各20 μL注入液相色譜儀，記錄色譜圖，供試品色譜圖中，在與對照品色譜圖相同保留時間有相應的峰，陰性對照液無對應峰，結果見圖1。

圖1 對照品(A)、陰性樣品(B)及供試品(C)色譜圖

2.2 試驗溶液的制備

2.2.1 對照品溶液的制備 取馬來酸氯苯那敏對照品12.5 mg，精密稱定，置50 mL量瓶中，加甲醇適量使溶解并稀釋至刻度，搖勻，精密吸取5 mL，置50 mL量瓶中，加流動相稀釋至刻度，搖勻，即得。

2.2.2 供試品溶液的制備 取本品20片，除去糖衣，研細，取細粉約1 g，精密稱定，置50 mL量瓶中，加流動相40 mL，搖勻，超聲處理30 min，取出，放置至室溫，加流動相稀釋至刻度，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。

2.2.3 陰性溶液的制備 稱取1.0 g缺馬來酸氯苯那敏的樣品，同供試品溶液制備法制備。

2.3 線性關系 精密稱取馬來酸氯苯那敏對照品12.80 mg，置50 mL量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得0.255 2 mg·mL－1的對照品貯備液，分別精密吸取對照品貯備液 1、3、5、7、10 mL 置50 mL 量瓶中，加流動相稀釋至刻度，搖勻，各精密吸取20 μL注入液相色譜儀，記錄色譜圖，以峰面積Y對進樣濃度C進行線性回歸分析，結果馬來酸氯苯那敏在進樣濃度為5.105 ～51.05 μg·mL－1范圍內呈良好線性關系，其線性回歸方程為:Y=18 274 C+577.59，r=1.000。

2.4 檢測限 在上述色譜條件下，取馬來酸氯苯那敏對照品適量，用流動相溶解并定量稀釋，在信噪比約為3∶1，得馬來酸氯苯那敏檢測限為1.532 ng。

2.5 精密度試驗 對線性項下25.52 μg·mL－1的馬來酸氯苯那敏對照品溶液連續(xù)6次進樣分析，計算氯苯那敏峰面積的RSD值。結果RSD為0.1%，精密度良好。

2.6 重復性試驗 精密稱取供試品細粉(批號:100900)約1 g，共6份，置50 mL量瓶中，同供試品溶液制備法制備，結果RSD為0.6%，表明該方法的重復性良好。

2.7 回收率試驗 取供試品細粉(批號:100900)0.5 g，共6份，分別精密稱定，再精密加入馬來酸氯苯那敏對照品貯備液適量，照正文含量測定方法，測定峰面積，回收率結果見表1。

表1 加樣回收率試驗結果

2.8 穩(wěn)定性試驗 精密稱取供試品細粉(批號:100900)1.005 0 g，置50 mL量瓶中，同供試品溶液制備法制備，分別在 0、2.5、5、7.5、10、12.5 h 取供試品溶液進樣分析，結果峰面積RSD為0.5%。

2.9 耐用性試驗 分別用島津LC－2010和Agilent 1200高效液相色譜儀通過3根色譜柱(色譜柱1:Diamonsil C18，4.6 mm ×150 mm，5 μm;色譜柱 2:Diamonsil C18，4.6 mm × 250 mm，5 μm;色譜柱 3:Agilent C18，4.6 mm ×250 mm，5 μm)對馬來酸氯苯那敏對照品溶液及重復性樣品(共6份)進行測定，結果平均標示百分含量為81.3%，RSD為0.5%。

2.10 樣品測定 按正文擬定方法測定3批樣品中馬來酸氯苯那敏的標示百分含量，測定結果見表2。

表2 樣品測定結果

3 討論

康樂鼻炎片成分復雜，且氯苯那敏含量較低，測定時干擾物質較多，有文獻通過三氯甲烷多次提取來去除干擾［1］，此方法操作繁瑣，誤差大，故本文嘗試用有機溶劑直接超聲提取，試驗中考察了甲醇、流動相、50%無水乙醇和無水乙醇4種提取溶劑，結果氯苯那敏提取效果優(yōu)劣次序為:流動相/50%無水乙醇＞甲醇＞無水乙醇，因文獻報道的50%無水乙醇提?。?］時溶液較為粘稠，不易濾過，故最終選擇流動相作為康樂鼻炎片馬來酸氯苯那敏的提取溶劑?？疾炝瞬煌墓┰嚻啡恿亢统晻r間，結果在供試品取樣量為0.5 g、1.0 g和2.0 g時，超聲時間為15 min、30 min 和 45 min 時馬來酸氯苯那敏的提取效果基本一致。

試驗中曾考察了5種流動相體系，分別為:①原標準中流動相:甲醇－含1%三乙胺和0.005 mol·L－1庚烷磺酸鈉的0.05 mol·L－1磷酸二氫鉀溶液(用磷酸調節(jié) pH 至3.0)體系;②乙腈－磷酸鹽緩沖液(取磷酸二氫銨11.5 g，加水溶解，量取磷酸1 mL，加水稀釋至1 000 mL)體系;③乙腈－磷酸鹽緩沖液(取磷酸二氫鉀6.8 g，加1 mol·L－1氫氧化鈉15.2 mL，三乙胺 0.5 mL，用水稀釋至1 000 mL)體系;④乙腈－0.2%十二烷基硫酸鈉水溶液(含0.1%磷酸)體系;⑤乙腈－0.5%十二烷基硫酸鈉水溶液(含0.1%磷酸)體系。結果發(fā)現在上述不使用離子對試劑的體系中，無論如何調節(jié)有機相與水相的比例，氯苯那敏與雜質峰均不能實現良好分離，增加十二烷基硫酸鈉離子對試劑濃度，可以使氯苯那敏在色譜柱上保留增強，從而更好地與雜質峰分離，以乙腈－0.5%十二烷基硫酸鈉水溶液(含0.1%磷酸)(50∶50)為流動相時，氯苯那敏與雜質峰分離良好，峰形尖銳對稱，保留時間較短。

［1］蒙躍龍，李小安.HPLC法測定康樂鼻炎片中馬來酸氯苯那敏的含量［J］.現代中醫(yī)藥，2005，25(6):51 －52.

［2］譚正虹，郭栩豐，周小露，等.HPLC法測定康樂鼻炎片中馬來酸氯苯那敏的含量［J］.今日藥學，2008，18(3):32 －33，88.