四會市地區(qū)鼻咽癌患者微腫瘤組織的病理特征與基因特征聯(lián)合研究

羅儉權(quán) 羅伙娣 馮天斌 潘清文

臨床研究

四會市地區(qū)鼻咽癌患者微腫瘤組織的病理特征與基因特征聯(lián)合研究

羅儉權(quán) 羅伙娣 馮天斌 潘清文

目的 觀察四會市地區(qū)鼻咽癌（NPC）患者微腫瘤組織的病理特征與基因特征。方法 回顧分析2006年1月至2012年12月廣東省四會市人民醫(yī)院收治的174例NPC腫瘤患者資料及50例非腫瘤性鼻咽部組織患者。結(jié)果 174例NPC患者中，頸部有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者124例，無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者50例。非腫瘤性鼻咽部組織KAI1/CD82蛋白的陽性表達率明顯高于NPC組織〔78.0%（39/50）比52.4%（65/124），P＜0.05〕。患者NPC組織中KAI1/CD82蛋白的表達與其性別、年齡、病理類型、原發(fā)部位（T分期）等臨床指標(biāo)均無相關(guān)性（均P＞0.05），但與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移（N分期）相關(guān)，且隨著N分期的進展，KAI1/CD82蛋白陽性表達率進一步降低。結(jié)論 NPC患者淋巴微腫瘤的病理特征和基因特征具有一些地域分布特征應(yīng)聯(lián)合診斷分析。

鼻咽癌； 病理特征； 基因特征； 精確診斷； 早治療

鼻咽癌（NPC）素有被冠以地名稱呼廣東瘤，反映出它在發(fā)病方面的特殊性，具有明顯的地域分布特征與種族特征［1-3］。我國福建、湖南、廣西、廣東等南部地區(qū)NPC發(fā)病率高。NPC不僅具有獨特的流行病學(xué)特點及生物學(xué)特性，且提示遺傳因子在其中起著重要作用［4-5］。目前NPC發(fā)病病因尚未完全明確,可能的致病因素有抑癌基因、化學(xué)致癌因素、遺傳因素及病毒（EB病毒）感染等［6-8］。

NPC生長位置、解剖結(jié)構(gòu)具有一定的特殊性,主要以放射治療為主。近幾年來,隨者放射治療技術(shù)與設(shè)備的不斷提高，NPC患者生存率亦不斷得到提高［9-10］。但是遠處轉(zhuǎn)移、局部復(fù)發(fā)仍是影響NPC患者預(yù)后的關(guān)鍵因素，遠期生存率低［11-12］。本文通過對廣東省四會市地區(qū)性NPC患者淋巴微腫瘤組織病理特征和基因特征的聯(lián)合分析，為探索一種新的早期診斷NPC技術(shù)提供依據(jù)。

1 資料和方法

1.1 病例選擇 選擇2006年1月至2012年12月在廣東省四會市人民醫(yī)院就診，經(jīng)病理證實的NPC患者174例，全部病例治療前均行高分辨螺旋CT影像檢查。其中男性126例，女性48例；男女比例2.625：1，年齡25～81歲，平均年齡（44.3±11.7）歲。50例非腫瘤性鼻咽部組織患者，其中男性30例，女性20例；年齡23～79歲，平均年齡(43.1±10.5)歲。影像學(xué)診斷由腫瘤科及影像科醫(yī)師共同完成。初診時多數(shù)以頸部腫塊、不適感為主訴，病理檢查發(fā)現(xiàn)為頸部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者達64%。

1.2 資料收集方法 收集174例經(jīng)病理證實的NPC診療患者的出生地和生活環(huán)境區(qū)域的信息。

1.3 組織標(biāo)本獲取方法 通過手術(shù)、穿刺、纖維支氣管鏡和介入手段獲取腫瘤組織的淋巴結(jié)，開展病理特征和個體的腫瘤基因檢測。

1.4 檢測方法 ① 采取逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈式反應(yīng)（RT-PCR）方法檢測174例NPC與50例非腫瘤性鼻咽部新鮮組織KAI1/CD82的表達情況,并對KAI1/CD82與臨床病理相關(guān)指標(biāo)的關(guān)系進行分析。KAI1基因（Kang Ai 1基因）,是一類特異性腫瘤轉(zhuǎn)移抑制基因，其屬于跨膜4超家族（TM4SF）的成員。研究表明,KAI1/CD82基因與多種腫瘤的轉(zhuǎn)移、侵襲密切相關(guān)［13］。② 應(yīng)用免疫組織化學(xué)鏈霉菌抗生物素蛋白-過氧化物（SP）方法檢測174例NPC和50例非腫瘤性鼻咽部組織的KAI1/CD82蛋白的表達情況，并對KAI1/CD82與臨床病理相關(guān)指標(biāo)的關(guān)系進行分析。③ 應(yīng)用聚合酶鏈反應(yīng)（PCR）技術(shù)檢測瘤細胞IgH基因重排，并進行統(tǒng)計相關(guān)分析。④ 研究腫瘤基因的傾向、患者5年生存率的各種影響因素分析。對比淋巴微腫瘤組織結(jié)構(gòu)的細微變化特征，結(jié)合腫瘤基因特征，探討腫瘤患者個體基因表達的特異性、敏感性、相關(guān)性。

1.5 統(tǒng)計學(xué)分析 數(shù)據(jù)采用統(tǒng)計學(xué)軟件SPSS 20.0進行分析，計數(shù)資料以例數(shù)（n）、百分率（%）表示，采用χ2檢驗；計量資料以均數(shù)±標(biāo)準差（±s）表示，樣本均值比較采用t檢驗，具有統(tǒng)計學(xué)意義的標(biāo)準定為P＜0.05。

2 結(jié)果

2.1 NPC和非腫瘤組織的KAI1/CD82蛋白表達的情況 本項目共入組174例NPC患者，其中124例伴頸部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移（72例雙側(cè)轉(zhuǎn)移、52例單側(cè)轉(zhuǎn)移），50例無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移。組織學(xué)上見少數(shù)非典型性大細胞散在分布于小淋巴細胞和組織細胞背景中。非腫瘤性鼻咽部組織KAI1/CD82蛋白的陽性表達率為78.0%（39/50），高于NPC組織中的52.4%（65/124），兩者差異明顯，具有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。

2.2 相關(guān)性分析 NPC組織中KAI1/CD82蛋白的表達與患者的性別、年齡、病理類型、原發(fā)部位（T分期）等臨床指標(biāo)均無相關(guān)性（均P＞0.05），但與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移（N分期）相關(guān)。并且隨著N分期的進展，KAI1/CD82蛋白陽性表達率進一步降低。

2.3 NPC患者5年生存率的各種影響因素分析比較四會市地區(qū)NPC患者5年生存率，與性別無相關(guān)性，與年齡段、臨床分期、治療方式明顯相關(guān)性。見表1。

表1 NPC患者5年生存率的各種影響因素分析

3 討論

采用腫瘤患者淋巴微腫瘤組織的病理特征與基因特征聯(lián)合研究NPC主要多見于南方的廣東、廣西、湖南、福建、江西等，高發(fā)中心是廣東的肇慶、佛山、廣西梧州地區(qū)，具有明顯的地區(qū)性。目前NPC發(fā)病機制尚未完全明確，遺傳因素和機體的免疫力是NPC發(fā)生的基礎(chǔ)，可能的致病因素有抑癌基因的失控、癌基因、化學(xué)致癌因素、遺傳因素及病毒（EB病毒）感染等［14-15］，在NPC的發(fā)生中起病因作用，促癌物或致癌物起協(xié)同作用。

近年來，伴隨放射治療設(shè)備及技術(shù)的不斷革新，大大提高了NPC患者的5年生存率。而局部復(fù)發(fā)和遠處轉(zhuǎn)移則影響了NPC患者的預(yù)后，并限制了進一步提高患者生存率［16-18］。故探討淋巴微腫瘤組織的病理特征和基因特征在NPC轉(zhuǎn)移中的作用具有重要意義。本組174例NPC患者主要表現(xiàn)為淋巴結(jié)腫大。組織學(xué)上見少數(shù)非典型性大細胞散在分布于小淋巴細胞和組織細胞背景中［19］。有研究表明，KAI1/CD82基因與多種腫瘤的轉(zhuǎn)移和侵襲相關(guān)［20-24］。本研究結(jié)果中非腫瘤性鼻咽部組織KAI1/CD82蛋白的陽性表達率顯著高于NPC組織，這提示KAI1/CD82基因在非腫瘤性鼻咽部組織中呈高表達，在NPC組織中呈低表達，KAI1/CD82基因可能與NPC的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)。

本研究應(yīng)用免疫組化SP方法檢測了NPC組織KAI1/CD82蛋白的表達與患者的性別、年齡、原發(fā)部位（T分期）及病理類型等指標(biāo)均無相關(guān)性，但與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移（N分期）相關(guān)。且隨著N分期的進展，KAI1/CD82蛋白陽性表達率進一步降低。

惡性腫瘤的產(chǎn)生與發(fā)展是一個非常復(fù)雜的過程，治療方法往往涉及到與腫瘤生長相關(guān)的諸多方面，尤其是對于解剖結(jié)構(gòu)、生物學(xué)行為及病理類型均具有特殊性的NPC淋巴微腫瘤［25-28］。應(yīng)盡早研究本地區(qū)的淋巴微腫瘤組織的病理特征和基因特征的相關(guān)性，為腫瘤高發(fā)地區(qū)人群研究提供早發(fā)現(xiàn)、早治療的科學(xué)依據(jù)。

本研究已證明，應(yīng)用淋巴微腫瘤組織的病理特征和基因特征的聯(lián)合分析，對腫瘤治療具有較高的診斷價值。如能擴大樣本量，通過建立地域性NPC患者淋巴微腫瘤組織的研究資料，聯(lián)合分析淋巴微腫瘤組織的病理特征特點，對比基因特征結(jié)果的敏感性、特異性和相關(guān)性，將有望提高臨床早期診斷水平。

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（本文編輯：李銀平）

Joint study on pathological features and gene characteristics of micro tumor tissue in patients withnasopharyngeal carcinoma in Sihui City area

Luo Jianquan, Luo Huodi, Feng Tianbin, Pan Qingwen.The People's Hospital of Sihui City, Sihui 526200, Guangdong , China

Objective To observe the pathological characteristics and gene characteristics of micro tumor tissue in patients with nasopharyngeal carcinoma (NPC) in Sihui City area. Methods The data of 174 patients with NPC who were admitted to our hospital and 50 patients with non-neoplastic nasopharyngeal tissue were analyzed retrospectively from January 2006 to December 2012. Results 124 patients with cervical lymph node metastasis and 50 patients without lymph node metastasis were found in 174 patients with NPC. The positive expression rate of KAI1/CD82 protein in non-neoplastic nasopharyngeal tissue was higher significantly than that in NPC tissue [78.0% (39/50) vs. 52.4% (65/124), P ＜ 0.05]. The expression of KAI1/CD82 protein in NPC tissue of patients was not correlated with its sex, age, pathological type, primary site (T staging) and other clinical indicators (all P ＞ 0.05), but was correlated with lymph node metastasis (N stage) and with the progress of N staging, the positive expression rate of KAI1/CD82 protein decreased further. Conclusions There were some geographical distribution characteristics in the pathological features and gene characteristics of lymphatic micro tumor tissue in patients with NPC and should joint diagnosis analysis.

Nasopharyngeal carcinoma; Pathological features; Genetic characteristics; Accurate diagnosis; Early treatment

肇慶市科技創(chuàng)新計劃項目（2016040301）

526200 廣東四會，廣東省四會市人民醫(yī)院

羅儉權(quán)，Email：luo3335686@163.com

10.3969/j.issn.1674-7151.2017.01.002

2017-01-20）