黑果腺肋花楸不定芽誘導(dǎo)與增殖研究

趙健竹+孫曉澤+辛廣+張文穎+劉影

摘要：本研究以黑果腺肋花楸為試驗材料，分別選取莖尖、莖段及葉片作為外植體，接種到不同植物激素種類及濃度配比的培養(yǎng)基上，進行誘導(dǎo)和增殖培養(yǎng)。結(jié)果表明：莖尖誘導(dǎo)不定芽效率最高，效果最好，莖段和葉片作為外植體誘導(dǎo)率很低，確定莖尖是不定芽誘導(dǎo)的最理想材料；莖尖誘導(dǎo)的最適培養(yǎng)基為MS+ 6-BA 2.0毫克/升+ NAA 0.5 毫克/升，誘導(dǎo)率達96.7%；不定芽增殖的最適培養(yǎng)基為MS+ 6-BA 3毫克/升+ NAA 0.5毫克/升，平均增殖倍數(shù)為10.89。

關(guān)鍵詞：黑果腺肋花楸；外植體；培養(yǎng)基；誘導(dǎo)；增殖

中圖分類號： R284 文獻標識碼： A DOI編號： 10.14025/j.cnki.jlny.2017.13.020

黑果腺肋花楸，是集食用、藥用、園林綠化和生態(tài)價值于一體的珍貴樹種，適應(yīng)性強、結(jié)果早、經(jīng)濟價值高，市場前景巨大[1]。20世紀90年代，黑果腺肋花楸被引入我國，并定植于遼西地區(qū)[2]。因其傳統(tǒng)的播種、扦插繁殖困難，野生資源破壞嚴重，目前綠化需求量大，應(yīng)用組織培養(yǎng)技術(shù)可以獲取大量組培苗，促進規(guī)?；a(chǎn)，供應(yīng)市場。

藥用價值：果實及其提取物具有保健作用，對心臟病、高血壓等疾病的治療有顯著效果，普遍應(yīng)用于功能食品和醫(yī)藥工業(yè)[3]；觀賞價值：由于樹形優(yōu)美、觀賞期長，是春天觀葉、夏天看花、秋天看果的優(yōu)質(zhì)綠化樹種，可單獨種植，或者大量種植在草坪、庭院、路旁等地方[4]；生態(tài)價值：黑果腺肋花楸抗旱性較強，生長所需水分很少，在干旱地區(qū)完全可以存活，淺根系發(fā)達，吸枝萌蘗力強，對表層土壤固持力強，病蟲害少，抗風害和冰雹災(zāi)害，生命周期較長，具有良好的保持水土效果，生態(tài)穩(wěn)定能力強[5]。

1材料與方法

本研究以莖尖、莖段、葉片三種外植體為基本材料，對黑果腺肋花楸不定芽進行誘導(dǎo)培養(yǎng)。再以莖尖為外植體，分別接種到9種不同的誘導(dǎo)培養(yǎng)基上，利用莖尖為外植體，直接誘導(dǎo)獲得不定芽，將不定芽進行增殖培養(yǎng)，提高增殖系數(shù)，從而獲得大量組培苗。

2結(jié)果與分析

2.1不同外植體對不定芽誘導(dǎo)的影響

將黑果腺肋花楸莖尖、葉片及莖段分別接種到MS+ 6-BA2.0毫克/升+ NAA0.5毫克/升培養(yǎng)基中，經(jīng)誘導(dǎo)培養(yǎng)30天后，觀察并統(tǒng)計誘導(dǎo)成活的外植體個數(shù)，計算出不同外植體的誘導(dǎo)率，見表1。

從表1可以看出：莖尖對不定芽的誘導(dǎo)率最高，為93.30%，莖段對不定芽的誘導(dǎo)率較低，為43.33%，而葉片對不定芽的誘導(dǎo)率為0。

三種外植體接種后，堅持每天觀察外植體的變化情況，莖尖在接種9天后可見接種的莖尖向上生長，在基部有小的凸起為萌動的不定芽，13天后可明顯地觀察到小的不定芽；莖段在接種20天后，可見部分莖段出現(xiàn)變化；葉片接種后一直進行觀察，無明顯變化，其不定芽誘導(dǎo)率最低。由此得出，莖尖對不定芽的誘導(dǎo)率最高，為93.30%，莖尖是不定芽誘導(dǎo)的最理想材料。

2.2不同培養(yǎng)基對莖尖誘導(dǎo)成活的影響

將莖尖分別接種到9種以MS為基本培養(yǎng)附加不同植物激素種類及濃度的完全培養(yǎng)基上，在培養(yǎng)室進行誘導(dǎo)培養(yǎng)，優(yōu)選莖尖誘導(dǎo)的最佳培養(yǎng)基，觀察并記錄得到誘導(dǎo)成活率，見表2。

從表2看出，莖尖最佳的誘導(dǎo)培養(yǎng)基為MS + 6-BA 2.0 毫克/升 + NAA 0.5毫克/升，誘導(dǎo)率為93.30 %，誘導(dǎo)率最高，誘導(dǎo)效果最好。

2.3不同培養(yǎng)基對不定芽增殖的影響

經(jīng)誘導(dǎo)培養(yǎng)獲得的不定芽，再分別接種到以MS為基本培養(yǎng)基附加不同濃度6-BA和NAA配比制成的6種培養(yǎng)基上，接種情況及增殖結(jié)果，見表3。

經(jīng)增殖培養(yǎng)17天后，可觀察到不定芽增殖分化出叢生芽，培養(yǎng)至25天，繼續(xù)分苗，統(tǒng)計每個不定芽分化出的苗數(shù)，并轉(zhuǎn)接到增殖培養(yǎng)基上，進行繼2代培養(yǎng)。將誘導(dǎo)獲得的不定芽轉(zhuǎn)接至增殖培養(yǎng)基情況，見圖1；不定芽轉(zhuǎn)接后，經(jīng)增殖培養(yǎng)25天分化出叢生芽情況，見圖2。

結(jié)合表3、圖1和圖2，不定芽分別轉(zhuǎn)接到6種由不同外源激素組合的MS培養(yǎng)基中，不定芽增殖的最適培養(yǎng)基為MS+ 6-BA 3毫克/升+ NAA 0.5毫克/升，增殖倍數(shù)為10.89。

3討論

本試驗分別采取黑果腺肋花楸莖尖、葉片及莖段為外植體進行不定芽誘導(dǎo)，莖尖誘導(dǎo)率最高，而葉片誘導(dǎo)不定芽無變化，結(jié)果表示不同外植體對不同激素的選擇性很大；在相同的基本培養(yǎng)基條件下，6-BA和NAA的濃度對芽增殖效果影響很大，對于黑果腺肋花楸不定芽增殖的最佳培養(yǎng)基為MS+ 6-BA 3毫克/升+ NAA 0.5毫克/升。

參考文獻

[1]付艷.黑果腺肋花楸的應(yīng)用價值及發(fā)展前景[J]. China science and Technology R eview，2012.

[2]王鵬.歐美國家黑果腺肋花楸栽培技術(shù)研究現(xiàn)狀[J].中南林業(yè)調(diào)查規(guī)劃，2014，（01）：54-57.

[3]于雪，胡文忠，姜愛麗，陳妍竹，劉星伯.黑果腺肋花楸營養(yǎng)物質(zhì)與功效的研究進展[J].食品工業(yè)科技，2016（10）：396-400.

[4]張連生，韓文忠，姜鎮(zhèn)榮. 黑果腺肋花楸——前途廣闊的綠化新品種[J].農(nóng)業(yè)科技與信息（現(xiàn)代園林），2007，（08）：63-64.

[5]高曄華.黑果腺肋花楸組培快繁體系的研究[D].延邊大學(xué)，2013.

作者簡介：趙健竹，在讀本科生，研究方向：生物學(xué)。

通訊作者：孫曉澤，碩士，講師，研究方向：植物栽培與繁育。