產(chǎn)超廣譜β—內(nèi)酰胺酶肺炎克雷伯菌的檢測及耐藥性分析

李麗+劉丹+王佳賀

[摘要] 目的 調(diào)查中國醫(yī)科大學(xué)附屬盛京醫(yī)院（以下簡稱“我院”）住院患者產(chǎn)超廣譜β-內(nèi)酰胺酶（ESBLs）肺炎克雷伯菌的臨床分布及耐藥性，為臨床醫(yī)師抗感染治療提供依據(jù)。 方法 收集2015年1～12月我院住院患者送檢的各類標(biāo)本，采用VITEK 2 Compact進(jìn)行細(xì)菌鑒定和藥敏試驗，按照CLSI推薦的方法進(jìn)行ESBLs初步篩選和表型確證試驗，并對陽性患者耐藥性進(jìn)行分析。 結(jié)果 共檢出產(chǎn)ESBLs肺炎克雷伯菌302株，其中痰液標(biāo)本中檢出最多，占38.74%，其次是全血和尿液，分別占28.81%和13.91%；科室分布以兒科和普通外科為主，分別占53.97%和7.95%。產(chǎn)ESBLs肺炎克雷伯菌對氨芐西林、頭孢唑啉、哌拉西林、頭孢曲松、頭孢噻肟的耐藥率均在95%以上，而對碳青霉烯類藥物的耐藥率較低，低于3%。 結(jié)論 住院患者產(chǎn)ESBLs肺炎克雷伯菌的耐藥率高，治療難度大，醫(yī)師應(yīng)根據(jù)藥敏試驗結(jié)果加強對抗生素的合理使用。

[關(guān)鍵詞] 肺炎克雷伯菌；超廣譜β-內(nèi)酰胺酶；耐藥性；病原菌

[中圖分類號] R969.3 [文獻(xiàn)標(biāo)識碼] A [文章編號] 1673-7210（2017）05（b）-0103-04

[Abstract] Objective To analyze the clinical distribution and drug resistance of extended-spectrum beta-lactamase （ESBLs）-producing Klebsiella pneumoniae in hospitalized patients in Shengjing Hospital Affiliated to China Medical University （"our hospital" for short）， in order to provide references for therapy of infections. Methods ESBLs-producing Klebsiella pneumoniae isolated in our hospital from January to December 2015 were collected. The bacteria identification and drug sensitivity test were performed by the VITEK 2 Compact. The ESBLs preliminary screening and the phenotypic confirmatory test were taken according to the guideline of CLSI， and at the same time， the results of the drug sensitivity test were analyzed. Results 302 strains of ESBLs-producing Klebsiella pneumoniae were isolated， which were mostly isolated from sputum samples （38.74%）， followed by blood （28.81%） and urine （13.91%）. The bacteria were mainly distributed in Paediatrics Department （53.97%） and General Surgery Department （7.95%）. The drug resistances of ESBLs-producing Klebsiella pneumoniae to Ampicillin， Cefazolin， Piperacillin， Ceftriaxone， Cefotaxime in hospitalized patients were more than 95%， and the resistance rate to carbapenemes was lower， less than 3%. Conclusion The isolated ESBLs-producing Klebsiella pneumoniae in hospitalized patients are highly resistant to the commonly used antibiotics， and the treatment is difficult. Therefore， the drug sensitive test should be strengthened to direct clinical rational use of antibiotics.

[Key words] Klebsiella pneumoniae； Extended spectrum beta-lactamases； Drug resistance； Pathogens

肺炎克雷伯菌廣泛分布于自然界，是引起呼吸道感染重要的條件致病菌，其臨床分離率在革蘭陰性桿菌中居第3位[1-2]。產(chǎn)生超廣譜β-內(nèi)酰胺酶（extended-spectrum beta-lactamase，ESBLs）是肺炎克雷伯菌的主要耐藥機制之一[3]，由其引起的感染在兒童及老年患者、免疫力低下的患者以及接受各種侵入性診療操作的重癥患者中發(fā)病率高[4]。隨著抗菌藥物的廣泛使用，尤其是第三代頭孢菌素類藥物在臨床上的大量使用，使得產(chǎn)ESBLs肺炎克雷伯菌的耐藥性不斷上升[5]。因此，本研究收集2015年1～12月中國醫(yī)科大學(xué)附屬盛京醫(yī)院（以下簡稱“我院”）住院患者送檢的標(biāo)本的培養(yǎng)結(jié)果，對其產(chǎn)ESBLs肺炎克雷伯菌的感染情況及其耐藥特點進(jìn)行回顧性分析，為臨床合理選擇抗產(chǎn)ESBLs肺炎克雷伯菌的藥物提供參考依據(jù)，現(xiàn)報道如下：

1 資料與方法

1.1 一般資料

收集我院住院患者的痰液、全血、尿液及分泌物等各類臨床感染標(biāo)本，同一患者相同類型標(biāo)本中多次分離的同一菌株陽性標(biāo)本按一例計算。質(zhì)控菌株為肺炎克雷伯菌ATCC700603，購自原衛(wèi)生部臨床檢驗中心。

1.2 方法

1.2.1 細(xì)菌學(xué)鑒定及藥敏實驗 送檢樣本均按照《全國臨床檢驗操作規(guī)程》[6]的操作要求對各種臨床標(biāo)本進(jìn)行培養(yǎng)分離，采用法國生物梅里埃公司的全自動細(xì)菌鑒定和Vitek2 Compact藥敏分析系統(tǒng)進(jìn)行分析鑒定和藥敏試驗。操作方法和結(jié)果評價嚴(yán)格按照美國臨床實驗室標(biāo)準(zhǔn)化委員會（CLSI）標(biāo)準(zhǔn)和指南[7]進(jìn)行。

1.2.2 ESBLs檢測 根據(jù)CLSI推薦的ESBLs初步篩選和表型確證試驗檢測[8]。

2 結(jié)果

2.1 我院住院患者產(chǎn)ESBLs肺炎克雷伯菌的標(biāo)本來源分布

經(jīng)培養(yǎng)共檢出產(chǎn)ESBLs肺炎克雷伯菌302株，主要來源于痰液、全血、尿液，分別占38.74%、28.81%、13.91%。見表1。

2.2 我院住院患者產(chǎn)ESBLs肺炎克雷伯菌的科室分布

我院住院患者產(chǎn)ESBLs肺炎克雷伯菌主要分布在兒科、普通外科及重癥監(jiān)護(hù)病房，分別占53.97%、7.95%、7.29%。見表2。

2.3 我院住院患者產(chǎn)ESBLs肺炎克雷伯菌對常用抗菌藥物的耐藥性

我院住院患者產(chǎn)ESBLs肺炎克雷伯菌對氨芐西林、頭孢唑啉、哌拉西林、頭孢曲松、頭孢噻肟的耐藥率較高，分別為100.00%、100.00%、98.72%、97.32%、96.16%，對厄他培南、亞胺培南、美羅培南、頭孢替坦、阿米卡星的敏感率較高，分別為100.00%、98.02%、97.44%、97.30%、95.70%。見表3。

3 討論

ESBLs由質(zhì)粒介導(dǎo)，能水解青霉素類、單酰胺類及頭孢菌素類等抗菌藥物[9]，其特點是能使細(xì)菌對多種類型的β-內(nèi)酰胺類抗菌藥物產(chǎn)生耐藥性[10]，具有作用底物廣、易播散、數(shù)量種類多、個體差異大的特點[11-12]。近年來，隨著臨床上廣泛使用β-內(nèi)酰胺類抗生素治療各類感染，使得革蘭陰性菌中的許多菌株對抗生素類藥物的耐藥性越發(fā)突出，以產(chǎn)ESBLs菌耐藥性最為顯著，尤其是產(chǎn)ESBLs肺炎克雷伯菌具有較高的多重耐藥性和交叉耐藥性，容易引起暴發(fā)和流行[13-15]，給臨床治療帶來極大困擾。

分析本研究我院住院患者中檢出的產(chǎn)ESBLs肺炎克雷伯菌標(biāo)本分布可見，302株肺炎克雷伯菌分離自臨床的各類標(biāo)本，其中以痰液中最多，占38.74%，表明產(chǎn)ESBLs肺炎克雷伯菌主要引起呼吸系統(tǒng)感染；其次為全血和尿液，分別占28.81%和13.91%，說明產(chǎn)ESBLs肺炎克雷伯菌亦容易引起血流感染和尿路感染?？剖曳植挤矫?，我院住院患者產(chǎn)ESBLs肺炎克雷伯菌主要分布在兒科，占53.97%，說明產(chǎn)ESBLs肺炎克雷伯菌容易引起兒童院內(nèi)感染，與何麗蕓等[16]報道一致；其次為普通外科、重癥監(jiān)護(hù)病房、康復(fù)科和呼吸內(nèi)科等科室，分別占7.95%、7.29%、5.63%和5.63%，這些科室患者抵抗力較低，住院時間長，經(jīng)驗性應(yīng)用三代頭孢菌素較多，說明產(chǎn)ESBLs肺炎克雷伯菌是引起院內(nèi)感染的重要病原菌，應(yīng)引起醫(yī)護(hù)人員的重視。這與孫紅等[17]報道的多見于重癥監(jiān)護(hù)病房和感染科病房略有差異，可能與各臨床科室感染特點不同、地區(qū)差異以及標(biāo)本的送檢等因素有關(guān)。

從產(chǎn)ESBLs肺炎克雷伯菌對臨床常用的抗菌藥物耐藥率的統(tǒng)計結(jié)果中發(fā)現(xiàn)：產(chǎn)ESBLs肺炎克雷伯菌對氨芐西林、哌拉西林等β-內(nèi)酰胺類藥物耐藥，而對亞胺培南、美羅培南、厄他培南等碳青霉烯類藥物敏感。與2013年孫立群等[18]報道的產(chǎn)ESBLs肺炎克雷伯菌對亞胺培南和美羅培南的耐藥率均為0相比，我院產(chǎn)ESBLs肺炎克雷伯菌對亞胺培南和美羅培南的耐藥率較高，分別為0.66%和2.56%，應(yīng)引起臨床醫(yī)生的關(guān)注。產(chǎn)ESBLs肺炎克雷伯菌對碳青霉烯類抗菌藥物敏感與碳青霉烯類藥物特殊的分子結(jié)構(gòu)有關(guān)，碳青霉烯類的β-內(nèi)酰胺環(huán)較小，容易進(jìn)入細(xì)菌的微孔蛋白通道，同時，碳青霉烯類藥物有特異的反式結(jié)構(gòu)，兩者相互作用使其對β-內(nèi)酰胺酶高度穩(wěn)定[19-21]。此外，分析結(jié)果顯示我院產(chǎn)ESBLs肺炎克雷伯菌對β-內(nèi)酰胺酶抑制劑藥物阿莫西林/克拉維酸、氨芐西林/舒巴坦、哌拉西林/他唑巴坦的耐藥率分別為27.50%、85.72%、7.29%，說明ESBLs可以被舒巴坦、他唑巴坦等β-內(nèi)酰胺酶抑制劑所抑制[22]。我院產(chǎn)ESBLs肺炎克雷伯菌對慶大霉素的耐藥率為51%，對左氧氟沙星的耐藥率為14.24%，說明產(chǎn)ESBLs肺炎克雷伯菌對喹諾酮類和氨基糖苷類抗菌藥物亦有一定的耐藥性，與其質(zhì)粒攜帶的耐藥基因的多重耐藥性有關(guān)[23]。因此，在臨床上對產(chǎn)ESBLs肺炎克雷伯菌引起感染的治療應(yīng)首選敏感的碳青霉烯類抗菌藥物，根據(jù)藥敏結(jié)果慎重選用β-內(nèi)酰胺酶抑制劑、氨基糖苷類和喹諾酮類，而大多數(shù)β-內(nèi)酰胺類和第一、二代頭孢菌素類對其無效。

綜上所述，住院患者產(chǎn)ESBLs肺炎克雷伯菌菌株檢出率比較高，引起的院內(nèi)感染不斷增加，并且抗菌藥物耐藥類型眾多。在臨床研究中，應(yīng)對產(chǎn)ESBLs肺炎克雷伯菌株進(jìn)行嚴(yán)密監(jiān)測，根據(jù)細(xì)菌培養(yǎng)及藥敏試驗結(jié)果耐藥情況，選擇合理的抗菌藥物，可有效預(yù)防醫(yī)院感染。

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（收稿日期：2017-01-10 本文編輯：程 銘）