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    小兒清肺止咳口服液對煙霧誘發(fā)的急性支氣管炎大鼠的血清IL-4及IFN-γ水平的影響

    2017-06-19 19:27:02魏朝霞
    中國婦幼健康研究 2017年5期
    關(guān)鍵詞:清肺口服液支氣管炎

    李 敏,魏朝霞

    (1.山東省東營市廣饒縣中醫(yī)院兒科,山東 東營 257300;2.東營勝利油田中心醫(yī)院兒科,山東 東營 257300)

    小兒清肺止咳口服液對煙霧誘發(fā)的急性支氣管炎大鼠的血清IL-4及IFN-γ水平的影響

    李 敏1,魏朝霞2

    (1.山東省東營市廣饒縣中醫(yī)院兒科,山東 東營 257300;2.東營勝利油田中心醫(yī)院兒科,山東 東營 257300)

    目的 分析小兒清肺止咳口服液對煙霧誘發(fā)的急性支氣管炎大鼠的血清白介素-4(IL-4)及干擾素-γ(IFN-γ)水平的影響。方法 2013年3月至2015年3月選取山東省東營市廣饒縣中醫(yī)院實驗室的120只大鼠作為研究對象,所有的大鼠均接受煙霧刺激從而制作急性支氣管炎的模型,采取隨機數(shù)字表法分為試驗組和對照組,每組各60只,試驗組胃灌注小兒清肺止咳口服液,對照組則胃灌注同等劑量的生理鹽水,對比兩組大鼠血清中IL-4、IFN-γ水平的變化情況以及大鼠的存活情況。結(jié)果 試驗組與觀察組治療后血清中IL-4濃度水平較治療前相比均明顯提高(t值分別為6.56、4.34,均P<0.05)。但試驗組血清中IL-4濃度水平較對照組相比提高更加顯著(t=5.92,P=0.023<0.05)。試驗組與觀察組治療后血清中IFN-γ濃度水平較治療前相比均明顯降低(t值分別為7.56、6.11,均P<0.05)。但試驗組血清中IFN-γ濃度水平較對照組相比提高更加顯著(t=7.18,P<0.05)。試驗組大鼠的生存率為96.67%,對照組大鼠的生存率為75.00%,組間相比具有顯著性差異(χ2=6.56,P<0.05)。結(jié)論 小兒清肺止咳口服液對治療煙霧誘發(fā)的急性支氣管炎大鼠可顯著增加血清中IL-4的含量,降低血清中IFN-γ的含量,在調(diào)節(jié)細(xì)胞因子方面發(fā)揮一定作用,具有積極的臨床價值,可以作為一種理想方法應(yīng)用于臨床工作中。

    小兒清肺止咳口服液;煙霧誘發(fā)的急性支氣管炎大鼠;血清白介素-4;血清擾素-γ

    小兒急性支氣管炎屬于兒童時期常見的一種呼吸系統(tǒng)性疾病,尤其多見于3歲以下的嬰幼兒,且近年來,小兒急性支氣管炎的發(fā)病率呈逐年增長趨勢。小兒急性支氣管炎主要的臨床表現(xiàn)為咳嗽、咳痰、發(fā)熱等,但是其預(yù)后大多數(shù)會恢復(fù)正常。但是若患兒的家屬未及時送往治療、醫(yī)院治療不當(dāng)、生活飲食照顧不合適等均會導(dǎo)致小兒的病情反復(fù)發(fā)作,加之患兒的年齡較小、自身的免疫能力較低可能會進(jìn)一步加重小兒的病情,嚴(yán)重影響患兒生長發(fā)育,在一定程度上可能會增加患兒成年后肺炎發(fā)病的機率,而此觀點值得臨床醫(yī)師對其進(jìn)行探討[1]。山東省東營市廣饒縣中醫(yī)院現(xiàn)針對小兒清肺止咳口服液的研究應(yīng)用于120只急性支氣管炎的大鼠模型中,對比其臨床療效,現(xiàn)將結(jié)果總結(jié)報告如下。

    1資料與方法

    1.1一般資料

    2013年3月至2015年3月選取山東省東營市廣饒縣實驗室的120只大鼠作為研究對象,所有的大鼠均接受煙霧刺激從而制作急性支氣管炎的模型,采取隨機數(shù)字表法分為試驗組和對照組,每組各60只。試驗組中雄鼠有29只,雌鼠31只,年齡在4至5周,平均年齡為(4.4±2.3)周,平均體重在(21.2±2.1)g。對照組中雄鼠有31只,雌鼠29只,年齡在4至5周,平均年齡為(4.5±1.9)周,平均體重在(22.1±2.2)g。

    1.2治療方法

    1.2.1試驗組

    從實驗室取回大鼠后正常飼養(yǎng)1~2天,觀察無異常者開始進(jìn)行模型的制作。參照《使用中醫(yī)動物模型學(xué)》,對大鼠使用煙熏刺激的方法進(jìn)行模型的制作。主要使用煙草進(jìn)行煙熏,每次煙熏刺激的時間為30~45min。每天早晚各1次,持續(xù)1周時間。模型制作成功的表現(xiàn)為大鼠開始精神不振、體重下降、咳嗽、呼吸急促、扎堆聚集等,并從大鼠氣管處取病理以確定急性支氣管炎(圖1)。急性支氣管炎模型制作后,試驗組大鼠開始胃灌注小兒清肺止咳口服液,每天灌注1次,持續(xù)灌注2周。停止治療后,測量大鼠的體重,摘除其眼球,使用無菌的試劑管采集血液,立即送往實驗室進(jìn)行一系列操作,以便測量血清中白介素-4(IL-4)及干擾素-γ(IFN-γ)濃度水平的變化情況。

    圖1 大鼠氣管處病理組織切片

    Fig.1 Pathological biopsy of rat trachea

    1.2.2對照組

    模型制作過程與試驗組相同。急性支氣管炎模型制作后,對照組大鼠開始胃灌注等量的生理鹽水,每天灌注1次,持續(xù)灌注2周。采集標(biāo)本與測量方法同試驗組。

    1.3觀察指標(biāo)

    觀察并對比兩組大鼠血清中IL-4、IFN-γ水平的變化情況以及大鼠的3個月生存率。正常情況下血清中IL-4的濃度水平為(44.56±1.85)pg/mL,急性支氣管炎時血清中IL-4的濃度水平開始下降并低于正常值,治療好轉(zhuǎn)后濃度開始增加并高于正常值。正常情況下血清中IFN-γ的濃度水平為(140.23±5.12)pg/mL,急性支氣管炎時IFN-γ的濃度開始升高并高于正常值,治療好轉(zhuǎn)后開始下降并低于正常值。

    1.4統(tǒng)計學(xué)方法

    采用SPSS 18.0統(tǒng)計軟件對本次研究所取得的數(shù)據(jù)進(jìn)行分析,計量資料采取t檢驗,以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差的形式對數(shù)據(jù)進(jìn)行表示,計數(shù)資料采取χ2檢驗,以P<0.05代表有統(tǒng)計學(xué)意義。

    2結(jié)果

    2.1兩組大鼠血清中白介素-4濃度水平情況的對比

    試驗組與觀察組治療前血清中IL-4濃度水平無明顯差異(P>0.05),試驗組與觀察組治療后血清中IL-4濃度水平較治療前相比均明顯提高,但試驗組血清中IL-4濃度水平較對照組相比提高更加顯著(P=0.023<0.05),見表1。

    2.2兩組大鼠血清中干擾素-γ濃度水平情況的對比

    試驗組與觀察組治療前血清中IFN-γ濃度水平無明顯差異(P>0.05),試驗組與觀察組治療后血清中IFN-γ濃度水平較治療前相比均明顯降低,但試驗組血清中IFN-γ濃度水平較對照組相比降低更加顯著(P<0.05),見表2。

    2.3兩組大鼠生存率對比

    試驗組大鼠的生存率為96.67%,對照組大鼠的生存率為75.00%,試驗組大鼠的生存率明顯高于對照組(χ2=6.56,P<0.05)。

    組別數(shù)量(n)治療前治療后tP試驗組6037.45±1.7950.32±1.936.560.003對照組6037.53±1.8740.33±1.854.340.010t1.315.92P0.780.023

    組別數(shù)量(n)治療前治療后tP試驗組60164.27±5,72139.21±5.327.560.003對照組60163.24±5.71152.17±6.156.110.012t1.287.18P0.920.009

    3討論

    3.1煙霧誘發(fā)的急性支氣管炎作用機制

    煙霧誘發(fā)的急性支氣管動物模型的建立可作為開展本次研究的基礎(chǔ),目前較為常用的方法包括二氧化硫吸入法、脂多糖吸入法、混合煙霧吸入法等。但給予吸入過量的二氧化硫易造成大鼠呼吸道粘膜的損傷,嚴(yán)重時可加重細(xì)胞退變及死亡,導(dǎo)致呼吸道急性炎癥的發(fā)生而致模型死亡。而給予脂多糖吸入法雖在一定程度上避免了對氣道粘膜造成的損傷,但易引起急性肺損傷的出現(xiàn),安全性較差,為此,我們采用了混合煙霧吸入法建立急性支氣管炎大鼠模型。其作用機制可總結(jié)為:當(dāng)混合煙霧進(jìn)入大鼠呼吸道內(nèi)后可誘發(fā)氣道及支氣管腺體的增生肥大、粘膜柱狀上皮細(xì)胞纖毛損傷,引起氣道壁結(jié)構(gòu)的改變,發(fā)生呼吸道遠(yuǎn)段擴大或部分狹窄等癥狀,并伴隨發(fā)生炎性細(xì)胞浸潤、炎性標(biāo)志物水平的變化等。本研究為煙霧誘發(fā)支氣管炎癥,與通常感染導(dǎo)致的支氣管炎有較大區(qū)別。

    3.2白介素-4及干擾素-γ在急性支氣管炎發(fā)病中的作用意義

    IL-4主要由Th2分泌,具有多種生物學(xué)活性,可以加快內(nèi)皮因子的表達(dá),并加快大量炎癥細(xì)胞向炎癥組織外移動并在一定程度上控制炎癥的發(fā)生[2-3]。IL-4在促進(jìn)T細(xì)胞分化的方面發(fā)揮一定的作用。IFN-γ是一種促進(jìn)炎癥發(fā)生的細(xì)胞因子,可以快速活化單核巨噬細(xì)胞,進(jìn)而激活T細(xì)胞[4-5]。同時,IFN-γ可以明顯增強腫瘤壞死因子的介導(dǎo)作用,并在一定程度上加重支氣管的炎癥反應(yīng)。臨床上急性支氣管炎的治療方面主張使用抗生素進(jìn)行控制,并加上相應(yīng)的對癥治療。但是抗生素容易發(fā)生耐藥性、再次感染以及臟器損傷等不良作用,止咳類藥物也會產(chǎn)生一定的不良反應(yīng),同時停藥后較易再次發(fā)病[6]。故而,中醫(yī)藥治療本病已然受到越來越多的重視。小兒清肺止咳口服液的主要配方為黃岑、大青葉、桑白皮、五味子、甘草、射干等[7]。

    3.3小兒清肺止咳口服液的臨床作用功效

    本次研究結(jié)果顯示,治療后試驗組血清中IL-4的濃度水平明顯高于對照組,試驗組血清中IFN-γ的濃度水平明顯低于對照組,結(jié)果提示小兒清肺止咳口服液在調(diào)節(jié)急性支氣管炎模型體內(nèi)細(xì)胞因子方面具有顯著的療效。大量臨床研究結(jié)果顯示,小兒清肺止咳口服液的藥品配方比較嚴(yán)謹(jǐn),藥品組合符合醫(yī)學(xué)倫理要求,根據(jù)患兒咳嗽咳痰的發(fā)病原理,方正切合,突顯了中醫(yī)中藥在辨證治療方面發(fā)揮的優(yōu)勢作用。此外,通過現(xiàn)代藥理學(xué)的大量研究,小兒清肺止咳口服液中的多種中藥成分具有抵抗病原微生物、清熱解毒、止咳化痰、緩解呼吸困難等作用[8]。黃岑與大青葉味苦、性寒,可以清熱、解毒、去火。桑白皮味甘,歸肺經(jīng),可以清肺、止咳。五味子性溫,可以補氣。射干在清熱、消炎等方面發(fā)揮作用。

    綜上所述,小兒清肺止咳口服液對治療小兒急性支氣管炎具有較好的療效,可以顯著增加血清中IL-4的含量,降低血清中IFN-γ的含量,在調(diào)節(jié)細(xì)胞因子方面發(fā)揮一定作用,具有積極的臨床價值,可以作為一種理想方法應(yīng)用于臨床工作中。

    [1]Jiang D X, Chen Y S, Hou X T,etal. Influence of Paeonia lactiflora roots extract on cAMP-phosphodiesterase activity and related anti-inflammatory action[J]. Journal of Ethnopharmacology,2011,137(1):914-920.

    [2]王有鵬,景偉超,譚杰軍.兒童支原體肺炎IFN-γ、IL-4水平中西醫(yī)研究現(xiàn)狀[J].中醫(yī)藥學(xué)報,2014,42(04):133-134.

    [3]Carroll W D, Wildhaber J, Brand P L. Parent misperception of control in childhood/ adolescent asthma: the Room to Breathe survey[J]. Eur Respir J,2012,39(39):90-96.

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    [5]Kwong K Y, Eghrari-Sabet J S, Mendoza G R,etal. The benefits of specific immunoglobulin E testing in the primary care setting.[J]. American Journal of Managed Care,2011,17(suppl 17):447-459.

    [6]孫洪德,于曉芳,黃嚴(yán),等.川貝清肺糖漿對支原體肺炎患兒血清INF-γ、IL-2的影響[J].中國實用醫(yī)藥,2012,7(16):177-178.

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    [專業(yè)責(zé)任編輯:侯 偉]

    Influence of pediatric clearing lung cough oral liquid on serum levels of IL-4 and IFN-γ in rats with smoke induced acute bronchitis

    LI Min1, WEI Zhao-xia2

    (1.DepartmentofPediatrics,GuangraoCountyHospitalofTraditionalChineseMdicineinDongying,ShandongDongying257300,China;2.DepartmentofPediatrics,DongyingCentralHospitalofShengliOilField,ShandongDongying257300,China)

    Objective To explore and analyze the influence of pediatric clearing lung cough oral liquid on serum levels of IL-4 and IFN-γ in rats with smoke induced acute bronchitis. Methods Totally 120 rats were selected as research objects from laboratory of Guangrao County Hospital of Traditional Chinese Medicine in Dongying, and all the rats accepted smoke stimulation to make models of acute bronchitis. They were divided into experimental group and control group according to random number table method with 60 in each group. In the experimental group pediatric lung cough oral liquid was perfused, while equal dose of normal saline was given the control group. The changes of serum IL-4 and IFN-γ levels as well as the survival were compared between two groups. Results In both groups serum IL-4 levels rose obviously after treatment (tvalue was 6.56 and 4.34, respectively, bothP<0.05), but the increase of serum IL-4 levels in the experimental group was greater than the control group (t=5.92,P=0.023<0.05). Serum concentrations of IFN-γ of two groups increased after treatment (tvalue was 7.56 and 6.11, respectively, bothP<0.05), but the increase of IFN-γ levels was greater in the experimental group than the control group (t=7.18,P<0.05). The survival rate was 96.67% and 75.00% in the experimental group and the control group, respectively, and the difference between them was significant (χ2=6.56,P<0.05).Conclusion The pediatric clearing lung cough oral liquid has good curative effect on enhancing serum IL-4 level and reducing concentration of serum IFN-γ in rats with smoke induced acute bronchitis. It plays a role in regulating cell factor and has positive clinical value, so it can be used as a kind of ideal method in clinical work.

    pediatric clearing lung cough oral liquid; rats with smoke induced acute bronchitis; serum IL-4; serum IFN-γ

    2015-05-12

    李 敏(1977-),女,主治醫(yī)師,主要從事兒科臨床醫(yī)療工作。

    魏朝霞,副主任醫(yī)師。

    10.3969/j.issn.1673-5293.2017.05.012

    R725.6

    A

    1673-5293(2017)05-0524-02

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