病毒性腦炎患兒腦脊液和血清中NSE、CK-BB、LDH同工酶的臨床分析

許曉琳，李 琛，孫玉敏

(1.滄州醫(yī)學高等?？茖W校，河北 滄州061001；2.滄州市中心醫(yī)院，河北 滄州061000)

病毒性腦炎患兒腦脊液和血清中NSE、CK-BB、LDH同工酶的臨床分析

許曉琳1，李 琛2，孫玉敏1

(1.滄州醫(yī)學高等?？茖W校，河北 滄州061001；2.滄州市中心醫(yī)院，河北 滄州061000)

目的 了解輕、重度病毒性腦炎患兒腦脊液和血清中神經(jīng)元特異性烯醇化酶(NSE)、腦型肌酸激酶同功酶(CK-BB)、乳酸脫氫酶(LDH)同工酶的變化。方法 回顧性分析2010年1月至2015年12月滄州市中心醫(yī)院收治的30例病毒性腦炎重癥患兒、30例輕癥患兒和30例排除顱內感染的偏頭痛患兒，并對其腦脊液和血清中NSE、CK-BB、LDH同工酶進行檢測，采用多因素方差分析進行多組間均數(shù)的分析及比較。結果 在血清分析中，三組患兒NSE、CK-BB、LDH同工酶檢測結果有統(tǒng)計學差異(F值分別為168.62、73.82和27.08，均P<0.01)；在腦脊液分析中，三組患兒NSE、CK-BB、LDH同工酶檢測結果也有統(tǒng)計學差異(F值分別為291.72、891.83和60.544，均P<0.01)。結論 病毒性腦炎患兒腦脊液和血清中NSE、CK-BB、LDH變化可作為診斷病毒性腦炎及評估病情輕重的臨床指標，可廣泛應用于臨床。

病毒性腦炎；神經(jīng)元特異性烯醇化酶；腦型肌酸激酶同功酶；乳酸脫氫酶

病毒性腦炎是兒科臨床中較為常見的神經(jīng)系統(tǒng)感染疾病之一，為了準確診斷病毒性腦炎，除卻有禁忌癥的患兒之外，疑似病毒性腦炎的患兒均需行腰椎穿刺，留取患兒腦脊液進行腦脊液常規(guī)檢測、細胞形態(tài)學檢測、生化檢測及病原學檢測[1-2]。

本研究對2010年1月至2015年12月入住滄州市中心醫(yī)院的60例病毒性腦炎患兒(30例重癥患兒和30例輕癥患兒)及30例排除顱內感染的偏頭痛患兒的腦脊液和血清中神經(jīng)元特異性烯醇化酶(neuron specific enolization enzymes, NSE)、腦型肌酸激酶同功酶(creatine kinaes BB isozyme, CK-BB)、乳酸脫氫酶(Lactate dehydrogenase,LDH)同工酶檢測結果進行回顧性分析，現(xiàn)報告如下。

1 研究對象與方法

1.1研究對象

隨機選取2010年1月至2015年12月之間滄州市中心醫(yī)院60例病毒性腦炎患兒及30例排除顱內感染的偏頭痛患兒。

90例患兒中男性患兒46例，女性患兒44例，年齡在2歲9個月至14歲3個月之間，平均年齡(7.18±3.03)歲，患兒入院治療距離發(fā)病時間為2～9天，平均為(5.11±1.56)天。

1.2病例分組

將90例頭痛患兒分為重癥病毒性腦炎患兒組(30例)、輕癥病毒性腦炎患兒組(30例)及排除顱內感染偏頭痛患兒組(30例)。三組患兒性別、年齡等無統(tǒng)計學差異(P>0.05)，均具有可比性。

60例病毒性腦炎患兒根據(jù)臨床表現(xiàn)和腦電圖診斷結果分為重癥病毒性腦炎患兒組和輕癥病毒性腦炎患兒組，其中發(fā)熱患兒21例(35%)，嘔吐患兒13例(21.7%)，頭痛患兒16例(26.7%)，驚厥患兒6例(10%)，精神差或嗜睡患兒3例(5%)，昏迷患兒1例(1.7%)。診斷標準參照《兒科學》(第8版)病毒性腦炎的診斷標準[3]。重癥病毒性腦炎診斷標準如下：①持續(xù)高熱不退；②持續(xù)驚厥或頻繁抽搐；③表現(xiàn)有昏迷、煩躁等意識障礙；④有精神異常行為、肢體癱瘓等大腦皮質受損的表現(xiàn)；⑤腦干顱神經(jīng)或皮質下神經(jīng)損害；⑥有持續(xù)或者嚴重的腦疝、顱內壓升高。重癥組患兒的腦脊液結果均符合以上標準的三個條件。無以上表現(xiàn)者為輕癥組患兒。本次研究所有患兒家屬均同意且簽署知情同意書，并符合醫(yī)院倫理委員會規(guī)定。

1.3 研究方法

入院當天或入院后第二天清晨抽取患兒外周靜脈血2mL并離心，取其血清置于-20℃的冰箱保存，用于常規(guī)的生化檢測和LDH檢測。LDH檢測應用全自動生化儀進行； CK-BB測定采用免疫抑制法進行，并應用美國ALD公司生產(chǎn)、上海豐翔生物科技有限公司提供的CK-BB酶聯(lián)免疫試劑盒，應用Autobio 實驗酶標儀對CK-BB的OD值進行檢測；NSE測定采用雙抗體夾心酶標免疫技術，應用羅氏公司提供的Cobas e411化學發(fā)光檢測儀及試劑進行。測定步驟均嚴格按試劑盒說明書。

1.4 統(tǒng)計學方法

2 結果

2.1血清中各因子水平

在各患兒的血清中，檢測到各患兒NSE、CK-BB及LDH水平，重癥病毒性腦炎、輕癥病毒性腦炎及排除顱內感染有偏頭痛的患兒之間比較有統(tǒng)計學差異(P<0.01)。

分組例數(shù)(n)NSE(ng/mL)CK-BB(U/L)LDH(U/L)重癥病腦患兒3012.92±2.0010.41±3.35382.86±111.78輕癥病腦患兒309.66±2.067.89±1.57375.31±96.70偏頭痛患兒304.55±1.143.62±0.79234.88±35.25F168.62073.82227.076P<0.01<0.01<0.01

2.2 腦脊液中各因子水平

在各患兒腦脊液中檢測的NSE、CK-BB及LDH水平，重癥病毒性腦炎、輕癥病毒性腦炎及排除顱內感染有偏頭痛的患兒之間比較有統(tǒng)計學差異(P<0.01)。

Table 2 Comparison of levels of each factor in cerebrospinal ±S)

3 討論

3.1病毒性腦炎診斷現(xiàn)狀

病毒性腦炎是由多種病毒引起的腦實質與腦膜的炎癥，在兒科臨床上較為常見，兒童發(fā)生病毒性腦炎的高發(fā)年齡是2～5 歲，具有較高的發(fā)病率且近年來呈逐年上升的趨勢，主要侵犯患兒大腦、小腦、腦干、脊髓及腦膜等，其病理改變主要為腦組織出現(xiàn)水腫、軟化或壞死，目前已引起臨床的廣泛關注[4]。新生兒應注意單純皰疹病毒、巨細胞病毒及腸道病毒，嬰兒及兒童應注意皰疹病毒及腸道病毒感染[5]。

臨床上關于兒童病毒性腦炎的診斷主要依賴于相關的腦損傷癥狀和腦膜刺激征癥狀、體征來判斷，腦電圖檢查是一種無創(chuàng)傷性檢查，對患兒疾病的發(fā)展狀況、治療效果、預后情況等都能進行很好的評估，腦脊液和生化異常為其金標準。

兒童由于發(fā)育不健全，機體的免疫力低下，容易受到病毒攻擊，導致疾病發(fā)生。病毒入侵體內后，繼而侵入到神經(jīng)中樞，直接導致腦組織的損傷[6]。病毒性腦炎的早期癥狀通常表現(xiàn)為非典型性，臨床的誤診率和漏診率均比較高，輕者會導致神經(jīng)功能損傷等后遺癥，重者會威脅患者的生命安全直接導致死亡。因此及時、早期、有效的診斷方法對于病毒性腦炎患者有非常重要的臨床意義。

3.2 神經(jīng)元特異性烯醇化酶在病毒性腦炎診斷中的意義

NSE屬于神經(jīng)元特異性血清標記物，是糖酵解途徑的關鍵酶，在糖酵解途徑的過程中能夠催化磷酸烯醇式丙酮酸和2-磷酸甘油酸的互相轉化。血清NSE水平的變化能夠反映神經(jīng)元細胞的損傷狀況[7]。

NSE在診斷顱腦損傷及反應顱腦損傷的嚴重程度中有著重要的臨床意義，其原因是因為顱腦損傷時神經(jīng)髓鞘崩解和神經(jīng)元壞死會導致胞質中的NSE通過受損的血-腦屏障進入患者血液中，造成血清中NSE升高。NSE作為大腦神經(jīng)元特異性損傷的重要標志物，能夠較為敏感和特異地反應出大腦的損傷及大腦損傷的嚴重程度。

腦脊液NSE作為病毒性腦炎的早期臨床診斷指標之一，對于辨別病毒性腦炎重癥型和輕癥型的發(fā)病程度有著重要意義。顱腦損傷愈嚴重，血-腦屏障受損的程度愈高，神經(jīng)元所釋放到血液中的NSE愈多，血清中NSE的含量也愈高[8]。

3.3 肌酸激酶在病毒性腦炎中的診斷意義

肌酸激酶是與肌肉收縮、細胞內能量轉運、三磷酸腺苷的再生有直接關系的一種重要激酶，肌酸激酶的主要功能是催化ATP與肌酸之間高能磷酸鍵的可逆性轉移，為機體的運輸系統(tǒng)和肌肉收縮提供能量來源，肌酸激酶有三種，CK-MB為心肌型，CK-MM為骨骼型，CK-BB為腦型，通常存在于動物的心臟、骨骼肌以及腦組織中，健康人血清中的肌酸激酶主要以骨骼型肌酸激酶為主，大約占人體肌酸激酶總量的95%，心肌型肌酸激酶很少，一般占人體肌酸激酶總量的5%，腦型肌酸激酶在健康人血清中含量極少，甚至檢測不到。CK-BB存在于大腦的腦神經(jīng)元細胞和星形膠質細胞中，是神經(jīng)元損傷的一種敏感性標志物，對于判斷大腦神經(jīng)元的損傷有著比較高的特異性，CK-BB在各種神經(jīng)系統(tǒng)疾病時升高的程度與腦損傷程度以及預后之間也存在著密切的關聯(lián)性。正常情況下，CK-BB在人體血液中的濃度非常微小，腦脊液中CK-BB的含量也非常低，當腦部組織出現(xiàn)病變導致腦細胞水腫、受傷時，CK-BB會釋放進入腦脊液，造成腦脊液中CK-BB濃度升高。

3.4 乳酸脫氫酶在病毒性腦炎中的診斷意義

LDH是糖無氧酵解與糖異生的重要同工酶之一，存住于機體多種組織器官，腦脊液是血清含量的10%。 LDH不僅能夠催化左旋乳酸和丙酮酸之間的氧化還原反應，還可以催化相關的α-酮酸，當發(fā)生顱內感染時，腦組織發(fā)生炎性水腫，導致顱內壓升高，造成腦組織病變部位發(fā)生缺血，糖酵解反應加強，直接導致乳酸酶活性升高，因此，腦脊液中乳酸脫氫酶變化最為顯著，對于不明類型的腦膜炎患兒進行腦脊液LDH檢測能夠起到一定的鑒別診斷作用[9]。

本次研究結果顯示病毒性腦炎患兒腦脊液和血清中NSE、CK-BB變化可作為診斷病毒性腦炎及評估病情輕重的臨床指標，但LDH在多種疾病中表達，作為檢測病毒性腦炎嚴重程度指標的敏感性較差。因此為了提升病毒性腦炎患兒診斷的正確率，應當聯(lián)合其他的實驗指標進行診斷。對于病毒性腦炎患兒腦脊液和血清中NSE、CK-BB及LDH進行聯(lián)合檢測，可以對臨床診斷有較好的指導意義，值得臨床進一步實踐和推廣。

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[9]余韶衛(wèi),葉欣,區(qū)小明.腦脊液乳酸脫氫酶檢測在小兒腦膜炎中的臨床應用[J].國際檢驗醫(yī)學雜志,2014,35(12):1633-1634.

[專業(yè)責任編輯： 吳紅艷]

Clinical research on isozyme of NSE, CK-BB and LDH in cerebrospinal fluid and serum of children with viral encephalitis

XU Xiao-lin1, LI Chen2, SUN Yu-min1

(1.CangzhouMedicalCollege,HebeiCangzhou061001,China; 2.CangzhouCentralHospital,HebeiCangzhou061000,China)

Objective To analyze the changes of neuron specific enolase (NSE), creatine kinaes BB isozyme (CK-BB) and lactate dehydrogenase (LDH) isozyme in cerebrospinal fluid and serum of children with mild or severe viral encephalitis. Methods Retrospective analysis was conducted in 30 cases of severe viral encephalitis, 30 mild cases and 30 cases of migraine without intracranial infection admitted in Cangzhou Central Hospital from January 2010 to December 2015.Isozyme of NSE, CK-BB and LDH in cerebrospinal fluid and serum of patients was detected and means were analyzed and compared among groups using multiple factor variance analysis. Results Differences in serum NSE, CK-BB and LDH isozyme test results were statistically significant among three groups (Fvalue was 168.62, 73.82 and 27.08, respectively, allP<0.01). Differences in cerebrospinal fluid test results of isozyme of NSE, CK-BB and LDH had statistical significance (Fvalue was 291.72, 891.83 and 60.544, respectively, allP<0.01). Conclusion Changes of NSE, CK-BB and LDH in cerebrospinal fluid and serum of children with viral encephalitis could be used as clinical indexes in diagnosing viral encephalitis and evaluating severity of illness, and can be widely used in clinical application.

viral encephalitis; neuron specific enolase (NSE); creatine kinaes BB (CK-BB) isozyme; lactate dehydrogenase (LDH)

2016-02-10

滄州市科技支撐計劃項目(編號：151302002)

許曉琳(1975-)，女，主治醫(yī)師，主要從事兒科臨床工作。

孫玉敏，副主任醫(yī)師。

10.3969/j.issn.1673-5293.2017.05.037

R512.3

A

1673-5293(2017)05-0598-03