結(jié)腸腺癌核仁素表達(dá)和Ki67標(biāo)記的增殖指數(shù)的關(guān)系

周 為 馬新福 戈 銳

(青海大學(xué)附屬醫(yī)院胃腸腫瘤外科，青海 西寧 810001)

結(jié)腸腺癌核仁素表達(dá)和Ki67標(biāo)記的增殖指數(shù)的關(guān)系

周 為 馬新福 戈 銳

(青海大學(xué)附屬醫(yī)院胃腸腫瘤外科，青海 西寧 810001)

目的 檢測結(jié)腸腺癌中核仁素(C23)表達(dá)和Ki67標(biāo)記的增殖指數(shù)的關(guān)系，分析其臨床意義。方法 65例結(jié)腸腺癌患者的臨床資料及術(shù)后蠟塊組織作為觀察組，正常結(jié)腸黏膜組織25例作為對照組，采用免疫組化方法檢測兩組中C23和Ki67的表達(dá)。結(jié)果 觀察組中C23和Ki67的陽性率明顯高于對照組(均P<0.001)。觀察組中C23和Ki67表達(dá)與腫瘤最大徑和浸潤深度密切相關(guān)，C23表達(dá)與腫瘤分化程度密切相關(guān)。相關(guān)分析顯示觀察組中C23和Ki67呈正相關(guān)。結(jié)論 結(jié)腸腺癌中C23和Ki67高表達(dá)可以促進(jìn)腫瘤形成和進(jìn)展，C23和Ki67有一定的協(xié)同作用。

結(jié)腸腺癌；核仁素；增殖

結(jié)腸癌病變與飲食因素及遺傳因素有關(guān)，最常見的類型是腺癌，病變的形成過程是高增殖性腫瘤，腫瘤細(xì)胞的繁殖活躍〔1〕。核仁素(C23)是一種多功能核仁蛋白質(zhì)，主要存在于細(xì)胞核，通過多種機(jī)制參與細(xì)胞周期、衰老和凋亡的調(diào)節(jié)過程〔2，3〕。本研究關(guān)注結(jié)腸腺癌中C23的表達(dá)及其與細(xì)胞增殖的關(guān)系，分析其臨床意義。

1 資料與方法

1.1 一般資料 2014年1月至2015年11月青海大學(xué)附屬醫(yī)院確診為結(jié)腸腺癌并行根治手術(shù)的患者65例作為觀察組，其中男35例，女30例，年齡34～87歲，平均59.6歲。納入均符合世界衛(wèi)生組織(WHO)中關(guān)于結(jié)腸腺癌的診斷標(biāo)準(zhǔn)，術(shù)前均未行任何放、化療。排除合并其他器官惡性腫瘤患者。選擇上述患者術(shù)后標(biāo)本中距腫物邊緣>5 cm的非腫瘤性結(jié)腸黏膜組織25例作為對照組，其中男13例，女12例，年齡35～85歲，平均57.5歲。兩組常規(guī)資料無明顯差別。

1.2 兩組中C23和Ki67表達(dá)的檢測 兩組均于術(shù)后常規(guī)留取標(biāo)本，應(yīng)用甲醛溶液固定，脫水，石蠟包埋，切取4 μm切片應(yīng)用免疫組化SP法檢測C23和Ki67的表達(dá)，應(yīng)用二氨基聯(lián)苯胺(DAB)顯色，操作嚴(yán)格按說明書進(jìn)行。

1.3 C23和Ki67結(jié)果的判斷 C23的陽性部位是細(xì)胞核，部分可以表達(dá)在細(xì)胞質(zhì)或細(xì)胞膜，Ki67的陽性部位是細(xì)胞核。C23和Ki67均以染成淡黃色至棕黃色為陽性反應(yīng)細(xì)胞。在低倍鏡下選擇上皮細(xì)胞集中分布且染色較為密集的區(qū)域，共選擇3個不重復(fù)的高倍視野(400倍)進(jìn)行計數(shù)，計算陽性細(xì)胞的百分率。陽性細(xì)胞百分率評分：陽性細(xì)胞≤5%為0分，6%～25%為1分，26%～50%為2分，51%～75%為3分，>75%為4分；陽性細(xì)胞表達(dá)著色強(qiáng)度計分：基本不著色為0分，淡著色為1分，適中著色為2分，深著色為3分。依據(jù)陽性細(xì)胞百分率和陽性細(xì)胞表達(dá)著色強(qiáng)度的乘積作為最終評定結(jié)果。以0～4分為陰性，5～12分為陽性。計算陽性率。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法 應(yīng)用SPSS17.0統(tǒng)計軟件進(jìn)行χ2檢驗及線性相關(guān)性分析。

2 結(jié) 果

2.1 兩組中C23和Ki67陽性率的比較 兩組中C23和Ki67的陽性率差異有統(tǒng)計學(xué)意義(均P<0.001)。見表1。

2.2 觀察組不同臨床病理特征中C23和Ki67表達(dá)的差異 觀察組中C23和Ki67表達(dá)與腫瘤最大徑和浸潤深度密切相關(guān)，C23表達(dá)與腫瘤分化程度密切相關(guān)(均P<0.05)。見表2。

2.3 觀察組中C23和Ki67表達(dá)相關(guān)性 C23和Ki67陽性率間呈正相關(guān)(r=0.56，P=0.016 0)。見表3。

表1 兩組中C23和Ki67表達(dá)陽性率的比較〔n(%)〕

表2 觀察組不同臨床病理特征C23和Ki67表達(dá)差異〔n(%)〕

表3 觀察組中C23和Ki67表達(dá)相關(guān)性(n)

3 討 論

結(jié)腸癌病變的形成與結(jié)腸黏膜上皮內(nèi)瘤變和上皮的不典型增生有明顯的相關(guān)性，病變的腫瘤為高增殖狀態(tài)，細(xì)胞繁殖活躍，生長和侵襲能力強(qiáng)〔4〕。研究顯示C23與腫瘤的形成和進(jìn)展密切相關(guān)〔5，6〕。C23是目前發(fā)現(xiàn)的271種核仁蛋白質(zhì)中含量最高的一種，約占核仁蛋白質(zhì)總量的10%。C23共有14個外顯子和13個內(nèi)含子，并有富含GC的啟動子區(qū)，其基因編碼產(chǎn)物有707個氨基酸殘基，分為3個主要的功能結(jié)構(gòu)域，即氨基端、中心區(qū)和羧基端，其功能也與上述結(jié)構(gòu)有密切關(guān)系。研究顯示C23的表達(dá)水平與細(xì)胞分裂的速率呈正相關(guān)，在腫瘤及其他快速分裂的細(xì)胞中表達(dá)升高〔7，8〕。研究認(rèn)為C23作為非組胺磷酸蛋白，主要存在于真核細(xì)胞核仁的致密纖維區(qū)和顆粒區(qū)，這種核仁定位特征主要取決于中心區(qū)的RNA結(jié)合結(jié)構(gòu)域、羧基端的甘氨酸富集區(qū)和核仁的其他結(jié)構(gòu)〔9，10〕，而羧基端的甘氨酸富集區(qū)還介導(dǎo)核仁素與其他蛋白質(zhì)和核酸的相互作用，為其參與核糖體的組裝、成熟與轉(zhuǎn)運(yùn)提供了重要的基礎(chǔ)〔11，12〕。Ki67是與細(xì)胞增殖相關(guān)的核抗原，主要位于細(xì)胞核內(nèi)，其抗原表達(dá)隨細(xì)胞周期的變化而變化，在G1后期出現(xiàn)，在S、G2期逐漸上升至M期達(dá)高峰，有絲分裂結(jié)束后迅速降解消失，靜止G0期細(xì)胞不表達(dá)〔13，14〕。多種惡性腫瘤Ki67高表達(dá)，也有學(xué)者認(rèn)為其與腫瘤的預(yù)后、臨床分期等因素直接相關(guān)〔15〕。

本研究結(jié)果提示C23和Ki67二者表達(dá)升高與腫瘤形成有關(guān)，二者具有一定的協(xié)同作用。C23表達(dá)水平與細(xì)胞分裂的速率呈正相關(guān)，在腫瘤及其他分裂活性高的細(xì)胞中核仁素的表達(dá)較高，而在非分裂的細(xì)胞中的表達(dá)常較低，也有研究認(rèn)為C23可以用來衡量腫瘤細(xì)胞增殖的程度〔7〕。本文提示C23和KI67二者高表達(dá)可以促進(jìn)腫瘤的生長，主要與二者對促進(jìn)腫瘤的增生繁殖有關(guān)，腫瘤細(xì)胞生長旺盛，細(xì)胞數(shù)量增多，腫瘤體積增大，浸潤能力增強(qiáng)。本文提示C23參與腫瘤分化過程中，由于分化是細(xì)胞由幼稚到成熟的發(fā)展階段，C23對細(xì)胞核相關(guān)結(jié)構(gòu)和功能的作用可能是影響分化的原因。郭鈺英等〔16〕通過觀察口腔鱗癌中C23和Ki67的表達(dá)，發(fā)現(xiàn)二者與腫瘤的浸潤和分化程度有關(guān)，認(rèn)為C23是參與鱗癌發(fā)生發(fā)展的重要蛋白，其在浸潤方面有較高的敏感性，其與Ki67一樣可以作為細(xì)胞增殖的指標(biāo)。因此C23和Ki67可能在多種腫瘤中均有重要的協(xié)同作用，但是其需要后續(xù)大量實驗來研究證實〔17，18〕?？赡蹸23的作用并不限制在對腫瘤細(xì)胞增殖的影響上，如近年來發(fā)現(xiàn)其對血管生成的調(diào)節(jié)作用等，可望從多角度對C23的功能進(jìn)行深入認(rèn)識〔19〕。

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〔2016-09-23修回〕

(編輯 苑云杰)

周 為(1965-)，男，副主任醫(yī)師，主要從事胃腸腫瘤研究。

R735

A

1005-9202(2017)10-2468-03；

10.3969/j.issn.1005-9202.2017.10.054