茶色素對(duì)高鉀狀態(tài)下離體蟾蜍心臟活動(dòng)的影響

趙心宇 吳佳歡 李國(guó)洋 穆靖洲 遲鑫明 張冬梅 傅 雷

(大連醫(yī)科大學(xué)檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)院，遼寧 大連 116044)

茶色素對(duì)高鉀狀態(tài)下離體蟾蜍心臟活動(dòng)的影響

趙心宇 吳佳歡 李國(guó)洋 穆靖洲 遲鑫明 張冬梅 傅 雷

(大連醫(yī)科大學(xué)檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)院，遼寧 大連 116044)

目的 探討茶色素在高鉀狀態(tài)下對(duì)離體蟾蜍心肌收縮力、心率和心電圖的影響。方法 60只蟾蜍隨機(jī)分為對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組。對(duì)照組包括任氏液組、高鉀(K+濃度為1.14 mg/ml)模型組和陽(yáng)性高鈣(Ca2+濃度為1.12 mg/ml)組；實(shí)驗(yàn)組為高鉀任氏液+低、中和高劑量茶色素組(200、400、800 μg/ml)。采用斯氏法制備離體蛙心灌流標(biāo)本，應(yīng)用BL-420F生物機(jī)能實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)同時(shí)記錄離體蟾蜍心肌收縮力和心電圖曲線，進(jìn)行心肌收縮力、心率和心電圖的統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。結(jié)果 高鉀模型組與任氏液組比較，離體蟾蜍的心肌收縮力、心率和心電圖QRS峰值均明顯減小(P<0.05)，陽(yáng)性高鈣組與高鉀模型組比較離體蟾蜍的心肌收縮力、心率和心電圖QRS波峰值均明顯增加(P<0.05)；而高鉀任氏液+低、中和高劑量茶色素組的心肌收縮力、心率和心電圖QRS峰值與高鉀模型組比較均顯著增加(P<0.05)，引起心肌收縮力、心率和心電圖QRS峰值增加的最低濃度200 μg/ml。結(jié)論 茶色素能使高鉀條件下心臟功能低下明顯恢復(fù)。

茶色素；高鉀；心肌收縮力；心率

茶色素(TPs)是茶葉中多種水溶性色素混合物的總稱，在制茶過(guò)程中由兒茶素類化合物在多酚氧化酶和過(guò)氧化物酶的催化作用下氧化形成。近些年對(duì)TPs的研究已表明TPs對(duì)多種心腦血管性疾病顯示出良好的療效〔1〕。汪洋等〔2〕研究發(fā)現(xiàn)，TPs在低鈣和高鈣條件下對(duì)離體蟾蜍心肌收縮力有雙向調(diào)節(jié)保護(hù)作用，并且這種保護(hù)作用可能與心肌細(xì)胞膜上的鈣離子通道、M受體及β受體有關(guān)。高鉀血癥對(duì)心臟的毒性很強(qiáng)，可引起心室顫動(dòng)和心搏停止等，但其發(fā)病機(jī)制未明〔3〕。本文旨在探討TPs對(duì)高鉀的治療作用，為臨床合理用藥和老年人保健提供參考依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料 中華蟾蜍60只，體重(90±10)g，由大連醫(yī)科大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心提供，在北方選擇8月份進(jìn)行本實(shí)驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物合格證號(hào)：SCXK(遼)20140002。TPs，江西綠色制藥有限公司生產(chǎn)并鑒定，鑒定TPs純度以游離兒茶素記36.27%，批號(hào)：20130920。任氏液按標(biāo)準(zhǔn)配方配制，所用的NaCl、KCl、CaCl2等試劑均為化學(xué)純級(jí)試劑。BL-420F生物機(jī)能實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)和張力換能器由成都泰盟公司生產(chǎn)。

1.2 方法

1.2.1 動(dòng)物分組 60只蟾蜍隨機(jī)分為對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組，對(duì)照組分為任氏液組、高鉀模型組和陽(yáng)性高鈣組。任氏液組只灌流任氏液，高鉀模型組灌流高鉀任氏液(任氏液灌流基礎(chǔ)上加10% KCl溶液10 μl)，陽(yáng)性高鈣組為高鉀任氏液(同高鉀模型組)+高鈣(10%CaCl210 μl)；實(shí)驗(yàn)組分為低、中和高3個(gè)劑量組，分別是高鉀任氏液(同高鉀模型組)+200、400、800 μg/ml TPs，每組10只蟾蜍。

1.2.2 高鉀血癥模型制備 蛙心插管模型參照文獻(xiàn)〔4〕制備。在蛙心插管的灌流任氏液中加入一定量KCl〔5〕。本實(shí)驗(yàn)采用離體蟾蜍心室外1.0 ml任氏液中加入10%KCl溶液10 μl,加上任氏液本身含有的KCl，KCl終濃度為1.14 mg/ml。心室外容積始終固定為1.0 ml，每次加藥前先等體積抽取任氏液，每次換液穩(wěn)定后記錄40 min。

1.2.3 檢測(cè)指標(biāo) 按照文獻(xiàn)〔5〕同時(shí)記錄離體蟾蜍心臟的心肌收縮力和心電圖。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 應(yīng)用SPSS19.0統(tǒng)計(jì)學(xué)應(yīng)用軟件對(duì)數(shù)據(jù)的組間比較進(jìn)行t檢驗(yàn)。

2 結(jié) 果

在正常蟾蜍離體蛙心灌流任氏液標(biāo)本穩(wěn)定后，改灌流含有1.14 mg/ml KCl任氏液溶液，換液前后心肌收縮力顯著減少(P<0.01)，心率明顯減少(P<0.05)；換液前后心電圖的QRS波峰值和T波峰值均顯著下降(P<0.05)。見表1。

在灌流含有1.14 mg/ml KCl的任氏液溶液穩(wěn)定后，改含有1.12 mg/ml CaCl2的高鈣任氏液，換液前后心肌收縮力顯著增加(P<0.01)，心率明顯增加(P<0.05)；換液前后心電圖的QRS波峰峰值顯著增加(P<0.05)。在灌流含有1.14 mg/ml KCl的任氏液狀態(tài)下，改灌流含有200、400、800 μg/ml TPs溶液，換液后心肌收縮力和心率、心電圖QRS峰值均顯著增加(P<0.05)。高鉀換高鈣任氏液后心肌收縮力與高鉀后改灌流含有200 μg/ml TPs任氏液時(shí)心肌收縮力比較有顯著變化(P<0.05)，而高鉀換高鈣任氏液后心肌收縮力與高鉀后改灌流含有400、800 μg/ml TPs任氏液時(shí)心肌收縮力比較無(wú)顯著變化(P>0.05)。高鉀換高鈣任氏液后心率與高鉀后改灌流含有不同濃度TPs任氏液溶液時(shí)心率比較無(wú)顯著變化(P>0.05)。高鉀換高鈣任氏液后QRS波和T波峰值與高鉀后改灌流含有不同濃度TPs任氏液溶液比較無(wú)顯著變化(P>0.05)。見表1。

表1 TPs對(duì)高鉀狀態(tài)下心肌收縮力、心率心電圖QRS波峰值和T波峰值的影響±s，n=10)

與高鉀模型組比較：1)P<0.05;2)P<0.01;3)P<0.001;與TPs低劑量組比較：4)P<0.05

3 討 論

TPs作為一種天然色素具有多種藥理學(xué)功能，在食品、醫(yī)藥等領(lǐng)域是一類極具開發(fā)潛力的茶葉天然產(chǎn)物。近期研究表明TPs具有抗氧化的生物學(xué)活性，可以清除自由基、抗動(dòng)脈硬化粥樣合成等〔6〕。本實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)：在高鉀狀態(tài)下，離體蟾蜍心臟功能明顯下降，在灌流高鈣后心臟功能又明顯恢復(fù)，而在高鉀狀態(tài)下改灌流不同濃度TPs對(duì)心臟功能有不同程度恢復(fù)，說(shuō)明低劑量TPs對(duì)高鉀已經(jīng)開始有治療作用，但劑量尚不足，而中或高劑量TPs有明顯治療作用，使離體蟾蜍心臟功能基本恢復(fù)正常。細(xì)胞外液中K+濃度增高使膜電位異常，心肌動(dòng)作電位0相上升速度及幅度均降低，心肌傳導(dǎo)系統(tǒng)的傳導(dǎo)速度也減慢，引起心律失?！?〕，加入TPs可使心肌收縮力增強(qiáng)、恢復(fù)心臟活性。對(duì)此推斷TPs的作用可能與調(diào)控K+通道或者Ca2+通道有關(guān)。在高K+的環(huán)境中，TPS可能通過(guò)降低心肌K+的通透性和增強(qiáng)Ca2+的通透性，調(diào)控心肌膜電位趨于正常，恢復(fù)心肌收縮力，從而保護(hù)心臟活性。

高鉀血癥是臨床上多種疾病并發(fā)的一種常見的病理生理過(guò)程，對(duì)心血管的毒性作用極強(qiáng)，可短時(shí)間內(nèi)危及生命。應(yīng)用TPs治療高鉀血癥可降低K+對(duì)心肌的毒性損害，增加心肌的抵抗力，具有保護(hù)心肌的作用，明顯改善高鉀血癥患者的治療后果與臨床預(yù)后。

1 韓 馳.茶的健康效益和人群干預(yù)研究〔J〕.衛(wèi)生研究,2011;40(6):802-5.

2 汪 洋,唐澤耀,王珂萌,等.茶色素對(duì)離體蟾蜍心肌收縮力的保護(hù)作用〔J〕.中國(guó)實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志，2015;21(12)：90-4.

3 王建枝,殷蓮華,吳立玲,等.病理生理學(xué)〔M〕.北京：人民衛(wèi)生出版社,2013:29-30.

4 王珂萌，傅 雷，孫藝平,等.鹿茸的心肌收縮力保護(hù)作用與鈣離子通道的相關(guān)性〔J〕.中國(guó)老年學(xué)雜志,2015;35(19):5381-3.

5 霍 健，蘇興利，王 爽.蟾蜍高鉀血癥模型的建立〔J〕.解放軍醫(yī)學(xué)雜志，2011;36(9)：926-7.

6 陳來(lái)蔭,陳榮山,葉陳英,等.茶色素的提取、功效及應(yīng)用研究進(jìn)展〔J〕.茶葉通訊,2013;40(2):31-5.

7 姜 恒,劉 鴻.家兔高鉀血癥心電生理機(jī)制的實(shí)驗(yàn)機(jī)制〔J〕.局解手術(shù)學(xué)雜志,2012;12(4):365-8.

〔2016-10-19修回〕

(編輯 袁左鳴)

國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(81200155)

傅 雷(1965-)，男，碩士，高級(jí)實(shí)驗(yàn)師，主要從事循環(huán)和腎臟生理研究。

趙心宇(1966-)，女，碩士，高級(jí)實(shí)驗(yàn)師，主要從事臨床檢驗(yàn)基礎(chǔ)研究。

R285.5

A

1005-9202(2017)10-2370-03；

10.3969/j.issn.1005-9202.2017.10.010