光動力療法對尿道尖銳濕疣的復(fù)發(fā)率及T淋巴細(xì)胞功能的影響

高愛莉，江娜，石建萍，張倩雯，楊日東，林壬嬌，朱慧蘭

（1.廣東省廣州市皮膚病防治所，廣州510095；2.廣州醫(yī)學(xué)院附屬深圳沙井醫(yī)院，深圳518104）

光動力療法對尿道尖銳濕疣的復(fù)發(fā)率及T淋巴細(xì)胞功能的影響

高愛莉1，江娜1，石建萍2，張倩雯1，楊日東1，林壬嬌1，朱慧蘭1

（1.廣東省廣州市皮膚病防治所，廣州510095；2.廣州醫(yī)學(xué)院附屬深圳沙井醫(yī)院，深圳518104）

目的觀察5-氨基酮戊酸-光動力療法（ALA-PDT）對尿道尖銳濕疣復(fù)發(fā)率及其T淋巴細(xì)胞亞型的影響。方法尿道尖銳濕疣患者100例，按收治時間及治療方法不同分為2組（PDT 50例，CO2組50例）。2組均每周復(fù)診1次，若有疣體生長，則以CO2激光清除，連續(xù)1個月；PDT組在此基礎(chǔ)上，再給予ALA-PDT治療，1次/周，連續(xù)1個月。觀察2組患者的復(fù)發(fā)率以及不良反應(yīng)，比較治療前、后2種治療方法對外周血T淋巴細(xì)胞亞群的影響。結(jié)果PDT組治療后CD3＋（67．41±2．40）、CD4＋（35．47±2．12）升高，CD8+（30．26±2．63）降低，CD4+/CD8+（1．18±0．12）升高，與治療前相比差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.01）。隨訪6個月，PDT組復(fù)發(fā)6例，復(fù)發(fā)率12.00%；對照組復(fù)發(fā)21例，復(fù)發(fā)率42.00%，2組差異有統(tǒng)計學(xué)意義（χ2=15.74，P<0.01）。2組復(fù)發(fā)高峰期位于第1、2、3個月。結(jié)論與CO2單獨(dú)治療尿道尖銳濕疣相比，ALA-PDT療法的復(fù)發(fā)率明顯降低，可能與改善尖銳濕疣患者細(xì)胞免疫功能有關(guān)。

尖銳濕疣；5-氨基酮戊酸；光動力療法；T淋巴細(xì)胞

尖銳濕疣（Condylomata acuminata，CA）是由人乳頭瘤病毒（Human papillomavirus，HPV）感染所引起的一種常見的性傳播疾病。盡管對CA治療方法頗多，如傳統(tǒng)的微波、激光、冷凍等治療，但其治療后的復(fù)發(fā)率仍高達(dá)30%～70%[1]。CA患者經(jīng)治療后復(fù)發(fā)間隔時間從2周、數(shù)月、數(shù)年不等，但絕大多數(shù)患者復(fù)發(fā)在1～3個月。尿道CA是其特殊類型，其解剖部位特殊，且微小皮損及隱匿感染病灶不易被發(fā)現(xiàn)，致使疣體難以徹底清除。另一方面，尿道黏膜血供豐富，治療過程中出血量較大，易出現(xiàn)感染、尿道狹窄等并發(fā)癥，CO2激光、電灼等傳統(tǒng)治療手段受到限制。上述因素決定了尿道CA更難治療且更易復(fù)發(fā)。5-氨基酮戊酸光動力療法（5-aminolevalinic acid photodynamic therapy，ALA-PDT）是近年來用于治療CA的一種新療法，其治療原理是利用5-氨基酮戊酸與異常組織相互結(jié)合后在特定波長的光源照射下產(chǎn)生光毒性反應(yīng)，從而破壞病變細(xì)胞而周圍正常組織不受損傷，該療法具有創(chuàng)傷小，復(fù)發(fā)率低等優(yōu)點(diǎn)[2]。

有研究表明HPV亞型混合感染模式和T淋巴細(xì)胞亞群免疫功能異常也是促使尖銳濕疣復(fù)發(fā)的重要因素[3]。Giomi等[4]研究還發(fā)現(xiàn)，ALA-PDT對于CA患者病灶局部的細(xì)胞免疫功能有顯著的改善作用，初步證實(shí)了ALA-PDT能夠通過改善患者病灶局部的細(xì)胞免疫功能達(dá)到清除HPV的目的。但對于該療法能否通過系統(tǒng)性影響免疫學(xué)指標(biāo)的改變而達(dá)到降低復(fù)發(fā)率的治療目的，目前的研究尚不多。本研究旨在分析ALA-PDT療法對降低尿道CA的復(fù)發(fā)率及其對T淋巴細(xì)胞亞型的影響，探討該療法對預(yù)防CA復(fù)發(fā)的可能機(jī)制。

1 材料與方法

1.1 臨床資料2012年6月—2015年6月，我院皮膚性病科門診及深圳沙井人民醫(yī)院皮膚科門診收治的尿道CA患者共100例，均符合衛(wèi)生部防疫司1991年制定的尖銳濕疣的診斷標(biāo)準(zhǔn)。排除淋病、非淋菌性尿道炎、梅毒、HIV感染等性傳播疾病，均無陰道炎和龜頭炎等其他炎癥性疾病，無自身免疫性疾病或系統(tǒng)應(yīng)用糖皮質(zhì)激素史，無CO2激光與ALA-PDT治療禁忌證，非妊娠及哺乳期患者，入選前未接受過任何治療。皮損主要位于尿道內(nèi)和尿道口，皮損數(shù)目>3個。按收治時間及治療方法不同分為2組，ALA-PDT治療組（簡稱PDT組）50例，男28例，女22例，年齡15～54歲，平均（28.56±7.46）歲，病程1.5～6個月，平均（3.81±1.85）個月。CO2激光治療組50例，男30例，女20例，年齡16～51歲，平均（28.42±7.73）歲，病程0.5～8個月，平均（3.62± 2.35）個月。2組患者在病程、年齡、性別等方面分布差異無統(tǒng)計學(xué)意義（均P>0.01），有可比性。

1.2 標(biāo)本采集與檢測PDT組及CO2組患者于治療前和治療后6個月復(fù)診時分別采集其靜脈血2 mL，經(jīng)EDTA-K2抗凝后采用流式細(xì)胞術(shù)檢測T淋巴細(xì)胞亞群，同時以職工健康體檢（并且確認(rèn)為健康的人群）血液為對照（簡稱健康對照組）。

1.3 治療方法PDT組及CO2組患者均需局部常規(guī)消毒，2%利多卡因病灶處浸潤麻醉，先以CO2激光去除疣體，其激光輸出功率依據(jù)皮損大小調(diào)節(jié)進(jìn)行。同時，PDT組在去除疣體后，以新鮮配制的20% 5-氨基酮戊酸溶液（商品名：艾拉，上海復(fù)旦張江生物醫(yī)藥股份有限公司生產(chǎn)，規(guī)格118 mg/瓶，于治療前用生理鹽水配制成20%的溶液），用脫脂棉自制棉簽插入或覆蓋于尿道口，外覆保鮮膜，避光封包并固定3～4 h，用光動力治療儀直接對準(zhǔn)病灶直接垂直照射，或采用光導(dǎo)纖維插入尿道內(nèi)進(jìn)行治療，波長635 nm，能量密度100/cm2，共20 min。每周治療1次，連續(xù)4周為1個療程。2組均治療4周，于末次治療結(jié)束后隨訪觀察，1次/月，共6個月，進(jìn)行療效評定。

1.4 療效判定標(biāo)準(zhǔn)臨床治愈為治療結(jié)束后皮損消失，6個月內(nèi)原皮損區(qū)域及其周圍無新疣體出現(xiàn)，醋酸白試驗(yàn)陰性；復(fù)發(fā)為治療結(jié)束后皮損消失，6個月內(nèi)原皮損區(qū)域及其周圍無新疣體出現(xiàn)，醋酸白試驗(yàn)陽性。

1.5 統(tǒng)計學(xué)方法采用SPSS19.0統(tǒng)計分析軟件進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析，其中比較不同治療組間均數(shù)差異有無統(tǒng)計學(xué)意義采用方差分析，2種療法對T淋巴細(xì)胞分型影響以及同一檢測指標(biāo)治療前后的比較等則采用配對t檢驗(yàn)，P<0.01為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.12 組治療后復(fù)發(fā)情況對比4周后，PDT組及CO2組疣體清除率均達(dá)100%。隨訪過程中，PDT組累計共6例復(fù)發(fā)，復(fù)發(fā)率12.00%；CO2組累計復(fù)發(fā)人數(shù)21例，復(fù)發(fā)率42.00%，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（χ2＝15．74，P＜0．01）。2組復(fù)發(fā)高峰期在第1～3個月。見表1。

2.2 治療前后T淋巴細(xì)胞亞群檢測治療前，2組患者CD3+、CD4+、CD4+/CD8+細(xì)胞與健康對照組相比，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.01）；經(jīng)ALA-PDT治療后，PDT組CD4+升高、CD8+降低、CD4+/CD8+比值升高，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0．01），CO2治療組上述指標(biāo)則無明顯變化（P＞0．01）。見表2。

2.3 不良反應(yīng)PDT組患者在敷藥過程中無明顯不適，光照治療過程中有程度不等的灼熱或疼痛感，治療結(jié)束時部分患者伴有輕度排尿疼痛等尿路刺激癥狀，但均可耐受，未予特殊處理，治療后24～48 h左右上述癥狀逐漸消退。2組患者治療過程中及治療后均未出現(xiàn)尿道黏連、潰瘍及狹窄。

3 討論

高復(fù)發(fā)率是CA治療過程中最棘手并函待解決的臨床問題，尤其是尿道CA，降低其復(fù)發(fā)率是臨床治療的關(guān)鍵。CA的發(fā)生、消退、復(fù)發(fā)等過程與機(jī)體的免疫功能密切相關(guān)，其中T淋巴細(xì)胞群在人體細(xì)胞免疫系統(tǒng)中具有重要功能，當(dāng)其數(shù)量和功能出現(xiàn)異常時，可使人體免疫系統(tǒng)出現(xiàn)紊亂，進(jìn)而引起相應(yīng)的病理改變[5]。ALA-PDT是近年來用于治療CA的一種新療法，該療法中5-氨基酮戊酸被HPV感染細(xì)胞特異性吸收，從而對周邊亞臨床感染灶進(jìn)行病毒清除，顯著降低復(fù)發(fā)率[6]。Giomi等[4]也初步證實(shí)了ALA-PDT可通過改善患者病灶局部的細(xì)胞免疫功能達(dá)到清除HPV的目的。

表1 PDT組及CO2組尖銳濕疣患者療效比較例

表2 2組患者治療前后CD3+、CD4+、CD8+及CD4+/CD8+

本研究通過納入100例患者（50例行CO2激光治療，50例在CO2激光治療的基礎(chǔ)上進(jìn)行ALAPDT治療），隨訪觀察其復(fù)發(fā)率，并分析該療法對患者T淋巴細(xì)胞亞型的影響，旨在探討ALA-PDT降低CA的復(fù)發(fā)率的可能機(jī)制。研究結(jié)果顯示：CO2組有效率為58.0%，隨訪結(jié)束時，復(fù)發(fā)率為42%，PDT有效率為88.0%，隨訪結(jié)束時，復(fù)發(fā)率為12%，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0．01）；治療過程中患者依從性好，未發(fā)生明顯的不良反應(yīng)。本研究還發(fā)現(xiàn)，治療前2組CA患者外周血CD3+T細(xì)胞百分率、CD4+T細(xì)胞百分率、CD4+/CD8+比值均低于正常水平，CD8+T細(xì)胞百分率高于正常水平，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P< 0.01）；ALA-PDT治療后，CA患者外周血CD3+T細(xì)胞百分率、CD4+T細(xì)胞百分率、CD4+/CD8+比值均治療前升高，CD8+T細(xì)胞百分率較治療前降低，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.01）；而CO2治療組與治療前相比，CD3+T細(xì)胞百分率、CD4+T細(xì)胞百分率、CD4+/ CD8+比值無明顯改變，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.01）。該研究結(jié)果與許建新[7]的研究結(jié)果一致。提示ALAPDT通過系統(tǒng)性影響免疫學(xué)指標(biāo)的改變而達(dá)到降低復(fù)發(fā)率的治療目的，該療法降低尿道CA的復(fù)發(fā)率可能與調(diào)節(jié)了CA患者相關(guān)細(xì)胞免疫功能有關(guān)。參考文獻(xiàn)：

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R752.5+3

B

1672－0709（2017）02-0161－03

2016-04-23）

朱慧蘭，E-mail:zhlhuilan@126.com