PCR法和細菌培養(yǎng)法用于陰道細菌檢驗的效果比較

何曉芳

PCR法和細菌培養(yǎng)法用于陰道細菌檢驗的效果比較

何曉芳

目的分析細菌培養(yǎng)法和PCR檢驗法在陰道細菌檢驗中的應用效果。方法選取自2015年8月至2016年8月間婦科收治病房的女性患者90例進行研究，采集其陰道后穹窿處分泌物分別使用細菌培養(yǎng)法和PCR法進行檢測，對比兩組檢測方法下各個細菌類型陽性率情況。結(jié)果PCR組細菌陽性率為90%，細菌培養(yǎng)組細菌陽性率為55.56%，前者明顯高于后者數(shù)據(jù)差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）；兩種檢測方法結(jié)果顯示腸球菌、棒狀桿菌以及加特納菌陽性率差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。結(jié)論在女性婦科疾病陰道細菌檢驗時采用PCR檢查法，細菌陽性檢出率更高，提供更為準確的依據(jù)。

陰道細菌 婦科疾病 細菌培養(yǎng)法 PCR檢驗

陰道炎是陰道黏膜及黏膜下結(jié)締組織的炎癥，是婦科門診常見的疾病，由于女性陰道內(nèi)致病菌逐漸增多，且乳酸桿菌含量明顯減少造成局部生態(tài)平衡遭到破壞所引發(fā)的一系列疾病。細菌性陰道炎是一種可經(jīng)由性行為傳播的病癥，主要的癥狀表現(xiàn)為陰道分泌物增加且性狀異常，帶有魚腥臭等刺激性氣味、外陰部瘙癢、性交疼痛等?？茖W的診斷方法是治療的關鍵，目前臨床上主要采用細菌培養(yǎng)法和PCR進行檢測，本文比較了這兩種方法的臨床價值。

1 臨床資料

1.1 一般資料 本次觀察對象均是本院近年來收治的細菌性陰道炎患者，共90例，年齡24~39歲，平均年齡（31.5±2.6）歲；病程3周~1個月，平均（4.3±0.4）周。納入標準：均為育齡期女性，主要癥狀表現(xiàn)為陰道異味、瘙癢、分泌物增多。

1.2 方法 采集患者陰道后穹窿處分泌物少許，將其置于無菌生理鹽水中保存，每位患者的樣本均分為2份：（1）細菌培養(yǎng)法：取出陰道分泌物樣本的NaCl溶液放置于配制的培養(yǎng)基中，然后將培養(yǎng)皿放在孵育箱中（CO2濃度為5%）約2d，提取菌落上部灰色半透明且光滑的菌群，隨即進行細菌鑒定（BIOMERIEUX的VITEK2全自動細菌鑒定儀和配套的細菌鑒定卡）。（2）PCR檢驗法：首先取1000μl保存于生理鹽水中的陰道分泌物樣本離心15min（1200r/min），棄去上層清液，向沉淀中加入蛋白酶K和內(nèi)參，在全自動核酸純化儀Smart.LabAssist-32上磁珠法提取35min，制作DNA模版。PCR反應體系為：DNA模板20.0μl，PCR緩沖液15μl，引物探針10μl，Taq酶5μ1（上海復星長征醫(yī)學科學有限公司）離心（1200r/min）數(shù)秒后置于PCR儀（羅氏Cobas z 480）上。50℃反應2min循壞1次；94℃保溫5min循壞1次；94℃10s→60℃ 45s循壞5次；94℃10s→60℃ 45s循壞40次，60℃采集FAM、JOE熒光通道信號并自動計算結(jié)果。陽性對照與陰性對照除不加模板DNA外，其余同檢測組。

1.3 統(tǒng)計學方法 采用SPSS 20.0統(tǒng)計軟件。計數(shù)資料以%表示，組間比較采用χ2檢驗，P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

本次實驗中共檢出致病細菌種類為腸球菌、加特納菌以及棒狀桿菌等，PCR組檢測的陽性率為90%，細菌培養(yǎng)法檢測陽性率為55.56%，前者細菌陽性率明顯高于后者（P<0.05），見表1。

表1 兩組檢查方法的細菌陽性率情況［n（%）］

3 討論

陰道炎發(fā)病較緩慢，隱匿期較長，因此早期患者臨床癥狀不明顯，多數(shù)患者難以察覺，直至炎性病變發(fā)展至盆腔、腹部出現(xiàn)腹痛等明顯癥狀時病情已經(jīng)較為嚴重，比如難治性陰道炎等，嚴重者會引發(fā)不孕癥等，所以早期有效的診斷是預防和治療最佳手段［1］。目前臨床上在檢查陰道炎時依然將細菌培養(yǎng)法作為“金標準”予以應用，該方法的優(yōu)點是操作簡單，檢測費用低廉，患者更容易接受，但是該種檢測法耗時較長，細菌培養(yǎng)時間必需在兩天左右，且樣本容易被污染而影響最終的檢測結(jié)果，由于細菌培養(yǎng)法的檢測陽性率較低，常需要患者進行多次采樣檢測［2］。PCR法用于陰道炎診斷快速及時且靈敏度高，通過IPDNA雜交能提高特異性，保證了陰道致病菌檢測的準確性，還能展現(xiàn)PCR技術的敏感度，因此在細菌陽性檢測方面準確率非常高［3-5］。本次實驗中檢測腸球菌、棒狀桿菌以及加特納菌90例，結(jié)果PCR法檢測該3種細菌的陽性率分別為18.89%、14.44%、56.67%，細菌培養(yǎng)組數(shù)據(jù)依次為7.78%、6.67%和41.11%，兩組數(shù)據(jù)對比差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。

綜上所述，在細菌性陰道炎的診斷過程中采用PCR法能夠提高陰道炎的致病菌檢出率，為制定治療方案提供依據(jù)，因此值得推廣。

［1］ 華玲.PCR檢驗法和細菌培養(yǎng)法用于陰道細菌檢驗的效果對比.中外醫(yī)學研究,2015,13(17):50-51.

［2］ 成樹芳.PCR檢驗法和細菌培養(yǎng)法用于陰道細菌檢驗的效果.中國處方藥,2016,14(2):107-108.

［3］ 張賀偉.PCR檢驗法和細菌培養(yǎng)法用于陰道細菌檢驗的效果.醫(yī)藥論壇雜志,2014,13(24):660-662.

［4］ 劉學勇.比較PCR檢驗法與細菌培養(yǎng)法用于陰道細菌檢驗的效果.中國實用醫(yī)藥,2016, 11(11):338-339.

［5］ 趙彥叢.PCR檢驗法和細菌培養(yǎng)法在陰道細菌檢驗中的應用價值.世界臨床醫(yī)學,2016, 10(9):247-248.

ObjectiveTo analyze the effect of bacterial culture method and PCR test in the detection of vaginal bacteria.MethodsFrom August 2015 to August 2016，90 female patients admitted to the department of gynecology ward were collected posterior vaginal fornix secretions respectively by bacterial culture method and PCR method. They were used to examine the positive rate of different types of bacteria detection and compared between the two groups.ResultsThe PCR positive rate of bacteria was 90%，the positive rate of bacteria culture of bacteria was 55.56%，the former was signifi cantly higher than that of the latter data（P<0.05）；the results of the two detection methods showed that there was statistical significance difference in positive rate of Corynebacterium and Enterococcus, Gardnerella vaginalis（P<0.05）.ConclusionThe PCR detection method is more effective in the detection of vaginal bacteria in women with gynecological diseases.

Vaginal bacteria Gynecological diseases Bacterial culture PCR test

321100 浙江省蘭溪市人民醫(yī)院檢驗科