熒光光譜法測定蔬菜中辛硫磷的殘留量

陳晶晶

摘要：在磷酸二氫鉀-磷酸氫二鈉緩沖溶液中，H2O2會氧化羅丹明B，當(dāng)在羅丹明B中加入辛硫磷后，體系的熒光強(qiáng)度明顯降低，且熒光強(qiáng)度降低值與辛硫磷的加入量呈良好的線性關(guān)系，據(jù)此建立了測定辛硫磷殘留量的新方法。

關(guān)鍵詞：熒光光譜法；辛硫磷；羅丹明B；過氧化氫

引言

目前我國使用量最多的農(nóng)藥是辛硫磷農(nóng)藥，此類農(nóng)藥能有效地控制害蟲、雜草及細(xì)菌的生長，提高農(nóng)業(yè)產(chǎn)量，但它屬于高毒性農(nóng)藥，大量使用會造成許多潛在的危害[1]。隨著農(nóng)藥的無節(jié)制用，蔬菜中農(nóng)藥殘留問題越來越嚴(yán)重，這不僅污染環(huán)境，而且危害人類身心健康。因此，建立高效、快速、精準(zhǔn)的檢測蔬菜中辛硫磷農(nóng)藥殘留的方法迫在眉睫[2-3]。

本文研究表明：在羅丹明B溶液中加入過氧化氫溶液后，體系的熒光強(qiáng)度明顯降低，當(dāng)再加入辛硫磷后，熒光強(qiáng)度顯著猝滅，且熒光強(qiáng)度降低的程度與加入辛硫磷的量呈良好的線性關(guān)系，據(jù)此建立了熒光法測定辛硫磷殘留量的新方法。

一、實(shí)驗(yàn)過程

（一）儀器與試劑

1.儀器：F-7000型熒光光譜儀； KQ3200超聲波清洗器；BS224S型電子分析天平；移液管；比色管；比色皿。

2.試劑：磷酸二氫鉀，磷酸氫二鈉，硫酸，冰醋酸，醋酸鈉，辛硫磷（18.5%），過氧化氫（30%，），羅丹明B，以上所用試劑均為分析純。

3.標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制。1.0×10-4mol/L 羅丹明B溶液；6%過氧化氫標(biāo)準(zhǔn)溶液；pH=1的硫酸溶液；pH=4.74的醋酸醋酸鈉溶液； 辛硫磷儲備液7.4mg/L：準(zhǔn)確量取18.5%的辛硫磷溶液1.0mL稀釋到250mL的容量瓶，然后取0.1mL稀釋到10mL比色管中；

4.材料：菠菜（市售）；油菜（市售）；生菜（市售）。

（二）實(shí)驗(yàn)方法

在幾支 10 mL 比色管中，用移液管依次準(zhǔn)確加入濃度為 1.0×10-4 mol/L 羅丹明B溶液 2.0 mL和一定量的表面活性劑和適量的辛硫磷溶液，然后加入6%過氧化氫溶液2.5mL稀釋至所需刻度線，搖勻，充分反應(yīng)后，于激發(fā)波長264nm，發(fā)射波長587nm處測定熒光強(qiáng)度（If），在相同條件下測定試劑空白的熒光強(qiáng)度（If0），計(jì)算熒光猝滅值ΔIf（If0-If）。

二、結(jié)果與討論

（一）熒光光譜

在熒光光譜上分別掃描羅丹明B-H2O2-磷酸二氫鉀-磷酸氫二鈉-辛硫磷體系的激發(fā)光譜和發(fā)射光譜，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，體系的λex=264.0nm，λem=587.0nm。當(dāng)再加入H2O2一定濃度的后，發(fā)現(xiàn)熒光強(qiáng)度明顯降低，當(dāng)加入一定濃度的辛硫磷后，發(fā)現(xiàn)熒光強(qiáng)度明顯降低，但峰位置并不發(fā)生改變，且熒光強(qiáng)度降低的程度與辛硫磷濃度在一定范圍內(nèi)成正比。因此，說明辛硫磷可使體系熒光猝滅，基于此，可用熒光光譜法測定辛硫磷。

（二）標(biāo)準(zhǔn)曲線

先取一支比色管中依次加入為羅丹明B溶液2.5mL、磷酸鹽緩沖溶液1.0mL，然后都加入過氧化氫溶液2.5mL時(shí)，測定空白值，然后在八支比色管中加入上述溶液后加入辛硫磷溶液0.1mL～2.5mL。用熒光強(qiáng)度差值ΔIf做標(biāo)準(zhǔn)曲線。按實(shí)驗(yàn)方法測定辛硫磷系列標(biāo)準(zhǔn)溶液的熒光強(qiáng)度，以辛硫磷的濃度對對應(yīng)的ΔIf繪制 標(biāo)準(zhǔn)線。

實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，辛硫磷的濃度在7.4mg·L-1～185mg·L-1之間與ΔIf成良好的線性關(guān)系。其線性回歸方程為ΔIf=4.7505c+125.02，線性相關(guān)系數(shù)為r=0.9914。檢出限為0.53mg·L-1。

（三）分析應(yīng)用

1.樣品處理。用電子天平準(zhǔn)確稱取菠菜（9.5220g）、油菜（9.9204g）、生菜（9.5047g）加入250mL錐形瓶中，往錐形瓶中分別加入50 mL超純水，浸泡12小時(shí)后，置于超聲波清洗容器中振蕩5 min，取上清液進(jìn)行測定。

2.加標(biāo)回收率實(shí)驗(yàn)。分別取三支10mL比色管，然后在優(yōu)化的實(shí)驗(yàn)條件下，按1.2中實(shí)驗(yàn)方法測定樣品空白和加入了6.0mL的溶液在加了4.0mL樣品溶液，平行測定3次，然后在另外三支10ml比色管中加入待測的0.5mL的辛硫磷農(nóng)藥溶液，計(jì)算熒光強(qiáng)度的差值，同理，然后再分別測定辛硫磷溶液1.0mL，1.5mL時(shí)的熒光強(qiáng)度的差值，測完后根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線上的標(biāo)準(zhǔn)溶液的值，計(jì)算加標(biāo)回收率，優(yōu)化的實(shí)驗(yàn)條件下，取于3.1中相同量的試樣提取液，向試樣中加入一定量的待測成分標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，在587.0nm處的熒光強(qiáng)度If，測定結(jié)果如表4所示。

三、結(jié)論

在羅丹明B和混合磷酸鹽以及過氧化氫混合溶液中加入農(nóng)藥辛硫磷后，體系熒光強(qiáng)度明顯下降，結(jié)果表明，辛硫磷可使體系熒光猝滅。發(fā)現(xiàn)體系的熒光強(qiáng)度降低值與辛硫磷含量在一定濃度范圍內(nèi)成線性關(guān)系，基于此，可建立羅丹明B、混合磷酸鹽和過氧化氫測定辛硫磷的熒光分析法，該方法測定快速、簡便、靈敏度高，可用于蔬菜中辛硫磷殘留量的測定。

參考文獻(xiàn)

[1]程定璽，趙亞鵬，左國強(qiáng)等.熒光光譜法測定有機(jī)磷農(nóng)藥殘留量[J].解放軍藥學(xué)學(xué)報(bào)， 2010，（46）：645-647.

[2]余櫚.長沙市蔬菜有機(jī)磷農(nóng)藥殘留檢測與分析[J].科技與產(chǎn)業(yè)，2010.4：20-21.

[3]周睿璐，付大友，郭雪琰等.試紙法快速檢測果蔬中敵敵畏含量的研究[J].2017.46（1）：107-112.