高遷移率蛋白 HmgB3和組蛋白Mlh1維持了四膜蟲小核穩(wěn)定性

喬菊霞,王偉

(山西大學(xué) 生物技術(shù)研究所,化學(xué)生物學(xué)與分子工程教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,山西 太原 030006)

高遷移率蛋白 HmgB3和組蛋白Mlh1維持了四膜蟲小核穩(wěn)定性

喬菊霞,王偉*

(山西大學(xué) 生物技術(shù)研究所,化學(xué)生物學(xué)與分子工程教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,山西 太原 030006)

高遷移率族蛋白(High Mobility Group protein,HMG)和組蛋白H1結(jié)合染色質(zhì) DNA,在維持染色質(zhì)的高級(jí)結(jié)構(gòu)、基因組基因表達(dá)調(diào)控以及DNA修復(fù)等方面發(fā)揮重要作用。嗜熱四膜蟲細(xì)胞含有一個(gè)體細(xì)胞系的大核和一個(gè)生殖系的小核,小核特異定位的高遷移率蛋白HmgB3或組蛋白Mlh1的缺失并未引起生長(zhǎng)期細(xì)胞的異常表型。本研究通過同源重組的方法構(gòu)建了HMGB3和MLH1的雙敲除細(xì)胞突變株ΔHMGB3ΔMLH1。突變細(xì)胞在營(yíng)養(yǎng)生長(zhǎng)期能夠正常增殖,但對(duì)甲基磺酸甲酯較為敏感。缺對(duì)PCR檢測(cè)發(fā)現(xiàn)突變株中小核染色體有缺失現(xiàn)象,并且不能完成有性生殖。有性生殖過程中,減數(shù)分裂后的小核異常降解。結(jié)果表明高遷移率蛋白HmgB3和小核組蛋白Mlh1共同維持了四膜蟲小核的穩(wěn)定性,并可能具有功能上的冗余性。

嗜熱四膜蟲;高遷移率蛋白HmgB3;組蛋白Mlh1;小核穩(wěn)定性

0 引言

真核生物細(xì)胞中染色質(zhì)主要由DNA、組蛋白、非組蛋白以及少量的RNA構(gòu)成,其中組蛋白家族和高遷移率蛋白(High Mobility Group protein,HMG)家族是兩類最豐富和最重要的染色質(zhì)組分。組蛋白H1和HMG蛋白在DNA復(fù)制、轉(zhuǎn)錄、修復(fù)、染色質(zhì)重塑等方面發(fā)揮著重要的作用[1]。HMG蛋白不僅調(diào)控基因組功能,而且調(diào)節(jié)特定基因的表達(dá)[2]。組蛋白H1可以與核小體二分體附近的DNA 或者鄰近的連接 DNA 結(jié)合,促進(jìn)DNA纏繞在組蛋白八聚體上,保證核小體結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定性[3]。HMG蛋白與組蛋白H1在染色體上有不同的分布,同時(shí)在核小體二分體附近占位重疊[4]。哺乳動(dòng)物細(xì)胞中HMGB蛋白可以取代染色質(zhì)上的組蛋白H1,競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合特異的DNA位點(diǎn),影響染色質(zhì)結(jié)構(gòu),調(diào)節(jié)基因組轉(zhuǎn)錄活性[5]。

嗜熱四膜蟲(Tetrahymenathermophila)具有核的二態(tài)性:營(yíng)養(yǎng)生長(zhǎng)期轉(zhuǎn)錄活躍的多倍體大核(MAC)和營(yíng)養(yǎng)生長(zhǎng)期轉(zhuǎn)錄沉默的二倍體小核(MIC)。嗜熱四膜蟲HMG蛋白家族中的HmgB3(TTHERM-00155590)在生長(zhǎng)期和饑餓期特異定位在小核上,有性生殖時(shí)期定位于減數(shù)分裂和有絲分裂有功能的小核上。然而敲除HMGB3之后,沒有明顯的細(xì)胞學(xué)缺陷[6]。小核特異的組蛋白基因MLH1(TTHERM-00471820)敲除后,嗜熱四膜蟲的小核增大,大核保持不變,但MLH1的缺失并不影響嗜熱四膜蟲的營(yíng)養(yǎng)生長(zhǎng)期小核有絲分裂以及細(xì)胞增殖[7]。HMG家族蛋白與組蛋白H1在維持染色質(zhì)高級(jí)結(jié)構(gòu)和表觀遺傳學(xué)調(diào)控方面相互影響,然而嗜熱四膜蟲Mlh1與HmgB3是否存在功能上的補(bǔ)償,目前并不清楚。本研究首次獲得HMGB3和MLH1的雙敲除突變株,分析了組蛋白H1和高遷移率蛋白對(duì)四膜蟲細(xì)胞核的穩(wěn)定性和有性生殖發(fā)育的影響。

1 材料與方法

1.1 材料

嗜熱四膜蟲野生型細(xì)胞株B2086和CU428由美國(guó)康奈爾大學(xué)Peter J. Bruns博士惠贈(zèng)。ΔHMGB3-5和ΔHMGB3-7突變體,pBsr由本實(shí)驗(yàn)室保存。氨芐青霉素、巴龍霉素(上海生工),鏈霉素、兩性霉素、葡萄糖、DAPI(北京索萊寶科技有限公司)。pMD?18-T克隆試劑盒(TaKaRa公司)。限制性內(nèi)切酶、T4 DNA連接酶和TaqDNA聚合酶(Thermo公司);胰蛋白胨、酵母提取物(英國(guó)OXOID公司)。引物合成(上海生工);質(zhì)粒抽提試劑(北京天根生化公司),質(zhì)?；厥赵噭┖?OMEGA公司)。

1.2 四膜蟲細(xì)胞培養(yǎng)

嗜熱四膜蟲于SPP 培養(yǎng)基 (質(zhì)量濃度為1% 胰蛋白胨,0.2% 葡萄糖,0.1% 酵母提取物,0.003% EDTA鐵鹽)中30℃、170 r/min搖床培養(yǎng)[8]。兩種不同交配型四膜蟲生長(zhǎng)至濃度為3.0～3.5×105cells/mL后,于10 mmol/L Tris(pH 7.4)中饑餓18～24 h。將濃度為2.5×105cells/mL的兩種不同交配型四膜蟲等量混合,30℃靜置培養(yǎng),細(xì)胞進(jìn)行有性生殖[9]。

1.3MLH1和HMGB3基因的序列和表達(dá)分析

MLH1和HMGB3基因的DNA序列、mRNA序列和表達(dá)譜由四膜蟲基因組數(shù)據(jù)庫(kù)(http:∥www.ciliate.org)和四膜蟲功能基因組數(shù)據(jù)庫(kù)(http:∥tfgd.ihb.ac.cn)獲得[10-11]。HmgB3和Mlh1的HMG-box氨基酸序列比對(duì)使用DNAMAN軟件。

1.4 pBsr4-MLH1重組敲除載體的構(gòu)建

以嗜熱四膜蟲基因組為模板,通過引物KO-MLH1-5-F(5’-TGAGCTCCTTTAGTTAAACTTACTGATTAAATTTTC-3’,下橫線為SacI酶切點(diǎn))/KO-MLH1-5-R(5’-TGCGGCCGCGCAAATCTTTCATAAGTATTGTCAAATC-3’,下劃線為NotⅠ酶切位點(diǎn))和KO-MLH1-3-F (5’-TCTCGAGGTTAATTAATTACAAAATAGTTGGATGG-3’,下劃線為XhoⅠ酶切位點(diǎn))/KO-MLH1-3-R(5’-TGGTACCGGCAAATATTATATCATAAAGCTTATCC-3’,下劃線為KpnⅠ酶切位點(diǎn))分別擴(kuò)增MLH1基因的上游序列1 054 bp和下游序列571 bp,分別構(gòu)建到pMD?18-T載體上,得到重組質(zhì)粒pMD 18-T-5’和pMD 18-T-3’。限制性內(nèi)切酶SacⅠ和NotⅠ分別酶切質(zhì)粒pMD18-T-5’和pBsr并回收目的片段。目的片段用T4 DNA連接酶連接(16℃過夜),轉(zhuǎn)化并篩選得到重組質(zhì)粒pBsr-5’。限制性內(nèi)切酶KpnⅠ和XhoⅠ分別酶切質(zhì)粒pMD 18-T-3’和pBsr-5’,膠回收目的片段并連接轉(zhuǎn)化,篩選得到重組質(zhì)粒pBsr-MLH1(圖 1B)。

1.5 基因槍轉(zhuǎn)化以及突變株篩選

將構(gòu)建成功的重組敲除載體質(zhì)粒pBsr-MLH1用限制性內(nèi)切酶SacⅠ和KpnⅠ酶切線性化,濃縮后濃度達(dá)到1～1.5 μg/μL。使用高壓氣體基因槍(GJ-1000,寧波新芝科技有限公司)將線性化質(zhì)粒轉(zhuǎn)化到不同交配型的已經(jīng)敲除HMGB3基因的四膜蟲細(xì)胞ΔHMGB3-5和ΔHMGB3-7。通過同源重組的方法(圖1)，利用殺稻瘟菌素梯度濃度篩選,PCR鑒定(鑒定引物為5’-CGCTTAATGCTGCAGCTTTTCCC-3’和5’-CATAATGGTGAATATTTGTTAAAATACC-3’),得到穩(wěn)定的敲減突變株ΔHMGB3ΔMLH1-5和完全敲除突變株ΔHMGB3ΔMLH1-7(圖 1C)。

A. 基因MLH1的敲除同源重組示意圖。 B. 重組質(zhì)粒pBsr-MLH1的鑒定。 M, DNA Marker。 1, pBsr-MLH1。 2,4: 以pBsr-MLH1為模板,分別以MLH1的3’ 和5’ 側(cè)翼序列引物擴(kuò)增的PCR產(chǎn)物。3,5: pBsr-MLH1的Xho Ⅰ/Kpn Ⅰ 和Sac Ⅰ/Not Ⅰ的雙酶切產(chǎn)物。 C. 雙敲除突變株ΔHMGB3ΔMLH1的鑒定。 M, DNA Marker。W, 野生型條帶,大約2.4 kb。 箭頭所指為重組條帶,大約1.4 kbFig.1 Identification of ΔHMGB3ΔMLH1 mutants圖1 雙敲除突變株ΔHMGB3ΔMLH1的鑒定

1.6 小核染色體完整性檢測(cè)

四膜蟲五對(duì)小核染色體含有小核特異染色體斷裂序列(chromosome breakage sequence,Cbs)。利用分別來自五對(duì)染色體的特異斷裂片段側(cè)翼序列引物,以基因組為模板,進(jìn)行缺對(duì)PCR檢測(cè)小核的完整性分析[12]。使用的引物分別來自染色體1L-4,2R-1,3L-2,4L-2,5-1。 反應(yīng)條件為94℃，5 min,以及40個(gè)循環(huán)的變性94℃，30 s,退火50℃，30 s(引物Ⅱ[12]) 或者54℃，30 s (引物Ⅰ,Ⅲ,Ⅳ,和Ⅴ[12]), 延伸條件為68℃，2 min。 后延伸條件為68℃，10 min。

1.7 細(xì)胞核染色觀察

將20 μL的10 ng/mL的DAPI加入樣品,置于室溫15 min,封片,使用Olympus激光共聚焦顯微鏡觀察細(xì)胞有性生殖。

2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果

2.1 嗜熱四膜蟲HMGB3和MLH1基因分析

四膜蟲功能基因組數(shù)據(jù)庫(kù)顯示,MLH1在生長(zhǎng)期有著較低的表達(dá)量,在有性生殖時(shí)期有著較高的表達(dá)量,有性生殖6 h達(dá)到最大值(圖2A)。HMGB3在生長(zhǎng)期有較低的表達(dá)量,有性生殖時(shí)期有著較高的表達(dá)量,有性生殖2～4 h達(dá)到最大值(圖 2B)。MLH1和HMGB3具有相似的表達(dá)圖譜且在有性生殖過程中表達(dá)顯著上調(diào)。Mlh1和HmgB3的HMG-box有著35%的一致性(圖2C),且HmgB3和Mlh1有著相似的氨基酸電荷性分布特征[6],暗示兩個(gè)基因可能具有功能上的冗余性。

A.MLH1基因的微陣列表達(dá)譜。B.HMGB3基因的微陣列表達(dá)譜。圖A和圖B均引自四膜蟲功能基因組數(shù)據(jù)庫(kù)(http:∥tfgd.ihb.ac.cn)。L-1,L-2,L-3分別表示營(yíng)養(yǎng)生長(zhǎng)期細(xì)胞濃度為1×105 cells/mL,3.5×105 cells/mL和1×106 cells/mL;S0-S24表示饑餓期0-24 h的細(xì)胞;C0-C24表示有性生殖時(shí)期0-24 h的細(xì)胞。 C. Mlh1和HmgB3的HMG-box氨基酸序列比對(duì),方框中表示比對(duì)一致的氨基酸,使用的軟件為DNAMAN。Fig.2 Sequence analysis of MLH1 and HMGB3圖2 MLH1和HMGB3基因序列分析

2.2 雙敲除細(xì)胞株在甲基磺酸甲酯的脅迫下生長(zhǎng)受到抑制

甲基磺酸甲酯(methylmercuric sulfate,MMS)是一種單功能烷化劑,修飾后的DNA分子將產(chǎn)生一些非編碼堿基,如3-甲基腺嘌呤和7-甲基鳥嘌呤,從而引起堿基錯(cuò)配、暫停或阻斷DNA復(fù)制,進(jìn)而造成DNA損傷。HMG蛋白和組蛋白H1均可以參與DNA損傷修復(fù)。先前的研究表明敲除MLH1之后,發(fā)現(xiàn)突變株和野生型相比沒有明顯區(qū)別。雙敲除細(xì)胞株ΔHMGB3ΔMLH1和野生型細(xì)胞株生長(zhǎng)速率沒有明顯的區(qū)別(圖3A)。但是雙敲除細(xì)胞株較野生型細(xì)胞株對(duì)甲基磺酸甲酯(MMS)敏感(圖3B),表明HmgB3與Mlh1缺失的細(xì)胞對(duì)外源脅迫更為敏感,可能直接參與了染色質(zhì)的修復(fù)過程。

A.野生型四膜蟲和雙敲除突變株ΔHMGB3ΔMLH1-7的生長(zhǎng)曲線。 B.野生型四膜蟲和雙敲除突變株ΔHMGB3ΔMLH1-5/7在2 mM MMS藥物處理下的生長(zhǎng)曲線。 四膜蟲均于30℃條件下靜置培養(yǎng), 每隔4 h取樣計(jì)數(shù)細(xì)胞濃度。 每個(gè)樣均有3次重復(fù), 試驗(yàn)數(shù)據(jù)為三組數(shù)據(jù)的平均值±標(biāo)準(zhǔn)偏差。Fig.3 Prolifiration of T. thermophila during vegetative growing stage圖3 嗜熱四膜蟲細(xì)胞在營(yíng)養(yǎng)生長(zhǎng)期的增殖

2.3 雙敲除突變體導(dǎo)致小核染色體缺失

雙敲除突變株對(duì)MMS更為敏感,我們進(jìn)一步分析了突變株小核基因組DNA的完整性。利用分別來自小核五對(duì)染色體的五對(duì)特異的斷裂片段側(cè)翼序列引物,進(jìn)行五對(duì)染色體的缺對(duì)PCR檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)完全敲除細(xì)胞株ΔHMGB3ΔMLH1-7的5條染色體均有缺失(圖4A),而敲減細(xì)胞株ΔHMGB3ΔMLH1-5的第3對(duì)染色體有缺失(圖4B)。

A. 分別以四膜蟲5條染色體的5對(duì)引物, 野生型四膜蟲和雙敲除突變株ΔHMGB3ΔMLH1-7的基因組為模板,PCR擴(kuò)增的產(chǎn)物。 Ⅰ,Ⅱ,Ⅱ,Ⅳ,Ⅴ分別對(duì)應(yīng)五條不同的染色體;B. 分別以四膜蟲5條染色體的5對(duì)引物,野生型四膜蟲和雙敲除突變株ΔHMGB3ΔMLH1-5的基因組為模板,PCR擴(kuò)增的產(chǎn)物。 Ⅰ,Ⅱ,Ⅱ,Ⅳ,Ⅴ分別對(duì)應(yīng)五條不同的染色體。Fig.4 Loss of micronuclear chromosome in ΔHMGB3ΔMLH1圖4 ΔHMGB3ΔMLH1突變體中小核染色體的缺失

2.4 ΔHMGB3ΔMLH1突變細(xì)胞株進(jìn)行異常的有性生殖

將雙敲除突變株ΔHMGB3ΔMLH1-7和雙敲減突變株ΔHMGB3ΔMLH1-5饑餓20 h等數(shù)量混合,進(jìn)行有性生殖。DAPI染色后,發(fā)現(xiàn)野生型細(xì)胞株配對(duì)后,經(jīng)過兩次減數(shù)分裂形成配子核(圖5c),配子核進(jìn)行有絲分裂(圖5d)以及交換融合后形成合子核,合子核進(jìn)行兩次有絲分裂,分化發(fā)育形成2個(gè)新大核和2個(gè)新小核(圖5f)。突變株配對(duì)細(xì)胞中有一個(gè)細(xì)胞在配對(duì)形成時(shí)期的小核(圖5h)和Crescent時(shí)期(圖5i) DNA著色較淺,之后不能進(jìn)行正常的減數(shù)分裂(圖5j and 5k);另一個(gè)突變株進(jìn)行正常的減數(shù)分裂 (圖5j) 和合子核前有絲分裂 (圖5k),但是之后由于單倍體配子核不能和另一個(gè)細(xì)胞的配子進(jìn)行融合,導(dǎo)致配子降解 (圖5l)。最終細(xì)胞發(fā)育為只有大核的異常細(xì)胞 (圖5m,5n)。

a,h:配對(duì)細(xì)胞形成; b,i:Crescent時(shí)期,突變株細(xì)胞中一個(gè)小核DNA著色較弱;c,j:減數(shù)第二次分裂; d,k:單倍體配子進(jìn)行有絲分裂;e:合子核第二次有絲分裂;l:突變株中配子開始降解; f:anlagen時(shí)期;m,只有舊大核的配對(duì)細(xì)胞;g:2個(gè)大核和1個(gè)小核的細(xì)胞;n,只有一個(gè)舊大核的異常細(xì)胞。標(biāo)尺,10 μmFig.5 Abnormal micronuclear development of ΔHMGB3ΔMLH1 cells圖5 ΔHMGB3ΔMLH1突變株的異常小核發(fā)育

3 討論

組蛋白H1和HMG蛋白在調(diào)節(jié)染色質(zhì)結(jié)構(gòu)和功能方面都起著重要的作用。組蛋白H1進(jìn)化上存在多種變體,但多數(shù)H1含有三個(gè)結(jié)構(gòu)域:中間保守的球形結(jié)構(gòu)域,較短的N端結(jié)構(gòu)域以及較長(zhǎng)的C端結(jié)構(gòu)域[13-14]。四膜蟲Mlh1不同于多細(xì)胞真核生物的H1,包含有一個(gè)HMG-box,且在不同的發(fā)育階段存在水解過程[15]。哺乳動(dòng)物細(xì)胞內(nèi)HMGB蛋白含有兩個(gè)HMG-box,植物細(xì)胞內(nèi)HMGB蛋白含有1個(gè)HMG-box[16]。四膜蟲HmgB3含有一個(gè)HMG-box。四膜蟲細(xì)胞內(nèi)HmgB3和Mlh1蛋白N端的HMG-box有著35 %的一致性,兩個(gè)蛋白都沒有半胱氨酸,含有幾乎相同數(shù)目的帶同種電荷的氨基酸和相同數(shù)目的疏水性氨基酸[6]。HMGB3和MLH1在四膜蟲細(xì)胞內(nèi)有著相似的表達(dá)圖譜,而且具有保守的HMG-box結(jié)構(gòu),它們?cè)谒哪はx細(xì)胞中可能存在相互作用或功能的冗余性。

先前我們的研究發(fā)現(xiàn)嗜熱四膜蟲HMGB3的敲除細(xì)胞株沒有明顯的細(xì)胞學(xué)缺陷,然而HMGB3的過表達(dá)細(xì)胞株不能產(chǎn)生后代[6]。敲除四膜蟲小核組蛋白基因MLH1,發(fā)現(xiàn)小核變大,但并不影響四膜蟲的營(yíng)養(yǎng)生長(zhǎng)[7]。我們?cè)跇?gòu)建了HMGB3和MLH1的雙敲除突變株后,發(fā)現(xiàn)突變株的小核染色體會(huì)有丟失現(xiàn)象,而且完全敲除突變株比敲減突變株的小核受損嚴(yán)重。嗜熱四膜蟲小核的缺損對(duì)其營(yíng)養(yǎng)生長(zhǎng)的影響并不顯著，然而MMS的脅迫影響了突變體細(xì)胞株的生長(zhǎng)。先前我們的研究結(jié)果表明HmgB3在生長(zhǎng)、饑餓和有性生殖時(shí)期特異定位在小核,因此我們推測(cè)在MMS脅迫下,HmgB3和組蛋白H1的功能可能會(huì)發(fā)生改變,從而參與大核的損傷修復(fù)。組蛋白H1可以在DNA損傷之后,起始和擴(kuò)大泛素化信號(hào),它的泛素化標(biāo)記為RNF168提供結(jié)合位點(diǎn),進(jìn)而招募修復(fù)因子到DNA雙鏈斷裂位點(diǎn)進(jìn)行DNA損傷修復(fù)[17]。在 DT40 細(xì)胞中,HMGNs 在紫外照射引起的DNA損傷修復(fù)和維持基因組完整性方面發(fā)揮著一定的作用[18]。HMGB1/2對(duì)化學(xué)藥物順鉑造成的損傷的DNA有著較高的親和性[19]。四膜蟲HmgB3在生長(zhǎng)期和饑餓期特異定位在小核,敲除突變體在有性生殖時(shí)期沒有明顯的細(xì)胞學(xué)缺陷,而雙敲除突變株對(duì)MMS敏感性升高。哺乳動(dòng)物細(xì)胞中HMGB蛋白可以取代染色體上的組蛋白H1或者通過和H1相互作用調(diào)節(jié)DNA的結(jié)構(gòu)[5]。Mlh1的缺失會(huì)造成四膜蟲小核染色質(zhì)的松散[7],但不影響細(xì)胞在營(yíng)養(yǎng)生長(zhǎng)期的有絲分裂。HmgB3和Mlh1的同時(shí)缺失影響了有性生殖的進(jìn)程。在小核減數(shù)分裂時(shí)期,突變細(xì)胞株小核DNA著色很淺,隨著減數(shù)分裂的進(jìn)行,小核降解。我們推測(cè)HmgB3和Mlh1的缺失使得染色質(zhì)的高級(jí)結(jié)構(gòu)不能維持,DNA復(fù)制和修復(fù)異常導(dǎo)致有性生殖異常。 HmgB3和Mlh1在四膜蟲中可能存在功能的冗余性或者存在相互調(diào)節(jié),它們共同參與維持了染色質(zhì)的高級(jí)結(jié)構(gòu)。真核生物組蛋白H1和高遷移蛋白的相互作用及對(duì)染色質(zhì)的分子調(diào)控機(jī)制需進(jìn)一步深入研究。

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High Mobility Group Protein HmgB3 and Linker Histone Mlh1 Maintain Micronuclear Stability inTetrahymenathermophila

QIAO Juxia,WANG Wei*

(Key Laboratory of Chemical Biology and Molecular Engineering of Ministry of Education,Institute of Biotechnology,Shanxi University,Taiyuan 030006,China)

High mobility group protein (HMG) and linker histone H1 bind to linker DNA in chromatin and play important roles in establishing chromatin higher structure, regulating gene transcription and DNA repair.Tetrahymenathermophilacontains one somatic macronucleus (MAC) and one germ line micronucleus (MIC), disruption of micronuclear specific HmgB3 or Mlh1 has no significant cytological defects during vegetative growing stage.HMGB3 andMLH1 double knockout strains were constructed by homologous recombination.ΔHMGB3ΔMLH1 mutants normally proliferate during vegetative growing stage, but are sensitive to methylmercuric sulfate treatment. Loss of micronuclear chromosomes was found in ΔHMGB3ΔMLH1 mutants by the nullisomic-based PCR. Furthermore, abnormal conjugation progress and degradation of micronuclei occurred in ΔHMGB3ΔMLH1 mutants.The results show that HmgB3 and Mlh1 were required for micronuclear stability and could had redundant function inT.thermophila.

Tetrahymenathermophila;high mobility group protein (HmgB3);histone H1 (Mlh1);micronuclear stability

10.13451/j.cnki.shanxi.univ(nat.sci.).2017.02.025

2017-02-26；

2017-03-20

國(guó)家自然科學(xué)基金(31471999);山西省自然科學(xué)基金 (2015011078);山西省回國(guó)留學(xué)人員科研資助項(xiàng)目(2015008)

喬菊霞(1991-),女,碩士研究生,研究方向?yàn)榧?xì)胞分子生物學(xué)。

*通信作者：王偉(WANG Wei)，E-mail:gene@sxu.edu.cn

Q75

A

0253-2395(2017)02-0358-07