• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    升降散對(duì)DM大鼠雙歧桿菌、大腸桿菌及IL—6的影響

    2017-05-12 18:49杜芬芬孫曉澤劉愛華
    關(guān)鍵詞:糖平雙歧菌群

    杜芬芬+孫曉澤+劉愛華

    【摘要】目的:觀察升降散對(duì)糖尿病大鼠雙歧桿菌、大腸桿菌及IL-6的影響,探討其作用機(jī)制。方法:取70只SD雄性大鼠,隨機(jī)取10只作為正常對(duì)照組,余60只用高脂飼料喂養(yǎng)配合小劑量鏈脲佐菌素誘導(dǎo)建立糖尿病模型,取成模大鼠50只分為模型對(duì)照組、拜糖平組、升降散低劑量組、升降散中劑量組和升降散高劑量組,共分6組,每組10只,各組按相應(yīng)藥物劑量干預(yù)6周后,每組取8只大鼠樣本采用Elisa法檢測(cè)IL-6、INS,Realtime PCR技術(shù)進(jìn)行細(xì)菌定量測(cè)定。結(jié)果:治療前,模型對(duì)照組、拜糖平組、升降散低、中、高三個(gè)劑量組較正常對(duì)照組空腹血糖(FBG)、IL-6、INS及大腸桿菌數(shù)量均明顯升高,但雙歧桿菌數(shù)量明顯減少;治療前后,正常對(duì)照組及模型對(duì)照組組內(nèi)各指標(biāo)無明顯變化。治療后,拜糖平組及升降散低、中、高劑量FBG在2周、4周及6周均逐漸降低,且高于同時(shí)間正常對(duì)照組,低于同時(shí)間模型對(duì)照組(P<005);IL-6、INS、大腸桿菌數(shù)量較模型對(duì)照組明顯減少,但同時(shí)高于正常對(duì)照組(P<005);雙歧桿菌數(shù)量較模型對(duì)照組、正常對(duì)照組明顯增多(P<001)。尤以升降散中劑量組增加雙歧桿菌數(shù)量、降低大腸桿菌數(shù)量,抑制炎癥因子、降低胰島素含量效果明顯。結(jié)論:升降散能通過增加益生菌數(shù)量,降低致病菌數(shù)量達(dá)到調(diào)整腸道菌群結(jié)構(gòu)的目的,從而抑制炎癥狀態(tài),降低血糖。其部分作用機(jī)制可能是通過調(diào)整腸道菌群、抑制炎癥因子而減輕胰島素抵抗(IR),增加胰島素利用率實(shí)現(xiàn)的。

    【關(guān)鍵詞】升降散;糖尿??;雙歧桿菌;大腸桿菌;IL-6 大鼠

    【中圖分類號(hào)】R285【文獻(xiàn)標(biāo)志碼】 A【文章編號(hào)】1007-8517(2017)08-0035-04

    Abstract:Objective To observe the effect and the mechanism of Chinese herbal medicine on Bifidobacterium, Escherichia coli and IL-6 in diabetic rats Methods 70 SD male rats, 10 rats as normal control group, only more than 60 high fat diet combined with low dose of streptozotocin induced diabetic model was established, the model 50 rats were divided into model group, Bai Tangping group, Shengjiangsan low dose group, middle dose group Shengjiangsan Shengjiangsan and high dose groups were divided into 6 groups, 10 rats in each group, each group according to the corresponding dose of drug for 6 weeks, 8 rats from each group of samples was detected by Elisa IL-6, INS Realtime, PCR technology for quantitative determination of bacteria Results Before treatment, model group and acarbose group, Shengjiangsan low, medium and high dose groups compared with normal control group, fasting blood glucose (FBG), IL-6, INS and the number of Escherichia coli were significantly increased, but the number of bifidobacteria was significantly reduced; before and after the treatment, the normal control group and model control group each index in the group had no obvious change After treatment, acarbose Shengjiangsan group and low, middle and high dose of FBG in 2 weeks, 4 weeks and 6 weeks were gradually decreased, and higher than that of the normal control group, compared with model control group (P<005); IL-6, INS, the number of Escherichia coli than the model control group was significantly reduced, but at the same time higher than the normal control group (P<005); the number of bifidobacteria compared with model control group, normal control group increased significantly (P<001) Especially in the middle dose group, the number of bifidobacteria increased, the number of Ecoli decreased, the inflammatory factors and insulin content were decreased significantly Conclusion By increasing the number of probiotic bacteria, reducing the number of pathogens to adjust the structure of intestinal flora, thereby inhibiting the inflammatory state, reducing blood glucose Part of its mechanism may be to reduce insulin resistance (IR) and increase insulin utilization by regulating intestinal flora and inhibiting inflammatory factors

    Keywords:Shengjiangsan; DM rats; bifidobacterium; e Coli; IL-6

    隨著大量實(shí)驗(yàn)研究證實(shí)腸道菌群與肥胖、糖尿病等代謝性疾病密切相關(guān),腸道菌群已成為代謝性疾病防控的新方向。研究表明,腸道菌群失調(diào)可誘發(fā)慢性炎癥進(jìn)而誘發(fā)胰島素抵抗,從而導(dǎo)致糖尿病發(fā)生,但其機(jī)制尚未十分明確。Zhang等[1]運(yùn)用16Sr DNA高通量測(cè)序方法,發(fā)現(xiàn)機(jī)體代謝參數(shù)和菌群多樣性兩者間有明顯的關(guān)聯(lián)性。此為腸道菌群的結(jié)構(gòu)可調(diào)控糖尿病的發(fā)病機(jī)制研究提供了證據(jù)?,F(xiàn)有關(guān)于腸道菌群失調(diào)導(dǎo)致肥胖及2型糖尿病發(fā)生的研究,多數(shù)觀點(diǎn)集中認(rèn)為腸道乳酸菌、雙歧桿菌等益生菌的減少與糖耐量異常密切相關(guān)[2-4]。中藥升降散為臨床調(diào)理脾胃氣機(jī)的常用治療大法,前期研究證實(shí),其改善糖尿病的癥狀及降低血糖效果頗佳。本研究通過制作DM大鼠模型,觀察升降散對(duì)DM大鼠腸道菌群(大腸桿菌、雙歧桿菌)結(jié)構(gòu)變化及相關(guān)炎癥因子(IL-6)的影響,探討其部分作用機(jī)制,為升清降濁法調(diào)整腸道菌群、改善糖尿病炎癥狀態(tài)、改善糖尿病臨床預(yù)后提供理論依據(jù)。

    1儀器與材料

    11動(dòng)物SD雄性大鼠70只,SPF級(jí),體重140~160g,由鄭州大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心提供,合格證號(hào):41003100002297。清潔環(huán)境中飼養(yǎng),室內(nèi)溫度維持在25℃左右,自由攝水。

    12藥品與試劑升降散藥物組成(僵蠶10g,蟬蛻6g,姜黃6g,大黃3g),藥物購(gòu)自河南省中醫(yī)院,由三九顆粒制藥提供,顆粒劑總重量為7g;拜糖平/阿卡波糖片(德國(guó)拜耳公司);鏈脲佐菌素(STZ)(美國(guó)Sigma公司);SYBR Green/Flourescein qPCR Master Mix(2X))Fermentas公司);Ex TaqTM、DL2000 DNA Marker、DL15000 DNA Marker(TAKARA公司);引物合成,擎科新業(yè)生物技術(shù)有限公司提供;基因組DNA提取試劑盒(北京天根生化科技有限公司,批號(hào):DP328);大鼠IL-6 Elisa檢測(cè)試劑盒(河南天馳生物有限公司,批號(hào):CK-E30646R)。

    13儀器血糖測(cè)定儀:穩(wěn)豪倍優(yōu)型血糖儀(強(qiáng)生醫(yī)療器械有限公司);實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀、熒光定量PCR管(ABI);水平電泳儀、紫外分析儀(北京君意東方電泳設(shè)備有限公司)。

    2方法

    21動(dòng)物造模70只大鼠普通飼料適應(yīng)性喂養(yǎng)1周后,隨機(jī)取10只作為正常對(duì)照組,標(biāo)準(zhǔn)飼料喂養(yǎng),余60只予高脂飼料喂養(yǎng)至滿8周后,腹腔注射STZ30mg/kg,正常組對(duì)照組注射等體積01mol/L無菌枸櫞酸緩沖液。72h后測(cè)大鼠空腹血糖(禁食8~10h),空腹血糖≥111mmol/L認(rèn)為糖尿病大鼠造模成功[5]。剔除未成模及死亡大鼠10只。

    22分組與給藥50只成模大鼠按隨機(jī)數(shù)字表法分為模型對(duì)照組、拜糖平組、升降散高、中、低劑量組及未造模的正常對(duì)照組,共6組,每組10只。拜糖平組每日灌胃70 mg·kg-1;升降散低、中、高劑量組,每日灌胃升降散(0753,1506,3012 g·kg-1),模型對(duì)照組與正常組每日灌胃等量生理鹽水。每3天稱體重1次,根據(jù)體重調(diào)整給藥量。藥物干預(yù)6周后進(jìn)行各指標(biāo)的觀察檢測(cè)。

    23標(biāo)本采集與指標(biāo)檢測(cè)

    231一般情況治療期間觀察大鼠精神狀態(tài)、皮毛色澤、飲水量、尿量、體重等。

    232生化指標(biāo)檢測(cè)每周血糖儀測(cè)空腹血糖值;治療第6周末,4%的水合氯醛動(dòng)物麻醉后取血標(biāo)本,每組取8只樣本進(jìn)行ELISA法檢測(cè)血清IL-6、INS。

    233Realtime PCR技術(shù)測(cè)定雙歧桿菌、大腸桿菌每組取8只大鼠新鮮糞便樣本進(jìn)行檢測(cè),按試劑盒說明書每只大鼠取02g新鮮糞便進(jìn)行基因組DNA提取,以其為模板做PCR擴(kuò)增,擴(kuò)增片段引物Ecoli (95bp):Ecoli F:CATGCCGCGTGTATGAAGAA,Ecoli R:CGGGTAACGTCAATGAGCAAA ;Bifidobacterium genus (398bp):Bifi F:CAAGGGCATCTCCGTCA, Bifi R:GCGTTCAGGGTCTTCTCC。在PCR反應(yīng)體系中,加入SYBR熒光染料,利用熒光信號(hào)的變化實(shí)時(shí)檢測(cè)PCR擴(kuò)增反應(yīng)中每一個(gè)循環(huán)擴(kuò)增產(chǎn)物量的變化,通過Ct值和標(biāo)準(zhǔn)曲線的分析對(duì)起始模板進(jìn)行定量分析。

    24統(tǒng)計(jì)學(xué)方法采用SPSS 170軟件,計(jì)量數(shù)據(jù)采用(x±s)表示,組內(nèi)比較采用t檢驗(yàn),多組間比較采用單因素方差分析,P<005 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

    3結(jié)果

    31一般情況觀察正常組大鼠精神狀況良好,反應(yīng)靈敏,飲食及尿量正常,毛色有光澤,體重穩(wěn)定增加。其余各組注射STZ后明顯消瘦,并出現(xiàn)多飲、多食、多尿、精神萎靡,毛色發(fā)黃無關(guān)澤等癥狀。

    32各組大鼠不同時(shí)間點(diǎn)FBG的比較治療前后,正常對(duì)照組及模型對(duì)照組組內(nèi)血糖無明顯變化,升降散低、中、高劑量組及拜糖平組血糖在2周、4周及6周逐漸降低,且均高于同時(shí)間正常對(duì)照組,低于同時(shí)間模型對(duì)照組,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<005)。 見表1。

    33各組大鼠治療前后IL-6、INS的比較治療前,模型對(duì)照組、拜糖平組及升降散低、中、高劑量組較正常組IL-6、INS水平均明顯升高(P<001);治療前后,正常對(duì)照組及模型對(duì)照組組內(nèi)IL-6、INS水平無明顯變化;治療后,拜糖平組及升降散低、中、高劑量組IL-6、INS較模型對(duì)照組明顯減少,但同時(shí)高于正常對(duì)照組,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<001)。其中尤以升降散中劑量組IL-6、INS減少明顯。見表2。

    34雙歧桿菌、大腸桿菌Realtime PCR定量分析治療前,模型對(duì)照組、拜糖平組及升降散低、中、高劑量組較正常組雙歧桿菌明顯降低、大腸桿菌量明顯升高(P<001);治療前后,正常對(duì)照組及模型對(duì)照組組內(nèi)乳酸桿菌、大腸桿菌量無明顯變化;治療后,模型對(duì)照組、拜糖平組及升降散低、中、高劑量組雙歧桿菌量較模型對(duì)照組、正常對(duì)照組均明顯升高,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<001),大腸桿菌數(shù)量較模型對(duì)照組明顯減少,但同時(shí)高于正常對(duì)照組(P<005);其中尤以升降散中劑量組及拜糖平組升高乳酸桿菌量、降低大腸桿菌量明顯。見表3。

    4討論

    腸道菌群做為人體最大微生態(tài)系統(tǒng),參與并影響著人體物質(zhì)與能量代謝,目前多項(xiàng)研究表明,腸道菌群與糖尿病的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān),其作用機(jī)制可能為[6-9]:首先,腸道細(xì)菌可提高能量轉(zhuǎn)化效率,能將食物中宿主自身不能分解的碳水化合轉(zhuǎn)化為代謝終產(chǎn)物—短鏈脂肪酸(SC-FAs),腸道菌群失調(diào)可誘發(fā)機(jī)體內(nèi)SCFAs水平和構(gòu)成發(fā)生異常,如此腸道抗炎癥反應(yīng)能力、腦腸肽激素分泌功能等受到影響,會(huì)引起胰島細(xì)胞功能受損、胰島素抵抗的發(fā)生;其次,高脂飲食可改變腸道細(xì)菌的環(huán)境,腸道菌群失調(diào)導(dǎo)致革蘭陰性菌比例的增多、腸壁通透性增加或者腸道菌群移位,通過產(chǎn)生和吸收更多的 LPS,激活胰島的低度慢性炎癥,炎癥可能通過多種途徑導(dǎo)致胰島β細(xì)胞結(jié)構(gòu)受損與功能障礙,促進(jìn)β細(xì)胞凋亡。同時(shí),2型糖尿病本身亦會(huì)導(dǎo)致腸道菌群紊亂,削弱腸道屏障作用,刺激機(jī)體免疫系統(tǒng)所產(chǎn)生的IL-6、TNF-α等細(xì)胞因子,促使胰島細(xì)胞功能進(jìn)一步受損,如此形成惡性循環(huán)。因此,通過調(diào)控腸道菌群的組成或許能為糖尿病的治療提供新策略。

    中醫(yī)強(qiáng)調(diào)以整體辨證論治,對(duì)此單方面的研究甚少,對(duì)其病因病機(jī)的研究散見于消渴病的文獻(xiàn)中。總結(jié)前人對(duì)其病因的認(rèn)識(shí)大致為稟賦虛弱、飲食失節(jié)、情致失調(diào)及勞欲過度,其病機(jī)以陰虛燥熱為主。但疾病是發(fā)展的,病因病機(jī)亦是發(fā)展的。劉愛華教授基于多年對(duì)DM臨床觀察和總結(jié)的基礎(chǔ)上,應(yīng)用中醫(yī)病因病機(jī)學(xué)基本理論、繼承脾胃學(xué)家李東垣、國(guó)醫(yī)大師李振華 “升清降濁”學(xué)說,并在查閱相關(guān)的文獻(xiàn)資料,運(yùn)用類比、歸納、演繹多種方法,經(jīng)過較嚴(yán)密的邏輯思維過程,創(chuàng)新提出“脾失升清,濁毒下陷”之假說,認(rèn)為DM的發(fā)病與脾胃氣機(jī)升降失常、痰濁瘀毒逆亂有關(guān),而且認(rèn)為“脾失升清,濁毒下陷”氣機(jī)升降是根本。故用升降散,以僵蠶、蟬蛻、姜黃、大黃,共研細(xì)末,以黃酒、蜂蜜為引導(dǎo),蟬蛻、僵蠶升陽中之清陽;片姜黃、制大黃降陰中之濁陰,則雜氣之流毒頓消矣?,F(xiàn)代藥理亦研究證實(shí)升降散具有抗炎、抗病毒、抗過敏、解痙,利膽,抗驚厥,調(diào)節(jié)免疫等功能[10]。

    本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示:治療前,模型對(duì)照組、拜糖平組、升降散低、中、高三個(gè)劑量組較正常對(duì)照組空腹血糖(FBG)、IL-6、INS及大腸桿菌數(shù)量均明顯升高,但雙歧桿菌數(shù)量明顯減少;治療前后,正常對(duì)照組及模型對(duì)照組組內(nèi)各指標(biāo)無明顯變化。治療后,拜糖平組及升降散低、中、高劑量FBG在2周、4周及6周均逐漸降低,且高于同時(shí)間正常對(duì)照組,低于同時(shí)間模型對(duì)照組(P<005);IL-6、INS、大腸桿菌數(shù)量較模型對(duì)照組明顯減少,但同時(shí)高于正常對(duì)照組(P<005);雙歧桿菌數(shù)量較模型對(duì)照組、正常對(duì)照組明顯增多(P<001)。尤以升降散中劑量組增加雙歧桿菌數(shù)量、降低大腸桿菌數(shù)量,抑制炎癥因子、降低胰島素含量效果明顯。由此推測(cè),升降散能通過增加益生菌數(shù)量,降低致病菌數(shù)量達(dá)到調(diào)整腸道菌群結(jié)構(gòu)的目的,從而抑制炎癥狀態(tài),減輕胰島素抵抗,增加胰島素利用率而降低血糖。參考文獻(xiàn)

    [1]Zhang X,Shen D,F(xiàn)eng Z,et al.Human gut microbiota changes reveal the progression of glucose intolerance [J].PLoS one,2013,8(8):e71108.

    [2]Gills,Mihai P,Robert T,et al. Metagenomic analysis of the human distal gut[J]. Science,2006,312(1355):1355-1359.

    [3]Larsen N,Vogensen FK,van den Berg FW,et al. Gut microbiota in human adults with type 2 diabetes differs from non-diabetic adults[J].PLoS One,2010,5(2):e 9058.

    [4] Rabot S,Membrez M,Bruneau A,et al.Germ-free C57BL/6J mice are resistant to high-fat-diet-induced insulin resistance and have altered cholesterol metabolism [J].FASEB J,2010,24(12):4948-4959.

    [5]魏占英,沈麗,馮曉慧,等. 高脂飼料喂養(yǎng)時(shí)間和STZ劑量對(duì)建立2型糖尿病大鼠模型的影響[J]. 醫(yī)學(xué)研究雜志,2014(02):42-46.

    [6] Samuel BS,Shaito A,Motoike T,et al. Effects of the gut micorbiota on host adiposity are modulated by the short -chanfatty-acid binding G protror,Gpr41[J].ProcNatl Acad Sci USA,2008,105(43):16767-16772.

    [7] Velagapudi VR,Hezaveh R,Reigstad CS,et al. The gut microbiota modulate shostenergyand lipid metabolism in mice[J].J Lipid Res,2010,51(5):1101-1112.

    [8]Guarner F,Malagelada JR. GUT flora in helth and disease[J].Lancet,2003,361(9356):512-519.

    [9]Lu YC,wc,Ohashi PS. LPS/TLP4 signal transductionpathway[J]. Cytokine,2008,42(7):145-151.

    [10]劉文軍,薛燕星,胡東鵬. 升降散的現(xiàn)代藥理機(jī)制研究進(jìn)展[J]. 北京中醫(yī)藥,2012(12):939-943.

    (收稿日期:2017-2-20編輯:陶希睿)

    猜你喜歡
    糖平雙歧菌群
    “云雀”還是“貓頭鷹”可能取決于腸道菌群
    “水土不服”和腸道菌群
    肉牛剩余采食量與瘤胃微生物菌群關(guān)系
    拜糖平與二甲雙胍治療2型糖尿病療效及藥物副作用分析
    咽部菌群在呼吸道感染治療中的臨床應(yīng)用
    雙歧桿菌三聯(lián)活菌聯(lián)合多潘立酮治療新生兒喂養(yǎng)不耐受40例
    母乳嬰兒源產(chǎn)細(xì)菌素雙歧桿菌的分離鑒定
    抗性淀粉在雙歧桿菌作用下的體外降解
    實(shí)時(shí)熒光定量PCR法測(cè)定發(fā)酵乳中雙歧桿菌
    糖平膠囊調(diào)節(jié)血糖的臨床研究
    日韩免费av在线播放| 老司机福利观看| 法律面前人人平等表现在哪些方面| 久久午夜综合久久蜜桃| 777久久人妻少妇嫩草av网站| 嫩草影视91久久| 亚洲18禁久久av| 午夜福利在线观看吧| 亚洲第一欧美日韩一区二区三区| 亚洲精品av麻豆狂野| 精品国产超薄肉色丝袜足j| avwww免费| 国产三级黄色录像| 听说在线观看完整版免费高清| 久久香蕉激情| 精品国内亚洲2022精品成人| 久久婷婷成人综合色麻豆| 国产91精品成人一区二区三区| 99国产精品一区二区蜜桃av| 蜜桃久久精品国产亚洲av| 99国产精品一区二区三区| 日韩精品青青久久久久久| 亚洲熟妇熟女久久| 狂野欧美白嫩少妇大欣赏| 精品国产乱子伦一区二区三区| 在线观看免费视频日本深夜| 国产成年人精品一区二区| 亚洲精品久久国产高清桃花| 精品久久久久久成人av| 国产伦一二天堂av在线观看| 婷婷精品国产亚洲av在线| 国产三级黄色录像| 国产亚洲欧美98| 中文字幕av在线有码专区| 亚洲欧美精品综合久久99| 成人一区二区视频在线观看| 日韩免费av在线播放| 久久久水蜜桃国产精品网| 一本一本综合久久| 一级毛片高清免费大全| 久久国产乱子伦精品免费另类| 亚洲av电影在线进入| 亚洲人与动物交配视频| 香蕉久久夜色| 国产一区二区在线观看日韩 | 国产亚洲精品一区二区www| 久久欧美精品欧美久久欧美| 丝袜美腿诱惑在线| 亚洲avbb在线观看| 白带黄色成豆腐渣| 国产免费av片在线观看野外av| 叶爱在线成人免费视频播放| 别揉我奶头~嗯~啊~动态视频| 久久久久国内视频| 1024视频免费在线观看| 精品熟女少妇八av免费久了| 亚洲男人的天堂狠狠| 国内精品久久久久精免费| 免费观看精品视频网站| 亚洲av中文字字幕乱码综合| 久久伊人香网站| av片东京热男人的天堂| 精品久久蜜臀av无| 免费看日本二区| 成熟少妇高潮喷水视频| 人妻久久中文字幕网| 无人区码免费观看不卡| 99久久国产精品久久久| 又爽又黄无遮挡网站| 国内久久婷婷六月综合欲色啪| 人人妻人人看人人澡| 男男h啪啪无遮挡| 成人永久免费在线观看视频| 国产精品久久久av美女十八| 18美女黄网站色大片免费观看| 校园春色视频在线观看| 国产午夜福利久久久久久| 国产高清视频在线观看网站| 99热6这里只有精品| 亚洲午夜理论影院| 日本 av在线| 中亚洲国语对白在线视频| 久久久久精品国产欧美久久久| 免费无遮挡裸体视频| 久久这里只有精品中国| 午夜精品在线福利| 一级毛片高清免费大全| 午夜福利欧美成人| 两性夫妻黄色片| 一级毛片女人18水好多| 男女午夜视频在线观看| 国产高清有码在线观看视频 | 91字幕亚洲| 视频区欧美日本亚洲| 一级作爱视频免费观看| 国产av一区在线观看免费| 国产日本99.免费观看| 久久中文字幕人妻熟女| 国产精品久久久av美女十八| 国产人伦9x9x在线观看| 精品久久久久久久久久久久久| 久久久久精品国产欧美久久久| 成人18禁高潮啪啪吃奶动态图| 怎么达到女性高潮| 日本一本二区三区精品| 精品高清国产在线一区| 窝窝影院91人妻| 亚洲自偷自拍图片 自拍| 亚洲专区中文字幕在线| 国产亚洲精品久久久久5区| 老司机福利观看| 三级男女做爰猛烈吃奶摸视频| 91麻豆精品激情在线观看国产| 久久九九热精品免费| 国产99久久九九免费精品| 神马国产精品三级电影在线观看 | 亚洲av中文字字幕乱码综合| 日韩精品免费视频一区二区三区| 好男人在线观看高清免费视频| 国产1区2区3区精品| 日本五十路高清| 日本a在线网址| 欧美另类亚洲清纯唯美| 老熟妇仑乱视频hdxx| 特级一级黄色大片| 国产精品一及| 欧美人与性动交α欧美精品济南到| 男男h啪啪无遮挡| 亚洲欧美日韩无卡精品| 精品久久久久久久末码| 真人做人爱边吃奶动态| 99久久精品热视频| 美女 人体艺术 gogo| 无限看片的www在线观看| 亚洲片人在线观看| 国产麻豆成人av免费视频| 女人爽到高潮嗷嗷叫在线视频| 国产一区二区在线观看日韩 | 在线免费观看的www视频| 亚洲色图 男人天堂 中文字幕| 中文字幕高清在线视频| 国产免费av片在线观看野外av| 真人一进一出gif抽搐免费| 看黄色毛片网站| 97人妻精品一区二区三区麻豆| 中亚洲国语对白在线视频| 国内毛片毛片毛片毛片毛片| 国产高清videossex| 两个人的视频大全免费| 最近最新中文字幕大全免费视频| 国产精品一区二区免费欧美| 国产精品久久久av美女十八| 午夜精品久久久久久毛片777| 欧美高清成人免费视频www| 亚洲国产看品久久| 国产精华一区二区三区| 国产成+人综合+亚洲专区| 国产主播在线观看一区二区| 亚洲人成伊人成综合网2020| 一区二区三区激情视频| 午夜亚洲福利在线播放| 亚洲欧美日韩高清在线视频| www日本黄色视频网| 丝袜人妻中文字幕| 亚洲精品av麻豆狂野| 亚洲成人中文字幕在线播放| 久久香蕉激情| 久热爱精品视频在线9| 亚洲18禁久久av| 国产视频内射| 亚洲中文字幕日韩| 90打野战视频偷拍视频| xxx96com| av在线播放免费不卡| 亚洲色图 男人天堂 中文字幕| 搡老熟女国产l中国老女人| 久久婷婷人人爽人人干人人爱| 久9热在线精品视频| 成人永久免费在线观看视频| 午夜免费观看网址| 可以免费在线观看a视频的电影网站| 777久久人妻少妇嫩草av网站| 黄色女人牲交| 午夜免费激情av| 国产av一区在线观看免费| 黑人巨大精品欧美一区二区mp4| 神马国产精品三级电影在线观看 | 成人亚洲精品av一区二区| 欧美性长视频在线观看| 熟妇人妻久久中文字幕3abv| 日韩精品青青久久久久久| 成在线人永久免费视频| 亚洲人成电影免费在线| 91大片在线观看| 国产精品一区二区三区四区免费观看 | 久99久视频精品免费| 精品国内亚洲2022精品成人| 亚洲色图av天堂| 国产真人三级小视频在线观看| 欧美性猛交黑人性爽| 久9热在线精品视频| 窝窝影院91人妻| 男人舔女人的私密视频| 久久精品国产清高在天天线| 18美女黄网站色大片免费观看| 久久久久精品国产欧美久久久| 亚洲人成网站在线播放欧美日韩| 草草在线视频免费看| 51午夜福利影视在线观看| 97超级碰碰碰精品色视频在线观看| 久久精品亚洲精品国产色婷小说| 亚洲欧美日韩无卡精品| 亚洲精华国产精华精| 精品第一国产精品| 免费在线观看影片大全网站| 午夜福利免费观看在线| 久久久久久亚洲精品国产蜜桃av| 亚洲欧美日韩东京热| 国产精品香港三级国产av潘金莲| 51午夜福利影视在线观看| 国产成人欧美在线观看| 亚洲国产精品合色在线| 日本撒尿小便嘘嘘汇集6| 亚洲五月天丁香| 很黄的视频免费| 成人高潮视频无遮挡免费网站| 久久精品夜夜夜夜夜久久蜜豆 | 国产蜜桃级精品一区二区三区| 草草在线视频免费看| 国产一区在线观看成人免费| 在线观看美女被高潮喷水网站 | 欧美极品一区二区三区四区| 成人永久免费在线观看视频| 女人高潮潮喷娇喘18禁视频| 成在线人永久免费视频| 非洲黑人性xxxx精品又粗又长| 99久久99久久久精品蜜桃| 亚洲自拍偷在线| 一个人免费在线观看电影 | 精品久久久久久久久久久久久| 一区二区三区激情视频| 国产一区二区在线av高清观看| 制服诱惑二区| 国产精品国产高清国产av| 女生性感内裤真人,穿戴方法视频| 久久精品国产99精品国产亚洲性色| 在线观看舔阴道视频| 亚洲精品久久成人aⅴ小说| 一本久久中文字幕| 男男h啪啪无遮挡| 黄色女人牲交| 校园春色视频在线观看| 人人妻,人人澡人人爽秒播| 午夜福利视频1000在线观看| 国产黄片美女视频| 欧美成人性av电影在线观看| 脱女人内裤的视频| 国产精品,欧美在线| 久久精品国产99精品国产亚洲性色| 99久久久亚洲精品蜜臀av| 免费人成视频x8x8入口观看| 欧美绝顶高潮抽搐喷水| 舔av片在线| 91老司机精品| 国产欧美日韩一区二区三| 两人在一起打扑克的视频| 妹子高潮喷水视频| 男女视频在线观看网站免费 | 又大又爽又粗| 国产免费男女视频| a级毛片a级免费在线| 亚洲在线自拍视频| 国产av一区二区精品久久| 国产97色在线日韩免费| 此物有八面人人有两片| 后天国语完整版免费观看| 老司机在亚洲福利影院| 在线永久观看黄色视频| 色综合欧美亚洲国产小说| 日韩欧美国产一区二区入口| 一进一出抽搐动态| 日本免费一区二区三区高清不卡| 亚洲五月婷婷丁香| 黑人巨大精品欧美一区二区mp4| 亚洲七黄色美女视频| 亚洲av片天天在线观看| 九九热线精品视视频播放| 久久久久久久久免费视频了| 亚洲精品久久成人aⅴ小说| 国产成人aa在线观看| 国内精品一区二区在线观看| 日日夜夜操网爽| 国产精品亚洲av一区麻豆| 制服人妻中文乱码| 欧美三级亚洲精品| 一个人免费在线观看电影 | 中文字幕最新亚洲高清| 亚洲精品在线美女| 在线观看美女被高潮喷水网站 | 婷婷精品国产亚洲av| 十八禁网站免费在线| 国产亚洲欧美98| 亚洲精品在线美女| 岛国在线免费视频观看| 日日摸夜夜添夜夜添小说| 国产一区在线观看成人免费| 别揉我奶头~嗯~啊~动态视频| 国产伦在线观看视频一区| 亚洲欧美日韩无卡精品| 桃红色精品国产亚洲av| 国产午夜精品论理片| 国产精品免费一区二区三区在线| 又大又爽又粗| 欧美最黄视频在线播放免费| 神马国产精品三级电影在线观看 | 国产亚洲精品综合一区在线观看 | 精品午夜福利视频在线观看一区| 香蕉久久夜色| www.自偷自拍.com| av在线天堂中文字幕| 欧美日韩一级在线毛片| 亚洲国产日韩欧美精品在线观看 | 亚洲国产欧美网| 在线观看一区二区三区| 麻豆国产av国片精品| 一本综合久久免费| 国产私拍福利视频在线观看| 中文字幕精品亚洲无线码一区| 欧美日韩精品网址| 久久久水蜜桃国产精品网| www国产在线视频色| 欧美三级亚洲精品| 免费人成视频x8x8入口观看| 国语自产精品视频在线第100页| 欧美成人性av电影在线观看| 婷婷亚洲欧美| 中亚洲国语对白在线视频| 又黄又爽又免费观看的视频| 女生性感内裤真人,穿戴方法视频| 亚洲男人的天堂狠狠| 操出白浆在线播放| 操出白浆在线播放| 最新美女视频免费是黄的| 国产男靠女视频免费网站| 国产精品亚洲一级av第二区| 久久久久久九九精品二区国产 | 免费一级毛片在线播放高清视频| 国产精品av视频在线免费观看| 国产熟女午夜一区二区三区| 成人永久免费在线观看视频| 久久精品夜夜夜夜夜久久蜜豆 | 欧美乱码精品一区二区三区| 九色成人免费人妻av| 正在播放国产对白刺激| av中文乱码字幕在线| 男插女下体视频免费在线播放| 久久久久免费精品人妻一区二区| 日韩欧美三级三区| 欧美一级毛片孕妇| 老汉色∧v一级毛片| 亚洲一码二码三码区别大吗| 窝窝影院91人妻| 国产高清激情床上av| 一进一出抽搐动态| 亚洲精品一卡2卡三卡4卡5卡| 欧美一区二区国产精品久久精品 | 精品一区二区三区视频在线观看免费| 久久中文字幕人妻熟女| 黄色a级毛片大全视频| 国产三级在线视频| 国产精品亚洲av一区麻豆| 亚洲美女黄片视频| 色av中文字幕| 久久亚洲精品不卡| 国产av一区在线观看免费| 国产精品久久久久久精品电影| 日本三级黄在线观看| 国产av一区二区精品久久| 欧美国产日韩亚洲一区| 91麻豆精品激情在线观看国产| 天堂影院成人在线观看| 男女床上黄色一级片免费看| 可以在线观看毛片的网站| 国产午夜精品久久久久久| 成人欧美大片| 亚洲精品国产精品久久久不卡| 可以在线观看毛片的网站| 琪琪午夜伦伦电影理论片6080| 日日摸夜夜添夜夜添小说| 亚洲av日韩精品久久久久久密| 中文字幕av在线有码专区| 露出奶头的视频| 香蕉久久夜色| 亚洲aⅴ乱码一区二区在线播放 | 国产精品美女特级片免费视频播放器 | 婷婷精品国产亚洲av在线| 99久久精品国产亚洲精品| 午夜影院日韩av| 亚洲第一欧美日韩一区二区三区| 欧美黑人精品巨大| 久久午夜综合久久蜜桃| 变态另类丝袜制服| 中文资源天堂在线| 欧美zozozo另类| 老熟妇乱子伦视频在线观看| 色播亚洲综合网| 又紧又爽又黄一区二区| 欧美色视频一区免费| 三级国产精品欧美在线观看 | 国产精品电影一区二区三区| 天天添夜夜摸| 日韩国内少妇激情av| 大型av网站在线播放| av免费在线观看网站| 黄片大片在线免费观看| 国内少妇人妻偷人精品xxx网站 | 超碰成人久久| 国产精品 国内视频| 在线观看免费视频日本深夜| 别揉我奶头~嗯~啊~动态视频| 97碰自拍视频| 91麻豆av在线| 他把我摸到了高潮在线观看| 国产探花在线观看一区二区| 悠悠久久av| 高清毛片免费观看视频网站| 色哟哟哟哟哟哟| 欧美日韩一级在线毛片| 久久国产乱子伦精品免费另类| 精品欧美一区二区三区在线| 黄色女人牲交| 脱女人内裤的视频| 久久中文字幕一级| 欧美精品亚洲一区二区| 青草久久国产| 99国产极品粉嫩在线观看| 免费看日本二区| 99久久精品热视频| 国产在线精品亚洲第一网站| 九九热线精品视视频播放| 特级一级黄色大片| 1024视频免费在线观看| 午夜视频精品福利| 成人国语在线视频| 亚洲精品久久成人aⅴ小说| 丰满人妻熟妇乱又伦精品不卡| 国产精品,欧美在线| 成人欧美大片| 日本a在线网址| 日本成人三级电影网站| 国产成人aa在线观看| 午夜福利18| www.精华液| 国产成年人精品一区二区| 一区二区三区国产精品乱码| 狠狠狠狠99中文字幕| 国产视频一区二区在线看| 在线观看日韩欧美| 色在线成人网| 国产久久久一区二区三区| 欧美黄色片欧美黄色片| 亚洲成av人片在线播放无| 大型av网站在线播放| 久久精品91蜜桃| 午夜激情福利司机影院| 一区福利在线观看| 日韩大尺度精品在线看网址| 极品教师在线免费播放| 国产精品1区2区在线观看.| tocl精华| 村上凉子中文字幕在线| 伦理电影免费视频| 欧美性猛交黑人性爽| 757午夜福利合集在线观看| 丝袜人妻中文字幕| 97碰自拍视频| 欧美中文综合在线视频| 国产黄a三级三级三级人| 又黄又粗又硬又大视频| 一边摸一边抽搐一进一小说| 欧美+亚洲+日韩+国产| 精品日产1卡2卡| 岛国视频午夜一区免费看| 日韩欧美在线乱码| 亚洲黑人精品在线| 悠悠久久av| 久久精品国产99精品国产亚洲性色| 色综合亚洲欧美另类图片| 日日摸夜夜添夜夜添小说| 51午夜福利影视在线观看| 亚洲成人免费电影在线观看| 亚洲欧美激情综合另类| 在线永久观看黄色视频| 国产成人精品久久二区二区免费| 亚洲黑人精品在线| 久久久久久九九精品二区国产 | 99热只有精品国产| 女人爽到高潮嗷嗷叫在线视频| 免费人成视频x8x8入口观看| 国产高清视频在线播放一区| 成人三级做爰电影| 亚洲熟妇中文字幕五十中出| 超碰成人久久| 香蕉国产在线看| 亚洲成人精品中文字幕电影| 91大片在线观看| 国产一区二区三区在线臀色熟女| 欧美日韩精品网址| 18禁黄网站禁片午夜丰满| 在线观看一区二区三区| 窝窝影院91人妻| 亚洲一码二码三码区别大吗| 成人av一区二区三区在线看| 老司机午夜福利在线观看视频| 欧美午夜高清在线| 99久久99久久久精品蜜桃| 中亚洲国语对白在线视频| 大型黄色视频在线免费观看| 熟女少妇亚洲综合色aaa.| 一二三四社区在线视频社区8| 欧美绝顶高潮抽搐喷水| 制服诱惑二区| 丁香欧美五月| 亚洲国产中文字幕在线视频| 免费电影在线观看免费观看| 精品第一国产精品| 哪里可以看免费的av片| 9191精品国产免费久久| 国产黄色小视频在线观看| 又黄又爽又免费观看的视频| 这个男人来自地球电影免费观看| 两个人的视频大全免费| 成人av在线播放网站| 黄色 视频免费看| 女警被强在线播放| 久久欧美精品欧美久久欧美| 成人av在线播放网站| 欧美又色又爽又黄视频| 在线看三级毛片| 日韩欧美精品v在线| 精品欧美一区二区三区在线| 午夜福利欧美成人| www.精华液| 美女黄网站色视频| 欧美久久黑人一区二区| 亚洲av成人av| 成人精品一区二区免费| 叶爱在线成人免费视频播放| 亚洲最大成人中文| 国模一区二区三区四区视频 | 久久久久亚洲av毛片大全| 国产精品亚洲av一区麻豆| 亚洲国产看品久久| 午夜久久久久精精品| 99精品欧美一区二区三区四区| 国产激情偷乱视频一区二区| 成在线人永久免费视频| 欧美日韩瑟瑟在线播放| av超薄肉色丝袜交足视频| 久久精品91蜜桃| 99久久国产精品久久久| 国产精品久久久人人做人人爽| 亚洲av成人一区二区三| 禁无遮挡网站| 999久久久国产精品视频| 欧美黄色淫秽网站| 午夜a级毛片| 免费看日本二区| 少妇被粗大的猛进出69影院| 一本精品99久久精品77| 久久天堂一区二区三区四区| 国产又黄又爽又无遮挡在线| 99精品欧美一区二区三区四区| 麻豆一二三区av精品| 亚洲精品中文字幕一二三四区| 精品少妇一区二区三区视频日本电影| 一级作爱视频免费观看| 亚洲美女黄片视频| 蜜桃久久精品国产亚洲av| 他把我摸到了高潮在线观看| 久久久精品大字幕| 亚洲av日韩精品久久久久久密| 一本综合久久免费| 母亲3免费完整高清在线观看| 亚洲中文字幕日韩| 一级作爱视频免费观看| 亚洲美女黄片视频| 日本在线视频免费播放| 亚洲熟妇中文字幕五十中出| 亚洲成av人片在线播放无| 国产成人精品无人区| 女同久久另类99精品国产91| 99精品久久久久人妻精品| 亚洲自拍偷在线| 亚洲第一电影网av| www.999成人在线观看| 黑人操中国人逼视频| 少妇裸体淫交视频免费看高清 | 亚洲,欧美精品.| 国产探花在线观看一区二区| 国产成年人精品一区二区| 两个人看的免费小视频| 亚洲中文av在线| 91在线观看av| 色综合站精品国产| 国产激情偷乱视频一区二区| 搡老妇女老女人老熟妇| 国产精品1区2区在线观看.| 别揉我奶头~嗯~啊~动态视频| 亚洲成人精品中文字幕电影| 国产人伦9x9x在线观看| 国产一区二区激情短视频| 天天一区二区日本电影三级| 在线观看免费午夜福利视频| 日韩欧美一区二区三区在线观看|