氣相色譜法測定疏風(fēng)散熱膠囊中薄荷酮、薄荷腦和胡薄荷酮的含量

覃子龍+覃華亮

【摘要】目的：建立疏風(fēng)散熱膠囊中薄荷酮、薄荷腦和胡薄荷酮的含量測定方法。方法：采用HP-5毛細(xì)管柱（30m×032mm，025μm），程序升溫，分流比為10∶1，F(xiàn)ID檢測器。結(jié)果：薄荷酮、薄荷腦和胡薄荷酮在同一色譜條件下分離良好，在2～200μg/mL范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，回收率符合要求。結(jié)論：建立的方法重復(fù)性好、靈敏、易操作，適用于疏風(fēng)散熱膠囊中薄荷酮、薄荷腦和胡薄荷酮的質(zhì)量控制。

【關(guān)鍵詞】疏風(fēng)散熱膠囊；薄荷酮；薄荷腦；胡薄荷酮；氣相色譜法

【中圖分類號】R2842【文獻(xiàn)標(biāo)志碼】 A【文章編號】1007-8517（2017）08-0011-03

Abstract：Objective To develop a quality method of menthone、menthol and pulegone in shufengsanre capsule. Methods Analyzed samples on HP-5 column（30m×032mm，025μm）with temperature programmed，and the splitting ratio was 1∶10，detected by FID. Results menthone、menthol and pulegonehave been separated well under the same chromatographic condition， and have a good relationship within the range of 2～200μg/mL， and recoveryrate of the determination method all corresponded to the experimental standard.Conclusion The method developed was in good repeatability， sensitive and easy operation， can be applied in quality control of menthone，menthol and pulegone in shufengsanre capsule.

Keywords：Shufengsanre Capsule；Menthone；Menthol；Pulegone；GC

疏風(fēng)散熱膠囊是在銀翹散的基礎(chǔ)上經(jīng)加工制成的中藥膠囊[1]，現(xiàn)行標(biāo)準(zhǔn)收載于《中華人民共和國衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)中藥成方制劑第十二冊》，具有清熱解毒，疏風(fēng)散熱的功效，臨床用于風(fēng)熱感冒，發(fā)熱頭痛，咳嗽口干，咽喉疼痛[2]。處方由金銀花、連翹、忍冬藤、桔梗、薄荷、牛蒡子、地黃、淡竹葉、荊芥、梔子、淡豆豉、甘草等十二味中藥組成。其中，薄荷味辛而性涼，疏風(fēng)散熱，且可解毒利咽；荊芥辛而微溫，散發(fā)表邪，透熱外出，二者皆為臣藥。在本制劑的制備工藝中，先提取薄荷和荊芥的揮發(fā)油，最后加到收膏干燥后的粉末中，再裝膠囊?？梢娚鲜鰮]發(fā)油在組方中有重要作用，但現(xiàn)行標(biāo)準(zhǔn)對于揮發(fā)油只有一個顯色反應(yīng)[2]。王世清等[3]研究了疏風(fēng)散熱膠囊中薄荷和荊芥的薄層鑒別方法，但該方法仍無法對其中薄荷和荊芥揮發(fā)油的主要成分進(jìn)行含量控制，不利于藥品的質(zhì)量控制。薄荷的主要揮發(fā)性成分為薄荷腦，同時含少量薄荷酮和胡薄荷酮[4]；荊芥主要揮發(fā)性成分為胡薄荷酮和薄荷酮[5]。因此，本研究借鑒霍麗霞等[6]的方法，以薄荷酮、薄荷腦和胡薄荷酮為指標(biāo)性成分，采用氣相色譜法，建立適用于疏風(fēng)散熱膠囊中薄荷和荊芥揮發(fā)性成分的含量測定方法，為進(jìn)一步完善其質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)提供參考依據(jù)。

1儀器和材料

11儀器氣相色譜儀（島津GC-2010 plus，配島津AOC-5000plus自動進(jìn)樣器，F(xiàn)ID檢測器）；安捷倫HP-5毛細(xì)管柱（30m×032mm，025μm）；萬分之一電子分析天平（梅特勒AE200）；十萬分一電子分析天平（梅特勒XS205DU）；AS7240BT超聲波清洗儀（天津奧特賽恩斯儀器有限公司）。

12材料薄荷酮（批號：111705-200602）、薄荷腦（批號：110728-200506）、胡薄荷酮（批號：111706-201205，含量998%）等對照品購自中國食品藥品檢定研究院；疏風(fēng)散熱膠囊（批號：150302、150303、160801、160802，黑龍江省濟(jì)仁藥業(yè)有限公司；批號：20150601，貴州民族藥業(yè)股份有限公司）；乙酸乙酯（分析純，廣州化學(xué)試劑廠）。

2方法

21色譜條件色譜柱HP-5毛細(xì)管柱（30m×032mm，025μm）；色譜柱升溫條件：初始溫度為50℃，保持1min；以15℃/min的速率升溫至100℃，保持10min；以10℃/min的速率升溫至150℃，保持2min；以15℃/min的速率升溫至240℃，保持2min；進(jìn)樣口溫度為200℃；FID檢測器；檢測器溫度為250℃；體積流量為15mL/min；進(jìn)樣量1μL，分流進(jìn)樣，分流比為10∶1。

22對照品溶液制備取薄荷酮、薄荷腦、胡薄荷酮對照品適量，精密稱定，加乙酸乙酯制成含薄荷酮1072 mg/mL、薄荷腦1092 mg/mL和含胡薄荷酮1209 mg/mL的混合對照品儲備液。

23供試品溶液制備本品混勻后，取05g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入乙酸乙酯20mL，密塞，稱定重量，超聲10min，放冷，稱定重量，用乙酸乙酯補足減失的重量，搖勻，以045μm濾膜過濾，取續(xù)濾液，即得。

24陰性樣品溶液制備參考疏風(fēng)散熱膠囊現(xiàn)行標(biāo)準(zhǔn)中的制法[2]，制成缺薄荷和荊芥的陰性樣品。

在上述色譜條件下，分別精密吸取對照品溶液、供試品溶液和陰性樣品溶液各1μL，注入氣相色譜儀，記錄色譜圖。結(jié)果表明，供試品溶液色譜中薄荷酮、薄荷腦和胡薄荷酮與相鄰色譜峰的分離度均大于15，且陰性對照無干擾。見圖1。

25線性試驗分別精密吸取混合對照品溶液適量，加乙酸乙酯制成濃度分別為2～200μg/mL的梯度混合對照品溶液。以濃度（μg/mL）為橫坐標(biāo)，峰面積為縱坐標(biāo)進(jìn)行線性回歸，得回歸方程、相關(guān)系數(shù)及線性范圍。結(jié)果見表1。

27穩(wěn)定性試驗精密吸取同一供試品溶液，分別于0、2、4、6、8、12h進(jìn)樣6次。結(jié)果薄荷酮、薄荷腦和胡薄荷酮峰面積的RSD分別為099%、079%、089%，表明供試品溶液在12h內(nèi)基本穩(wěn)定。

28重復(fù)性試驗同時取6份樣品（批號：20150601），依法制備供試品溶液，測定并計算含量，結(jié)果樣品中薄荷酮、薄荷腦和胡薄荷酮含量RSD值分別為025%、091%、023%表明測定方法的重復(fù)性良好。

29回收率試驗取樣品（批號：20150601）6份，每份加入薄荷酮濃度為005360mg/mL、薄荷腦005460 mg/mL和含胡薄荷酮006045 mg/mL的混合對照品溶液各10mL，依法測定其含量，計算回收率，結(jié)果薄荷酮、薄荷腦和胡薄荷酮的平均回收率分別為1024%、970%、1032%。見表2～4。

210樣品測定取疏風(fēng)散熱膠囊5批（標(biāo)示量均為025g/粒），依法制備供試品溶液，測定并計算其中薄荷酮、薄荷腦和胡薄荷酮含量。結(jié)果見表5。

3討論

研究考察了提取時間（5min、10min、20min）和提取溶劑的用量（10mL、20mL、30mL），確定以05g取樣時，用20mL乙酸乙酯超聲10min，即可完全提取樣品中的薄荷酮、薄荷腦和胡薄荷酮，且在本實驗的色譜條件下，分離良好。

從樣品測定結(jié)果也可知，薄荷酮和薄荷腦的含量相對較為穩(wěn)定，但胡薄荷酮的含量差異較大，或許與生產(chǎn)投料有關(guān)。故研究以薄荷酮、薄荷腦和胡薄荷酮為指標(biāo)性成分建立的色譜方法可用于疏風(fēng)散熱膠囊中薄荷與荊芥的含量測定，為準(zhǔn)確評價藥品質(zhì)量提供參考依據(jù)。參考文獻(xiàn)

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[3]王世清，彭英.疏風(fēng)散熱膠囊的TLC鑒別[J].中國藥業(yè)，1999，8（9）：11.

[4]沈梅芳，李小萌，單琪媛.薄荷化學(xué)成分與藥理作用研究新進(jìn)展[J].中華中醫(yī)藥學(xué)刊，2012，30（7）：1484-1486.

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（收稿日期：2017-02-11編輯：梁志慶）