外陰陰道念珠菌病菌種分布及藥敏檢測

王平 朱壯彥 賀義恒 范瑞強(qiáng)

(1.山西大同大學(xué)醫(yī)學(xué)院,大同 037000；2.廣東省中醫(yī)院，廣州 510120)

·短篇論著·

外陰陰道念珠菌病菌種分布及藥敏檢測

王平1朱壯彥1賀義恒1范瑞強(qiáng)2

(1.山西大同大學(xué)醫(yī)學(xué)院,大同 037000；2.廣東省中醫(yī)院，廣州 510120)

白念珠菌；菌株分布；藥敏試驗(yàn)

隨著社會生活的改變和現(xiàn)代醫(yī)學(xué)的發(fā)展，HIV感染的增加、器官移植的開展、化療藥物的使用、廣譜抗生素和激素的濫用、靜脈插管等介入性操作的增加，真菌感染率逐年上升。白念珠菌是最重要的機(jī)會致病真菌之一[1]。該菌在口腔、上呼吸道、腸道及陰道都有分布，一般數(shù)量較少，不引起疾病，當(dāng)機(jī)體免疫力低下時(shí)，該菌會大量繁殖，引起不適。主要由白念珠菌引起的念珠菌性陰道炎是臨床常見病、多發(fā)病。近年來，在上述因素作用下，念珠菌性陰道炎的耐藥菌不斷出現(xiàn)，致病菌群構(gòu)成也發(fā)生了改變，現(xiàn)對2012年3～9月我院119例念珠菌性陰道炎患者的念珠菌菌種分布及耐藥性進(jìn)行分析，以了解念珠菌性陰道炎致病菌的現(xiàn)狀，為臨床治療提供參考。

1 材料和方法

1.1 菌株來源

所有菌株均選自我院2012年3～9月皮膚科和婦科門診患者白帶標(biāo)本119例，年齡在15～48歲之間，平均30.4歲。排除重復(fù)病例，如同一位患者多次分離出真菌，只統(tǒng)計(jì)首次分離株。

1.2 儀器和試劑

ATBFUNCUS藥敏板和API-20C AUX鑒定試劑盒購自法國生物梅里埃公司；沙氏培養(yǎng)基、科瑪嘉念珠菌顯色培養(yǎng)基購自廣州迪景微生物科技有限公司。

1.3 質(zhì)控菌株

克柔念珠菌ATCC6258購于衛(wèi)生部臨檢中心。

1.4 方法

真菌培養(yǎng)與鑒定 采用無菌拭子在念珠菌性陰道炎患者的陰道后穹隆處取分泌物，之后對標(biāo)本進(jìn)行直接鏡檢，見到假菌絲后接種于血平板，經(jīng)初次培養(yǎng)分離后,轉(zhuǎn)種于科瑪嘉念珠菌顯色培養(yǎng)基,35℃培養(yǎng)箱培育24～48 h,篩選出顯綠色或翠綠色的白念珠菌,藍(lán)色為熱帶念珠菌，粉色為克柔念珠菌,對顯色培養(yǎng)基不能鑒定的菌株采用API-20C AUX試劑盒鑒定。

藥敏試驗(yàn) 采用真菌藥敏實(shí)驗(yàn)板進(jìn)行試驗(yàn)，試驗(yàn)過程嚴(yán)格按照說明書要求操作。

2 結(jié) 果

2.1 菌種分布

119例念珠菌性陰道炎分離培養(yǎng)的致病菌以白念珠菌為主，為97例 (81.51%)，其次為光滑念珠菌18株 (15.13%)，熱帶念珠菌2株 (1.68%)，近平滑念珠菌2株 (1.68%)。

2.2 藥敏結(jié)果分析

藥物敏感試驗(yàn)結(jié)果見表1。

3 討 論

外陰陰道念珠菌病是由念珠菌導(dǎo)致的一類炎癥性疾病，近年來，有諸多研究報(bào)道發(fā)現(xiàn)，非白念珠菌在致病菌中所占比例越來越高[2]。但是，同時(shí)仍有研究表明，白念珠菌仍是主要的致病菌。張文等[3]在 527 株念珠菌中，檢出白念珠菌412株 (78.18%)，光滑念珠菌47株 (8.92%)，熱帶念珠菌24株 (4.54%)，其他念珠菌44株 (8.35%)，表明白念珠菌仍是外陰陰道念珠菌病的主要致病菌。本研究通過科瑪嘉念珠菌顯色培養(yǎng)基和API-20C AUX鑒定試劑盒研究發(fā)現(xiàn)，119例VVC陰道白帶標(biāo)本中，白念珠菌97例 (81.51%)，其次為光滑念珠菌18株 (15.13%)，熱帶念珠菌2株 (1.68%)，近平滑念珠菌2株 (1.68% )。表明白念珠菌仍然是導(dǎo)致陰道念珠菌病的主要因素，這與以往的報(bào)道是一致的[4]。

表1 陰道分離念珠菌對抗真菌藥物耐藥性分析 (%)

注：R.耐藥 (MIC≥64 μg/mL),I.劑量依賴,S.敏感 (MIC≤8 μg/mL)

本研究還同時(shí)對致病菌的藥敏情況進(jìn)行了分析，研究發(fā)現(xiàn)兩性霉素B對菌群的敏感性最強(qiáng)，其次是伏立康唑、氟康唑、5-氟胞嘧啶、伊曲康唑，由于不同的念珠菌對藥物敏感性差異較大，有些菌株對某些藥物天然耐藥，因此臨床上念珠菌性陰道炎的菌種分布和準(zhǔn)確鑒定對抗真菌藥物的選擇具有重要價(jià)值。

就以上兩點(diǎn)而言，近年來的臨床研究發(fā)現(xiàn)，非白念珠菌在致病菌中所占比例越來越高，這與氟康唑在臨床的廣泛使用密切相關(guān)，氟康唑僅對白念珠菌敏感，在這種藥物的篩選作用下，無形中使得非白念珠菌漸成為優(yōu)勢菌群，并最終導(dǎo)致念珠菌的菌種構(gòu)成比發(fā)生變化，從而對藥物的選擇和疾病的轉(zhuǎn)歸有重要影響[4]。除此以外，近年來，有關(guān)白念珠菌對氟康唑耐藥的報(bào)道越來越多，但本研究分離的白念珠菌對氟康唑還保持比較高的敏感性?；诰陮λ幬锩舾行暂^以往發(fā)生的變化，臨床工作者應(yīng)重視加強(qiáng)流行菌株的鑒定和藥敏檢測。

隨著抗真菌藥物的使用，真菌對藥物的耐藥問題也越來越突出，成為制約抗真菌藥發(fā)揮作用的“瓶頸”，如何突破這一瓶頸，提高真菌性疾病診治的效果，越來越受到廣大醫(yī)學(xué)工作者的重視。一方面，基于目前菌株分布和藥敏試驗(yàn)，根據(jù)藥敏試驗(yàn)結(jié)果選用合適的抗真菌藥物，就本病的藥物選擇而言,兩性霉素B雖然抗菌作用好，但其腎毒性明顯，嚴(yán)重影響了其在臨床的使用。伏立康唑抗菌作用明顯，但其價(jià)格昂貴，除侵襲性真菌感染外，臨床使用較少。5-氟胞嘧啶單用抗菌作用差，且對造血系統(tǒng)及肝腎影響較大，臨床使用較少。氟康唑、伊曲康唑較適用于外陰陰道念珠菌病的治療。另一方面，則應(yīng)努力尋找具有較好的抑菌或殺菌作用、或可以提高耐藥真菌對抗真菌藥物敏感的天然化合物[5]。

[1] Khajeh E,Hosseini Shokouh SJ,Rajabibazl M,et al.Antifungal effect ofEchinophoraplatylobaon expression of CDR1 and CDR2 genes in fluconazole-resistantCandidaalbicans[J].Br J Biomed Sci,2016,73(1):44-48.

[2] Brandolt TM,Klafke GB,Gon?alves CV,et al.Prevalence ofCandidaspp.in cervical-vaginal samples and theinvitrosusceptibility of isolates[J].Braz J Microbiol,2016,1517-8382(16):30903-30910.

[3] 張文,柏彩英，周強(qiáng)，等.假絲酵母菌性陰道炎的菌種分布及耐藥性分析[J].皮膚性病診療學(xué)雜志，2012,19(3):139-141.

[4] 張力,賀帥.女性陰道假絲酵母菌藥敏試驗(yàn)及分析[J].吉林醫(yī)學(xué)，2011，32(33)：7044.

[5] 姜遠(yuǎn)英,劉偉,曹永兵.念株菌的耐藥機(jī)制及應(yīng)對策略研究[J].中國真菌學(xué)雜志，2011,6(4):193-197.

[本文編輯] 王 飛

國家科技部“十一五”國家科技支撐計(jì)劃 (2008BAI53B041)

王平，女 (漢族)，博士，講師.E-mail:wp88666@163.com

范瑞強(qiáng),E-mail:fanrq54@163.com

R 519.3

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1673-3827(2017)12-0106-02

2016-11-13