人參、黨參、太子參對SD雌性大鼠性成熟的影響

王至駿 王曉素 陳宇華 孔婧 呂秀華

?

·論著·

人參、黨參、太子參對SD雌性大鼠性成熟的影響

王至駿 王曉素 陳宇華 孔婧 呂秀華

目的 觀察人參、黨參、太子參對SD雌性大鼠生長發(fā)育的影響。 方法 將動物隨機(jī)分為對照組、人參組、黨參組及太子參組，分別予生理鹽水、人參、黨參和太子參灌胃2周，并每天行陰道涂片檢查，干預(yù)前后檢測雌二醇(Estrogen，E2)水平，最后解剖大鼠，取出卵巢和子宮，計(jì)算卵巢指數(shù)和子宮指數(shù)。結(jié)果 四組大鼠比較，性成熟時(shí)間和卵巢指數(shù)未見明顯差異；與對照組相比，黨參組、人參組的E2水平明顯升高(P<0.05)；與對照組和太子參組相比，人參組的子宮指數(shù)較大(P<0.05)；與對照組相比，三個(gè)給藥組大鼠體重增長較多(P<0.05)。結(jié)論 黨參和人參在一定程度上可能導(dǎo)致SD雌性大鼠的性早熟；人參、黨參、太子參能促進(jìn)SD雌性大鼠體重的增長。

人參； 黨參； 太子參； 性早熟

在中國，隨著經(jīng)濟(jì)發(fā)展和物質(zhì)生活的不斷改善，一些中、小學(xué)學(xué)生的家長們會給孩子服用各種保健品。因此，保健品是否會對孩子身體成長發(fā)育造成不良影響成為家長和孩子日益關(guān)注的焦點(diǎn)。中國有相當(dāng)數(shù)量的保健食品是利用傳統(tǒng)中醫(yī)藥理論中“藥食同源”特點(diǎn)進(jìn)行組方，并用現(xiàn)代加工技術(shù)提取和加工，使其成為具有特定保健功能的食品。目前已有二百多種中藥提取物用于保健食品中，最常用的就是人參、黨參及太子參等補(bǔ)益藥材。本實(shí)驗(yàn)旨在研究三種補(bǔ)益類中藥對SD雌性大鼠性成熟的影響，進(jìn)而探討對兒童生長發(fā)育的影響。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動物

選用4周齡的清潔級雌性SD大鼠體重85～90 g，購自于上海斯萊克實(shí)驗(yàn)動物有限公司。

1.2 實(shí)驗(yàn)試劑

人參顆粒、黨參顆粒和太子參顆粒均購自于上海中醫(yī)藥大學(xué)附屬中西醫(yī)結(jié)合岳陽醫(yī)院(江陰天江藥業(yè)有限公司，人參生產(chǎn)批號：1507019，黨參生產(chǎn)批號：1507095，太子參生產(chǎn)批號：1508038)；將三種中藥顆粒劑以1∶1的比例溶解于滅菌注射用水中，每10 mL的溶液中含有10 g藥物。

1.3 動物分組及處理

將33只大鼠隨機(jī)分成4組，每組8～9只，分別為對照組、人參組、黨參組及太子參組(其中人參組9只，其余3組均為8只)。適應(yīng)性飼養(yǎng)3天后，對照組僅給予生理鹽水灌胃，人參組給予人參顆粒溶劑灌胃，黨參組給予黨參顆粒溶劑灌胃，太子參組給予太子參顆粒溶劑灌胃，用藥量為每天每公斤體重大鼠3 g(按生藥計(jì))(按60公斤體重正常成人每日用生藥量30 g的6倍量計(jì)算大鼠用藥量)，每天1次，連續(xù)給藥14天，各組大鼠均常規(guī)方式喂養(yǎng)。同時(shí)每天進(jìn)行陰道分泌物的常規(guī)檢查，判斷性成熟時(shí)間。給藥前各組大鼠尾靜脈取血；給藥14天后將每組動物麻醉，解剖，取腹主動脈血，檢測4組雌性大鼠雌二醇水平，并測定卵巢指數(shù)與子宮指數(shù)，從而研究人參、黨參及太子參對雌性大鼠的性成熟的影響。1.4 大鼠陰道分泌物檢查

每日觀察大鼠的陰道分泌物，進(jìn)行陰道涂片檢查。左手背位固定大鼠，右手持吸管，其內(nèi)預(yù)先吸有生理鹽水0.1～0.2 mL。輕輕插入大鼠陰道內(nèi)0.5～1 cm，抽吸2～3次，滴一滴吸液于載玻片上。干后以5%美藍(lán)溶液染色10分鐘后，用水沖洗多余染液。吹干后置于顯微鏡下進(jìn)行細(xì)胞學(xué)檢查。動情間期：見大量多核白細(xì)胞，少量上皮細(xì)胞。動情前期：見大量上皮細(xì)胞，胞漿呈粒狀，少量角化(無核)上皮細(xì)胞，無白細(xì)胞。動情期：見大量角化上皮細(xì)胞，形狀大而不規(guī)則，尚有少量上皮細(xì)胞。動情后期：見大量白細(xì)胞，尚有少量融合的角化上皮細(xì)胞。連續(xù)7天陰道監(jiān)測未見動情周期證明無性成熟表現(xiàn),若出現(xiàn)動情周期即證明出現(xiàn)性成熟。1.5 大鼠雌二醇水平檢測

各種大鼠灌胃干預(yù)前常規(guī)尾靜脈取血，灌胃給藥后14天，麻醉后腹主動脈取血并處死，全血于4℃靜置2小時(shí)，3000 r/min, 離心半徑18.8 cm， 10分鐘離心取血清，-20℃保存。使用I125雌二醇放射免疫分析藥盒測定所有大鼠血清雌二醇含量，按照試劑盒說明書進(jìn)行操作[1]。

1.6 大鼠卵巢指數(shù)及子宮指數(shù)計(jì)算

灌胃14天后各組大鼠麻醉開腹，分別取出雙側(cè)卵巢和Y型子宮，稱濕重并計(jì)算卵巢指數(shù)和子宮指數(shù)。

1.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

2 結(jié)果

2.1 人參、黨參和太子參對SD雌性大鼠陰道分泌物的影響

雌性大鼠性成熟后每4～5天一個(gè)性周期，陰道分泌物將出現(xiàn)動情間期、動情前期、動情期、動情后期等明顯動情周期性變化，連續(xù)7天陰道監(jiān)測未見動情周期證明無性成熟表現(xiàn)，若出現(xiàn)動情周期即證明出現(xiàn)性成熟。詳見圖1。在2周內(nèi)，通過觀察陰道白帶涂片，對照組有6只大鼠性成熟，人參組有8只大鼠性成熟，黨參組有6只大鼠性成熟，太子參組有4只大鼠性成熟。提示人參、黨參和太子參對SD雌性大鼠的性成熟時(shí)間無明顯影響。詳見表1。

注：a：動情間期；b：動情前期；c：動情期；d：動情后期

圖1 顯微鏡下大鼠動情周期陰道涂片(×400)

2.2 人參、黨參和太子參對SD雌性大鼠雌二醇水平的影響

通過單因素方差分析提示：與對照組比較，黨參組、人參組的雌二醇水平顯著升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；與對照組比較，太子參組大鼠雌二醇水平略有升高，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，詳見表2。

表2 人參、黨參、太子參灌胃2周對SD雌性大鼠雌二醇水平的影響

注： 與對照組相比，aP<0.05。

2.3 人參、黨參和太子參對SD雌性大鼠卵巢指數(shù)及子宮指數(shù)的影響

各組動物卵巢指數(shù)根據(jù)方差分析，可認(rèn)為人參、黨參和太子參對SD雌性大鼠卵巢指數(shù)無明顯影響；但是人參組的卵巢指數(shù)有高于其他三組的趨勢。四組大鼠的子宮指數(shù)有顯著差異，其中人參組的子宮指數(shù)顯著大于對照組和太子參組(P<0.05)，提示人參有可能導(dǎo)致大鼠性早熟。見表3。

表3 人參、黨參和太子參對SD雌性大鼠卵巢指數(shù)及子宮指數(shù)的影響

注： 與對照組相比，aP<0.05；與太子參組相比，bP<0.05。

2.4 人參、黨參和太子參對SD雌性大鼠體重增長的影響

對灌胃2周前后四組大鼠的體重進(jìn)行方差分析。藥物干預(yù)前，各組動物體重?zé)o統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。藥物干預(yù)2周后，與對照組相比，三個(gè)給藥組體重有顯著增高(P<0.05)，提示人參、黨參、太子參均能顯著增加SD雌性大鼠的體重；而三種中藥之間比較對大鼠體重的增長量沒有顯著差異。見表4。

表4 人參、黨參和太子參對SD雌性大鼠體重增長的影響

注： 與對照組相比，aP<0.05。

3 討論

卵巢主要合成雌二醇和雌酮兩種雌激素。雌二醇主要來源于顆粒細(xì)胞，對卵泡發(fā)育、成熟、排卵起重要作用[2]。雌激素的含量與大鼠的年齡呈一定的相關(guān)性，正常大鼠的雌激素隨年齡的增加而升高，至成年末期后基本維持不變[3]，在大鼠周齡較小的情況下，雌二醇的水平越高則表明大鼠越成熟。在中醫(yī)典籍中，黨參具有補(bǔ)中益氣、止渴、健脾益肺和養(yǎng)血生津的作用；國內(nèi)外學(xué)者還發(fā)現(xiàn)其能抗疲勞、耐缺氧、抗輻射、調(diào)節(jié)免疫力、改善記憶力及保護(hù)胃黏膜[4]；同時(shí)還具有一定的降壓、抑制血小板聚集作用[5]。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，四組的雌二醇水平有差異，其中黨參組、人參組的雌二醇水平較對照組高，可以推測黨參、人參在一定程度上能夠促進(jìn)大鼠雌二醇的分泌，從而促使其性成熟。

子宮指數(shù)和卵巢指數(shù)越高表示大鼠越可能處于性成熟期。本研究表明，人參、黨參、太子參對卵巢指數(shù)無明顯影響，但是人參組的卵巢指數(shù)高于其他三組。并且，人參組大鼠子宮指數(shù)顯著高于對照組，顯示人參能顯著提高大鼠子宮指數(shù)，因此人參有可能導(dǎo)致大鼠性早熟?！渡褶r(nóng)本草經(jīng)》中描述人參是大補(bǔ)之物，“味甘微寒，主補(bǔ)五臟，安精神，定魂魄，止驚悸，除邪氣，明目，開心益智。久服，輕身延年。一名人銜，一名鬼蓋。生山谷”。研究發(fā)現(xiàn)，人參對人體的免疫調(diào)節(jié)網(wǎng)可起到正調(diào)節(jié)作用，并通過免疫調(diào)節(jié)網(wǎng)發(fā)揮十分廣泛的免疫學(xué)效應(yīng)[6]。

本研究以雌性SD大鼠為實(shí)驗(yàn)對象，初步研究人參、黨參及太子參各自對雌性大鼠生殖腺發(fā)育及其功能的影響。筆者通過初步實(shí)驗(yàn)研究得出，人參、黨參、太子參均能顯著增加SD雌性大鼠的體重，其中人參和黨參可能干擾其生長發(fā)育，促使性早熟。雖然人參和黨參的作用廣泛，但可能并不適合生長發(fā)育時(shí)期的中小學(xué)生，它們可能會在一定程度上干擾兒童正常的生長發(fā)育過程，甚至造成性早熟的后果。太子參也是中醫(yī)臨床常用補(bǔ)虛藥，與人參、黨參功效相似，能益氣健脾，生津潤肺，在臨床上尤其在青少年中廣泛使用。現(xiàn)代研究顯示，太子參還具有改善慢性心衰、改善記憶、調(diào)節(jié)血糖的作用[7]。筆者實(shí)驗(yàn)觀察，太子參對大鼠生殖腺發(fā)育無明顯影響，因此，臨床上可以短期低劑量服用人參、黨參，或者應(yīng)用太子參代替人參和黨參，避免導(dǎo)致兒童性早熟。

[1] 張達(dá)利，王健，李毅平，等.性激素及其受體與肝硬化的相關(guān)性[J].世界華人消化雜志，2009,17(36):3749-3751.

[2] Knochenhauer ES, Key TJ , Kahsar Miller M, et al. Prevalence of the polycystic syndrome in unselected black and white of the southeastern United States:a prospective study[J]. Cline Endocrinol Metab，1998,83:3078.

[3] 左群，于新凱，陸愛云.游泳運(yùn)動和增齡對小鼠雌二醇和骨組織雌激素受體表達(dá)的影響[J].中國體育科技，2007,5(43)：141-143.

[4] 王潔，鄧長泉，石磊，等.黨參的現(xiàn)代研究進(jìn)展[J].中國醫(yī)藥指南，2011，31(9)：279-281.

[5] 黃婭.黨參文獻(xiàn)研究學(xué)[J].中國中醫(yī)藥信息雜志，2008，15(4):105-106.

[6] 于永利，楊貴貞.吉林人參花總皂甙NKC-IFN-IL-2調(diào)節(jié)網(wǎng)的作用及其抑瘤效應(yīng)[J].中國免疫學(xué)雜志，1987，3(1):41-45.

[7] 王文凱，賈靜，丁仁偉，等.太子參經(jīng)驗(yàn)研究概況[J]. 中國實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志，2011,12(17):264-267.

(本文編輯： 王馨瑤)

Effect of ginseng, radix codonopsis, radix pseudostellariae on sexual maturation of female SD rats

WANGZhijun,WANGXiaosu,CHENYuhua,etal.

Departmentofbiology,TheSecondAffiliatedMiddleSchoolofEastChinaNormalUniversity,Shanghai201203，China

WANGXiaosu，E-mail：xswangxs0084@163.com

Objective To observe the effects of ginseng, radix codonopsis and radix pseudostellariae on the growth and development of SD female rats. Methods Animals were randomly divided into four groups: control group, ginseng group, radix codonopsis group and radix pseudostellariae group, intragastric administration for 2 weeks with normal saline, ginseng, radix codonopsis and radix pseudostellariae, vaginal smears were taken every day. The levels of estrogen before and after intervention were detected. The ovarian index and uterine index was calculated. Results There was no significant difference in sexual maturation time and ovarian index of the four groups. Compared with the control group, the E2level of radix codonopsis group and ginseng group was significantly increased(P<0.05). Compared with the control group and the radix pseudostellariae group, the uterus index of the ginseng group was larger(P<0.05). Compared with the control group, the rats in the rest groups had more weight gain (P<0.05). Conclusion Ginseng and radix codonopsis may lead to precocious puberty of SD female rats in a certain degree; Ginseng，radix codonopsis and radix pseudostellariae can promote the weight growth of SD female rats.

Ginseng； Radix codonopsis； Radix pseudostellariae； Precocious puberty

上海市中西醫(yī)結(jié)合學(xué)會科研基金(ZXYK-1213)

201203 上海，華東師范大學(xué)附屬第二中學(xué)生物學(xué)教研室[王至駿(高中生)、呂秀華]；上海中醫(yī)藥大學(xué)附屬岳陽中西醫(yī)結(jié)合醫(yī)院消化科[王曉素、孔婧、陳宇華(碩士研究生)]

王至駿(1999- )，高中三年級在讀。E-mail：wmz111wmz222@126.com

王曉素(1967- )，女，博士，主任醫(yī)師，博士生導(dǎo)師，中華中醫(yī)藥學(xué)會脾胃病分會委員。研究方向：中西醫(yī)結(jié)合防治消化系統(tǒng)疾病。E-mail：xswangxs0084@163.com

R285

A

10.3969/j.issn.1674-1749.2017.05.008

2016-05-25)