高溫應激下日糧中添加維生素E對不同存放期雞蛋蛋品質及血清抗氧化能力的影響

安婷婷， 張菁菁， 楊建生， 林雨鑫， 楊鳳萍， 辛世杰， 關富康， 王詩琴， 戴國俊*

（1.揚州大學，江蘇揚州 225009；2.昆山市畜牧獸醫(yī)站，江蘇昆山 215300）

高溫應激下日糧中添加維生素E對不同存放期雞蛋蛋品質及血清抗氧化能力的影響

安婷婷1， 張菁菁1， 楊建生2， 林雨鑫2， 楊鳳萍1， 辛世杰1， 關富康1， 王詩琴1， 戴國俊1*

（1.揚州大學，江蘇揚州 225009；2.昆山市畜牧獸醫(yī)站，江蘇昆山 215300）

為研究高溫應激條件下蛋雞日糧中添加維生素E對不同存放時間雞蛋蛋品質及血清抗氧化能力的影響，試驗選取健康的41周齡京粉Ⅰ號蛋雞360只，隨機分為4個組，每組3個重復，每個重復30只雞。其中Ⅰ組為對照組，第Ⅱ，Ⅲ，Ⅳ組為試驗組，分別在日糧中添加不同水平的維生素E（0、100、200、300 mg/kg），預試期1周，試驗期為6周。結果表明：在熱應激（26～33℃，平均28.5℃）狀態(tài)下，日糧中添加維生素E的試驗Ⅲ組蛋白高度顯著提高（P＜0.05）；日糧中添加維生素E的試驗Ⅲ組哈氏單位在存放15 d時顯著高于對照組（P＜0.05）；日糧中添加維生素E的試驗Ⅲ、Ⅳ組蛋黃重在存放25 d時顯著高于對照組（P＜0.05）；日糧中添加維生素E的試驗Ⅱ組丙二醛（MDA）含量顯著降低（P＜0.05），試驗Ⅲ組總抗氧化能力（T-AOC）顯著升高（P＜0.05）。由此可見，高溫應激下日糧中添加200 mg/kg維生素E可顯著改善蛋雞的抗氧化能力，提高雞蛋蛋品質。

維生素E；高溫應激；蛋雞；蛋品質；抗氧化性

夏季氣溫高，并且持續(xù)時間長，導致高產蛋雞采食量下降，能量攝取不足，從而影響產蛋性能，蛋重減輕。Cerci等（2003)認為雞適宜生長環(huán)境溫度為16～25℃，超過該范圍會引起雞糖皮質激素和皮質醇等分泌過多，誘導體內產生過多的自由基，細胞膜內多不飽和脂肪酸氧化，產生過量的脂質過氧化物（張菁菁等，2016)，致使生產性能下降，蛋品質受到影響（劉宏芹等，2014)，同時，雞蛋在高溫下存放時間過長，會損壞雞蛋蛋白質結構和蛋黃膜。有關熱應激對蛋雞的影響，國內外大量研究表明，日糧中添加抗氧化劑可有效緩解蛋雞在高溫季節(jié)的氧化熱應激反應。維生素E（VE）是生育酚類化合物的總稱，且作為一種有效的生物抗氧化劑，可與易受攻擊的細胞膜選擇性結合，從而保護細胞膜的穩(wěn)定性 （Scheideler等，2010；吳迪，2009）。汪求真等（2005）研究表明，當日糧中維生素E含量增高時，可有效提高機體抗氧化能力。本試驗通過對高溫環(huán)境下在蛋雞日糧中添加不同水平的維生素E，研究其對雞蛋不同存放期蛋品質和血清抗氧化能力的影響，以期提供用于夏季高溫條件下，提高蛋品質的解決方法。

1 材料與方法

1.1 試驗材料 維生素E購自揚州大學飼料廠，濃度為500 IU/mg，試驗地點為江蘇昆山星期九休閑農莊蛋雞場，試驗蛋雞選用北京市華都峪口禽業(yè)有限責任公司培育的京粉Ⅰ號商品蛋雞。

試驗日糧參照美國NRC（1994）蛋雞營養(yǎng)需要配制而成。試驗基礎日糧組成及營養(yǎng)水平見表1。

表1 基礎日糧組成及營養(yǎng)水平

1.2 試驗設計與飼養(yǎng)管理 選用健康的41周齡京粉I號蛋雞360只，隨機分為4個試驗組，每組3個重復，每個重復30只雞，采用3層階梯式籠養(yǎng)。試驗Ⅰ組為對照組，用基礎日糧飼喂，試驗Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ組為試驗組，在基礎日糧的基礎上，分別添加100、200和300 mg/kg的維生素E。試驗設1周預試期，正式試驗從2014年8月1日至9月11日，為期42 d。試驗期內雞只自由采食，自由飲水，產蛋期恒定光照16 h，每天上下午分別給料1次，采用濕簾通風降溫。

1.3 指標測定

1.3.1 溫度測定 試驗期間每天分5個點 （舍內東南西北和中心）測定雞舍內溫度三次（8∶00、12∶00、18∶00），記錄每日平均溫度。

1.3.2 蛋品質指標測定 在試驗結束當天收集當日所產雞蛋，在室內恒定的25℃環(huán)境中放置1、15和25 d后用于雞蛋蛋品質的測定，每次每個重復隨機抽取雞蛋5枚，測定的蛋品質指標有蛋重、蛋形指數(shù)、哈氏單位、蛋黃顏色、蛋黃重、蛋白高度、蛋殼厚度、蛋殼強度。雞蛋蛋重、蛋白高度、哈氏單位和蛋黃顏色采用SONOVA蛋品質自動分析儀（Egg Analyzer TM，Orka）測定；蛋殼強度采用蛋殼強度分析儀 （Egg Force Reader，Orka）測定；蛋殼厚度采用蛋殼厚度測定儀（Egg Shell Thickness Gauge，Orka）測定；蛋形指數(shù)采用游標卡尺測定。蛋黃在分離蛋清后采用電子天平進行稱重；蛋殼在清洗、曬干后采用電子天平進行稱重。

1.3.3 血清抗氧化指標測定 在試驗結束時，以重復為單位，每個重復隨機抽取6只蛋雞，禁食24 h后，翅靜脈采血，冰盒中靜置15 min，4000 r/min離心，取上清液4℃保存，用于測定血清中超氧化物歧化酶（SOD）、過氧化氫酶（CAT）、丙二醛（MDA）、總抗氧化能力（T-AOC）。其中SOD采用羥胺法測定；MDA采用 TBA法測定；CAT采用鉬酸銨法測定；T-AOC采用還原鐵法測定。試劑的配制和操作步驟均按照試劑盒（購自南京建成生物工程研究所）說明書進行。

1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計與處理 試驗數(shù)據(jù)采用SPSS18.0軟件進行單因子方差分析，不同處理間多重比較采用LSD法進行差異顯著性檢驗，P＜0.05為差異顯著水平。數(shù)值用“平均數(shù)±標準差”表示。

2 結果

2.1 溫度分析 試驗期間舍內環(huán)境最高溫度33℃，最低溫度26℃，平均溫度為28.5℃，均超出了蛋雞產蛋期的最適溫度，試驗期舍內溫度變化見圖1。

圖1 舍內溫度變化圖

2.2 蛋品質分析 由表2可知，在日糧中添加不同水平維生素E對蛋品質有一定影響。在蛋重方面，試驗Ⅱ組、試驗Ⅲ組相比于對照組，分別升高了5.76%、4.03%，但試驗組與對照組間差異并不顯著，而在試驗組間，試驗Ⅱ組較試驗Ⅳ組顯著升高（P＜0.05)；在蛋白高度方面，試驗Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ組較對照組分別升高了10.53%、34.73%、23.16%，且試驗Ⅲ組較對照組顯著升高（P＜0.05)；在蛋形指數(shù)方面，試驗Ⅱ組較試驗Ⅳ組顯著上升（P＜0.05)；在蛋殼強度、殼重、蛋黃顏色、蛋黃重、哈氏單位方面各試驗組未出現(xiàn)顯著性變化（P＞0.05)，且在哈氏單位方面各組均值在72以上，為AA級（A級及以上為食用蛋）。

由表3、表4可知，日糧中添加維生素E的試驗Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ組與對照組在雞蛋放置不同時間蛋重、蛋殼強度、蛋殼厚度、殼重、蛋黃顏色、蛋形指數(shù)方面差異不顯著（P＞0.05)。在蛋白高度方面，放置15 d時，試驗Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ組相對于對照組分別升高20.11%、58.97%、45.38%，且試驗Ⅲ、Ⅳ組顯著高于對照組（P＜0.05)，在放置 25 d時，試驗Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ組無顯著差異（P＞0.05)；在蛋黃重方面，放置15 d時，試驗Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ組無顯著差異（P＞0.05)，放置25 d時，試驗Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ組相對于對照組分別升高3.13%、12.36%、13.99%，其中試驗Ⅲ、Ⅳ組顯著高于對照組（P＜0.05)；在哈氏單位方面，放置15 d時，試驗Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ組相對于對照組分別升高13.82%、24.92%、23.68%，且試驗Ⅲ組顯著高于對照組（P＜0.05)，放置25 d時，各處理組間無顯著差異（P＞0.05)。

2.3 血清抗氧化指標分析 由表5可知，高溫季節(jié)日糧中添加維生素E的試驗Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ組和試驗Ⅰ組（對照組）在蛋雞血液抗氧化指標中，SOD、CAT含量各試驗組之間差異不顯著 （P＞0.05)。在T-AOC方面，試驗Ⅲ組較對照組升高了30.2%，且顯著高于對照組、試驗Ⅱ組（P＜0.05)；在MDA方面，試驗Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ組較對照組降低了33.84%、30.78%、20.71%，且試驗Ⅱ組顯著低于對照組（P＜0.05)。

3 討論

3.1 高溫應激下日糧中添加維生素E對高產蛋雞蛋品質的影響 雞蛋的蛋黃顏色主要由葉黃素決定，葉黃素是蛋黃穩(wěn)定的著色物質之一，家禽自身不能合成葉黃素，日糧中的葉黃素是蛋黃沉積的唯一來源。有研究表明，在日糧中添加維生素E能緩解高溫引起的產蛋雞蛋品質的下降（Yardibi等，2008)，可有效防止色素氧化，提高色素對蛋黃的著色能力（吳迪等，2009)；但也有研究表明，日糧中添加維生素E對蛋雞蛋品質 （蛋殼強度、哈氏單位、蛋黃顏色）并無顯著影響 （Manne等，2008)，造成這種差異的原因可能與維生素E的添加量有關。本試驗結果表明，日糧中添加維生素E的試驗組與對照組間蛋黃顏色并無顯著差異。Sahin等（2002)報道，高溫下日糧中添加維生素E可增加雞蛋蛋黃沉積能力，本試驗結果中，日糧中添加維生素E的試驗組與對照組在存放1、15 d時雞蛋蛋黃重并無顯著差異，但存放25 d時，日糧中添加200、300 mg/kg維生素E組的蛋黃重分別升高了12.36%、13.99%，維生素E是否對存放時間較長的雞蛋蛋黃重有影響，有待進一步研究分析。

表2 存放1 d時各組蛋品質指標比較

表3 存放15 d時各組蛋品質指標比較

表4 存放25 d時各組蛋品質指標比較

表5 各組血清抗氧化指標

哈氏單位是用來衡量雞蛋新鮮程度的重要指標。哈氏單位值越大說明蛋白越黏稠，品質越好，哈氏單位72以上為AA級，71～55為A級，54～31為B級，30以下為C級（A級以上為食用蛋，B級為加工蛋，C級僅部分供加工用）（趙夢瑩等，2013)。Kirunda等（2001)報道，在高溫環(huán)境下哈氏單位隨維生素E添加量的增加而提高，說明添加維生素E會影響蛋品質。本研究結果表明，在25℃室溫下存放1 d測樣，日糧中添加200 mg/kg維生素E的試驗組蛋白高度相較于對照組升高了34.73%，哈氏單位差異不顯著；室溫存放15 d后測樣，日糧中添加200 mg/kg維生素E的試驗組蛋白高度、哈氏單位均顯著高于對照組；放置25 d測樣，雖然試驗組與對照組蛋白高度、哈氏單位差異不顯著，但試驗組均高于對照組。由試驗結果可看出，日糧中添加維生素E可提高雞蛋蛋品質。蛋殼的強度和厚度也是衡量雞蛋蛋品質的重要指標，本研究結果表明，在日糧中添加維生素E并不影響雞蛋的蛋殼強度和厚度，這與 Jiang等（2013)的研究結論一致。

3.2 高溫應激下日糧中添加維生素E對高產蛋雞血清抗氧化指標的影響 熱應激可誘導體內產生過多自由基，自由基可破壞和攻擊DNA、細胞膜、蛋白質和脂類，在動物機體內引發(fā)膜脂質過氧化反應（Wolf等，1998)。SOD是生物體內一種重要的抗氧化防御酶，MDA是脂質過氧化物的最終分解產物之一，其含量直接反映機體脂質過氧化程度，并導致細胞膜的損傷（唐飛江等，2011)。體內SOD活力強時，MDA含量隨之降低。CAT是一類廣泛存在于動植物和微生物體內的末端氧化酶，通過催化轉移一對電子而最終將過氧化氫分解為水和氧氣。T-AOC的大小可反映機體抗氧化酶系統(tǒng)和非酶系統(tǒng)對外來刺激的代償能力以及機體自由基代謝狀態(tài)的強弱。本試驗結果表明，添加維生素E的試驗II組（100 mg/kg）MDA含量顯著低于未添加維生素E的對照組，這與武江利等（2008)的結論一致。試驗III組（200 mg/kg）的T-AOC顯著高于對照組。綜合分析表明，200 mg/kg維生素E能提高蛋雞的抗氧化能力。

4 結論

日糧中添加適量的維生素E有利于緩解蛋雞受高溫應激的影響。高溫條件下，在日糧中添加200 mg/kg維生素E，可提高雞蛋的蛋品質和蛋雞的抗氧化能力。

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The influence of dietary vitamin E（VE）supplementation on eggs quality stored at different times and antioxidant of hens in high temperature environment was investigated in this study.A total of 360 41-weeks old healthy laying hens of Jingfen numberⅠwere randomly divided into 4 groups.Each group had 3 repeats and each repeat had 30 hens.GroupⅠwas control group（basal diet），groupⅡ（basal diet+100 mg/kgVE），Ⅲ（basal diet+200 mg/kgVE）andⅣ（basal diet+ 300 mg/kgVE）were treatment groups.The first week was set for an adjustment period，the following six weeks were set for experiment period.The results showed that under heat stress（26～33℃，an average of 28.5℃）status，protein height of groupⅢwas significantly increased（P＜0.05），haugh unit in the storage 15 days of groupⅢwas significantly increased（P＜0.05）；yolk weight in the storage 25 days of groupⅢand groupⅣwere significantly increased（P＜0.05）；malondialdehyde（MDA) of groupⅡwas significantly decreased （P＜0.05），total antioxidant capacity （T-AOC）of groupⅢwas significantly increased（P＜0.05）.In conclusion，under the condition of heat stress，feeding daily ration added with 200 mg/kgVE could significantly improve the antioxidant of laying hens，and improve the egg quality of deposit 15 to 25 days.

vitamin E；heat stress；laying hens；egg quality；antioxidant

10.15906/j.cnki.cn11-2975/s.20170807

S816.7

A

1004-3314（2017）08-0025-04

“十二五”國家科技支撐計劃（2014BAD13B02）；江蘇省農業(yè)三新工程項目（SXGC[2015]327）；江蘇省高校優(yōu)勢學科建設項目（PAPD）；蘇州市農業(yè)科技支撐計劃項目（SNG201407）

*通訊作者