ERα及PR在乳腺癌患者中的表達(dá)及與疾病預(yù)后關(guān)系探討

侯芃芬+丁芳+江時(shí)建+繆卡莉

[摘要] 目的 探討ERα及PR在乳腺癌患者中的表達(dá)及與疾病預(yù)后的關(guān)系。 方法 選取我院100例原發(fā)性乳腺癌患者檢測(cè)ERα及PR水平，然后根據(jù)檢測(cè)結(jié)果評(píng)價(jià)乳腺癌早期診斷以及病情監(jiān)測(cè)、預(yù)后評(píng)估的價(jià)值。 結(jié)果 ERα與PR的表達(dá)隨著乳腺癌臨床分期的逐漸升高，陰性表達(dá)也逐漸升高，在臨床分期中比較Ⅰ期與Ⅱ期、Ⅱ期與Ⅲ期之間差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。 結(jié)論 ERα與PR的表達(dá)主要隨著臨床腫瘤的分期而發(fā)生顯著變化，反映其對(duì)于乳腺癌分化程度可以作為重要的檢測(cè)指標(biāo)，為監(jiān)測(cè)臨床療效及判斷預(yù)后等方面提供有利依據(jù)。

[關(guān)鍵詞] 乳腺癌；ERα；PR；腫瘤分期

[中圖分類號(hào)] R737.9 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A [文章編號(hào)] 1673-9701（2017）07-0005-03

[Abstract] Objective To investigate the expression of ERα and PR in breast cancer and its relationship with the prognosis of the disease. Methods The levels of ERα and PR were detected in 100 patients with primary breast cancer. And then based on the test results， their values in early diagnosis of breast cancer and disease monitoring， prognostic were evaluated. Results The expression of ERα and PR gradually increased with the clinical stage of breast cancer， while negative expression also gradually increased. There was statistically significant difference between Ⅰand Ⅱ， and between Ⅱ and Ⅲ in the clinical stage（P<0.05）. Conclusion The expression of ERα and PR mainly changes with the staging of clinical tumor， which reflects the degree of differentiation of breast cancer can be used as an important test index， providing a favorable basis for monitoring clinical efficacy and judging the prognosis.

[Key words] Breast cancer； ERα； PR； Tumor staging

乳腺癌是發(fā)生在乳腺腺上皮組織的惡性腫瘤，是當(dāng)前嚴(yán)重危害女性健康的最常見惡性腫瘤之一。乳腺癌是一種高度異質(zhì)性的惡性腫瘤，它包括瘤間異質(zhì)性以及瘤內(nèi)異質(zhì)性，瘤內(nèi)異質(zhì)性可以看成是瘤間異質(zhì)性的基礎(chǔ)。為減少疾病的發(fā)生及縮短治療時(shí)間，提高患者的生存率及生活質(zhì)量，強(qiáng)調(diào)早發(fā)現(xiàn)早治療的理念。而鑒于乳腺癌具有高度異質(zhì)性的存在，隨著蛋白質(zhì)組學(xué)、分子病理學(xué)及基因組學(xué)的發(fā)展進(jìn)步，對(duì)于乳腺癌患者治療目前已經(jīng)進(jìn)入了分子分型指導(dǎo)下的個(gè)體化診療階段。乳腺癌的內(nèi)分泌治療主要通過測(cè)定ERα和PR的狀態(tài)決定，激素受體的存在提示乳腺上皮增生仍受一定程度的調(diào)控。生物學(xué)因素是影響乳腺癌預(yù)后的主要因素之一，其在乳腺癌患者的療效預(yù)測(cè)和預(yù)后判斷方面有著不可或缺的地位[1]。本文即從ERα及PR兩個(gè)指標(biāo)在乳腺癌患者中表達(dá)情況及與疾病預(yù)后的關(guān)系進(jìn)行探討分析。

1 資料與方法

1.1 一般資料

隨機(jī)選取100例門診及住院確診為乳腺癌患者，年齡31～72歲，平均51.5歲。采用國(guó)際抗癌協(xié)會(huì)建議的pTNM分期法進(jìn)行臨床分期：Ⅰ期34例、Ⅱ期31例、Ⅲ期35例。全部病例均由術(shù)前乳腺B超、鉬靶X線檢查及術(shù)后病理活檢明確診斷。

1.2 方法

1.2.1標(biāo)本收集 本試驗(yàn)所收集的樣本均未經(jīng)過術(shù)前放化療。取材過程：在利多卡因局部麻醉下切除乳腺腫物進(jìn)行術(shù)中冰凍病理檢查，病理結(jié)果確診為乳腺癌后再改全麻并行乳腺癌改良根治術(shù)或乳腺癌保乳術(shù)。術(shù)中留取標(biāo)本送往病理科進(jìn)行免疫組化實(shí)驗(yàn)。

1.2.2 實(shí)驗(yàn)步驟 ①微波抗原熱修復(fù)法：首先將組織標(biāo)本進(jìn)行二甲苯脫蠟-再梯度酒精水化浸泡在蒸餾水中以備用-加入檸檬酸鹽緩沖液（低于500 mL），高檔微波持續(xù)加熱到沸騰（約5 min）-取出脫蠟水化后的組織切片置于耐高溫的塑料切片架上，放入已沸騰的緩沖液中，使用中檔微波加熱約20 min，然后從微波盒中取出并冷卻至室溫，最后從緩沖液中取出標(biāo)本，蒸餾水洗滌2次并用PBS液（pH=7.2～7.4）沖洗2次。②防脫載玻片處理：將載玻片清洗干凈，然后將其浸泡在重鉻酸鉀濃硫酸清潔液中約24 h-再用清水漂洗過夜使其充分清洗干凈-再使用蒸餾水沖洗2次-95%酒精浸泡12 h后烘干。③免疫組化染色：將石蠟切片進(jìn)行脫蠟水化-再用PBS液沖洗3次，每次清洗時(shí)間不少于3 min-在室溫下孵育大約10 min，用以阻斷內(nèi)源性過氧化酶，再用PBS液清洗3次，每次約3 min-甩干PBS溶液后，每一張切片加入1滴第一抗體室溫孵育2 h-PBS液再次沖洗3次，每次不少于5 min-甩干PBS溶液后，在每一張切片上滴入酶標(biāo)抗鼠/兔聚合物（試劑B），室溫孵育30 min-PBS沖洗3次，每次不少于3 min，每張玻片各滴入2滴DAB染色液—顯微鏡下觀察。

1.2.3 診斷依據(jù) 所有標(biāo)本在顯微鏡下均可見細(xì)胞核呈現(xiàn)棕黃色細(xì)顆粒，當(dāng)陽性細(xì)胞數(shù)<25%（-），25%≤陽性細(xì)胞數(shù)<50%（+），50%≤陽性細(xì)胞數(shù)<75%（++），陽性細(xì)胞數(shù)≥75%（+++）[2]。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS19.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)量資料以（x±s）表示，組間比較采用t檢驗(yàn)及方差分析，計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)，P<0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 顯微鏡下ERα及PR陽性表達(dá)

見封三圖1、2。

2.2 ERα及PR在乳腺癌臨床不同分期陽性表達(dá)情況比較

與Ⅰ期相比，Ⅱ期乳腺癌患者中ERα及PR陽性細(xì)胞數(shù)減少，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；與Ⅱ期相比，Ⅲ期乳腺癌患者中ERα及PR陽性細(xì)胞數(shù)減少，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。見表1。

3 討論

乳腺癌是亞洲女性發(fā)病第一位的惡性腫瘤，其流行特點(diǎn)呈現(xiàn)出發(fā)病率持續(xù)上升[3]，嚴(yán)重影響女性的生命及健康。雖然乳腺癌死亡率較高，但預(yù)后較好。因此對(duì)乳腺癌的治療及預(yù)后的研究成為眾多相關(guān)人員的研究方向，大部分學(xué)者認(rèn)為乳腺癌的預(yù)后與自身生物學(xué)信息有密切聯(lián)系[4，5]。為更好地判斷預(yù)后，提高患者術(shù)后的生存質(zhì)量，綜合全面的評(píng)估尤為重要，因此，本文旨在研究ERα及PR在乳腺癌患者中的表達(dá)情況，研究其與該疾病的關(guān)系及與預(yù)后相關(guān)的影響結(jié)果。

隨著基因組學(xué)、流行病學(xué)、蛋白質(zhì)組學(xué)等研究的不斷深入，有助于醫(yī)師獲得更多的治療信息并進(jìn)行個(gè)體化治療及了解乳腺癌的發(fā)病機(jī)制，從而找到更有效的方法和技術(shù)預(yù)防和治療乳腺癌。惡性腫瘤的發(fā)生、發(fā)展與機(jī)體的免疫功能，尤其是與細(xì)胞免疫功能密切相關(guān)[6]，由此強(qiáng)調(diào)采取包括免疫療法在內(nèi)的綜合治療。早診斷、早發(fā)現(xiàn)惡性腫瘤的復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移并及時(shí)采取有效的治療，對(duì)提高乳腺癌預(yù)后有重要作用。目前對(duì)檢測(cè)乳腺癌預(yù)后因素的研究較多，許多研究表明乳腺癌的生存期因腫塊大小的不同而呈現(xiàn)階梯式的改變：腫塊越大，生存期越短[7]。腫瘤的大小還與腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移以及遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移的情況直接相關(guān)，腫瘤越大出現(xiàn)轉(zhuǎn)移的機(jī)會(huì)越大[8]。隨著科技的發(fā)展，尤其流式細(xì)胞儀投入臨床應(yīng)用以來，淋巴細(xì)胞亞群及各種細(xì)胞因子檢測(cè)項(xiàng)目的發(fā)展迅速，提供了新的臨床診斷學(xué)的常規(guī)模式。

乳腺癌是雌激素依賴性的腫瘤，目前的大量研究顯示，該病的發(fā)病與雌激素水平有著密切關(guān)系[9]，ERα及PR是一種特殊功能蛋白，能夠調(diào)節(jié)乳腺癌的生長(zhǎng)及分化[10]。雌激素的終產(chǎn)物是PR，而且雌激素是PR合成的必要啟動(dòng)物質(zhì)，測(cè)定ERα及PR對(duì)于乳腺癌患者的藥物治療及預(yù)后判斷有著積極的作用和意義[11]，ER（+）和（或）PR（+）的乳腺癌內(nèi)分泌治療效果明顯，5年生存率顯著長(zhǎng)于陰性表達(dá)患者，預(yù)后較好[12]。而本試驗(yàn)也進(jìn)一步證實(shí)了ERα及PR陽性表達(dá)對(duì)于乳腺癌患者的預(yù)后有著良好的指導(dǎo)意義。

ER包括兩個(gè)亞型，分別為ERα和ERβ[13]，在不同的組織中表達(dá)及分布不同，它們分別通過ERS1和ERS2基因編碼生成，ERα和ERβ的結(jié)構(gòu)十分相似，目前臨床上內(nèi)分泌指導(dǎo)的主要依據(jù)仍是針對(duì)ERα的狀態(tài)，而ERβ還處在實(shí)驗(yàn)研究階段?？墒牵陙淼膶?shí)驗(yàn)結(jié)果顯示ERβ與腫瘤細(xì)胞增殖方面的抑制作用也有相關(guān)性，乳腺癌患者且對(duì)芳香化酶抑制劑耐藥使用ERβ激動(dòng)劑有顯著的臨床療效[14]。因此，對(duì)于ERα和ERβ的聯(lián)合檢測(cè)對(duì)于指導(dǎo)乳腺癌治療提供新的方向。ERα和（或）PR陽性率≥1%是臨床上內(nèi)分泌治療的指標(biāo)，然而陽性率1%～100%的指導(dǎo)治療以及預(yù)后意義卻有顯著差異。乳腺癌屬于高度異質(zhì)性腫瘤[15-18]，在不同的病理學(xué)乳腺癌類型中，相比較于導(dǎo)管原位癌以及浸潤(rùn)性癌非特殊型，浸潤(rùn)性小葉癌中ERα和PR的陽性率最高，經(jīng)典型小葉癌和非經(jīng)典型小葉癌對(duì)比無顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。而且組織分化越好，ERα和PR的陽性率表現(xiàn)越明顯。乳腺癌核級(jí)與ERα和PR陽性率呈負(fù)相關(guān)性。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示：ERα及PR在乳腺癌不同臨床分期中有不同的表達(dá)程度，其中，ERα在乳腺癌Ⅰ期的陽性表達(dá)率為61.8%，Ⅱ期的陽性表達(dá)率為41.9%，Ⅲ期的陽性表達(dá)率為22.9%；PR在乳腺癌Ⅰ期的陽性表達(dá)率為67.6%，Ⅱ期的陽性表達(dá)率為45.2%，Ⅲ期的陽性表達(dá)率為25.7%。隨著臨床分期的不斷遞增，ER及PR的陽性表達(dá)逐漸減少。臨床Ⅰ期與Ⅱ期、臨床Ⅱ期與Ⅲ期之間的差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。由此可得出，ERα與PR的表達(dá)主要隨著臨床腫瘤的分期增高而發(fā)生顯著變化，反映對(duì)于乳腺癌分化程度可以作為重要的檢測(cè)指標(biāo)。

綜上所述，聯(lián)合檢測(cè)ERα和PR可為判斷乳腺癌患者臨床療效及預(yù)后等方面提供有利依據(jù)，但是，影響腫瘤預(yù)后的因素較多，需結(jié)合臨床具體情況，結(jié)合更多的檢測(cè)結(jié)果，才能更加準(zhǔn)確地予以判斷。

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（收稿日期：2016-12-23）