Rh血型配合性輸注的重要性

史恩祥 魯傳東 丁秀麗 王茹燕 徐 然 門(mén)蓓蕾

Rh血型配合性輸注的重要性

史恩祥 魯傳東 丁秀麗 王茹燕 徐 然 門(mén)蓓蕾

目的 通過(guò)對(duì)患者輸血前Rh血型抗原（C、c、D、E、e）鑒定，有條件地配合性輸血，解決患者因不完全抗體導(dǎo)致的配血和輸血難題。方法 選取2009年1月～2013年2月有輸血史、妊娠史、需要多次輸血及血型抗體篩查陽(yáng)性或Rh（D）陰性的患者為研究對(duì)象，進(jìn)行Rh血型抗原鑒定、不完全抗體篩查。選擇Rh血型抗原相同或高頻高原（D、E、C）相合的血液相容性輸注。結(jié)果 3 547例患者Rh血型抗原檢出12種表型，以CCDee（40.18%）和CcDEe（34.96%）表型居多，其次為CcDee（7.87%）、ccDEE（6.71%）、CcDEE（4.17%）、ccDEe（3.58 %）表型，少見(jiàn)ccdEe（0.03%）表型。不完全抗體檢測(cè)陽(yáng)性180例，其中抗-D 23例、抗-E 56例、抗-C 44例、抗-c28例、抗-e 20例，有9例患者同時(shí)存在2種Rh系統(tǒng)的抗體。結(jié)論 患者輸血前應(yīng)常規(guī)鑒定Rh血型抗原，盡量選擇Rh血型抗原配合的紅細(xì)胞制品輸注，以免產(chǎn)生Rh抗體。

不完全抗體 Rh血型抗原 輸血

臨床上有許多需要輸血治療的患者，會(huì)由于外來(lái)Rh血型抗原刺激而產(chǎn)生抗體，當(dāng)需要輸血時(shí)就有可能出現(xiàn)配血困難的情況。對(duì)患者輸血前常規(guī)進(jìn)行Rh血型系統(tǒng)C、c、D、E、e抗原鑒定，選擇Rh血型配合性輸注，對(duì)解決因不完全抗體導(dǎo)致的配血和輸血難題有重要意義。

資料與方法

1 標(biāo)本來(lái)源 2009年1月～2013年2月輸血科接收住院患者血液相容性檢測(cè)樣本25 215例，選擇有輸血史、妊娠史、需要多次輸血及血型抗體篩查陽(yáng)性或Rh（D）陰性的3 547例患者作為研究對(duì)象（其中如有選項(xiàng)重合按1例統(tǒng)計(jì)）。

2 試劑 Rh血型抗原檢測(cè)卡（長(zhǎng)春博迅生物技術(shù)有限責(zé)任公司）。微柱凝膠抗人球蛋白卡（西班牙戴安娜）。微柱凝膠ABO、Rh（D）血型定型卡（中山市生科試劑儀器有限公司）。ABO單克隆抗體血清、抗體篩選譜細(xì)胞（上海血液生物醫(yī)藥責(zé)任有限公司）。

3 方法

3.1 不完全抗體篩查：在微柱凝膠抗人球蛋白卡第1～3孔內(nèi)，分別加入0.5%的Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ標(biāo)準(zhǔn)譜紅細(xì)胞懸液100 μl，在第4孔內(nèi)加入受血者0.5%紅細(xì)胞懸液100 μl。在各孔內(nèi)分別加入25 μl受檢者血漿，置孵育器（37℃）孵育15 min。于專用離心機(jī)中離心（1 000 r/min離心2 min，1 800 r/ min離心3 min）。判讀結(jié)果。

3.2 Rh血型抗原鑒定：在Rh血型抗原檢測(cè)卡孔內(nèi)，分別加入受檢者1%紅細(xì)胞懸液50 μl，于專用離心機(jī)離心（900 r/min離心2 min，1 500 r/min離心3 min）。判讀結(jié)果。

3.3 血液相容性檢測(cè)：在微柱凝膠抗人球蛋白卡標(biāo)記主側(cè)孔內(nèi)加入受血者血漿50 μl，同時(shí)加入供血者1%紅細(xì)胞懸液50 μl；在標(biāo)記次側(cè)孔內(nèi)加入供血者血漿50 μl，同時(shí)加入受血者1%紅細(xì)胞懸液50 μl。置孵育器（37℃）孵育15 min。于專用離心機(jī)（1 000 r/min離心2 min，1 800 r/min離心3 min）。 判讀結(jié)果。

3.4 RhD抗原陰性再進(jìn)一步用抗-D（IgM）血型定型試劑（單克隆抗體）（合肥天一生物技術(shù)研究所）檢測(cè)；用抗-D（IgM+IgG）血型定型試劑（單克隆抗體）（Millipore（UK）Ltd）做間接抗人球蛋白（IAT）實(shí)驗(yàn)確定，IAT實(shí)驗(yàn)顯微鏡下未見(jiàn)凝集，判為Rh陰性血型，出現(xiàn)凝集的判斷為Du型（含弱D和部分D）。

3.5 配合性輸注選擇：患者輸血根據(jù)Rh抗原分型鑒定結(jié)果，盡可能選擇Rh血型抗原相同或高頻抗原相合的紅細(xì)胞成分進(jìn)行輸注。

結(jié) 果

1 患者Rh血型抗原表現(xiàn)型分布見(jiàn)表1。Rh血型抗原檢出12種表型，以CCDee （40.18%）和CcDEe （34.96%）表型居多，其次為CcDee （7.87%）、ccDEE （6.71%）、CcDEE（4.17%）、ccDEe（3.58 %）表型，再次為CCDEE（0.87%）、ccDee（0.54%）、ccdee（0.42%）、CCDEe（0.39%）、Ccdee（0.28%），少見(jiàn)ccdEe（0.03%）表型。

2 患者Rh血型系統(tǒng)抗體鑒定分類(lèi)見(jiàn)表2。Rh血型抗體檢測(cè)陽(yáng)性180例，其中抗-D 23例、抗-E 56例、抗-C 44例、抗-c 28例、抗-e 20例，依次為抗-E 31.11%＞抗-C 24.54%＞抗-c 15.55%＞抗-D 12.78%＞抗-e 11.11%。同時(shí)存在2種Rh血型抗體有9例，其中6例患者抗-Ec 、3例有抗-Ce。

表1 患者Rh血型抗原表現(xiàn)型分布

表2 患者Rh血型抗體鑒定分類(lèi)

討 論

《臨床輸血技術(shù)規(guī)范》要求輸血前常規(guī)檢查患者Rh（D）血型。實(shí)際上Rh血型系統(tǒng)較為復(fù)雜，除Rh（D）抗原外，C、c、E、e抗原也具有重要的臨床意義[1]。常見(jiàn)的C、c、D、E、e 五種抗原可檢出18種表型和36種基因型。文獻(xiàn)報(bào)道Rh陰性血清學(xué)表型分布研究較多[2，3]。本研究Rh血清學(xué)檢出12種表型，以CCDee和CcDEe居多，其次為CcDee＞ccDEE ＞CcDEE＞ccDEe、少見(jiàn)ccdEe。表型分布較全面反映Rh血型系統(tǒng)。

Rh血型系統(tǒng)主要抗原以D抗原性最強(qiáng)，其次依次為E、C、c、e。杜肖剛[4]等研究結(jié)果顯示Rh（D）抗原陰性、Rh（E）抗原陰性和Rh（C）抗原陰性檢出率分別為0.49%、47.09%和11.71%，與本文檢測(cè)結(jié)果Rh（D）抗原陰性、Rh（E）抗原陰性和Rh（C）抗原陰性檢出率分別為0.73%、49.29%和11.28%相當(dāng)。陳尚良[5]等研究顯示Rh（D）抗原陰性、Rh（E）抗原陰性和Rh（C）抗原陰性檢出率分別為0.30%、67.50%和2.5%，與本次結(jié)果不一致，可能與應(yīng)用基因分型技術(shù)有關(guān)；但與人群中Rh（E）陰性頻率遠(yuǎn)高于Rh（D）陰性頻率的研究結(jié)果相同。Rh（E）抗原具有Rh血型系統(tǒng)中除Rh（D）外最強(qiáng)抗原性，1次隨機(jī)輸血后產(chǎn)生抗-E的概率為抗-D抗體的2.47倍[4]。反復(fù)多次輸注Rh血型系統(tǒng)抗原不相合的血液，往往會(huì)產(chǎn)生單一或混合的不完全抗體[6]。本文檢測(cè)結(jié)果抗-E＞抗-C＞抗-c＞抗-D ＞抗-e進(jìn)一步提示，由于僅有D抗原被要求常規(guī)檢測(cè)，故產(chǎn)生抗-E、抗-C、抗-c的概率高于抗-D。關(guān)于Rh血型系統(tǒng)抗原所致的新生兒溶血病、溶血性輸血反應(yīng)配血難和輸血難等也屢見(jiàn)報(bào)道[7]。若對(duì)有輸血史、妊娠史、短期內(nèi)需要接受多次輸血或長(zhǎng)期需要輸血改善貧血癥狀的慢性貧血疾病患者進(jìn)行Rh抗原分型檢測(cè)，并給予Rh抗原同型或高頻抗原相合血液進(jìn)行輸血治療，可避免Rh系統(tǒng)抗體的產(chǎn)生。對(duì)于已產(chǎn)生某Rh抗體的患者，更應(yīng)以Rh表型相同的血液輸注，以免產(chǎn)生另一Rh抗體，增加配血難度。我們針對(duì)患者輸血前Rh抗原分型鑒定結(jié)果，選擇Rh血型抗原相同或高頻高原（D、E、C）相同的血液相容性輸注，經(jīng)臨床應(yīng)用取得滿意效果。

我科是集采血與臨床供血一體的軍隊(duì)采供血站，建立了獻(xiàn)血者Rh抗原表型庫(kù)。目前部分血液中心也已開(kāi)展了Rh抗原分型常規(guī)檢測(cè)工作，建立了獻(xiàn)血者Rh抗原表型庫(kù)[8，9]，有條件的輸血科可以對(duì)患者輸血前進(jìn)行Rh抗原分型常規(guī)檢測(cè)，與供血單位協(xié)調(diào)，有條件地選擇Rh配合的血液成分制品，特別是紅細(xì)胞制品進(jìn)行輸注，解決不完全抗體導(dǎo)致的配血和輸血難題。

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R457.1

A

1671-2587（2017）02-0182-03

2016-09-19）

（本文編輯：王虹）

10.3969/j.issn.1671-2587.2017.02.026

075000 河北省張家口市解放軍第二五一醫(yī)院輸血科（史恩祥，丁秀麗，王茹燕，徐然，門(mén)蓓蕾）；質(zhì)量管理科（魯傳東）

史恩祥（1964–），男，河北張家口人，副主任技師，學(xué)士，主要從事血液管理工作，（E-mail）enxiangshi@ aliyun.com。