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      龍血竭劑型的研究進展

      2017-04-14 01:26:42馬乃榮陳梅姜婷婷曹志尉劉影陳晨
      當代醫(yī)學 2017年31期
      關鍵詞:血竭微膠囊黃酮

      馬乃榮,陳梅,姜婷婷,曹志尉,劉影,陳晨

      (南京醫(yī)科大學附屬淮安第一醫(yī)院護理部,江蘇 淮安 223300)

      龍血竭劑型的研究進展

      馬乃榮,陳梅,姜婷婷,曹志尉,劉影,陳晨

      (南京醫(yī)科大學附屬淮安第一醫(yī)院護理部,江蘇 淮安 223300)

      近年來,龍血竭越來越多的應用于臨床,但其上市劑型僅有散劑、膠囊劑和片劑。目前,雖然各種緩釋劑型已研發(fā)出,且可明顯提高龍血竭的溶出度,但多處于動物實驗階段,尚未應用于臨床實踐。這在臨床應用中有著廣闊的發(fā)展前景,是未來需要關注的研究方向。龍血竭具有活血散瘀、消腫止痛、收斂止血、軟堅散結、生肌斂瘡的功效,在臨床有很好的效用。目前臨床常見劑型及藥物濃度還不能滿足臨床需要,通過對其提取工藝的研究,增加其溶出度應是未來研究的重點。

      龍血竭;劑型;龍血竭總黃酮;溶出度;提取工藝

      龍血竭,即滇龍血竭[1],主產于云南,從百合科植物劍葉龍血樹中獲得,樹皮割破后會流出殷紅的汁液,龍血竭就是從汁液中提取的。為紅棕色至黑棕色的不規(guī)則塊狀或片狀,有光澤,質地較脆,結構有空隙,有些附有少量紅棕色粉末。微有清香,嚼起來微有澀味,有炭粒感并輕微粘牙,物理特性為可溶于甲醇、乙醇或稀堿液,不溶于水、乙醚和稀酸溶液[2]。20世紀70年代,人們發(fā)現龍血竭含有血竭紅素、血竭素、去甲血竭紅素、去甲血竭素、松香酸及苯甲酸等,中醫(yī)發(fā)現它具有活血散瘀、消腫止痛、收斂止血、軟堅散結、生肌斂瘡之功效,在《本草綱目》中有活血之圣藥的美譽[3],主要用于外傷出血、潰瘍不斂、跌打損傷、瘀滯等癥,同時還有消炎、鎮(zhèn)痛、抗菌、降血糖、降血脂、抗氧自由基、抗血小板聚集、保護心肌細胞、抗肺纖維化、改變血液流變學、降低NOS活性、促進表皮修復的作用[4-5]。龍血竭在臨床上廣泛應用于壓瘡、糖尿病皮膚潰瘍、軟組織損傷等[6-10],現將近10年來龍血竭的各種不同劑型的制備工藝及優(yōu)缺點的研究進展及未來發(fā)展方向綜述如下。

      1 微膠囊

      由于市面銷售的龍血竭產品主要是將龍血竭粉碎后直接灌裝的膠囊劑型,而龍血竭由于其物理特性,水溶性極差,從而導致生物利用度低,嚴重影響了療效的發(fā)揮。2006年,洪宗國等[11]利用固體龍血竭溶于乙醇而不溶于水的性質,將龍血竭乙醇溶液滴入溶有囊材明膠的水溶液中,當產生初生態(tài)微晶時立刻進行包裹,制備成功了納米龍血竭微膠囊。這種納米龍血竭微膠囊就是用明膠將龍血竭包埋起來,讓后緩慢釋放龍血竭,從而使藥物作用更長效、更穩(wěn)定。由于形成的微膠囊有各種不同的粒徑,洪宗國等[11]用高速冷凍離心機將其分離后,還得到了不同粒徑型的龍血竭微膠囊,其中,粒徑小于100納米的微膠囊,由于其微粒小,可制成針劑,粒徑大的微膠囊則制成粉劑、片劑或者軟膠囊使用。但是納米龍血竭微膠囊的成膜材料是明膠,雖然它無毒、價格低廉、有良好的成膜性和生物相容性等,但是如果微膠囊單純以明膠為基材,由于明膠的水溶性,膠囊壁很快溶解,使芯材很快釋放,這就限制了微膠囊在醫(yī)藥領域的應用,而加入交聯劑又會使藥品過于昂貴,這一難題在2013終于有了解決方案。井樂剛等[12]采用植物中廣泛存在、價格低廉的阿魏酸為交聯劑,制備出的復合維生素微膠囊,包埋芯材率高、球形度高、直徑大小均勻一致、具有一定的緩釋性能。未來可以期待這一成膜技術能應用于龍血竭的制作工藝,從而使龍血竭更能做到長效緩釋。

      2 固體分散體

      由于龍血竭中黃酮難溶于水,易溶于95%乙醇[2],為提高黃酮在水中的溶出度,2007年,喬淑娟等[13]采用固體分散技術,將龍血竭制成了固體分散體。固體分散體[14]是指將一種或多種藥物以分子、膠態(tài)、無定形物、超細結晶等狀態(tài)分散于某一固體載體中,使藥物達到納米級高度分散狀態(tài),以此提高難溶性藥物的溶出度、溶解度、溶出速率、穩(wěn)定性,從而使藥物具有緩釋效果。喬淑娟[13]在實驗中將龍血竭與pluronicF68以1:4(質量比)的比例通過物理混合后,以溶劑熔融法制成固體分散劑,保證了龍血竭的有效成分以分子狀態(tài)在適宜的溫度下與輔料充分混合,使其分散程度大大提高,最終發(fā)現溶出度比龍血竭與載體的物理混合物增大了近五倍。

      3 環(huán)糊精包合劑

      β-環(huán)糊精是由7個葡萄糖殘基形成的環(huán)狀低聚糖化臺物,由于包合方法簡單、價格低廉、口服無毒、并且能將藥物分子以物理方式包合進它的空洞中,從而掩蓋中藥的不良氣味及味道,降低刺激性,改善藥物的口感,增強制劑的穩(wěn)定性,大大增加藥品生物利用度及患者服藥的順應性,因而廣泛應用于中藥制劑中[15]。由于龍血竭有澀味,韓彬彬等[16]將龍血竭研磨成細粉和B-環(huán)糊精以質量比1:4投料,常溫下加約為環(huán)糊精質量3倍的水,用磁力攪拌器攪拌半小時,加熱60℃下滴加稀NaOH溶液至pH 10.0,繼續(xù)保溫攪拌1 h,冷卻至室溫后,緩慢滴加稀酸至中性,繼續(xù)攪拌數小時,50℃以下減壓除水,室溫真空干燥得到紅色龍血竭β-環(huán)糊精包合物。再將龍血竭含量約為20%的龍血竭β-環(huán)糊精包合物與常用輔料按比例混合,過100目篩混勻,用75%乙醇制軟材,過20目篩濕法制成顆粒,然后在60℃烘箱中干燥5 h,過20目篩整粒,在干顆粒中加入處方量的硬脂酸鎂(200篩)混合2~3 min,用7 kg左右壓力壓片,最終制成龍血竭包合片。龍血竭包合片在體外對兔血小板聚集的影響試驗中結果顯示:達同等效果時,所需包合物的劑量約為龍血竭的1/2;同等劑量時,包合物在體內外抗血小板聚集和抗血栓的藥物療效大大高于未經包合的龍血竭,證明其生物利用度和藥理活性比龍血竭均顯著提高。

      4 緩釋滴丸

      由于緩釋滴丸具有能夠在控制藥物釋放的同時增加藥物溶解度,從而增加藥物吸收,穩(wěn)定血藥濃度,達到長效和高效并存的特性。因此,2010年中醫(yī)藥研究院通過固體分散技術,以硬脂酸為骨架材料,以聚乙二醇-4000為致孔劑,將龍血竭藥材粉末和適量的基質,置于85℃的水浴中,加熱使其充分熔融,然后將熔融液倒入滴丸制備機中,保溫15 min,然后以20滴/分鐘的速度滴入冷凝劑液體石蠟,滴口直徑定為0.6 mm,等待成型后,收集滴丸,滴丸表面的液體石蠟用濾紙吸收掉后,在干燥器中放置24 h,制得具有良好緩釋效果的龍血竭緩釋滴丸[17]。研究證明龍血竭滴丸能使龍血竭2 h累積釋放量達到50%以上,10 h累積釋放量達80%以上,這就做到了服用后既能夠使龍血竭的血藥濃度快速達到治療范圍,又能持續(xù)維持一定時間的藥物濃度[17]。鄭焱江等[18]的研究也證實了龍血竭滴丸的作用,他將龍血竭原料藥組及龍血竭總酚滴丸高、中、低劑量組對比,分別進行神經功能評分,并測定梗死體積。結果發(fā)現龍血竭總酚滴丸各劑量組均可顯著降低大鼠腦缺血后神經功能的評分,縮小腦梗死體積,對大鼠局灶性腦缺血損傷具有較好的保護作用。

      5 超微粉

      由于中藥材的有效成分主要存在于細胞質和細胞核內,細胞在完整無損的情況下,其有效成分只能通過細胞壁釋放出來。但經過超微粉碎后,粒度變得均勻細密,并可破碎細胞壁,增加了藥材的表面積,有利于藥物有效成分的溶出,增加藥材有效成分的溶出度,既保留了傳統(tǒng)飲片的優(yōu)點,又具有了良好的溶解性、分散性、吸附性和化學反應活性等[19]。2013年,鹿麗麗等[20]將龍血竭80目細粉(江蘇康緣藥業(yè)股份有限公司,批號 Z110801)用FDV型原泰奇氣引式粉碎機(佑崎有限公司)粉碎后制成不同粒徑的龍血竭超微粉,并且實驗發(fā)現:隨著粒徑的減小,龍血竭粉末越加細膩,顆粒感消失,吸濕性變強,體外溶出度提高。這個實驗為龍血竭的超微粉入藥提供了實驗依據。

      6 龍血竭乙醇液

      向金蓮等[21]研究已證明:對家兔“急性血瘀癥”模型,龍血竭能明顯抑制家兔血小板聚集,防止血栓形成。劉芳等[22]研究也表明龍血竭能抑制體內外凝血酶活性,調節(jié)凝血和抗凝血的動態(tài)平衡,具有活血化瘀的藥理作用。鑒于龍血竭的這一作用,余德文等[23]用龍血竭粉與75%乙醇以1∶2的比例濃度調制涂敷急性軟組織損傷處,發(fā)現龍血竭乙醇溶液能使瘀血的吸收速度、腫脹及疼痛的消退速度加快,從而引起創(chuàng)傷組織的修復愈合加速,尤其是瘀血、腫脹的快速消退吸收,具有非常顯著的療效。

      7 乙酸乙酯提取物

      屠鵬飛[24]等從龍血竭的乙酸乙酯提取物中分離出黃酮類化合物,即龍血竭的總黃酮,它具有強大的抗炎鎮(zhèn)痛作用。而陳素等[25]通過研究發(fā)現龍血竭總黃酮的鎮(zhèn)痛作用與阿片受體無關,因為龍血竭總黃酮的鎮(zhèn)痛作用不能被阿片受體阻斷劑納絡酮阻斷。隨后,陳玉立等[26]觀察到龍血竭總黃酮的主要鎮(zhèn)痛機制是阻滯神經傳導,干預痛覺信息傳導。龍血竭總黃酮對初級感覺神經元電壓門控性鈉通道的放電活動的抑制作用[27-28]干預了痛覺信息的傳導過程,對中樞和外周痛覺信息傳導起阻滯效應。并且龍血竭作用于牛蛙坐骨神經可使動作電位幅值明顯下降,不應期延長、傳導速度減慢。

      陳洪濤等[29]研究了龍血竭不同提取物對高血糖模型小鼠血糖水平的影響,實驗結果表明龍血竭的乙酸乙酯提取物能夠降低糖尿病小鼠的血糖,并且提取物的降血糖效果能夠隨著給藥時間的延長而加強,并可上調糖尿病小鼠GLUT4m RNA的表達,提示其作用機制可能與改善胰島素抵抗有關。另外,在給藥時間較長時,氯仿溶劑也能夠降低糖尿病小鼠的血糖,說明乙酸乙酯提取物中存在黃酮-降血糖的主要成分。

      8 軟膏

      由于軟膏有較好的附著性、涂展性、使用及攜帶方便等優(yōu)點,在臨床中被廣泛應用。龍血竭具有增強創(chuàng)面免疫細胞活性,促進創(chuàng)傷局部血液循環(huán),改善創(chuàng)面營養(yǎng)狀況,促進創(chuàng)面愈合和組織修復的作用。為更好的發(fā)揮龍血竭的作用,于浩飛等[30]自制了含0.5%龍血竭粉末、40%乙醇提取物的PEG乳化型軟膏。且將龍血竭軟膏用于大鼠急性創(chuàng)傷實驗,表明該軟膏能顯著促進創(chuàng)面愈合,改善創(chuàng)面愈合質量,無感染等不良反應,且制備工藝簡單,穩(wěn)定性好。

      9 固體分散體膠囊

      談增等[31]采用溶劑法研制龍血竭固體分散體粉末,在無水乙醇中將龍血竭粉末與PVP K30按1∶4配比后充分溶解,混合均勻后旋蒸除去有機溶劑,真空干燥、粉碎即可。同時用0號膠囊填充龍血竭固體分散體粉末,實驗表明談增所制成的分散體膠囊藥物溶出度可高達至80%,是市售的龍血竭膠囊的溶出度的44倍,大大提高了龍血竭的溶解性能,改善了血竭的利用率。隨后石雷等[32]的研究也證明了龍血竭固體分散體緩釋膠囊60min累積溶出度為81.21%,而市售的龍血竭膠囊60 min累積溶出度僅為13.86%。

      10 優(yōu)化龍血竭總黃酮提取工藝

      總黃酮的提取工藝一般包括藥材粉碎、溶劑提取、堿溶解和酸沉淀,屠鵬飛等[33]以總黃酮的含量為檢測指標,對工藝中的提取溶劑、堿種類和濃度、pH值等進行試驗,考察黃酮類化合物為其主要活性物質的提取效率,最終發(fā)現采用8倍量的乙酸乙酯提取2次,每次1 h,用0.35%NaOH溶液溶解、攪拌,結果黃酮類成分提取率最高,可達50%以上。

      為提高龍血竭產品質量并使之更好地發(fā)揮治療作用,2015年,王少兵等[34]以乙酸乙酯為提取溶劑,10倍溶劑70℃下回流提取0.5 h,提取1次,獲得提取物中總黃酮質量百分比為54.61%,相對其他工藝,由于提取時間偏短、提取次數偏少,避免了黃酮類成分的熱穩(wěn)定性比較差,溫度過高容易導致氧化或分解。

      11 涂膜劑

      宋美芳等[35]經過實驗發(fā)現:將聚乙烯醇-1788與聚乙烯吡咯烷-k30按4:1的比例混合在龍血竭乙醇溶液中具有較好的成膜性,且涂膜質地均勻、光滑、容易脫膜,具有較好的臨床效用。

      藥物涂膜劑沒有首過效應、毒副作用較小,制備工藝簡單。并且涂膜能使藥物在局部持續(xù)、緩慢并且高濃度地釋藥,增強藥物療效。涂膜劑干燥后不易脫落,藥物可長期與患者接觸。同時涂膜劑覆蓋創(chuàng)面后,能有效地保護創(chuàng)傷組織。且藥物成膜后還可以避免弄臟衣物,使用方便、藥效持久,特別適用于瘡疔、淺表性創(chuàng)面、外傷等[36]。

      12 凝膠劑

      凝膠劑作為一種新型制劑,具有透氣性佳、生物相容性良、局部作用快、藥物吸收好等特點,可長時間作用于患處、發(fā)揮緩控緩釋作用[37]。石聰等[38]將卡波姆溶解于適量蒸餾水中,加入丙二醇、聚山梨酯-80,充分攪拌后加入龍血竭粉末,充分溶解后加入凝膠基質,用三乙醇胺調節(jié)pH值,制成龍血竭凝膠劑。制成的凝膠劑成型性高,性質穩(wěn)定,涂敷后皮膚舒適度好。另外,小鼠創(chuàng)傷實驗表明了對于開放性傷口,龍血竭凝膠制劑的創(chuàng)面組織修復作用強,結痂時間短、愈合速度快。修復毛囊或者是真皮部位的創(chuàng)面作用較強。凝膠劑在治療創(chuàng)傷的同時還具有抗氧化作用,能夠激活白細胞,增強創(chuàng)傷部位的免疫力,加速創(chuàng)面愈合速度。而對于閉合性創(chuàng)傷,龍血竭凝膠制劑同樣易于透過皮膚發(fā)揮活血化瘀作用,使皮膚下的瘀血快速散開,從而加快傷口愈合速度,副作用小。

      13 巴布劑

      “復方龍血竭”由龍血竭、黃連、冰片組成,具有活血散瘀,定痛止血功效,用于跌打損傷,化瘀止痛,做為臨床經驗外用藥方,療效確切。余曉玲等[39]利用巴布劑載藥量大、生物利用度高、敷貼舒適度好、剝離方便、自然透氣、保濕性好、對皮膚無過敏、無刺激、不易污染衣物等優(yōu)點的特性,將傳統(tǒng)龍血竭散劑制成巴布劑。復方龍血竭巴布劑的制備方法為:稱取適量龍血竭加入溶劑中充分溶解,將溶解后得藥物加入溶脹的卡波姆中,攪拌均勻,為A相;此外,將聚維酮、水、酒石酸充分溶解,為B相;取聚丙烯酸納、甘油、氫氧化鋁置攪拌鍋中攪拌均勻,為C相。將B相與A相混合后加入到C相中后,攪拌均勻至無顆粒感,涂布,并在過程中適當延長交聯攪拌時間、放慢涂布的速度,最終得到的巴布劑膏體光潔、細膩、表面平整、無顆粒感、氣泡明顯減少、粘附性良好。這種制備工藝穩(wěn)定、可行,但仍然存在著一些問題,如仍有顆粒感、涂布時有氣泡等。因此,需要在此基質配比基礎上對攪拌時間和涂布速度再進行探索。

      巴布劑的體外釋放度和透皮吸收量是巴布劑質量評價的重要指標,藥物能否從基質中充分釋放是保證藥物透皮吸收率的前提。李爭艷[40]等實驗證明:復方龍血竭巴布劑(昆明市中醫(yī)醫(yī)院提供,批號140527,140603,140605)具有良好的釋放度和透皮性能,其中主要成分:龍血素A、龍血素B在2h的釋放度分別為94.53%、90.27%,透過立體大鼠皮膚72h的透皮率分別為35.01%,44.60%。

      14 總結

      隨著對龍血竭研究的不斷深入和現代制劑技術的發(fā)展,龍血竭劑型的研究必將具有廣闊的市場。而常規(guī)制劑經多次給藥后易產生較大的峰谷波動現象,且口服后在腸胃道中迅速崩解溢出,對腸胃刺激較大,緩釋制劑則可以減少這些不良反應,提高藥品使用的安全性,減少每天用藥次數,維持血藥濃度,因此,龍血緩釋制劑的研究開發(fā),符合臨床應用的需要,而近年對龍血竭劑型的開發(fā),主要集中于對釋藥速度、釋藥過程、釋藥規(guī)律,以及緩釋制劑的體外、體內釋藥過程。本文主要討論了不同龍血竭劑型的研究進展,為龍血竭新劑型的研究提供參考,為指導臨床合理用藥提供依據。

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      The advances in research on the form of Dragon’s Blood

      Ma Nai-rong,Chen Mei,Jiang Ting-ting,Cao Zhi-wei,Liu Ying,Chen Chen
      (The FirstAffiliated Hospital of Nanjing Medical UniversityEndocrinology,Huaian,Jiangsu,223300,China)

      In recent years,dragon's blood is applied more and more in the clinical,but listed Dosage forms are only powder,capsule and tablet formulations.At present various sustained-release dosage form has been developed,it has been shown to significantly improve the dissolution of dragon's blood,but many is in the stage of animal experiments.t has not been applied to clinical practice.The controlled-release dosage forms of dragon's blood have broad prospects for development in clinical applications,it is the future research direction which need to pay attention to.In this paper,the preparation of a variety of dosage forms,characteristics and research about extract,solvent,dosage form In order to improve the dragon's blood efficacy were summarized.

      Dragon’sBlood;Dosage form;Total flavones extracted from Dragon’sBlood;issolution rate;Extraction process

      10.3969/j.issn.1009-4393.2017.31.087

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