前循環(huán)腦梗死患者血清PLGF水平與頸動脈粥樣斑塊超聲特征的相關性研究

劉美香， 馬麗麗， 蔡姝萍

前循環(huán)腦梗死患者血清PLGF水平與頸動脈粥樣斑塊超聲特征的相關性研究

劉美香， 馬麗麗， 蔡姝萍

目的 通過對頸內動脈系腦梗死患者進行頸動脈彩超檢查，結合檢測胎盤生長因子(PLGF)水平，探尋頸動脈易損斑塊的敏感生物學標志物。方法 根據(jù)頸動脈超聲檢查情況分為無斑塊組、穩(wěn)定斑塊組、不穩(wěn)定斑塊組。對照組為年齡、性別與腦梗死組相匹配的同期住院的非腦血管病患者58例。所有研究對象均采用固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA)測定血清PLGF，并進行頸動脈超聲檢查和卒中危險因素的測定，資料中數(shù)據(jù)均應用 SPSS17.0軟件進行分析。結果 (1)腦梗死組PLGF水平高于對照組，CAS斑塊總檢出率及不穩(wěn)定斑塊檢出率高于對照組，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；(2)不穩(wěn)定斑塊組PLGF水平高于穩(wěn)定斑塊組和無斑塊組(P<0.05)；結論 (1)急性腦梗死患者PLGF水平增高，提示PLGF參與了腦梗死的發(fā)生發(fā)展過程；(2)急性腦梗死患者不穩(wěn)定斑塊組PLGF水平高于穩(wěn)定斑塊組和無斑塊組，提示PLGF水平越高，CAS斑塊的穩(wěn)定性越差，PLGF可作為頸動脈易損斑塊的敏感生物學標志物來評估頸動脈病變的嚴重程度。

急性腦梗死； 胎盤生長因子； 頸動脈粥樣硬化斑塊

目前國內外對于頸動脈粥樣硬化(CAS)易損斑塊的評估手段主要有血清生物學標志物檢測、頭頸部血管彩超檢查、CTA、MRI等影像學檢查。雖然影像學檢查，尤其是MRI能夠準確反映頸動脈粥樣硬化易損斑塊的形態(tài)和成分，但價格昂貴，操作性差；超聲學檢查頸動脈易損斑塊的歷史較久，可操作性較好，能很好地顯示斑塊的形態(tài)，并且能對斑塊穩(wěn)定性做出較為準確地判斷。胎盤生長因子(placenta gronth factor，PLGF)能促進早孕時滋養(yǎng)細胞增殖與分化，可誘導內皮細胞增殖、遷移，抗內皮細胞凋亡，并能增加血管的通透性，能增強低濃度的血管內皮生長因子的生物學活性，是參與多種腫瘤血管生成的重要的促血管生成因子。

本研究通過對頸內動脈系腦梗死患者進行頸動脈彩超檢查，結合檢測PLGF水平，探尋頸動脈易損斑塊的敏感生物學標志物，為臨床防治動脈粥樣硬化及缺血性腦血管病提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 一般資料 選擇2012年6月～2014年9月在開封市中心醫(yī)院神經內科住院發(fā)病3 d以內的急性前循環(huán)腦梗死患者290例，男性200例，女性90例，年齡33～88歲，平均(61.8±11.5)歲。其中有高血壓病238例、糖尿病88例、冠心病24例、卒中史46例。診斷標準符合2005年人民衛(wèi)生出版社出版的第二版神經病學(吳江主編，八年制)制定的標準，并經頭部CT和(或)頭部MRI證實。排除標準：(1)有意識障礙或存在嚴重合并癥而不能完成檢查或神經功能評定的患者；(2)有房顫、風濕性心臟病或脈管炎等可能導致腦栓塞的患者；(3)近1 m內有急性冠狀動脈綜合征病史者；(4)存在嚴重心肝腎疾病、嚴重營養(yǎng)不良或合并有免疫性疾病者；(5)2 w內使用過影響血小板聚集、他汀類的藥物者；(6)腫瘤、妊娠患者；(7)感染發(fā)熱、月經期婦女、免疫接種者。

根據(jù)頸動脈超聲檢查責任血管情況分為無斑塊組(血管內膜< 1.5 mm)、穩(wěn)定斑塊組(斑塊回聲增強、等回聲或混合性回聲)、不穩(wěn)定斑塊組(斑塊回聲為低回聲)。選擇同期住院的年齡、性別與腦梗死組相匹配的非腦血管病患者58例為對照組，包括周圍神經病患者14例，脊髓疾病患者2例，神經系統(tǒng)變性疾病患者2例，運動障礙疾病患者1例，非中樞性頭暈患者33例，心因性軀體感覺障礙疾病2例，癡呆患者2例，動脈瘤患者1例，體位性低血壓患者1例。男性27例，女性31例，年齡34～79歲，平均(62.2±10.4)歲。腦梗死患者和對照組在年齡、性別、高血壓病、糖尿病、冠心病、吸煙、飲酒傳統(tǒng)危險因素比較，差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。

1.2 PLGF的檢測 試劑盒購自上海亞培生物科技有限公司。取靜脈血4 ml注入含樣品保護劑(抗氧化劑)的試管中，輕輕混勻，靜置在冰盒中，待其自然沉降、凝固；而后低溫高速離心，以3500 r/min離心10 min，取上層血清，置于-20 ℃保存，每批樣本集齊后采用固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實驗

(ELISA)檢測。試驗原理：將特異性單克隆抗體包被固相載體，與待測樣品中PLGF結合，再加入酶標記特異性抗體，然后加入底物顯色。用酶標儀在 450 nm處測定。標準血清濃度與OD值進行回歸后計算樣品濃度。

1.3 頸動脈超聲檢查 使用美國GE公司VVID-7型頸動脈彩色多普勒超聲儀檢查，探頭頻率8.0～12.0 MHz。受檢者取仰臥位，從頸動脈起始處開始至頸內動脈入顱顯示不清為止，分別檢測雙側頸總動脈、頸總動脈分叉處及頸內動脈顱外段、頸外動脈、椎動脈、鎖骨下動脈。測量并記錄頸動脈內膜中層厚度(IMT)、管腔內徑、粥樣硬化斑塊部位、數(shù)量、內膜面光整程度及回聲類型等。

斑塊判斷標準：IMT<1.0 mm為正常；1.0 mm≤IMT<1.5 mm為內膜增厚；IMT≥1.5 mm為動脈粥樣硬化粥斑塊形成，根據(jù)斑塊對聲波吸收和反射所表現(xiàn)出的聲學特征，分為穩(wěn)定斑塊，不穩(wěn)定斑塊，混合性斑塊。

2 結 果

2.1 腦梗死組與對照組PLGF水平、不同類型頸動脈斑塊超聲檢出率比較 腦梗死組PLGF水平較對照組明顯增高，差異顯著，有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。腦梗死組CAS斑塊總檢出率(67.6%)高于對照組(46.5%)，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，其中腦梗死組不穩(wěn)定斑塊檢出率(43.8%)高于對照組(15.5%)，差異顯著(P<0.05)，而兩組穩(wěn)定斑塊檢出率比較無統(tǒng)計學差異(P>0.05)(見表1)。

2.2 腦梗死患者不同頸動脈斑塊超聲學特征血PLGF水平比較 不穩(wěn)定斑塊組PLGF水平高于穩(wěn)定斑塊組和無斑塊組，差異顯著，有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，穩(wěn)定斑塊組PLGF水平高于無斑塊組，差異顯著，有統(tǒng)計學意義(P<0.05)(見表2)。

表1 腦梗死組與對照組PLGF水平、不同類型頸動脈斑塊超聲檢出率比較

組別例數(shù)PLGF(ng/L)無斑塊組穩(wěn)定斑塊組不穩(wěn)定斑塊組F值P值946912783．691±21．154139．854±20．362?220．636±36．652?★13．1860

注：與無斑塊組比較*P<0.05，與穩(wěn)定斑塊組比較★P<0.05

3 討 論

PLGF最早于1991年由Maglione等[1]從人的胎盤cDNA文庫中分離純化而得，屬于血管內皮細胞生長因子(VEGF)家族中的一個新成員。除胎盤外，心臟、甲狀腺、骨骼肌及肺等組織亦可表達PLGF mRNA[2]。PLGF在生物學活性時呈二聚體結構，有PLGF-1/PLGF131、PLGF-2/PLG152和PLGF-3/PLGF2033個亞型，3個亞型除長短不一外，分泌特性和受體親和力也不一樣。PLGF各亞型通過結合fms樣酪氨酸激酶受體-1(Fit-1/VEGFR-1)發(fā)揮其病理生理功能。PLGF-1與Fit-1有很強的親和力，可使Fit-1轉磷酸化，激活信號轉導級聯(lián)反應，在疾病狀態(tài)下Fit-1表達明顯上調。PLGF通過與其受體VEGFR-1/Flt-1特異性結合而發(fā)揮一系列病理生理學作用，由于VEGFR-1不僅存在于血管內皮細胞表面，還存在于單核/巨噬細胞表面，因此具有促進內皮細胞增殖、調節(jié)內皮細胞生長、增加微血管通透性、誘導血管生成等多種功能；在早期動脈粥樣硬化斑塊形成中發(fā)揮著重要作用[3]；近幾年其與心血管疾病相關研究較多，Ronald等[4]研究表明當機體低氧時心臟血管中PLGF的表達較多，在病理性新生血管中PLGF的表達是上調的。慢性心力衰竭患者血清PLGF水平顯著升高，且與心力衰竭程度呈正相關[5]。急性心肌梗死(AMI)患者中PIGF的含量較正常心肌組織表達升高，在早期聯(lián)合檢測PIGF的含量變化，有利于對AMI早期心肌壞死程度的評估及危險終末事件發(fā)生率的預測[6]。PIGF在低氧及缺血心肌中的表達是增高的，并且與其程度成正相關，這表明PIGF參與心肌缺血及低氧代謝。杜歡、郭茂娟等[7]認為PLGF在缺血性疾病的作用：(1)PLGF只參與病理狀態(tài)下的新生血管生成，而對正常血管發(fā)育影響不大；(2)PLGF具有巨噬細胞趨化性；(3)PLGF與VEGF有協(xié)同作用。在對頸動脈粥樣斑塊的研究中，Pilarczyk等[8]發(fā)現(xiàn)，有癥狀的患者 PLGF表達的水平明顯高于無癥狀的患者，并且炎癥細胞的浸潤和微血管的生成前者均明顯高于后者，PLGF的表達與 C反應蛋白(CRP)及 CD40配體(CD40L)均呈正相關，提示 PLGF在 動脈粥樣硬化患者的斑塊不穩(wěn)定及臨床表現(xiàn)中起一定作用。PIGF還可以動員單核/巨噬細胞，參與血管壁的炎癥反應，刺激血管平滑肌細胞增殖，引起斑塊不穩(wěn)定[9]。本研究發(fā)現(xiàn)腦梗死組PLGF水平及CAS不穩(wěn)定斑塊檢出率高于對照組，差異顯著，有統(tǒng)計學意義，而兩組穩(wěn)定斑塊檢出率比較無統(tǒng)計學差異(P>0.05)。不穩(wěn)定斑塊組PLGF水平高于穩(wěn)定斑塊組和無斑塊組，差異顯著，有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，穩(wěn)定斑塊組PLGF水平高于無斑塊組，差異顯著，有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，提示急性腦梗死患者PLGF水平增高，CAS不穩(wěn)定斑塊檢出率高，PLGF水平越高，CAS斑塊的穩(wěn)定性越差；其促進動脈粥樣硬化斑塊增長和導致斑塊不穩(wěn)定的作用機制可能為：(1)通過趨化作用使單核細胞黏附聚集；(2)使巨噬細胞浸潤到早期動脈粥樣硬化斑塊，通過巨噬細胞產生蛋白溶解酶，促使纖維帽破裂；(3)引起血管平滑肌細胞增殖，促進斑塊內新生血管形成造成斑塊內出血；(4)通過促進組織因子分泌而形成血栓。

因此，血清PIGF是一種簡便可行的前瞻性早期診斷動脈粥樣硬化的指標，結合頸部血管彩超更有效、確切評估動脈斑塊病變嚴重程度及穩(wěn)定性；對缺血性腦缺血病有較好的預警及評估價值。

[1]Maglione D，Guerriero V，Viglietto G，et al. Two alternative mRNAs coding for the angiogenic factor，placenta growth factor(PLGF)，are transcribed from a single gene of chromosome 14[J]. Oncongene，1993，8：925-931.

[2]Sands M，Howell K，Costello CM，et al. Placenta growth factor and vascular endothelial growth factor B expression in the hypoxic lung[J]. Respir Res，2011，12(17)：10.1186.

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[4]Ronald J，Torry. Hypoxia Increases Placenta Growth Factor Expression in Human Myocardium and Cultured Neonatal Rat Cardiomyocytes[J]. The Journal of Heart and Lung Transplantation，2009，183-190.

[5]王亞玲，李擁軍. 慢性心力衰竭患者血清PIGF的變化及臨床意義[J]. 臨床心血管雜志，2009，25(4)：251.

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[7]杜 歡，郭茂娟，姜希娟. 胎盤生長因子與缺血性疾病關系的研究進展 [J]. 天津中醫(yī)藥，2014，31(2)：125-128.

[8]Pilarczyk K，Sattler KJ，Galili O，et al. Placenta growth fact or expression in human at herosclerotic carotid plaques is related to plaquedestab ili zation[J]. At Herosclerosis，2008，196(1)：333- 340.

[9]Khurana R，Moons L，Shaft S，et al. Placental growth factor promotes atherosclerotic intimal thickening and macrophage accumulation[J]. Circulation，2005，111(21)：2828-2836.

Correlation between serum Placenta growth factor and the color Dopplor ultrasonography of plaque in carotid arteries of cerebral infarction patients with anterior infarction

LIUMeixiang，MALili，CAIShuping.

(TheCentralHospitalofKaifeng，Kaifeng475000，China)

Objective To investigate the correlation between the Placenta growth factor(PLGF)in blood and the color dopplor ultrasonography data of carotidarteries plaque of cerebral infarction(CI)patients with anterior infarction. Methods All the pPatients were divided into 3 groups：non-plaque group，stable plaque group，unstable plaque group. At the same time 58 patients who without ischemic cerebrovascular disease were selected as control group. All the subjects were examined the levels of serum PLGF and were examined by carotid artery color dopplor ultrasonography. Date in tThe datea are were application applied with SPSS17.0 software for analysis. Results The level of PLGF in the patients of the CI group was significantly higher than those of the control group(P<0.05). The rates of overall plaques and unstable plaques of the CI group were significantly higher than those of the control group，The levels of serum PLGF in the patients of the unstable plaques group are were significantly higher than those of the non-plaque group and stable plaques group. Conclusion High rate of plaques of carotid artery was found in CI patients，mostly were unstable plaques. The level of PLGF was correlated with the unstable plaques. PLGF can be sensitive of carotid vulnerable plaques biological marker to evaluate the severity of the carotid artery lesions.

Cerebral infarction； Lacenta growth factor； Arotid atheromatous sclerosis plaques

2016-11-10；

2017-03-04

(開封市中心醫(yī)院 神經內科，河南 開封 475000)

馬麗麗，E-mail：xiangxin2007@163.com

1003-2754(2017)03-0265-03

R743

A