液相色譜—串聯(lián)質(zhì)譜法測定火鍋食品中罌粟堿等非法添加劑含量的不確定度評定

劉慧　袁興啟　宋芳　王娟　袁博

1引言

罌粟殼是成熟罌粟果去籽后的部分，屬于國家管制藥品，但因其具有調(diào)味的功能，所以被一些不法商販用于火鍋、面湯、酸辣粉、鹵制品等食品中。罌粟殼中主要成分有罌粟堿、嗎啡、那可丁、可待因和蒂巴因等，長期食用容易上癮，過量攝入可能引起心律不齊，甚至導(dǎo)致死亡。因此，準(zhǔn)確檢測食品中罌粟堿等非法添加劑含量，對于維護(hù)人民身體健康、打擊非法添加現(xiàn)象具有重要的意義。測量不確定度表征合理地賦予被測量之值的分散性，對檢測結(jié)果的可信性有著重要意義。

本文以罌粟堿為例對液相色譜一串聯(lián)質(zhì)譜法測定火鍋食品中非法添加劑含量的不確定度進(jìn)行了評定，計(jì)算了測定結(jié)果的合成不確定度和擴(kuò)展不確定度，為評價(jià)檢測結(jié)果提供了理論依據(jù)。

2材料與方法

2.1儀器與試劑

Dionex Ultimate 3000高效液相色譜儀：TSQ QuantivaMS三重四級桿質(zhì)譜儀（Thermo fisher）；配加熱電噴霧離子源（H-ESI）；XP204型電子天平（METTLER TOLEDO）；超聲波清洗機(jī)（德國Elma-P120H）；高速離心機(jī)（德國Sigma）；WH-861渦旋混合器（南京諾泰施格科學(xué)儀器有限公司）；罌粟堿等非法添加劑混合標(biāo)準(zhǔn)溶液（罌粟堿濃度10μg/mL，安譜公司）；乙腈、甲醇、甲酸（色譜純，美國天地有限公司）。

色譜柱：Phenomenex C18（4.6mm×100mm，2.6μm）；流動(dòng)相A為含0.1%甲酸水溶液，流動(dòng)相B為甲醇，梯度洗脫條件：0～2min：90%A；2～3min：90%A～10%A；3～7min：10%A：7～8min：10%A～90%A：8～10min：90%A：流速0.5m L/min，進(jìn)樣量10μL，柱溫35℃。

質(zhì)譜條件：H-ESI；正離子模式；選擇反應(yīng)監(jiān)測（SRM）掃描模式；噴霧電壓3.5kV；毛細(xì)管溫度350℃，離子源溫度350℃，鞘氣（N₂）流速4.58L/min，輔助氣（N₂）流速7.97L/min。

2.2實(shí)驗(yàn)方法

稱取樣品5g于50mL聚乙烯離心管中，加入5mL水，振搖使分散均勻，加入15mL乙腈，渦旋振蕩1min，加入6g無水硫酸鎂門.5g無水醋酸鈉的混合粉末（Waters公司），迅速振搖，渦旋振蕩1min，以4000轉(zhuǎn)/分鐘離心5min。取上清液1.5mL于DisQuE的凈化管（150mg無水硫酸鎂/50mgPSA/50mg C18，Waters公司），渦旋混合1miD，以10000轉(zhuǎn)/分鐘離心2min，移取上清液，0.22μm濾膜過濾，取濾液待測。

2.3數(shù)學(xué)模型

根據(jù)樣品測試方法建立的不確定度評估模型如下：

式中：ω——試樣中罌粟堿的含量（μg/kg）；C——試樣溶液中罌粟堿的濃度（ng/mL）；V——定容體積（mL）；M——試樣質(zhì)量（g）。

3不確定度的分析與評定

3.1測量重復(fù)性引入的不確定度U_rel（X）

采用A類方法評定測量重復(fù)性引入的不確定度，評定結(jié)果已涵蓋了各步驟的重復(fù)性及樣品前處理中各因素的影響。

在相同的條件下，取一陽性樣品采用相同的方法平行測試10次，測試結(jié)果如表1所示：