段凱莉,高明景,劉永泉,張婷婷,陳 麗,趙三忠,羅麗萍,*
(1.南昌大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院,江西 南昌 330031;2.北京忠瀾艾健康研究院,北京 100070)
2 種艾葉酚類化合物與揮發(fā)油成分比較
段凱莉1,高明景2,劉永泉1,張婷婷1,陳 麗1,趙三忠2,羅麗萍1,*
(1.南昌大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院,江西 南昌 330031;2.北京忠瀾艾健康研究院,北京 100070)
為研究艾葉化學(xué)成分與其產(chǎn)地之間關(guān)系,分別以產(chǎn)自河南南陽(yáng)和新疆的艾葉為實(shí)驗(yàn)材料,對(duì)比研究其酚類化合物和揮發(fā)油的組成。以體積分?jǐn)?shù)60%乙醇溶液為溶劑超聲提取酚類化合物,高效液相色譜法結(jié)合標(biāo)樣檢測(cè)其組成;同時(shí)蒸餾萃取結(jié)合氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用檢測(cè)揮發(fā)油的化學(xué)成分。結(jié)果表明,河南南陽(yáng)和新疆艾葉揮發(fā)油得率分別為2.644%、0.805%;河南南陽(yáng)、新疆艾葉分別檢測(cè)出標(biāo)準(zhǔn)品中的19 種和14 種酚類化合物,總含量達(dá)13.43 mg/g和9.75 mg/g;揮發(fā)油中分別鑒定出29 種和12 種化合物,占揮發(fā)油總量的80.24%和71.22%。河南南陽(yáng)艾葉比新疆艾葉含有更加豐富的酚類化合物和揮發(fā)油。
艾葉;酚類化合物;相似度分析;高效液相色譜;揮發(fā)油;氣相色譜-質(zhì)譜法
艾草(Artemisia argyi)為菊科蒿屬多年生草本植物。艾葉在我國(guó)具有悠久的藥食同源應(yīng)用歷史以及很高的藥用價(jià)值,我國(guó)古代曾有“家有三年艾,郎中不用來(lái)”的諺語(yǔ),在歷代本草著作以及醫(yī)書古籍均有描述和記載?,F(xiàn)代研究表明,艾葉含有香豆素、糖苷、黃酮、甾醇、萜類化合物、揮發(fā)油等,具有治潰瘍[1]、活血[2]、抗氧化[3]、抗誘變、抗炎[4]、抗癌、抗菌、免疫調(diào)節(jié)[5]等生物活性。
酚類化合物是一種廣泛存在于植物中的次級(jí)代謝產(chǎn)物。艾葉的酚類化合物具有抗菌、抗炎、抗癌、抗氧化[6]及抗乙肝病毒[7]的活性,是艾葉的主要活性成分之一。但是不同品種與不同產(chǎn)地艾葉的酚類化合物存在差異,如銀葉蒿的酚類化合物主要為黃酮和羥基肉桂酸的衍生物[8];野艾蒿含有39 種酚類化合物,包括黃酮、香豆素、酚酸等[6];北艾葉僅含有15 種酚類化合物[9];Carvalhoa等[10]對(duì)6 個(gè)品種的艾葉酚類化合物研究發(fā)現(xiàn)艾葉富含酚類化合物,但不同品種間有較大差異;Tan Xiaojie等[11]研究發(fā)現(xiàn)不同產(chǎn)地及收獲季節(jié)的茵陳蒿酚類物質(zhì)有很大差異。
艾葉揮發(fā)油具有特殊香氣,味辛、微苦、性涼,為艾葉的主要活性成分,一直被視為評(píng)價(jià)其藥材質(zhì)量的標(biāo)準(zhǔn)。研究表明,艾葉揮發(fā)油不僅具有防曬、抗氧化[12]、抗菌[13]的活性;還具有神經(jīng)調(diào)節(jié)的作用,可以治療癲癇、抑郁、失眠、焦慮等精神疾病[14]。由于生長(zhǎng)環(huán)境的不同,不同產(chǎn)地間艾葉揮發(fā)油質(zhì)量不同。有研究對(duì)土耳其[15]、伊朗卡尚地區(qū)[16]及伊朗西北部[17]的艾葉揮發(fā)油進(jìn)行測(cè)定,得率分別為0.4%、0.25%、1.4%,土耳其艾葉主要成分為側(cè)柏酮、石竹烯、桉樹腦,伊朗卡尚地區(qū)艾葉主要成分為反式石竹烯、桉樹腦、鼠尾草烯,伊朗西北部艾葉主要成分為蒎烯、薄荷腦、桉葉油醇;Jin Ran等[18]研究發(fā)現(xiàn)5 個(gè)不同產(chǎn)地的艾葉所含揮發(fā)油成分及含量明顯不同。
然而,以上研究均為獨(dú)立報(bào)道,艾葉的品種、采收季節(jié)、提取方式、測(cè)定儀器不同,使這些數(shù)據(jù)缺乏可比性。且地理來(lái)源對(duì)艾葉主要化學(xué)成分影響的研究均為艾葉酚類化合物或揮發(fā)油單一方面的比較,鮮見(jiàn)艾葉酚類化合物與揮發(fā)油兩方面的綜合分析。本實(shí)驗(yàn)以河南南陽(yáng)和新疆艾葉為材料,采用同一方法分別提取其酚類化合物和揮發(fā)油,計(jì)算得率,然后采用高效液相色譜(high performance liquid chromatography,HPLC)法結(jié)合標(biāo)樣測(cè)定其酚類化合物,氣相色譜-質(zhì)譜(gas chromatographymass spectrometry,GC-MS)聯(lián)用測(cè)定揮發(fā)油的化學(xué)組成,通過(guò)對(duì)結(jié)果的比較分析,明確河南南陽(yáng)和新疆艾葉主要化學(xué)組成的差異。研究結(jié)果可為艾葉的開(kāi)發(fā)利用,以及優(yōu)質(zhì)艾葉的科學(xué)種植規(guī)劃提供理論依據(jù)。
1.1 材料與試劑
艾葉分別采自新疆和河南南陽(yáng),由北京忠瀾艾健康研究院提供。
阿魏酸、肉桂酸、柚皮素、槲皮素、山柰酚(純度≥98%) 中藥固體制劑制造技術(shù)國(guó)家工程研究中心;沒(méi)食子酸、兒茶素、咖啡酸、蘆丁(純度≥98%) 中國(guó)食品藥品檢定研究院;染料木素、p-香豆酸、楊梅酮、對(duì)硝基苯甲酸(純度≥98%) 美國(guó)Sigma公司;白藜蘆醇、黃豆苷元、橙皮素、鷹嘴豆芽素A(純度≥98%) 美國(guó)阿拉丁公司;橙皮苷、原兒茶酸(純度≥98%) 北京百靈威科技有限公司;實(shí)驗(yàn)用水均為超純水;甲醇和乙腈為色譜純,甲酸為優(yōu)級(jí)純,其余試劑均為國(guó)產(chǎn)分析純。
1.2 儀器與設(shè)備
1200型HPLC儀(包括在線脫氣裝置、四元泵、柱溫箱、光電二極管陣列檢測(cè)器、手動(dòng)進(jìn)樣裝置、配有G2170BA LC化學(xué)工作站)、6890/5973 GC-MS聯(lián)用儀美國(guó)Agilent公司;JS-02安捷順多功能粉碎機(jī) 浙江武義捷順工具有限公司;KQ3200DE超聲波清洗器 昆山市超聲儀器有限公司;同時(shí)蒸餾萃?。╯imultaneous distillation extraction,SDE)裝置 安徽天長(zhǎng)優(yōu)信電器設(shè)備有限公司;DK-S18水浴鍋 上海森信實(shí)驗(yàn)儀器有限公司;ME203E/02電子天平 梅特勒-托利多儀器(上海)有限公司;TDL-5-A離心機(jī) 上海安亭科學(xué)儀器廠;IKARV10旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀 艾卡儀器設(shè)備有限公司;Hitech-Master綜合型超純水機(jī) 上海和泰儀器有限公司。
1.3 方法
1.3.1 艾葉酚類化合物的提取
將河南南陽(yáng)和新疆艾葉粉碎,過(guò)40 目篩。分別準(zhǔn)確稱取1.000 g樣品于離心管中,加入40 mL體積分?jǐn)?shù)60%乙醇溶液混勻,室溫浸泡24 h,40 ℃、150 W超聲提取40 min。提取液3 500 r/min離心10 min,取上清液旋轉(zhuǎn)蒸發(fā),回收乙醇溶液,體積分?jǐn)?shù)70%甲醇溶液定容至10 mL,提取液于-20 ℃保存?zhèn)溆谩?/p>
1.3.2 標(biāo)準(zhǔn)品的制備
分別稱取19 種干燥至恒質(zhì)量的標(biāo)準(zhǔn)品5.0 mg,用甲醇溶解,配制成1 mg/mL標(biāo)準(zhǔn)品儲(chǔ)備液,-20 ℃避光保存,用體積分?jǐn)?shù)70%甲醇溶液稀釋其他質(zhì)量濃度標(biāo)準(zhǔn)品溶液,保存?zhèn)溆谩?/p>
1.3.3 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制
準(zhǔn)確吸取適量上述標(biāo)準(zhǔn)品儲(chǔ)備液,用體積分?jǐn)?shù)70%甲醇溶液稀釋成各質(zhì)量濃度的6 組混合標(biāo)準(zhǔn)溶液。參照Guo Xiali等[19]的方法,黃豆苷元、柚皮素、槲皮素、沒(méi)食子酸、山柰酚、蘆丁、楊梅酮的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液在波長(zhǎng)256 nm處檢測(cè);橙皮素、p-香豆酸、咖啡酸、鷹嘴豆芽素A、肉桂酸、白藜蘆醇、染料木素、原兒茶酸、阿魏酸、對(duì)硝基苯甲酸、橙皮苷、兒茶素的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液在波長(zhǎng)280 nm處檢測(cè)。p-香豆酸、鷹嘴豆芽素A、肉桂酸、黃豆苷元的質(zhì)量濃度為1.8~60 μg/mL,柚皮素、染料木素的質(zhì)量濃度為1~60 μg/mL,沒(méi)食子酸、原兒茶酸、阿魏酸、蘆丁、白藜蘆醇、槲皮素的質(zhì)量濃度為3~100 μg/mL,對(duì)硝基苯甲酸、橙皮苷、兒茶素、楊梅酮、咖啡酸、山柰酚、橙皮素的質(zhì)量濃度為6~200 μg/mL。用體積分?jǐn)?shù)70%甲醇溶液將上述標(biāo)準(zhǔn)品稀釋成6 個(gè)質(zhì)量濃度,按從低到高質(zhì)量濃度依次進(jìn)行HPLC分析,平行測(cè)定3 次。
1.3.4 HPLC檢測(cè)艾葉酚類化合物組成
色譜柱:Agilent ZORBAX Eclipse XDB C18色譜柱(4.6 mm×150 mm,5 μm);流動(dòng)相:乙腈(A)和0.2%甲酸溶液(B);流速1.0 mL/min;柱溫35℃;檢測(cè)波長(zhǎng)為256 nm和280 nm;進(jìn)樣量20 μL;采用梯度洗脫:0~5 min,5%~14% A,95%~86% B;5~20 min,14%~16% A,86%~84% B;20~25 min,1 6%~2 8% A,84%~72% B;25~40 m i n,2 8%~3 3% A,72%~67% B;40~50 m i n,3 3%~5 5% A,67%~45% B;50~55 m i n,5 5%~6 5% A,45%~35% B;55~60 m i n,65%~25% A,35%~75% B。
1.3.5 HPLC指紋圖譜的相似度分析
利用國(guó)家藥典委員會(huì)指紋圖譜相似度評(píng)價(jià)系統(tǒng)(2004A版)對(duì)河南南陽(yáng)和新疆2 種艾葉醇提物在波長(zhǎng)256 nm和280 nm處檢測(cè)的HPLC指紋圖譜進(jìn)行相似度分析,設(shè)定參照譜圖,將譜圖自動(dòng)匹配生成對(duì)照?qǐng)D譜進(jìn)行相似度評(píng)價(jià)。
1.3.6 GC-MS測(cè)定艾葉揮發(fā)油的化學(xué)成分
1.3.6.1 艾葉揮發(fā)油的提取
采用SDE法提取艾葉揮發(fā)油。稱取15 g艾葉粉末與400 mL蒸餾水混合浸泡10 h,將混合物轉(zhuǎn)移至SDE裝置的物料瓶中,下方用電爐加熱。儀器另一側(cè)容量瓶中加入40 mL無(wú)水乙醚,50 ℃恒溫水浴加熱,打開(kāi)冷凝裝置,待樣品沸騰時(shí)開(kāi)始計(jì)時(shí),SDE萃取8 h。蒸餾完畢后收集乙醚相,加入無(wú)水硫酸鈉除去水分,旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)獲得揮發(fā)油[20]。1.3.6.2 揮發(fā)油化學(xué)組成的GC-MS分析
取適量揮發(fā)油用正己烷稀釋進(jìn)行GC-MS檢測(cè)。色譜條件:色譜柱為Agilent 122-3832 DB-35ms(30 m×0.25 mm,0.25 μm);載氣為高純氦氣;流速1.0 mL/min;分流比50∶1;進(jìn)樣量1 μL;進(jìn)樣口溫度280℃;升溫程序:初始溫度50 ℃,保持2 min,以6 ℃/min的速率升溫至180 ℃,保持1 min,再以10 ℃/min的速率升溫至280 ℃,保持5 min,共運(yùn)行39.67 min。
電子電離源;電子能量70 eV;離子源溫度230 ℃;傳輸線溫度280 ℃;四極桿溫度150 ℃;質(zhì)量掃描范圍40~600 u。
利用NIST 02.L質(zhì)譜庫(kù)對(duì)各色譜峰進(jìn)行檢索,根據(jù)質(zhì)譜數(shù)據(jù)和保留時(shí)間確認(rèn)揮發(fā)性物質(zhì)中各化學(xué)成分。用峰面積歸一法進(jìn)行定量分析,得出揮發(fā)性油中各化學(xué)成分的相對(duì)含量。
2.1 酚類化合物標(biāo)準(zhǔn)品的HPLC譜圖及其相似度分析
圖2 河南南陽(yáng)和新疆艾葉醇提液HPLC圖譜比較Fig.2 HPLC chromatograms of alcoholic extracts of A. argyi leaves from Nanyang and Xinjiang
在220、256、280、320 nm和360 nm 5 個(gè)波長(zhǎng)條件下同時(shí)檢測(cè)混合標(biāo)準(zhǔn)品,發(fā)現(xiàn)在256 nm和280 nm檢測(cè)波長(zhǎng)條件下出峰數(shù)及分離效果較好。在綜合考慮基線、峰形、信號(hào)響應(yīng)強(qiáng)弱以及負(fù)峰等情況后,最終確定將標(biāo)準(zhǔn)品分為2 組,分別在波長(zhǎng)256 nm和280 nm處檢測(cè)。分組后混合標(biāo)準(zhǔn)品的分離效果較好,如圖1所示。
如圖2所示,可直觀判斷2 種艾葉醇提物中酚類化合物種類和相對(duì)含量存在較大差異。在波長(zhǎng)256 nm和280 nm處檢測(cè)與對(duì)照譜圖的相似度,河南南陽(yáng)艾葉為0.794和0.846,新疆艾葉為0.903和0.887。
2.2 方法學(xué)驗(yàn)證
2.2.1 線性關(guān)系及檢出限
以1.3.3節(jié)所配制標(biāo)準(zhǔn)溶液的平均峰面積y對(duì)標(biāo)準(zhǔn)品質(zhì)量x(μg)進(jìn)行線性回歸。以RSN為3確定各物質(zhì)的檢出限,得出各標(biāo)準(zhǔn)品HPLC檢測(cè)的回歸方程、線性范圍和相關(guān)系數(shù),如表1所示。
表1 混合標(biāo)準(zhǔn)品保留時(shí)間、線性范圍、校正曲線、相關(guān)系數(shù)(R2)及檢出限Table1 Retention times, linear ranges, calibration curves, correlation coeff i cients (R2) and limits of detection of mixed standard substances
2.2.2 精密度、穩(wěn)定性、重復(fù)性和回收率實(shí)驗(yàn)結(jié)果
分別將2 組混合標(biāo)準(zhǔn)品溶液按1.3.4節(jié)方法進(jìn)行HPLC分析,每6 h測(cè)定一次,共測(cè)6 次,考查保留時(shí)間及峰面積的重復(fù)性。如表2所示,各色譜峰峰面積的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(relative standard deviation,RSD)在1.19%~5.50%之間,保留時(shí)間的RSD在0.45%~5.37%之間,結(jié)果表明儀器精密度良好。
將配制好的混合標(biāo)準(zhǔn)品溶液,置于4 ℃冰箱中保存,每隔2 h測(cè)定一次,后每隔1 d測(cè)定一次,連測(cè)4 d,考查混合樣品中各標(biāo)準(zhǔn)品的穩(wěn)定性。如表2所示,各色譜峰峰面積的RSD在0.93%~5.66%之間,保留時(shí)間的RSD在 0.26%~4.59%之間,說(shuō)明2 組混合標(biāo)準(zhǔn)品在測(cè)定時(shí)間內(nèi)性質(zhì)穩(wěn)定。
稱取6 份南陽(yáng)艾葉,按1.3.1節(jié)方法制得供試品溶液,按1.3.4節(jié)色譜條件,分別進(jìn)樣20 μL,進(jìn)行重復(fù)性實(shí)驗(yàn)。如表2所示,保留時(shí)間的RSD在0.04%~4.27%之間,各色譜峰峰面積的RSD在1.24%~11.54%之間,說(shuō)明該方法具有很好的重復(fù)性。
準(zhǔn)確稱取1 g艾葉樣品,分別加入高、中、低3 個(gè)質(zhì)量濃度的已知量混合標(biāo)準(zhǔn)品溶液,充分混勻,按1.3.1節(jié)的方法提取,在1.3.4節(jié)色譜條件下分別以20 μL進(jìn)樣,每個(gè)水平測(cè)定3 次。如表2所示,19 種酚類化合物的平均回收率在71.42%~118.67%之間,RSD在1.01%~3.31%之間,說(shuō)明本方法準(zhǔn)確度高。
表2 混合標(biāo)準(zhǔn)品的精密度、穩(wěn)定性及樣品的重復(fù)性、加標(biāo)回收率Table2 Precision, stability, repeatability and recovery of spiked samples %
2.3 2 種艾葉的酚類化合物HPLC檢測(cè)結(jié)果
由表3可知,19 種標(biāo)準(zhǔn)品在河南南陽(yáng)艾葉中均可檢出;從新疆艾葉可檢出14 種,其中柚皮素、山柰酚、染料木素、橙皮素和對(duì)硝基苯甲酸未檢出。有研究運(yùn)用質(zhì)譜、紫外、核磁等方法檢測(cè)出艾葉、北艾中含有兒茶素、槲皮素、楊梅酮、山柰酚、p-香豆素、咖啡酸、阿魏酸、肉桂酸、沒(méi)食子酸、苯甲酸、柚皮素、原兒茶酸、香豆素、蘆丁等酚類物質(zhì),與本實(shí)驗(yàn)所檢測(cè)出的物質(zhì)相同[6-10,21-23]。2 種艾葉中含量最高的成分均為橙皮苷;黃豆苷元、白藜蘆醇及槲皮素含量相當(dāng);河南南陽(yáng)艾葉中蘆丁、肉桂酸含量高于新疆艾葉,新疆艾葉中兒茶素和楊梅酮含量高于河南南陽(yáng)艾葉。兩地艾葉醇提物酚類化合物的種類和含量有較大差異。
表3 HPLC分析河南南陽(yáng)和新疆艾葉中各標(biāo)準(zhǔn)品含量Table3 HPLC analysis of the concentrations of phenolic compounds in A. argyi from Nanyang and Xinjiang
2.4 艾葉揮發(fā)油的化學(xué)組成
表4 GC-MS分析南陽(yáng)和新疆艾葉揮發(fā)油的化學(xué)成分Table4 GC-MS analysis of the essential oil compositions of A. argyi leaves from Nanyang and Xinjiang
續(xù)表4
經(jīng)檢測(cè)河南南陽(yáng)艾葉揮發(fā)油得率為2.644%,明顯高于新疆艾葉的0.805%。河南南陽(yáng)艾葉揮發(fā)油呈淺黃綠色,新疆艾葉揮發(fā)油呈黃綠色,均具有艾葉特有的濃郁芳香氣味。
如表4所示,2 種艾葉揮發(fā)油共鑒定出37 種化合物,其中氧化石竹烯、1,8-桉葉油素、崖柏酮、六氫法尼基丙酮4 種化合物為2 種艾葉揮發(fā)油的共有成分。河南南陽(yáng)艾葉揮發(fā)油鑒定出29 種化合物,占揮發(fā)油總量的80.24%,主要成分為氧化石竹烯、1,8-桉葉油素、冰片、(-)-4-松油醇等。新疆艾葉揮發(fā)油鑒定出12 種化合物,占揮發(fā)油總量的71.22%,主要成分為氧化石竹烯、1,8-桉葉油素、α-畢橙茄醇、棕櫚酸等。河南南陽(yáng)艾葉揮發(fā)油萜醇相對(duì)含量最高,為37.80%;新疆艾葉揮發(fā)油中萜醇相對(duì)含量為19.67%,兩地?fù)]發(fā)油存在差異。
艾葉主要活性成分為黃酮類、酚酸、香豆素[11],艾葉黃酮和酚酸具有抗氧化、抗炎的生物活性[24],黃酮類的蘆丁[25]對(duì)腎病具有治療作用,橙皮苷[26]、山柰酚[27]具有抗炎抗癌作用。河南南陽(yáng)艾葉醇提物酚類化合物中有以上藥用價(jià)值的活性物質(zhì)含量較高且成分多樣,因此,河南南陽(yáng)艾葉可能比新疆艾葉有更高的藥用價(jià)值。
河南南陽(yáng)和新疆艾葉揮發(fā)油與其他產(chǎn)地艾葉揮發(fā)油化學(xué)成分也存在較大差別,如貴州遵義艾葉揮發(fā)油中含量最高的成分是表藍(lán)桉醇(8.79%)[28],湖北蘄春、江西樟樹和河北安國(guó)艾葉揮發(fā)油中含量最高的成分是1,8-桉葉油素(25.625%、22.924%、26.095%)[29],云南艾葉揮發(fā)油中含量最高的成分是龍腦(52.42%)[30]。
河南南陽(yáng)和新疆艾葉揮發(fā)油的主要成分均為萜類化合物,其中氧化石竹烯具有抗利什曼蟲的活性[31],1,8-桉葉油素可用于神經(jīng)痛和皮膚病的治療[29],河南南陽(yáng)艾葉揮發(fā)油中氧化石竹烯和1,8-桉葉油素都高于新疆艾葉揮發(fā)油。冰片是傳統(tǒng)中藥的重要成分,有抗氧化、抑菌、抗炎[32]、治療心腦血管疾病等作用,它與阿霉素合成的靶向藥物可以穿過(guò)血腦屏障,有效治療神經(jīng)膠質(zhì)瘤[33]。河南南陽(yáng)艾葉揮發(fā)油中冰片相對(duì)含量為10.95%,新疆艾葉揮發(fā)油中未檢出。
若以開(kāi)發(fā)艾葉酚類化合物和揮發(fā)油為目的的功能性藥物及保健品時(shí)應(yīng)注意艾葉產(chǎn)地的選擇。在開(kāi)發(fā)利用前對(duì)艾葉進(jìn)行成分分析,根據(jù)有效成分區(qū)別應(yīng)用,可以為優(yōu)質(zhì)艾葉生產(chǎn)基礎(chǔ)選擇提供理論依據(jù)。
河南南陽(yáng)和新疆艾葉中酚類化合物組成存在差異,從河南南陽(yáng)和新疆艾葉醇提物中分別檢測(cè)出19 種和14 種酚類化合物,含量為13.43 mg/g和9.75 mg/g。河南南陽(yáng)艾葉醇提物中酚類化合物主要為橙皮苷、楊梅酮、黃豆苷元、山柰酚、肉桂酸,新疆艾葉醇提物中酚類化合物主要為橙皮苷、楊梅酮、兒茶素、黃豆苷元、槲皮素。河南南陽(yáng)和新疆艾葉揮發(fā)油成分也有較大差異,其中河南南陽(yáng)艾葉揮發(fā)油相對(duì)含量較高,化合物種類豐富,主要為萜醇、萜烯及萜類氧化物,且萜烯、萜醇等具有生物活性的萜類化合物相對(duì)含量更高;而新疆艾葉主要為萜醇和芳香族化合物。河南南陽(yáng)艾葉的酚類化合物及揮發(fā)油的種類及相對(duì)含量均高于新疆艾葉,活性成分較新疆艾葉豐富。
[1] YOON K D, CHIN Y W, YANG M H, et al. Separation of anti-ulcer flavonoids from Artemisia extracts by high-speed countercurrent chromatography[J]. Food Chemistry, 2011, 129(2): 679-683. DOI:10.1016/j.foodchem.2011.05.005.
[2] AAMS J D, GARCIA C, GARY G. Mugwort (Artemisia vulgaris, Artemisia douglasiana, Artemisia argyi) in the treatment of menopause, premenstrual syndrome, dysmenorrhea and attention def i cit hyperactivity disorder[J]. Chinese Medicine, 2012, 3(3): 116-123. DOI:10.4236/cm.2012.33019.
[3] Lü J L, DUAN J A, SHEN B, et al. Caffeic acid esters from Artemisia argyi and their antioxidant activities[J]. Chemistry of Natural Compounds, 2013, 49(1): 8-11. DOI:10.1007/s10600-013-0492-5.
[4] ABU-DARWISH M S, CABRAL C, GONCALVES M J, et al. Artemisia herba-alba essential oil from Buseirah (South Jordan): chemical characterization and assessment of safe antifungal and antiinflammatory doses[J]. Journal of Ethnopharmacology, 2015, 174: 153-160. DOI:10.1016/j.jep.2015.08.005.
[5] BAO X L, YUAN H, WANG C, et al. Antitumor and immunomodulatory activities of a polysaccharide from Artemisia argyi[J]. Carbohydrate Polymers, 2013, 98(1): 1236-1243. DOI:10.1016/j.carbpol.2013.07.018.
[6] MEGDICHE-KSOURI W, TRABELSI N, MKADMINI K, et al. Artemisia campestris phenolic compounds have antioxidant and antimicrobial activity[J]. Industrial Crops and Products, 2015, 63: 104-113. DOI:10.1016/j.indcrop.2014.10.029.
[7] ZHAO Y, GENG C A, MA Y B, et al. UFLC/MS-IT-TOF guided isolation of anti-HBV active chlorogenic acid analogues from Artemisia capillaris as a traditional Chinese herb for the treatment of hepatitis[J]. Journal of Ethnopharmacology, 2014, 156: 147-154. DOI:10.1016/j.jep.2014.08.043.
[8] GOUVEIA S, CASTILHO P C. Antioxidant potential of Artemisia argentea L’Hér alcoholic extract and its relation with the phenolic composition[J]. Food Research International, 2011, 44(6): 1620-1631. DOI:10.1016/j.foodres.2011.04.040.
[9] MELGUIZO-MELGUIZO D, DIAZ-DE-CERIO E, QUIRANTESPINé R, et al. The potential of Artemisia vulgaris leaves as a source of antioxidant phenolic compounds[J]. Journal of Functional Foods, 2014, 10: 192-200. DOI:10.1016/j.jff.2014.05.019.
[10] CARVALHOA I S, CAVACOA T, BRODELIUS M. Phenolic composition and antioxidant capacity of six Artemisia species[J]. Industrial Crops and Products, 2011, 33(2): 382-388. DOI:10.3390/ molecules15053135.
[11] TAN X J, LI Q, CHEN X H, et al. Simultaneous determination of 13 bioactive compounds in herba Artemisiae Scopariae (Yin Chen) from different harvest seasons by HPLC-DAD[J]. Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis, 2008, 47(4): 847-853. DOI:10.1016/ j.jpba.2008.04.010.
[12] HUANG H C, WANG H F, YIH K H, et al. Dual bioactivities of essential oil extracted from the leaves of Artemisia argyi as an antimelanogenic versus antioxidant agent and chemical composition analysis by GC/MS[J]. International Journal of Molecular Sciences, 2012, 13(11): 14679-14697. DOI:10.3390/ijms131114679.
[13] WANG W, ZHANG X K, WU N, et al. Antimicrobial activities of essential oil from Artemisiae argyi leaves[J]. Journal of Forestry Research, 2006, 17(4): 332-334. DOI:10.1007/s11676-006-0077-2.
[14] PREEDY V R. Essential oils in food preservation, flavor and safety[M]. Academic Press, 2015: 573-579.
[15] EREL ? B, REZNICEK G, ?ENOL S G, et al. Antimicrobial and antioxidant properties of Artemisia L. species from West Anatolia[J]. Turkish Journal of Biology, 2012, 36(1): 75-84. DOI:10.3906/biy-0912-27.
[16] BAMONIRI A, MIRJALILI B B F, MAZOOCHI A, et al. Chemical composition of Artemisia vulgaris L. from Kashan area isolated by nano scale injection[J]. Iranian Journal of Organic Chemistry, 2010, 2(4): 533-536.
[17] ALIZADEH M, AGHAEI M, SHARIFIAN I, et al. Chemical composition of essential oil of Artemisia vulgaris from West Azerbaijan, Iran[J]. Electronic Journal of Environmental Agricultural and Food Chemistry, 2012, 11(5): 493-496.
[18] JIN R, ZHAO B X. Volatile constituents of folium Artemisiae argyi of different sources[J]. Journal of Acupuncture and Tuina Science, 2010, 8(4): 214-217. DOI:10.1007/s11726-010-0406-z.
[19] GUO X L, CHEN B, LUO L P, et al. Chemical compositions and antioxidant activities of water extracts of Chinese propolis[J]. Journal of Agricultural and Food Chemistry, 2011, 59(23): 12610-12616. DOI:10.1021/jf202818p.
[20] ZHU Y, Lü H P, DAI W D, et al. Separation of aroma components in Xihu Longjing tea using simultaneous distillation extraction with comprehensive two-dimensional gas chromatography-time-of-flight mass spectrometry[J]. Separation and Purif i cation Technology, 2016, 164: 146-154. DOI:10.1016/j.seppur.2016.03.028.
[21] NIRANJAN A, BARTHWAL J, LEHRI A, et al. Development and validation of an HPLC-UV-MS-MS method for identification and quantification of polyphenols in Artemisia pallens L[J]. Acta Chromatographica, 2009, 21(1): 105-116. DOI:10.1556/ AChrom.21.2009.1.9.
[22] 魏海勝, 呂豐, 張令令. 蘄艾化學(xué)成分研究[J]. 亞太傳統(tǒng)醫(yī)藥, 2013, 9(2): 4-6. DOI:10.3969/j.issn.1673-2197.2013.02.003.
[23] HAN J, YE M, QIAO X, et al. Characterization of phenolic compounds in the Chinese herbal drug Artemisia annua by liquid chromatography coupled to electrospray ionization mass spectrometry[J]. Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis, 2008, 47(3): 516-525. DOI:10.1016/j.jpba.2008.02.013.
[24] FERREIRA J F S, LUTHRIA D L, SASAKI T, et al. Flavonoids from Artemisia annua L. as antioxidants and their potential synergism with artemisinin against malaria and cancer[J]. Molecules, 2010, 15(5): 3135-3170. DOI:10.3390/molecules15053135.
[25] HAO H H, SHAO Z M, TANG D Q, et al. Preventive effects of rutin on the development of experimental diabetic nephropathy in rats[J]. Life Sciences, 2012, 91(19): 959-967. DOI:10.1016/j.lfs.2012.09.003.
[26] DEVI K P, RAJAVEL T, NABAVI S F, et al. Hesperidin: a promising anticancer agent from nature[J]. Industrial Crops and Products, 2015, 76: 582-589. DOI:10.1016/j.indcrop.2015.07.051.
[27] LIAO W Z, CHEN L Y, MA X, et al. Protective effects of kaempferol against reactive oxygen species-induced hemolysis and its antiproliferative activity on human cancer cells[J]. European Journal of Medicinal Chemistry, 2016, 114: 24-32. DOI:10.1016/ j.ejmech.2016.02.045.
[28] 蘭美兵, 余永莉, 李嘯紅. 貴州產(chǎn)艾葉揮發(fā)油的化學(xué)成分分析[J].藥物分析雜志, 2009, 29(8): 1305-1308. DOI:10.16155/j.0254-1793.200.08.010.
[29] 江丹, 易筠, 楊梅, 等. 不同品種艾葉揮發(fā)油的化學(xué)成分分析[J].中國(guó)醫(yī)藥生物技術(shù), 2009, 4(5): 339-344. DOI:10.3969/cmba. j.issn.1673-713X.2009.05.004.
[30] 杜萍, 張先俊, 孫曉東. 滇產(chǎn)艾納香葉揮發(fā)油化學(xué)成分的GC-MS分析[J]. 林產(chǎn)化學(xué)與工業(yè), 2009, 29(2): 115-118. DOI:10.3321/ j.issn:0253-2417.2009.02.023.
[31] PASTOR J, GARCíA M, STEINBAUER S, et al. Combinations of ascaridole, carvacrol, and caryophyllene oxide against Leishmania[J]. Acta Tropica, 2015, 145: 31-38. DOI:10.1016/ j.actatropica.2015.02.002.
[32] ZHANG Q, WU D, WU J, et al. Improved blood-brain barrier distribution: effect of borneol on the brain pharmacokinetics of kaempferol in rats by in vivo microdialysis sampling[J]. Journal of Ethnopharmacology, 2015, 162: 270-277. DOI:10.1016/ j.jep.2015.01.003.
[33] XU X L, LI J J, HAN S P, et al. A novel doxorubicin loaded folic acid conjugated PAMAM modified with borneol, a nature dualfunctional product of reducing PAMAM toxicity and boosting BBB penetration[J]. European Journal of Pharmaceutical Sciences, 2016, 88: 178-190. DOI:10.1016/j.ej ps.2016.02.015.
Phenolic Compounds and Essential Oil Compositions of Artemisia argyi Leaves from Two Growing Areas
DUAN Kaili1, GAO Mingjing2, LIU Yongquan1, ZHANG Tingting1, CHEN Li1, ZHAO Sanzhong2, LUO Liping1,*
(1. School of Life Sciences, Nanchang University, Nanchang 330031, China; 2. Beijing Zhonglan Moxa Health Research Institute, Beijing 100070, China)
To fi nd the relationship between the chemical composition and geographic origin of Artemisia argyi leaves, leaf samples from Nanyang, Henan province and Xinjiang were comparatively analyzed for phenolic compounds and essential oil composition. The phenolic compounds were ultrasonically extracted with 60% ethanol, and then detected by high performance liquid chromatography (HPLC) using standard substances. The essential oils were extracted by simultaneous distillation extraction method and analyzed by gas chromatography-mass spectrometry (GC-MS). The results showed that the yields of essential oil from A. argyi leaves from Nanyang and Xinjiang were 2.644% and 0.805%, respectively. A total of 19 and 14 phenolic compounds were identif i ed from A. argyi leaves grown in the two areas, with total contents of 13.43 and 9.75 mg/g, respectively. A total of 29 and 12 compounds were identif i ed from the two essential oils different geographic origins, which accounted for 80.24% and 71.22% of the total amount, respectively. A. argyi leaves from Nanyang contained more abundant phenolic compounds and essential oils than those from Xinjiang.
Artemisia argyi; phenolic compounds; similarity analysis; high performance liquid chromatography (HPLC); essential oil; gas chromatography-mass spectrometry (GC-MS)
10.7506/spkx1002-6630-201704033
TS207.3
A
1002-6630(2017)04-0204-07
段凱莉, 高明景, 劉永泉, 等. 2 種艾葉酚類化合物與揮發(fā)油成分比較[J]. 食品科學(xué), 2017, 38(4): 204-210. DOI:10.7506/ spkx1002-6630-201704033. http://www.spkx.net.cn
DUAN Kaili, GAO Mingjing, LIU Yongquan, et al. Phenolic compounds and essential oil compositions of Artemisia argyi leaves from two growing areas[J]. Food Science, 2017, 38(4): 204-210. (in Chinese with English abstract)
10.7506/ spkx1002-6630-201704033. http://www.spkx.net.cn
2016-07-04
江西省科技廳項(xiàng)目(20123BCB22004);國(guó)家自然科學(xué)基金面上項(xiàng)目(31370384);長(zhǎng)江學(xué)者和創(chuàng)新團(tuán)隊(duì)發(fā)展計(jì)劃項(xiàng)目(IRT13054);南昌大學(xué)研究生創(chuàng)新專項(xiàng)資金項(xiàng)目(cx2016204)
段凱莉(1992—),女,碩士研究生,研究方向?yàn)橹参锘瘜W(xué)。E-mail:18292337518@163.com
*通信作者:羅麗萍(1972—),女,教授,博士,研究方向?yàn)橹参锎x產(chǎn)物。E-mail:lluo2@126.com