CD4+CD25high+CD127low+與兒童免疫性血小板減少癥相關(guān)性的研究

馬文典 王 弘*

（1 中國(guó)醫(yī)科大學(xué)附屬盛京醫(yī)院，遼寧 沈陽(yáng) 110004；2 本溪市中心醫(yī)院，遼寧 本溪 117000）

CD4+CD25high+CD127low+與兒童免疫性血小板減少癥相關(guān)性的研究

馬文典1,2王 弘1,2*

（1 中國(guó)醫(yī)科大學(xué)附屬盛京醫(yī)院，遼寧 沈陽(yáng) 110004；2 本溪市中心醫(yī)院，遼寧 本溪 117000）

目的 研究CD4+CD25high+CD127low+在兒童免疫性血小板減少癥相關(guān)性的研究。方法 選擇中國(guó)醫(yī)科大學(xué)附屬盛京醫(yī)院小兒血液科于2015年1月至2016年6月就診2～6歲兒童60例。觀察組：重度和極重度血小板減少癥患兒30例。對(duì)照組：30例健康兒童做正常對(duì)照。60例兒童均采外周血為標(biāo)本行檢測(cè)調(diào)節(jié)性T細(xì)胞中CD4+CD25high+CD127low+。結(jié)果 對(duì)照組30例正常兒童以上觀察指標(biāo)均在正常值范圍。觀察組30例血小板減少癥患兒調(diào)節(jié)性T細(xì)胞中CD4+CD25high+CD127low+與正常兒童組比較P＞0.05無(wú)統(tǒng)計(jì)意義。結(jié)論 調(diào)節(jié)性T細(xì)胞CD4+CD25high+CD127low+在兒童免疫性血小板減少癥的發(fā)病中無(wú)明顯影響。

調(diào)節(jié)性T細(xì)胞；CD4+CD25high+CD127low+；兒童免疫性血小板減少癥

免疫相關(guān)性血小板減少癥（immune related thrombocytopenia， ITP）是一種自身免疫性血小板減少性疾病，由于自身免疫功能異常，導(dǎo)致患兒產(chǎn)生抗血小板自身抗體，使血小板在單核-巨噬細(xì)胞系統(tǒng)被大量吞噬，從而引起血小板減少[1]。兒童免疫性血小板減少癥的發(fā)生，與機(jī)體免疫功能紊亂致血小板生成減少及破壞增加相關(guān)。調(diào)節(jié)性T細(xì)（regulatory T cell，treg）是人體內(nèi)具有免疫調(diào)節(jié)功能的特殊T細(xì)胞亞群，其對(duì)維持機(jī)體免疫平衡狀態(tài)起重要作用，具有免疫抑制能力，維持著對(duì)自身抗原的耐受，在防止自身免疫性疾病方面具有重要作用[2]。CD4+CD25high+CD127low+是在Treg家族中的一群，主要通過(guò)降低機(jī)體對(duì)抗原的免疫應(yīng)答來(lái)保持機(jī)體的自身免疫耐受，具有免疫抑制和免疫應(yīng)答低下兩大特征。報(bào)道有些調(diào)節(jié)性T細(xì)胞在兒童免疫性血小板減少癥中的作用相關(guān)，本研究選取調(diào)節(jié)T細(xì)胞中CD4+CD25high+CD127low+對(duì)此做初步探討。

1 對(duì)象與方法

1.1 研究對(duì)象：選擇中國(guó)醫(yī)科大學(xué)附屬盛京醫(yī)院小兒血液科于2015年1月至2016年6月就診2～6歲兒童60例。隨機(jī)分為，觀察組：血小板減少癥患兒30例。治療前血小板計(jì)數(shù)為（1～25）×109/L。對(duì)照組：健康兒童30例，血小板計(jì)數(shù)為（100～300）×109/L。

1.2 ITP患兒依照病情分為四度。輕度：50×109/L＜PLT＜100× 109/L，只在外傷后出血；中度：25×109/L＜PLT≤50×109/L，尚無(wú)廣泛出血；重度：10×109/L＜PLT≤25×109/L，見(jiàn)廣泛出血，外傷處出血不止；極重度：PLT＜10×109/L自發(fā)性出血不止，危及生命[3]。目前臨床中輕中度ITP患兒病情可以得到自然緩解，故本研究中選取30例患兒均為中重度ITP患兒，其中重度18例，極重度12例。

1.3 方法

1.3.1 入組條件：30例患兒均臨床診斷為兒童免疫性血小板減少癥，無(wú)其他疾病同時(shí)存在。在采集標(biāo)本前均未接受任何糖皮質(zhì)激素等相關(guān)免疫治療。

1.3.2 標(biāo)本采集：60例兒童均采外周血為標(biāo)本，采集靜脈血2～3 mL，1 g/L肝素鈉抗凝，室溫下放置待用，于3 h內(nèi)檢測(cè)。

1.3.3 檢測(cè)方法：運(yùn)用血細(xì)胞簇分化抗原檢測(cè)調(diào)節(jié)性T細(xì)胞：CD4+CD25high+CD127low+。

1.4 統(tǒng)計(jì)方法：用SPSS11.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，采用χ2檢驗(yàn)，P＜0.05具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。

2 結(jié) 果

2.1 比較重度與極重度ITP患兒和健康兒童外周血中調(diào)節(jié)性T細(xì)胞：CD4+CD25high+CD127low+的變化（表1～2）用配對(duì)t檢驗(yàn)。

表1 兩組患兒比較（

表1 兩組患兒比較（

注：健康兒童與重度ITP患兒CD4+CD25high+CD127low+比較，P＞0.05，差異沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義

+CD25high+CD127low+(%) PLT×109健康兒童 5.1±1.92 215.6±40.7重度患兒 4.8±1.32 19.34±3.54 P值 ＞0.05觀察指標(biāo) CD4

表2 兩組患兒比較（

表2 兩組患兒比較（

注：健康兒童與極重度ITP患兒比較CD4+CD25high+CD127low+，P＞0.05，差異沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。說(shuō)明：血小板減少癥患兒調(diào)節(jié)性T細(xì)胞CD4+CD25high+CD127low+與血小板減少程度無(wú)關(guān)

+CD25high+CD127low+(%) PLT×109健康兒童 5.1±1.92 215.6±40.7極重度患兒 4.4±1.15 7.31±2.63 P值 ＞0.05觀察指標(biāo) CD4

3 討 論

兒童血小板減少癥的發(fā)生主要與機(jī)體免疫功能紊亂導(dǎo)致的血小板破壞增加及生成減少相關(guān)。調(diào)節(jié)性T細(xì)（regulatory T cell，treg）在人體內(nèi)可能主要介導(dǎo)免疫耐受，是免疫及炎性反應(yīng)抗原暴露產(chǎn)生的結(jié)果[4-5]。兒童發(fā)病率約1.9/10萬(wàn)～6.4/10萬(wàn)，重要臟器如顱內(nèi)出血仍然是ITP危及生命的原因[6]。

目前認(rèn)為ITP的發(fā)病是一個(gè)多步驟的過(guò)程，T細(xì)胞、B細(xì)胞和抗原遞呈細(xì)胞（APC）等在其發(fā)病過(guò)程中均發(fā)揮重要作用。Treg可直接或間接通過(guò)與抗原提呈細(xì)胞或周圍環(huán)境中的其他細(xì)胞（內(nèi)皮細(xì)胞、平滑肌細(xì)胞）而與靶淋巴細(xì)胞相互作用。這些反應(yīng)由Tregs細(xì)胞表面分子介導(dǎo).如轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β、細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞相關(guān)抗原4或胞間黏附分子[6]。有學(xué)者認(rèn)為在效應(yīng)性T細(xì)胞和Treg細(xì)胞之間存在著一種類似于陰陽(yáng)平衡的關(guān)系，也就是說(shuō)人體內(nèi)環(huán)境穩(wěn)態(tài)的維持不僅與Treg細(xì)胞的數(shù)量和功能相關(guān) ，同時(shí)可能與 Treg細(xì)胞和活化的效應(yīng)性 T細(xì)胞間維持一定的比值有關(guān)[7]。大多數(shù)研究表明，與正常對(duì)照相比，ITP患者尤其是活動(dòng)性ITP患者和（或）血小板特別低的患者，外周Treg數(shù)量明顯減少；當(dāng)ITP患者處于緩解期時(shí)，Treg數(shù)量會(huì)增高。針對(duì)血小板特異性抗體自身反應(yīng)性CD4+T 細(xì)胞的激活主要在脾臟發(fā)生，并以記憶性T 細(xì)胞形式釋放到外周血中，通過(guò)釋放細(xì)胞因子促進(jìn)自身反應(yīng)性B 細(xì)胞產(chǎn)生特異性抗血小板抗體，從而破壞血小板[8]。

本研究表明血小板減少癥患兒與正常兒童比較外周血CD4+CD25high+CD127low+與正常兒童相比 無(wú)統(tǒng)計(jì)意義。兒童血小板減少癥的病因很復(fù)雜，深入研究調(diào)節(jié)性T細(xì)胞在兒童血小板減少癥患者發(fā)病機(jī)制中的作用 ，具有非常重要的臨床意義。對(duì)此課題的探討目前尚需要進(jìn)一步臨床數(shù)據(jù)研究。

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CD4+CD25high+CD127low+Immune Thrombocytopenia Associated with Children's Study

MA Wen-dian1,2, WANG Hong1,2

(1 Shengjing Hospital Affiliated to China Medical University, Shenyang 110004, China; 2Benxi Center Hospital, Benxi 117000, China)

Objective Research on CD4+CD25high+CD127low+ in children immune thrombocytopenia correlation research.MethodsChoose shengjing hospital affiliated to China Medical University pediatric onset in hospital from January 2015 to June 2015 60 2-6 years old children. Observation group: thrombocytopenia with 30. Control group: 30 healthy children as normal control. 60 children have line detection of regulatory T cells in peripheral blood of specimen: CD4+CD25high+CD127low+.ResultsControl group: 30 normal children above observation indexes were in normal range. In observation group: CD4+CD25high+CD127low, two groups of patients were compared with no statistical significance (P＞0.05).ConclusionCD4+CD25high+CD127low sample enough T cells may not be in the children's immunity play a role in the pathogenesis of thrombocytopenia.

Regulatory T cells; CD4+CD25high+CD127low; Children immune thrombocytopenia

R725.5

B

1671-8194（2017）06-0003-02

*通訊作者:E-mail: wang_hong354@aliyun.com