丁智慧
武昌區(qū)婦幼保健院 湖北省武漢市 430060
細(xì)菌對(duì)藥物敏感性試驗(yàn)的質(zhì)量控制
丁智慧
武昌區(qū)婦幼保健院 湖北省武漢市 430060
文章通過闡述質(zhì)量控制,就細(xì)菌對(duì)藥物敏感性試驗(yàn)的質(zhì)量控制策略展開探討,旨在為如何促進(jìn)我國細(xì)菌耐藥性檢測水平的有效提高研究適用提供一些思路。
細(xì)菌;藥物敏感試驗(yàn);質(zhì)量控制細(xì)菌對(duì)藥物敏感性試驗(yàn)的質(zhì)量控制,主要包括兩方面內(nèi)容,一方面是對(duì)影響藥敏試驗(yàn)各式各樣因素的質(zhì)量控制,諸如對(duì)培養(yǎng)基成分、細(xì)菌藥物含量以及試驗(yàn)儀器設(shè)備等的質(zhì)量控制。一方面是標(biāo)準(zhǔn)菌株對(duì)藥敏試驗(yàn)的質(zhì)量控制。在一系列體外細(xì)菌藥敏試驗(yàn)中,紙片擴(kuò)散法憑借其操作便捷、成本經(jīng)濟(jì)特征,在臨床微生物實(shí)驗(yàn)室得到廣泛推廣。而紙片擴(kuò)散法的結(jié)果會(huì)受到眾多因素的影響。由此可見,就細(xì)菌對(duì)藥物敏感性試驗(yàn)的質(zhì)量控制開展研究,有著十分重要的現(xiàn)實(shí)意義。
要想確保藥敏試驗(yàn)科學(xué)性、準(zhǔn)確性,質(zhì)量控制必不可少。質(zhì)量控制包括室內(nèi)質(zhì)量控制、室間質(zhì)量控制,前者是經(jīng)由將檢測質(zhì)控菌用以主要質(zhì)量保證程序,用以保證試驗(yàn)過程的科學(xué)、試劑可靠以及操作規(guī)范;后者可對(duì)提高菌種鑒定、藥敏試驗(yàn)準(zhǔn)確性提供有力保障。
2.1 細(xì)菌藥敏試驗(yàn)培養(yǎng)基的質(zhì)量控制
Muller-Hinton瓊脂是紙片擴(kuò)散法的指定用培養(yǎng)基。當(dāng)引進(jìn)新一批的培養(yǎng)基時(shí),應(yīng)當(dāng)驗(yàn)證其與先前用的培養(yǎng)基相似與否。驗(yàn)證手段為,于一致條件下,對(duì)新老培養(yǎng)基同時(shí)開展試驗(yàn)。不僅要包括常規(guī)質(zhì)控菌,還要包括苛養(yǎng)質(zhì)控菌。新引進(jìn)培養(yǎng)基檢測應(yīng)涵蓋所有常用抗生素。倘若抑菌圈質(zhì)量與質(zhì)控范圍不相符,即可能意味著新引進(jìn)培養(yǎng)基不達(dá)標(biāo)。PH值與四環(huán)素抑菌圈呈負(fù)相關(guān)關(guān)系,與氨基糖苷類抗生素抑菌圈呈正相關(guān)關(guān)系[1]。新引進(jìn)培養(yǎng)基唯有在得到滿意的檢測結(jié)果后才能開展使用,如此方可確保前后藥敏結(jié)果的可比價(jià)值。
2.2 細(xì)菌藥敏試驗(yàn)藥敏紙片的質(zhì)量控制
對(duì)于紙片擴(kuò)散法而言,應(yīng)當(dāng)開展好藥敏紙片存放工作,一般用量以外的藥敏紙片應(yīng)當(dāng)于存儲(chǔ)于冷藏室。藥敏紙片存放應(yīng)用期間,應(yīng)重視相關(guān)藥敏紙片如一些喹諾酮對(duì)光的不穩(wěn)定性,切記避光存放。含有亞胺培南、β-內(nèi)酰胺酶抑制劑的藥敏紙片害怕潮濕環(huán)境,應(yīng)添加適量的干燥劑存放。藥敏試驗(yàn)質(zhì)量控制過程中,藥敏紙片局部抑菌圈直徑縮小,原因可能為抗生素降解,所以應(yīng)當(dāng)對(duì)藥敏試紙予以重新更換。針對(duì)含β-內(nèi)酰胺酶抑制劑的藥敏紙片,可采用生成β-內(nèi)酰胺酶的大腸埃希菌開展檢測,檢測抑菌圈直徑是否會(huì)伴隨抑制劑降解而縮小[2]。
2.3 細(xì)菌藥敏試驗(yàn)接種菌量的質(zhì)量控制
對(duì)于各式各樣細(xì)菌的藥敏試驗(yàn)而言,適當(dāng)水平的接種菌量是獲取可靠結(jié)果的重要前提。在藥敏試驗(yàn)中,時(shí)常會(huì)出現(xiàn)接種菌量過多或者過少的問題。可通過選取分光光度計(jì)對(duì)新培養(yǎng)物菌懸液吸光度開展檢測,以達(dá)成對(duì)菌懸液濃度的有效確定。現(xiàn)階段,國內(nèi)眾多醫(yī)療機(jī)構(gòu)微生物實(shí)驗(yàn)室均通過該種方法來確定藥敏試驗(yàn)的接種菌量。此外,一些中小實(shí)驗(yàn)室還會(huì)選取麥?zhǔn)媳葷岱?。需要注意的是,未有?biāo)準(zhǔn)參照物,單憑經(jīng)驗(yàn)是難以確保接種菌懸液濃度的準(zhǔn)確性的。選取自配麥?zhǔn)媳葷峁艿膶?shí)驗(yàn)室,應(yīng)當(dāng)定期對(duì)比濁管予以更換。
2.4 細(xì)菌藥敏試驗(yàn)結(jié)果的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)
在日常工作中,應(yīng)當(dāng)每日開展標(biāo)準(zhǔn)菌株藥物敏感試驗(yàn),對(duì)S.M.R分界點(diǎn)予以計(jì)數(shù),從而為當(dāng)天被檢菌株S.M.R判定提供可靠依據(jù),標(biāo)準(zhǔn)菌株選取以大腸埃希菌、金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞桿菌等為代表的革蘭陽性球菌,選取非發(fā)酵菌、腸桿菌類的對(duì)比菌株。常規(guī)藥敏控制標(biāo)準(zhǔn),實(shí)驗(yàn)室應(yīng)連接檢測30次結(jié)果僅允許不超過3次的失控,并且3次失控不可連續(xù)出現(xiàn)[3]。
總而言之,伴隨臨床醫(yī)學(xué)逐步發(fā)展成熟,臨床檢驗(yàn)工作被提出了越來越嚴(yán)苛的要求。細(xì)菌對(duì)藥物敏感性試驗(yàn)的質(zhì)量控制旨在為患者及時(shí)獲取臨床治療提供有力依據(jù)。在臨床實(shí)驗(yàn)室開展藥物敏感實(shí)驗(yàn)?zāi)康膭t是,一方面為臨床醫(yī)務(wù)人員對(duì)患者選擇最佳抗生素制劑提供可靠依據(jù);一方面于相應(yīng)區(qū)域內(nèi)累積與公共衛(wèi)生關(guān)聯(lián)的重要耐藥微生物流行病學(xué)資料。鑒于此,相關(guān)人員務(wù)必要鉆研研究、總結(jié)經(jīng)驗(yàn),清楚認(rèn)識(shí)質(zhì)量控制的重要性,結(jié)合臨床細(xì)菌藥敏試驗(yàn)實(shí)際情況,強(qiáng)化細(xì)菌藥敏試驗(yàn)培養(yǎng)基的質(zhì)量控制,強(qiáng)化細(xì)菌藥敏試驗(yàn)藥敏紙片的質(zhì)量控制,強(qiáng)化細(xì)菌藥敏試驗(yàn)接種菌量的質(zhì)量控制等,積極我國細(xì)菌耐藥性檢測水平的有效提高。
[1]A Laszlo,M Rahman,M Espinal,et al.Quality assurance programme for drug susceptibility testing of Mycobacterium tuberculosis in the WHO/IUATLD Supranational Reference Laboratory Network: five rounds of proficiency testing, 1994-1998[J].International Journal of Tuberculosis & Lung Dis,2002,06(09):748-756.
[2]A King,DFJ Brown.Quality assurance of antimicrobial susceptibility testing by disc diffusion[J]. Journal of Antimicrobial Chemothe rapy,2001,48(s1):271-276.
[3]FC Tenover,MJ Mohammed,J Stelling,et al.Ability of Laboratories To Detect Emerging Antimicrobial Resistance: Proficiency Testing and Quality Control Results from the World Health Organization's External Quality Assurance System for Antimicrobial Susceptibility Testing[J].Journal of Clinical Mi crobiology,2001,39(01):241-250.