乳腺癌患者血清神經(jīng)生長因子和低親和力受體p75表達(dá)水平的變化及其意義

張季，李楊，楊思原，王茂華，李析胤

（云南省腫瘤醫(yī)院/昆明醫(yī)科大學(xué)第三附屬醫(yī)院 1. 乳腺外科 2.內(nèi)一科，云南 昆明 650118）

乳腺癌的發(fā)生發(fā)展，能夠增加患者的病死率，導(dǎo)致患者遠(yuǎn)期生存預(yù)后的評估。流行病學(xué)研究顯示，現(xiàn)階段臨床上乳腺癌的發(fā)生率可達(dá)234～345/10萬人左右，在合并有相關(guān)乳腺疾病家族史的人群中，其發(fā)病率更高[1-2]。在探討乳腺癌的發(fā)病機制過程中，可以發(fā)現(xiàn)的是生物學(xué)因子的改變，或者基因相關(guān)水平的改變，是促進(jìn)乳腺導(dǎo)管上皮細(xì)胞或者小葉上皮細(xì)胞惡性病變的主要原因。低親和力受體p75能夠在促進(jìn)糖蛋白配體的激活，加劇癌細(xì)胞對于基底膜組織的侵襲等方面發(fā)揮作用，促進(jìn)腫瘤的進(jìn)展；神經(jīng)生長因子（nerve growth factor，NGF）不僅能夠在促進(jìn)神經(jīng)纖維的形成方面具有生理學(xué)意義，同時近年來發(fā)現(xiàn)NGF的異常表達(dá)能夠增加癌細(xì)胞異常增殖的風(fēng)險，導(dǎo)致癌細(xì)胞的侵襲或者腫瘤轉(zhuǎn)移風(fēng)險的增加[3-4]。為了進(jìn)一步探討NGF或者p75在乳腺癌發(fā)生過程中的作用，本次研究選取2016年2月—2017年5月在我院接受治療的乳腺癌患者為研究對象，探討兩者的異常表達(dá)及其與患者腫瘤標(biāo)志物的關(guān)系。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2016年2月—2017年5月在我院接受治療的乳腺癌患者為研究對象。納入標(biāo)準(zhǔn)：⑴ 年齡≥18周歲；⑵ 經(jīng)病理檢查確診為乳腺癌者；⑶ 無其他系統(tǒng)嚴(yán)重疾病者。排除標(biāo)準(zhǔn)：⑴ 臨床資料不全者；⑵ 合并其他部位腫瘤者。根據(jù)納入排除標(biāo)準(zhǔn)共納入病例數(shù)100例，年齡35～62歲，平均（50.34±4.25）歲，其中高分化者62例，中低分化者38例；淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者25例。乳腺增生組納入排除標(biāo)準(zhǔn)：年齡≥18周歲；病理診斷為乳腺良性腫瘤者，共納入100例，年齡32～60歲，平均（50.30±4.12）歲。兩組患者的年齡比較無統(tǒng)計學(xué)差異（P＞0.05），具有可比性。本項研究經(jīng)醫(yī)院委員會評審?fù)ㄟ^，且所有患者均知情同意。

1.2 檢測方法

所有患者均于入院24 h內(nèi)采集空腹靜脈血約5 mL并分作2份，1份自然抗凝后以3 000r/min離心10 min，取上清液采用酶聯(lián)免疫吸附法測定血清中NGF、p75、CEA、CA15-3和CA125水平，檢測試劑盒購自北京中杉金橋生物有限公司，具體檢測步驟嚴(yán)格按照試劑盒說明書進(jìn)行操作；另1份置于枸櫞酸鈉抗凝管內(nèi)，加入TGF-β1、IL-6和TNF-γ檢測試劑盒后，利用膠體金法檢測TGF-β1、IL-6和TNF-γ水平，試劑盒購自上海奧普生物醫(yī)藥有限公司。

1.3 評價指標(biāo)

觀察兩組研究對象血清NGF、低親和力受體p75、細(xì)胞因子（TGF-β1、IL-6和TNF-γ）和腫瘤標(biāo)志物（CEA、CA15-3和CA125）水平的差異，分析乳腺癌患者血清NGF、低親和力受體p75表達(dá)水平與細(xì)胞因子和腫瘤標(biāo)志物水平的相關(guān)性。

1.4 統(tǒng)計學(xué)處理

數(shù)據(jù)錄入后，采用SPSS 11.5軟件進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析。計數(shù)和計量資料分別采用例和均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示。兩組患者血清NGF、低親和力受體p75、細(xì)胞因子和腫瘤標(biāo)志物水平的比較采用t檢驗進(jìn)行統(tǒng)計分析，采用Pearson相關(guān)分析法分析乳腺癌患者血清NGF、低親和力受體p75表達(dá)水平與細(xì)胞因子和腫瘤標(biāo)志物水平的相關(guān)性。P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 兩組患者血清NGF、低親和力受體p75、細(xì)胞因子及腫瘤標(biāo)志物水平

乳腺癌組患者血清NGF、低親和力受體p75水平均明顯高于乳腺增生組，TGF-β1水平明顯低于乳腺增生組，CEA、CA15-3和CA125水平明顯高于乳腺增生組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（均P＜0.001）（表1）。

表1 兩組患者血清NGF、低親和力受體p75、細(xì)胞因子及腫瘤標(biāo)志物水平比較（n=100，±s）

表1 兩組患者血清NGF、低親和力受體p75、細(xì)胞因子及腫瘤標(biāo)志物水平比較（n=100，±s）

CA125（U/mL）乳腺增生組 38.15±5.21 12.02±2.15 658.25±14.03 16.75±2.21 35.12±4.22 2.13±0.86 8.79±1.45 15.63±2.46乳腺癌組 658.12±46.27 90.48±3.42 302.14±11.62 24.18±3.04 44.11±5.97 14.12±6.85 40.82±8.45 58.24±8.25 t -133.148 -194.224 195.480 -19.769 -12.297 -17.367 -37.359 -49.495 P ＜0.001 ＜0.001 ＜0.001 ＜0.001 ＜0.001 ＜0.001 ＜0.001 ＜0.001組別 NGF（pg/mL）p75（pg/mL）TGF-β1（ng/L）IL-6（mg/L）TNF-γ（ng/L）CEA（U/mL）CA15-3（U/mL）

2.2 乳腺癌患者血清NGF、p75水平與細(xì)胞因子和腫瘤標(biāo)志物水平的相關(guān)分析

相關(guān)性分析結(jié)果顯示，乳腺癌患者血清NGF、p75水平與TGF-β1水平呈明顯負(fù)相關(guān)（均P＜0.05），與IL-6、TNF-γ、CEA、CA15-3和CA125水平呈明顯正相關(guān)（均P＜0.05）（表2）。

表2 乳腺癌患者血清NGF、p75水平與細(xì)胞因子和腫瘤標(biāo)志物水平的相關(guān)性

3 討 論

乳腺癌的發(fā)病原因較為復(fù)雜，但越來越多的研究顯示，分子生物學(xué)或者基因水平的表達(dá)異常，是促進(jìn)患者乳腺癌等惡性腫瘤病情的進(jìn)展的核心因素[5-6]。相關(guān)指標(biāo)的表達(dá)異常，能夠在影響到癌細(xì)胞DNA核轉(zhuǎn)錄調(diào)控相關(guān)基因的表達(dá)，影響到癌細(xì)胞增殖分化的障礙，加劇癌細(xì)胞的變形能力[2,7]。通過對于相關(guān)分子生物學(xué)相關(guān)指標(biāo)的變化研究，具有下列幾個方面的現(xiàn)實意義：⑴ 能夠為臨床上乳腺癌的早期血清學(xué)篩查提供新的研究方向；⑵ 能夠為乳腺癌的綜合性生物學(xué)治療提供理論基礎(chǔ)。

NGF蛋白是蛋白激酶家族成員，其可以通過對于患者體內(nèi)癌細(xì)胞相關(guān)信號通路的激活，促進(jìn)腫瘤相關(guān)蛋白信號通路PI3K/Akt、p53、p16等的激活，加劇多種信號通路的交聯(lián)式激活作用，促進(jìn)患者體內(nèi)上皮細(xì)胞交界性病變或者惡性病變的發(fā)生[8]。NGF蛋白同時能夠在影響到乳腺癌膜表面蛋白的糖蛋白配體的活性，降低癌細(xì)胞間的粘附能力，為惡性腫瘤的轉(zhuǎn)移提供條件[9-10]；p73的表達(dá)能夠顯著促進(jìn)乳腺癌上皮細(xì)胞核的異常轉(zhuǎn)錄，增加癌細(xì)胞的持續(xù)性增殖或者異常分化的風(fēng)險，特別是p73在結(jié)合細(xì)胞核轉(zhuǎn)錄調(diào)控基因的同時，抑制了細(xì)胞核內(nèi)凋亡相關(guān)基因的表達(dá)，抑制程序性凋亡的發(fā)生[11]。TGF-β是體內(nèi)趨化因子調(diào)控的重要因素，其對于趨化因子或者補體成分的調(diào)控作用，能夠避免過度的局部炎癥因子的趨化作用導(dǎo)致的患者腫瘤微環(huán)境的改變，抑制腫瘤細(xì)胞的持續(xù)性增殖風(fēng)險。

在本次研究中可以發(fā)現(xiàn)的是，乳腺癌患者血清中的相關(guān)指標(biāo)的異常表達(dá)較為明顯，其中NGF、p75的表達(dá)濃度可明顯上升，NGF、p75表達(dá)濃度的上升，可以在下列幾個方面影響到乳腺癌患者的臨床預(yù)后：⑴ NGF的高表達(dá)，促進(jìn)了乳腺癌細(xì)胞對于臨床正常導(dǎo)管上皮或者間質(zhì)組織成分的浸潤，促進(jìn)了癌細(xì)胞的擴散風(fēng)險；⑵ p75的表達(dá)增加，能夠在促進(jìn)腫瘤相關(guān)信號通路通路如NOTCH通路的激活，加劇癌細(xì)胞分化調(diào)控障礙。研究[12-13]在探討了117例樣本量的乳腺癌圍手術(shù)期血清學(xué)指標(biāo)的變化，發(fā)現(xiàn)NGF的表達(dá)濃度可平均上升26%～36%左右，同時患者的治療敏感性越差、生存指標(biāo)越低，相關(guān)血清學(xué)指標(biāo)的表達(dá)濃度越高。TGF-β1是調(diào)控體內(nèi)轉(zhuǎn)化生長因子的重要成員，其對于患者體內(nèi)的炎癥因子的調(diào)控作用，能夠避免過度的炎癥因子損傷導(dǎo)致的腫瘤細(xì)胞的擴散，本研究中TGF-β1的表達(dá)明顯下降，失去了其對于患者體內(nèi)病灶組織癌細(xì)胞的病理性進(jìn)展過程的調(diào)控作用，同時TGF-β1的表達(dá)下降失去了其對于腫瘤細(xì)胞的免疫監(jiān)察作用。IL-6和TNF-γ等炎癥因子指標(biāo)的高表達(dá)，主要考慮與腫瘤患者體內(nèi)的高度激活的瀑布式炎癥反應(yīng)有關(guān)，而腫瘤糖蛋白表面抗原如CEA、CA15-3和CA125等的表達(dá)上升，則主要考慮與腫瘤細(xì)胞凋亡或者增殖等過程中釋放的細(xì)胞膜配體成分進(jìn)入循環(huán)血中有關(guān)。關(guān)于NGF、p75水平的表達(dá)相關(guān)性分析可見，兩者的異常表達(dá)與患者的腫瘤生物學(xué)分子或者細(xì)胞炎癥因子的表達(dá)具有密切的關(guān)系，這一方面提示了NGF、p75與乳腺癌的病情進(jìn)展具有密切的關(guān)系，同時也提示NGF、p75的表達(dá)可能通過影響到體內(nèi)炎癥反應(yīng)，進(jìn)而影響到乳腺癌的病情進(jìn)展。

本研究的創(chuàng)新性在于探討了NGF、p75的異常表達(dá)及其與患者體內(nèi)炎癥因子或者腫瘤相關(guān)糖蛋白配體的關(guān)系。綜上所述，乳腺癌患者血清NGF、低親和力受體p75表達(dá)水平較高，且與患者的細(xì)胞因子和腫瘤標(biāo)志物水平密切相關(guān)，可作為臨床監(jiān)測的重要指標(biāo)。

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