核酸檢測技術(shù)在獻血者血液篩查中的作用

王建林

（內(nèi)蒙古赤峰市中心血站，內(nèi)蒙古 赤峰 024000）

核酸檢測技術(shù)在獻血者血液篩查中的作用

王建林

（內(nèi)蒙古赤峰市中心血站，內(nèi)蒙古 赤峰 024000）

目的 分析獻血者血液篩查中運用核酸檢測技術(shù)的價值。方法 通過轉(zhuǎn)錄介導(dǎo)擴增與實時熒光定量方法對我中心血站300份和4000份獻血者的標本實施病毒核酸檢測，比較兩種檢測方法的結(jié)果與對比檢測的結(jié)果。結(jié)果 通過這兩種方式進行檢測，都存在一定的比例的ELASA（+）和NAT（-），運用GFE核酸實施檢測之后，試劑HBV和HCV陽性的結(jié)構(gòu)低于ID-TMA的檢測試劑，此外，在本次研究中，并沒有出現(xiàn)HIV與HCV血清學(xué)漏檢的情況。結(jié)論 通過核酸的檢測可以有效降低在輸血過程中發(fā)生傳染病的概率，其中在獻血者的血液中實施病毒篩選，采用ID-TMA的檢測試劑效果更加。

核酸檢測技術(shù)；獻血者血液篩查；作用

當前，輸血所導(dǎo)致的傳染病已經(jīng)成為全社會重點關(guān)注的問題，因此，為了能夠更好地降低類似情況的發(fā)展，需要加強對血液病毒的篩選，從而有效排除血液中所攜帶的病毒，提升接受血液血液使用者的安全性[1]。在本文中結(jié)合我中心的情況而做出如下報道。

1 資料與方法

1.1 檢測儀器與試劑

在本文中采用的實時熒光定量的方法，即從autoX的病毒核算中提出試劑盒（此批號為：120304），HCV/HIVI-PCR和HBV的篩查試劑盒（即120304），其中IC的試劑盒批號是120405，都屬于某國公司的所生產(chǎn)的產(chǎn)品。TMA的方法為你某國公司所生產(chǎn)的自動血液檢測儀器，試劑批號是565034/20130904，鑒別試劑為HIV-I，其批號是：575108/20160312，而HBV的批號是（575112/20140314），而HCD的批號是：565106/20130215。

1.2 檢測方法

采用實時熒光定量中的PCR方法進行檢測，對其中的300份血液實時FLASA的陽性檢測，其中S/CO大于1，而其中的150份屬于陽性，而150份屬于HCV陽性。通過GFE試劑盒中的磁珠法而提取試劑并進行手工提取核酸然后分別放在HCV、HIV-1PCR和HBV的篩選試劑盒中，然后取出混合液BM與探針混合液分別在之前配置的HCV/HBV/PCR和實施混合反應(yīng)[2]，然后加入大約96孔的PCR的反應(yīng)板使其發(fā)生擴增反應(yīng)，大約60秒之后就可以將熒光定量置于PCR中觀察。結(jié)果判斷如下：內(nèi)標為陽性，而標本為陽性的情況則視為陽性，其他則視為無效。

TMA方法，將4000份標本通過FLISA的檢測。第一，運用FDTA-K2（5 mL）抗凝真空實時血管采樣血液標本，并將其保存在溫度大約為2至8℃的環(huán)境中，并通過24小時實施離心分離的方式將血漿分離開來，然后運用ELISA的方法實施檢測，通過離心十五分鐘之后分離5000 g，吸取剩下的血漿大約1.5 mL的無RNA酶在EP管當中，并保存在零下40℃的環(huán)境中，采用單人份的NAT檢測；第二，根據(jù)相關(guān)要求而進行操作[3]，把ULTRO的試劑用在HBV、HIV和HCV進行聯(lián)檢并作出分析，然后樣本進行重復(fù)分析，例如采用ULTRO兩次實施聯(lián)檢都為陽性則可以確定NAT為陽性；第三，對這些陽性樣本實施HBV-NDA、HIV-RNA和HCNRNA鑒別并最終確定屬于哪一種病毒。

2 結(jié) 果

采用熒光定量的方法檢測，其中132份屬于陽性，而IDNAT檢出陽性為32份，所占陽性比例是24.24%，而153份HCV標本中，陽性為21份，陽性比例為13.73%。實施TMA的檢測方式中，4000份樣本中，陽性541份（13.53%），抗-HCV陽性為328份（8.20%），抗-HIV的陽性為88份（2.20%）。單人份的檢測中，NAT陽性和ELISA陰性為32份（0.80%），ELISA陽性/NAT陽性323份（8.01%）。

3 討 論

對血液篩查中采用核酸檢測的技術(shù)，主要運用是通過聚合酶鏈反應(yīng)的基礎(chǔ)之上而擴展，目前，此方法在許多國家都得到廣泛運用，而在我國血站中的運用ELISA方法所出現(xiàn)的問題，即存在漏檢的情況，這就導(dǎo)致病毒滴度以及病毒變異的因素而導(dǎo)致的HIV和HBV的情況[4]，對輸血的安全性帶來重要的影響。通過核酸檢測的技術(shù)檢測，極大降低輸血中發(fā)生病毒感染的情況，同時也有效提升輸血的安全性。在本次研究中結(jié)合我血站的情況而證實此方法的效果，即熒光定量的方法檢測，ID-NAT檢出陽性為32份（24.24%），而153份HCV標本中，陽性為21份（13.73%）。TMA的檢測方式中，陽性541份（13.53%），抗-HCV陽性為328份（8.20%），抗-HIV的陽性為88份（2.20%）。單人份中NAT陽性和ELISA陰性0.80%，ELISA陽性/NAT陽性8.01%。

[1] 李莉華,王素玲,馬印圖,等.單人份核酸檢測在降低輸血感染人類免疫缺陷病毒殘余風(fēng)險中的應(yīng)用[J].解放軍醫(yī)藥雜志,2017,29(02):107-110.

[2] 別立莉.河南省漢族獻血者HBV基因突變及抗原檢測在輸血前血液篩查中的應(yīng)用臨床分析[J].中國實用醫(yī)刊,2017,44(14):36-39.

[3] 伍曉菲.2011-2014年中國國際輸血感染預(yù)防和控制(CITIC)項目血液篩查核酸檢測室間質(zhì)評結(jié)果分析[J].中國輸血雜志,2015,28(11):1410-1413.

[4] 王立林,盧 亮,聶冬梅,等.2種核酸篩查系統(tǒng)對血清學(xué)陽性獻血者檢測結(jié)果的分析[J].中國輸血雜志,2015,28(09):1090-1093.

R446.6

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ISSN.2095-8242.2017.062.12123.01

王雨辰