鼠神經(jīng)生長因子治療四肢創(chuàng)傷性骨不連27例臨床療效觀察

劉平勝+黃潮桐+陳隆福+劉宇濤+劉淦良

【摘要】 目的：探討鼠神經(jīng)生長因子（NGF）在治療四肢創(chuàng)傷性折骨不連的臨床治療效果。方法：對2003年3月-2014年3月期間本院收治的27例四肢創(chuàng)傷性骨折骨不連病例臨床資料進(jìn)行回顧性分析，X線片提示未見明顯骨痂生長，于骨折斷端周圍及骨折間隙內(nèi)注射鼠神經(jīng)生長因子（NGF），1次/周，連續(xù)8周，每2周1次定期X線片檢查觀察骨不連愈合狀態(tài)。結(jié)果：27例病例術(shù)后隨訪10個月～10年，其中26例骨折愈合，1例未見明顯骨痂生長，本組有效率96.3%。結(jié)論：局部注射鼠神經(jīng)生長因子治療骨不連取得較好的治療效果，具有安全有效、創(chuàng)傷小、并發(fā)癥少等優(yōu)點，為骨不連患者提供一種微創(chuàng)無痛的保守治療方法，但更深入的研究仍缺乏。

【關(guān)鍵詞】 鼠神經(jīng)生長因子； 四肢骨骨折； 骨不連； 創(chuàng)傷性； 治療

【Abstract】 Objective：To explore the effect of nerve growth factor （NGF） in treatment of limbs fracture nonunion and promotion effect of healing.Method：The clinic data of 27 cases with nonunion of limbs fractures from March 2003 to March 2014 were analyzed retrospectively.The X-ray showed no obvious callus growth，they were given injection of mouse nerve growth factor （NGF） in the gap of limbs fracture broken end once a week，for 8 weeks，and regular X-ray observation of bone nonunion status once 2 weeks.Result：27 cases were followed up for 10 months to 10 years.The healing of fracture were 26 cases，1 case had no obvious callus growth，the effective rate was 96.3%.Conclusion：Local injection of rat nerve growth factor for the treatment of nonunion has better treatment effect with safe and effective，little trauma，fewer complications and it is a particularly noninvasive and painless method of conservative treatment for nonunion patients，but further research is still lacking.

【Key words】 Rat nerve growth factor； Limbs fracture； Nonunion； Traumatic； Treatment

First-authors address：Graduate School of Guangdong Medical University，Zhanjiang 524000，China

doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2016.34.034

骨折后的愈合是一個相當(dāng)復(fù)雜的過程，骨折的順利修復(fù)主要取決于骨折處的血供條件及骨折端的固定穩(wěn)固性，同時，由眾多細(xì)胞因子等組成的微環(huán)境也影響骨折愈合的進(jìn)程，如果這些因素受到損害，骨折愈合進(jìn)程將會減緩甚至導(dǎo)致骨不連發(fā)生。在眾多細(xì)胞因子中神經(jīng)生長因子（NGF）具有較強(qiáng)的促進(jìn)骨不連骨痂生長和愈合的作用[1]，但目前對神經(jīng)生長因子用于治療骨不連的研究相對較少，其作用機(jī)制尚不清楚。有學(xué)者發(fā)現(xiàn)在骨不連的骨組織中沒有或者只有很少量的神經(jīng)纖維生長[2]，由此推斷缺乏神經(jīng)因素可能影響骨折愈合，導(dǎo)致骨不連的發(fā)生。因此，可以在骨不連的折端處局部注射外源性神經(jīng)生長因，促進(jìn)骨折愈合，治療骨不連?，F(xiàn)就本院于2003年3月-2014年3月期間，采用鼠神經(jīng)生長因子（NGF）局部注射治療27例四肢創(chuàng)傷性骨折骨不連取得的療臨床療效進(jìn)行回顧性總結(jié)分析，現(xiàn)報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 本次總共收集本院從2003年

3月-2014年3月收治的27例骨不連患者，均為四肢創(chuàng)作性骨折術(shù)后6～12個月，病程平均10個月，其中男19例，女8例；年齡23～62歲，平均39.2歲；交通車禍致傷20例，高處墜落、摔倒致傷5例，車床機(jī)器碾壓、絞軋致傷2例；脛骨骨折11例，脛腓骨雙骨折3例，股骨骨折1例，尺骨骨折5例，橈骨骨折2例，尺橈骨雙骨折3例，鎖骨骨折2例；采用切開復(fù)位內(nèi)固定術(shù)治療21例，采用手法復(fù)位石膏外固定治療6例。患者治療6個月后，X線片示骨折仍未達(dá)骨性愈合或骨折部位無進(jìn)行性修復(fù)跡象即為骨不連，本組所有病例均為非感染性骨不連。

1.2 方法 于門診手術(shù)室經(jīng)皮行鼠神經(jīng)生長因子（NGF）局部注射，常規(guī)消毒骨折斷端處皮膚后，鋪無菌洞巾，行局部麻醉，在骨折斷端皮膚處選擇合適的進(jìn)針點，將5 mL注射器針頭扎入骨折斷端縫隙，在X線透視下，確認(rèn)針尖進(jìn)入骨折縫隙內(nèi)后，將注射用鼠神經(jīng)生長因子（NGF）20 μg加0.9%氯化鈉注射液2 mL注入骨折斷端縫隙內(nèi)，維持原固定狀態(tài)，內(nèi)固定不牢固者，加用外固定，每周治療1次，連續(xù)治療8周。每2周復(fù)查1次X線檢查，觀察骨不連愈合情況。治療8周后，若X線檢查無骨折愈合跡象，將解除外固定，避免關(guān)節(jié)強(qiáng)直。療效標(biāo)準(zhǔn)：參照第八版外科學(xué)骨折愈合標(biāo)準(zhǔn)。

2 結(jié)果

本組病例均順利完成治療，術(shù)后隨訪10個月～10年，骨折愈合（X線復(fù)查骨折部位未見明顯的骨折線，有明顯的骨痂生成，有骨小梁穿過骨折線，患者完全負(fù)重，骨折區(qū)域無疼痛）26例，X線片顯示骨痂生長出現(xiàn)時間為（2.3±1.1）周，骨折線模糊不清時間為（8.1±1.5）周，骨折愈合時間為（12.2±1.4）周。1例脛骨下段粉碎性骨折患者未見明顯骨痂生長，經(jīng)治療2個月后，X線片示骨折愈合進(jìn)展緩慢，后采用取自體腓骨植骨手術(shù)治療后獲得骨性愈合。本組病例治愈率達(dá)96.3%，所有患者治療后均未出現(xiàn)明顯不良反應(yīng)。

3 討論

3.1 引起骨不連發(fā)生的可能因素 （1）局部供血條件：良好的血供條件是骨折愈合的根本保障，骨折時斷端的供血情況就被改變了，尤其是斷端遠(yuǎn)側(cè)的血供條件，再加上手術(shù)過程中剝離骨膜及軟組織，則進(jìn)一步破壞了骨折處的血運(yùn)。有研究結(jié)果顯示，骨折處的軟組織受損嚴(yán)重程度與骨折延遲愈合及骨不連的發(fā)生有一定的相關(guān)性。粉碎性骨折伴嚴(yán)重的軟組織受損以及手術(shù)過程中過多的剝離骨膜及軟組織等，都會增加發(fā)生骨不連的機(jī)率[3]。（2）斷端的穩(wěn)定性：骨折斷端固定不牢靠，往往會出現(xiàn)異?；顒?，這種異?；顒硬坏黾恿藘?nèi)固定材料松動和斷裂的風(fēng)險，還會破壞骨折斷端的血液供應(yīng)，影響骨折的愈合。然而，過度的固定可能會出現(xiàn)局部應(yīng)力摭擋作用，也不利于骨小梁的生長而影響骨折愈合。適當(dāng)?shù)墓潭捎兄诨颊哌M(jìn)行早期功能鍛煉促進(jìn)骨折愈合，進(jìn)而減少骨不連的發(fā)生。（3）斷端接觸情況：骨折斷端處碎骨片之間接觸良好有助于骨小梁及骨痂的爬行生長，嚴(yán)重的粉碎性骨折、骨折后復(fù)位欠佳和手術(shù)過程中摘除部分碎骨片或受傷過程中導(dǎo)致骨質(zhì)缺失等都會影響斷端的接觸。如果骨折間隙較大時，兩斷端之間無法接觸，骨小梁很難爬行閉合間隙。而且，兩斷端之間如被軟組織填塞，也會影響骨折愈合，進(jìn)而發(fā)生骨不連。本組病例中有1例脛骨粉碎性骨折骨不連患者，X線片提示骨折間隙經(jīng)>4.5 mm伴部分骨質(zhì)缺失，經(jīng)過8周注射治療后仍未愈合，究其原因，可能與骨折間隙較大、兩斷端接觸不良有關(guān)。（4）吸煙因素：香煙中的有毒成分尼古丁可通過抑制角化細(xì)胞、成纖維細(xì)胞及巨噬細(xì)胞增殖、遷移，增加組織血管收縮，減少組織營養(yǎng)性血流量等機(jī)制延遲傷口愈合[4-5]。尼古丁還可抑制骨折早期血管長入、再血管化及成骨機(jī)制，而阻礙骨折愈合[6]。Harvey等[7]研究報告稱吸煙會延長骨折愈合的時間并降低骨折愈合率，其研究顯示吸煙患者骨折的愈合率較非吸煙患者低10%，而且，被動吸煙的患者發(fā)生骨不連的機(jī)率也有增加[8]。（5）身體條件：年齡偏高，身體肥胖或營養(yǎng)不良，基礎(chǔ)疾病如糖尿病、代謝性疾病和惡病質(zhì)等，不良生活習(xí)慣如熬夜、酗酒等因素都會對骨折的愈合產(chǎn)生影響，甚至發(fā)生骨不連。

3.2 神經(jīng)生長因子在骨折愈合過程中所起的作用及可能機(jī)制 1952年，Levi-Montacini發(fā)現(xiàn)多種不同類型的細(xì)胞都可以產(chǎn)生神經(jīng)生長因子，它是一種能促進(jìn)神經(jīng)細(xì)胞發(fā)育及神經(jīng)纖維生長的活性蛋白[9]。之后有學(xué)者研究發(fā)現(xiàn)神經(jīng)生長因子是一種多功能蛋白因子[10-11]，除作用于神經(jīng)組織外，一些非神經(jīng)類的細(xì)胞組織也能利用神經(jīng)生長因子并產(chǎn)生神經(jīng)系統(tǒng)以外的效果。近年來眾多實驗研究和臨床觀察證明，神經(jīng)生長因子有增強(qiáng)促進(jìn)骨折愈合的作用。馬騁等[12]通過實驗發(fā)現(xiàn)神經(jīng)生長因子有促進(jìn)失神經(jīng)狀態(tài)下骨折斷端骨化的作用。Eppley等[13]在實驗時發(fā)現(xiàn)神經(jīng)生長因子能導(dǎo)致新生類骨質(zhì)形成。基于上述發(fā)現(xiàn)，Grills等[10]進(jìn)行局部注射神經(jīng)生長因子治療大鼠肋骨骨折，發(fā)現(xiàn)骨痂生成的數(shù)量和質(zhì)量顯著增加，后來他們又證實了在骨折處注射外源性神經(jīng)生長因子能提高骨折修復(fù)過程的速度和質(zhì)量[14-15]。白孟海等[16]研究發(fā)現(xiàn)骨折部位骨生長蛋白（BMP）濃度降低會導(dǎo)致骨不連的發(fā)生率增加，而劉宇鵬等[17]則進(jìn)一步顯示神經(jīng)生長因子可通過提高機(jī)體骨生長蛋白（BMP）的表達(dá)促進(jìn)骨折愈合。大量研究結(jié)果表明，神經(jīng)生長因子在骨折修復(fù)的各階段都能有效縮短骨折愈合時間并增加愈合質(zhì)量[15-18]，但其對骨折愈合的作用機(jī)理尚不明了。Otfinowski[19]研究大鼠不同部位神經(jīng)組織損傷后異位成骨情況的比較，結(jié)果表明神經(jīng)系統(tǒng)對骨形成的影響是復(fù)雜且多層面的。在骨折修復(fù)愈合過程中，神經(jīng)生長因子所起作用的可能機(jī)制：直接刺激骨折部位骨細(xì)胞或其他細(xì)胞分泌相關(guān)因子進(jìn)而促進(jìn)骨細(xì)胞再生；或者誘導(dǎo)神經(jīng)纖維長入骨組織，增加骨折處的神經(jīng)支配促進(jìn)骨折愈合等[20]。

3.3 本研究的意義和存在的問題 骨不連的治療是擺在骨科醫(yī)生面前的一大難題，雖然有多種治療方法可供選擇，但各有利弊。目前，手術(shù)以其療效確切，可以盡早恢復(fù)肢體功能，減少骨折后期并發(fā)癥的發(fā)生，提高生活質(zhì)量而作為治療骨不連的首選方案[21]。手術(shù)方式有內(nèi)、外固定、骨移植以及多種方式聯(lián)合應(yīng)用[22-23]，但其又存在可能需再次手術(shù)或取骨、骨移植等繼發(fā)損傷，而增加患者的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)和延長住院時間等缺點。近年來大量實驗研究和臨床應(yīng)用經(jīng)驗效果表明，神經(jīng)生長因子能促進(jìn)骨折愈合、縮短骨折愈合時間，且具有安全高效、副作用少的優(yōu)點。經(jīng)皮局部注射治療具有易操作、創(chuàng)傷小、價格低，對患者日常生活影響較小、治療依從性較好的特點，便于臨床應(yīng)用。本組對應(yīng)用鼠神經(jīng)生長因子治療骨不連療效進(jìn)行回顧性分析總結(jié)，驗證了鼠神經(jīng)生長因子具有治療骨不連的臨床價值，為進(jìn)一步臨床應(yīng)用提供療效借鑒。本組病例雖取得較滿意療效結(jié)果，但所有病例均采用局部注射相同濃度的鼠神經(jīng)生長因子，而未設(shè)置濃度梯度對比，對促進(jìn)骨不連的愈合是否有最佳的濃度范圍，這個濃度范圍是多少，治療不同部位的骨不連的最佳的濃度范圍是否相同，局部注射治療的最佳頻率是多少等，這些問題均有待進(jìn)一步研究探明。

綜上所述，通過回顧分析本組27例四肢骨折骨不連患者可見，局部注射鼠神經(jīng)生長因子具有促進(jìn)骨不連斷端骨痂生長、促進(jìn)骨折愈合的作用。目前，神經(jīng)生長因子應(yīng)用于骨折治療方面已取得了一定成果，但更深入的研究仍較缺乏，應(yīng)進(jìn)一步加強(qiáng)探究其作用機(jī)制及相關(guān)應(yīng)用理論，以便更好的指導(dǎo)臨床應(yīng)用實踐。

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