儀器法與鏡檢法檢測(cè)尿液有形成分的結(jié)果分析

馮有才，閆宏，宮麗娜，董興紅，武堅(jiān)銳

(1.山西省兒童醫(yī)院，山西 太原 030013；2.山西醫(yī)科大學(xué)第二醫(yī)院，山西 太原 030013；3.中國(guó)人民武裝警察部隊(duì)總醫(yī)院，北京 100039)

儀器法與鏡檢法檢測(cè)尿液有形成分的結(jié)果分析

馮有才1，閆宏2，宮麗娜3，董興紅1，武堅(jiān)銳1

(1.山西省兒童醫(yī)院，山西 太原 030013；2.山西醫(yī)科大學(xué)第二醫(yī)院，山西 太原 030013；3.中國(guó)人民武裝警察部隊(duì)總醫(yī)院，北京 100039)

目的：對(duì)儀器法和鏡檢法的尿液有形成分檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行對(duì)比，分析可能影響結(jié)果的因素，減少不必要的檢測(cè)誤差，保證檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性、可靠性。方法：選取1 000 例兒科住院患者的尿液樣本，分別采用AX-4030尿干化學(xué)分析儀、UF-1000i尿沉渣分析儀和光學(xué)顯微鏡進(jìn)行尿液有形成分分析。結(jié)果：在紅細(xì)胞和白細(xì)胞陽(yáng)性檢出率方面，AX-4030與鏡檢法存在差異，UF-1000i和鏡檢法比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。UF-1000i和鏡檢法對(duì)管型的陽(yáng)性檢出率存在差異。結(jié)論：影響儀器法檢測(cè)結(jié)果的因素很多，當(dāng)尿干化學(xué)儀和尿沉渣分析儀檢測(cè)結(jié)果不一致時(shí)，必須按照相應(yīng)的方法進(jìn)行鏡檢。

尿液有形成分；尿干化學(xué)分析儀；尿沉渣分析儀；尿沉渣鏡檢

尿液有形成分分析是臨床尿常規(guī)檢測(cè)項(xiàng)目的重要組成部分，對(duì)于泌尿系統(tǒng)疾病的診斷和鑒別診斷，以及健康普查都具有重要的參考價(jià)值[1]。全自動(dòng)尿液分析儀是目前應(yīng)用最為廣泛的尿液有形成分分析方法，具有快速、操作方便以及敏感性好等特點(diǎn)。但由于尿液標(biāo)本本身具有多樣性、復(fù)雜性且干擾因素多，以及儀器自身的局限性，常導(dǎo)致一些假陽(yáng)性或假陰性的出現(xiàn)。傳統(tǒng)的顯微鏡鏡檢是目前尿液檢查的金標(biāo)準(zhǔn)[2]，可直接識(shí)別和鑒定尿液中的有形成分，但操作繁瑣、費(fèi)時(shí)。本研究對(duì)儀器法與顯微鏡的檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行比較，分析可能影響儀器法檢測(cè)結(jié)果的相關(guān)因素，減少不必要的檢測(cè)誤差，保證檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性、可靠性。報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

隨機(jī)選取2016年1月—5月兒科住院患者1 000 例，其中男535 例，女465 例，年齡2～17 歲。

1.2 儀器與試劑

AX-4030尿干化學(xué)分析儀、UF-1000i尿沉渣分析儀及配套試劑和校準(zhǔn)物、質(zhì)控品均購(gòu)自Sysmex公司，CX31光學(xué)顯微鏡購(gòu)自O(shè)lympus公司，水平離心機(jī)、離心管及計(jì)數(shù)板等均為國(guó)產(chǎn)。

1.3 方法

1.3.1 儀器法

嚴(yán)格按照儀器說(shuō)明書和操作手冊(cè)進(jìn)行檢測(cè)。儀器應(yīng)保證每年校準(zhǔn)2次，每天開(kāi)機(jī)后先做質(zhì)控，確保質(zhì)控結(jié)果在控。檢測(cè)流程控制在2 h內(nèi)完成，并記錄測(cè)定結(jié)果。

1.3.2 鏡檢法

取新鮮尿液標(biāo)本3 mL，1 500 r/min 離心5 min，棄上清液，留取沉渣200 μL，混勻后吸15 μL滴入計(jì)數(shù)板。先于低倍鏡下連續(xù)計(jì)數(shù)至少20個(gè)視野中管型數(shù)，再于高倍鏡下連續(xù)計(jì)數(shù)至少10個(gè)視野中紅細(xì)胞和白細(xì)胞數(shù)。

1.4 判斷標(biāo)準(zhǔn)

AX-4030：以干化學(xué)儀判定的陰、陽(yáng)性為準(zhǔn)。UF-1000i：紅細(xì)胞為0～25/μL，白細(xì)胞為0～12/μL，管型為0～2/μL，大于正常值為陽(yáng)性。鏡檢結(jié)果根據(jù)《全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》標(biāo)準(zhǔn)：紅細(xì)胞大于3個(gè)/HP，白細(xì)胞大于5個(gè)/HP，管型大于1個(gè)/LP為陽(yáng)性判斷標(biāo)準(zhǔn)。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS19.0軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行數(shù)據(jù)處理與分析。組間比較采用χ2檢驗(yàn)，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 紅細(xì)胞檢測(cè)結(jié)果

在陽(yáng)性檢出率方面，AX-4030與鏡檢法存在差異(χ2=23.47，P<0.01)，UF-1000i和鏡檢法基本一致，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=0.97，P>0.05)。AX-4030和UF-1000i結(jié)果不一致者87 例，經(jīng)過(guò)鏡檢，確認(rèn)陽(yáng)性樣本9 例，陽(yáng)性率10.34%(見(jiàn)表1)。

表1 三種方法對(duì)紅細(xì)胞、白細(xì)胞和管型的檢測(cè)結(jié)果 例

2.2 白細(xì)胞檢測(cè)結(jié)果

在陽(yáng)性檢出率方面，AX-4030與鏡檢法存在差異(χ2=19.17，P<0.01)，UF-1000i和鏡檢法基本一致，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=0.54，P>0.05)。AX-4030和UF-1000i不一致結(jié)果者142 例，經(jīng)過(guò)鏡檢確認(rèn)陽(yáng)性27 例，陽(yáng)性率19.01%(見(jiàn)表1)。

2.3 管型檢測(cè)結(jié)果

UF-1000i和鏡檢法對(duì)管型的陽(yáng)性檢出率存在差異(χ2=10.75，P<0.01)(見(jiàn)表1)。106 例UF-1000i檢出陽(yáng)性中，鏡檢確認(rèn)65 例，準(zhǔn)確率為61.32%。

3 討 論

尿液有形成分檢測(cè)在臨床多種疾病的診療過(guò)程中起著非常重要的作用，目前常用的方法有尿干化學(xué)法、尿沉渣法和顯微鏡鏡檢法等。自動(dòng)化儀器的使用給尿液臨床檢測(cè)帶來(lái)了極大的便利，可快速簡(jiǎn)便地為臨床提供結(jié)果，但是每一種儀器和檢測(cè)方法都有其自身的優(yōu)點(diǎn)和局限性。采用不同的檢測(cè)方法對(duì)同一份尿液樣本進(jìn)行檢查，在最終的結(jié)果判讀方面有可能出現(xiàn)一定的差異，這給臨床醫(yī)生的判讀帶來(lái)困難[3]。本研究提示在尿液有形成分的檢測(cè)中AX-4030，UF-1000i和鏡檢法的結(jié)果之間存在差異。

本研究AX-4030尿干化學(xué)儀紅細(xì)胞陽(yáng)性檢出率為33.60%(336/1 000)高于UF-1000i尿沉渣儀和鏡檢法。AX-4030采用理化原理，通過(guò)檢測(cè)血紅蛋白來(lái)提示紅細(xì)胞的存在，即使破碎的紅細(xì)胞也會(huì)被檢測(cè)出來(lái)，而顯微鏡鏡檢只能檢測(cè)完整的紅細(xì)胞。當(dāng)尿液放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)或保存不當(dāng)?shù)纫蛩卮嬖跁r(shí)，就會(huì)出現(xiàn)尿干化學(xué)檢測(cè)結(jié)果陽(yáng)性，而鏡檢為陰性的情況。另外，當(dāng)患者尿液中含有對(duì)熱不穩(wěn)定的酶或肌紅蛋白尿、菌尿時(shí)，也可引起紅細(xì)胞干化學(xué)法檢測(cè)結(jié)果的假陽(yáng)性。所以干化學(xué)法與鏡檢法的符合率存在著一定的差異。UF-1000i采用流式細(xì)胞術(shù)和核酸熒光染色技術(shù)，對(duì)尿液有形成分直接作熒光色素等染色后，根據(jù)散射光和熒光的強(qiáng)弱對(duì)不同性質(zhì)有形成分進(jìn)行分類計(jì)數(shù)，其紅細(xì)胞陽(yáng)性檢出率與鏡檢法差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=0.97，P>0.05)。

本研究AX-4030和UF-1000i紅細(xì)胞檢測(cè)結(jié)果不一致87 例，鏡檢確認(rèn)陽(yáng)性9 例，陽(yáng)性率為10.34%。有研究[4]認(rèn)為，當(dāng)尿液標(biāo)本中含有微生物、結(jié)晶、精子、上皮細(xì)胞等成分時(shí)，會(huì)導(dǎo)致UF-1000i誤判為紅細(xì)胞，而AX-4030結(jié)果為陰性；當(dāng)尿液中有紅細(xì)胞碎片或影紅細(xì)胞時(shí)，由于其細(xì)胞膜不完整，導(dǎo)致熒光染色敏感度下降，也會(huì)造成UF-1000i陰性而AX-4030陽(yáng)性的情況。本研究顯微鏡鏡檢結(jié)果提示在尿液中含有酵母菌、草酸鈣結(jié)晶時(shí)，采用UF-1000i檢測(cè)時(shí)，應(yīng)同時(shí)結(jié)合其散點(diǎn)圖和直方圖進(jìn)行分析。

本研究AX-4030檢出率白細(xì)胞陽(yáng)性檢出率為15.30%(153/1 000)，低于UF-1000i和鏡檢法。AX-4030尿干化學(xué)儀采用白細(xì)胞酯酶法來(lái)進(jìn)行白細(xì)胞檢測(cè)，這種特異性酯酶只存在于中性粒細(xì)胞中，而在淋巴細(xì)胞和粒細(xì)胞中缺失，如果患者的尿液中只含有淋巴細(xì)胞或單核細(xì)胞時(shí)，就會(huì)出現(xiàn)假陰性的結(jié)果，使檢測(cè)的敏感度受到影響。本研究結(jié)果顯示，UF-1000i和鏡檢法陽(yáng)性檢出率基本一致，具有較高的參考價(jià)值。AX-4030和UF-1000i不一致結(jié)果142 例，鏡檢確認(rèn)陽(yáng)性27 例，陽(yáng)性率19.01%。這可能與尿液中白細(xì)胞被破壞或尿液主要成分以單個(gè)核細(xì)胞為主有關(guān)[5]。在UF-1000i的檢測(cè)中，造成白細(xì)胞檢測(cè)假陽(yáng)性的主要因素包括小圓上皮、細(xì)菌、扁平上皮和脂肪滴等。

本研究中，106 例UF-1000i檢出管型陽(yáng)性中，經(jīng)鏡檢確認(rèn)65 例，準(zhǔn)確率僅為61.32%。提示UF-1000i提供管型陽(yáng)性結(jié)果時(shí)，必須結(jié)合鏡檢復(fù)檢，以免引起臨床不必要的誤診。UF-1000i管型的假陽(yáng)性率高，且不能將病理管型進(jìn)一步分類，這可能與尿液中黏液絲、上皮細(xì)胞的存在有關(guān)[6]。

綜上所述，儀器法和鏡檢法在檢測(cè)尿液中有形成分時(shí)存在一定的差異，各有利弊。尿干化學(xué)儀和尿沉渣儀的聯(lián)合使用，不能完全取代傳統(tǒng)的顯微鏡檢查，只能起到初篩作用。鏡檢法具有儀器法不可替代的作用，它能對(duì)儀器法產(chǎn)生的假陽(yáng)性和假陰性結(jié)果起到糾正作用。因此，在臨床尿液檢測(cè)中應(yīng)將3種方法有機(jī)地結(jié)合在一起，在干化學(xué)與沉渣結(jié)果不一致時(shí)，一定要嚴(yán)格把關(guān)，以鏡檢為標(biāo)準(zhǔn)，確保檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。

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(本文編輯：王作利 )

佘凱(1966— )，女，湖南省桃源縣人，學(xué)士學(xué)位，主任醫(yī)師，主要從事超聲診斷及介入治療工作。

1671-8631(2017)02-0128-03

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2016-09-31