• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    [CX2]NaCl脅迫對(duì)萌發(fā)期甜高粱和春小麥生理生化特性的影響

    2017-02-15 19:26:21劉海波魏玉清周維松鄒程
    江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué) 2016年8期
    關(guān)鍵詞:抗氧化酶同工酶春小麥

    劉海波+魏玉清+周維松++鄒程

    摘要:以甜高粱品種M81-E和春小麥品種寧春42號(hào)為試驗(yàn)材料,研究水培條件下5種不同濃度NaCl脅迫(0、50、100、150、200 mmol/L)對(duì)萌發(fā)期甜高粱和春小麥抗氧化酶SOD、POD、CAT、MDA、APX活性,研究有機(jī)滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)可溶性糖、可溶性蛋白、脯氨酸含量變化的影響。研究結(jié)果:(1)NaCl脅迫下甜高粱和春小麥脯氨酸、可溶性糖、可溶性蛋白質(zhì)含量均隨鹽濃度升高而增加;(2)MDA含量與鹽濃度和處理時(shí)間呈正相關(guān),抗氧化酶活性隨鹽濃度升高呈先增加后降低的趨勢(shì),表現(xiàn)為低鹽濃度促進(jìn)、高鹽濃度產(chǎn)生抑制作用;(3)萌發(fā)早期甜高粱同工酶P5條帶消失、S3條帶出現(xiàn),春小麥同工酶P6、S4、S5條帶出現(xiàn)、C1條帶消失;(4)甜高粱與春小麥相比,在低鹽(≤50 mmol/L)脅迫下甜高粱MDA、脯氨酸、可溶性糖含量與對(duì)照差異不顯著,抗氧化酶活性顯著高于對(duì)照。結(jié)果表明,NaCl脅迫下甜高粱、春小麥均能通過(guò)調(diào)整自身有機(jī)滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)、保護(hù)酶活性來(lái)保證細(xì)胞膜的完整性,維持細(xì)胞正常代謝,其中甜高粱表現(xiàn)出較強(qiáng)的耐鹽性;同時(shí)在鹽脅迫早期,甜高粱主要通過(guò)調(diào)控POD、SOD基因表達(dá)來(lái)提高其耐鹽性,而春小麥主要通過(guò)POD、SOD、CAT基因表達(dá)來(lái)調(diào)控。

    關(guān)鍵詞:甜高粱;春小麥;丙二醛;滲透調(diào)節(jié)物質(zhì);抗氧化酶;同工酶

    中圖分類(lèi)號(hào): S514.01;S512.1+20.1文獻(xiàn)標(biāo)志碼:

    土壤鹽漬化嚴(yán)重影響農(nóng)業(yè)生產(chǎn)和生態(tài)環(huán)境,成為阻礙農(nóng)牧業(yè)快速發(fā)展的因素之一。鹽漬化土壤目前廣泛分布于全世界100多個(gè)國(guó)家和地區(qū),中國(guó)是世界鹽堿地大國(guó),各類(lèi)鹽漬土面積約3.46×107 hm2,耕地鹽堿化面積7.6×106 hm2,約占總耕地面積的1/5。隨著干旱頻繁發(fā)生、化肥使用和灌溉農(nóng)業(yè)的發(fā)展,次生鹽堿地面積還在逐年擴(kuò)大[1]。隨著我國(guó)工業(yè)化進(jìn)程不斷發(fā)展,耕地資源日漸匱乏。鹽漬化土地作為潛在土地資源受到各國(guó)科學(xué)家的重視。甜高粱作為新興的糖料、飼料和綠色能源作物,具有抗旱、耐澇、耐鹽的優(yōu)良特性[2],因此鹽堿地種植甜高粱得到大力推廣,為此研究甜高粱抗鹽性機(jī)制顯的十分重要。鹽脅迫降低土壤溶液水勢(shì),對(duì)植物造成滲透脅迫,可引發(fā)膜質(zhì)過(guò)氧化作用,其中脂質(zhì)氧化終產(chǎn)物丙二醛(MDA)在體外影響線粒體呼吸鏈復(fù)合物及線粒體內(nèi)關(guān)鍵酶活性,MDA是膜脂過(guò)氧化最重要的產(chǎn)物之一,可通過(guò)MDA了解膜脂過(guò)氧化的程度,以間接測(cè)定膜系統(tǒng)受損程度以及植物的抗逆性;植物體為克服吸水困難,可通過(guò)調(diào)節(jié)滲透物質(zhì)如蛋白質(zhì)、可溶性糖、脯氨酸等調(diào)節(jié)細(xì)胞的滲透勢(shì),維持細(xì)胞膜和細(xì)胞結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定;同時(shí)鹽脅迫對(duì)植物有明顯的毒害與脅變作用,使植物體內(nèi)活性氧自由基大量積累,破壞膜結(jié)構(gòu),引起蛋白質(zhì)和核酸等生物大分子變性,也能引起DNA結(jié)構(gòu)的定位損傷[3]。在長(zhǎng)期進(jìn)化過(guò)程中,為了適應(yīng)逆境脅迫,植物體形成了主要包括過(guò)氧化物酶(POD)、過(guò)氧化氫酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)、抗壞血酸過(guò)氧化物酶(APX)等重要保護(hù)酶的酶促防御體系,它們能有效清除活性氧自由基,對(duì)于保護(hù)植物免遭逆境傷害有重要作用[4-5]。同工酶是指催化功能相同而結(jié)構(gòu)及理化性質(zhì)不同的一組特異性蛋白質(zhì),其酶譜差異主要由基因決定[6-7]。同工酶是基因表達(dá)的直接產(chǎn)物,具有較高的穩(wěn)定性,可以直觀地反映出品種間的基因差異,同工酶酶譜資料可作為物種鑒定以及研究植物分類(lèi)、進(jìn)化、遺傳與變異的重要指標(biāo)[8-9]。同工酶不僅與個(gè)體發(fā)育有關(guān),也與對(duì)不同環(huán)境條件的適應(yīng)抵抗能力有關(guān)。相關(guān)研究表明,植物在遭受逆境脅迫時(shí),體內(nèi)一些酶的同工酶會(huì)發(fā)生變化[10]。

    本試驗(yàn)以甜高粱、春小麥為材料,對(duì)其萌發(fā)期鹽脅迫下丙二醛含量,有機(jī)滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)可溶性糖、可溶性蛋白、脯氨酸含量,抗氧化酶SOD、POD、CAT、APX活性,抗氧化酶同工酶進(jìn)行了比較研究,希望通過(guò)與春小麥的比較研究,鹽脅迫下甜高粱植株獨(dú)特的滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)變化規(guī)律和抗氧化酶系統(tǒng)的響應(yīng)機(jī)制,為探索甜高粱耐鹽的生理生化機(jī)制提供理論依據(jù)。

    1材料與方法

    1.1材料

    選用耐鹽性甜高粱M81-E,遼寧省農(nóng)業(yè)科學(xué)院高粱研究中心提供;春小麥寧春42號(hào),北方民族大學(xué)生物科學(xué)與工程學(xué)院提供。

    1.2方法

    1.2.1種子預(yù)處理選擇籽粒圓潤(rùn)飽滿(mǎn)、成熟無(wú)病害、大小一致的甜高粱和春小麥種子,蒸餾水清洗數(shù)次,用10%的次氯酸鈉溶液消毒20 min,蒸餾水沖洗5次,25 ℃蒸餾水中黑暗浸種吸脹4 h。

    1.2.2種子培養(yǎng)用蒸餾水將NaCl分別配制成4種不同鹽濃度溶液,分別為T(mén)1(50 mmol/L)、T2(100 mmol/L)、T3(150 mmol/L)、T4(200 mmol/L),以蒸餾水為對(duì)照。將吸脹后的種子置于放有2層濾紙直徑為12 cm的玻璃培養(yǎng)皿中。每個(gè)培養(yǎng)皿放置30粒種子,分別加入蒸餾水及4種不同濃度NaCl溶液10 mL,重復(fù)3次,置于人工氣候箱中培養(yǎng)催芽,晝—夜溫度為28 ℃—25 ℃,濕度60%,及時(shí)補(bǔ)充溶液。

    1.3測(cè)定方法

    1.3.1酶液的制取稱(chēng)取0.5 g鮮葉,冰浴條件下加 0.1 mol/L Tris-HCl緩沖液(pH值8.0,每100 mL內(nèi)含半胱氨酸0.073 g、維生素C 0.105 g、EDTA-Na2 0.075 g、甘油 10 mL、1 mol/L HCl 5.84 mL)2 mL,研磨至勻漿,然后在低溫冷凍離心機(jī)中4 ℃、13 000 r/min 離心20 min,上清液即為酶提取液。

    1.3.2生理指標(biāo)測(cè)定分別于萌發(fā)后3、5、7 d取胚芽進(jìn)行各項(xiàng)指標(biāo)的測(cè)定,重復(fù)3次。丙二醛含量測(cè)定采用硫代巴比妥酸(TBA)比色法;脯氨酸含量測(cè)定采用酸性茚三酮法;可溶性糖含量測(cè)定采用蒽酮法;超氧化物歧化酶活性測(cè)定采用氮藍(lán)四唑(NBT)光還原法,以抑制NBT光還原的50%作為一個(gè)酶活單位(U);過(guò)氧化物酶活性測(cè)定采用愈創(chuàng)木酚顯色法,以每分鐘內(nèi)D470 nm變化為1個(gè)過(guò)氧化物酶活力單位(U);過(guò)氧化氫酶活性測(cè)定采用紫外吸收比色法,以每分鐘內(nèi)D240 nm變化0.01為1個(gè)酶活力單位(U);抗壞血酸過(guò)氧化物酶活性測(cè)定參考孫云的方法[11],以每分鐘氧化1 μmol AsA的酶量作為1個(gè)酶活性單位(U);可溶性蛋白含量測(cè)定采用考馬斯亮藍(lán)法。

    1.3.3同工酶分析對(duì)萌發(fā)后3 d的甜高粱、春小麥胚芽采用垂直平板聚丙烯酰胺凝膠電泳(PAGE)進(jìn)行同工酶分析,分離膠濃度CAT為7.5%,POD、SOD、APX為10%,濃縮膠濃度為3%。 SOD同工酶染色采用四氮哇藍(lán)(NBT)法[12]染色;POD同工酶染色采用聯(lián)苯胺法[12]染色;CAT同工酶染色采用淀粉法[13]染色;APX同工酶染色參考邵巍等的方法[14-15]。

    1.4數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)

    凝膠板染色后立即照相,根據(jù)膠板計(jì)算遷移率,遷移率=固定染色后凝膠中酶蛋白區(qū)帶的遷移距離/固定染色中指示劑的遷移距離,然后根據(jù)記錄進(jìn)行分析。

    數(shù)據(jù)采用3個(gè)重復(fù)的“平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤差”,采用SPSS 20.0進(jìn)行數(shù)據(jù)分析,用Photoshop CS 2.0、GraphPad Prism 5.0 和 Microsoft Excel 2003進(jìn)行數(shù)據(jù)處理與作圖。

    2結(jié)果與分析

    2.1NaCl脅迫對(duì)甜高粱、春小麥萌發(fā)期滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)含量的影響

    2.1.1脯氨酸含量NaCl脅迫下甜高粱脯氨酸含量高于春小麥(圖1-A),說(shuō)明萌發(fā)期甜高粱的耐鹽性強(qiáng)于春小麥。甜高粱脯氨酸含量隨鹽濃度升高呈增加的趨勢(shì),低鹽濃度(50 mmol/L)脅迫下處理組與對(duì)照差異不顯著,中度、重度鹽(≥100 mmol/L)脅迫下處理組與對(duì)照間差異顯著;春小麥脯氨酸含量與甜高粱呈現(xiàn)不同的變化趨勢(shì),春小麥在低鹽(50 mmol/L)脅迫下,脯氨酸含量高出對(duì)照108.93%~77627%,與對(duì)照差異顯著,表明低濃度鹽脅迫下甜高粱未受到傷害。

    2.1.2可溶性糖含量NaCl脅迫下甜高粱、春小麥可溶性糖含量隨鹽濃度升高呈增加的趨勢(shì)(圖1-B),甜高粱在低鹽(50 mmol/L)脅迫下處理組與對(duì)照差異不顯著,中度、重度鹽(≥100 mmol/L)脅迫下,處理組與對(duì)照間差異顯著。春小麥低鹽(50 mmol/L)脅迫下,在脅迫前期處理后3 d處理組與對(duì)照差異不顯著,隨處理時(shí)間延長(zhǎng),脅迫后期處理后5~7 d處理組與對(duì)照差異顯著,表明低濃度鹽脅迫下甜高粱未受到傷害。

    2.1.3可溶性蛋白質(zhì)含量NaCl脅迫下甜高粱、春小麥可溶性蛋白質(zhì)含量隨著處理時(shí)間的延長(zhǎng)而逐漸降低(圖1-C),在脅迫后期處理后7 d,蛋白質(zhì)含量迅速下降,說(shuō)明植株的正常代謝功能失調(diào)。與春小麥相比,甜高粱可溶性蛋白含量下降幅度較低,說(shuō)明甜高粱可溶性蛋白的鹽敏感性較低。甜高粱和春小麥可溶性蛋白含量隨鹽濃度增加而逐漸升高,表明鹽脅迫顯著增加可溶性蛋白含量。

    2.2NaCl脅迫對(duì)萌發(fā)期甜高粱、春小麥MDA含量的影響

    NaCl脅迫下甜高粱、春小麥MDA含量均隨鹽濃度升高呈增加的趨勢(shì)(圖1-D)。低鹽濃度(50 mmol/L)脅迫下處理組與對(duì)照差異不顯著,而春小麥MDA含量顯著高于對(duì)照,說(shuō)明輕度鹽脅迫下,甜高粱耐鹽性強(qiáng)于春小麥。在中度、重度鹽鹽濃度(≥100 mmol/L)脅迫下,隨著脅迫時(shí)間的延長(zhǎng),甜高粱和春小麥MDA含量與對(duì)照均差異顯著,說(shuō)明隨著鹽濃度增加和脅迫時(shí)間的延長(zhǎng),甜高粱和春小麥膜透性受損嚴(yán)重,膜質(zhì)過(guò)氧化加劇,抗逆性下降。

    2.3NaCl脅迫對(duì)甜高粱、春小麥萌發(fā)期抗氧化酶活性的影響

    2.3.1POD活性NaCl脅迫下甜高粱和春小麥POD活性隨鹽濃度升高呈先增加后降低的趨勢(shì)(圖2-A),甜高粱低鹽濃度(50 mmol/L)脅迫下POD活性高出對(duì)照39.8%~161.0%,與對(duì)照差異顯著;春小麥低鹽濃度(50 mmol/L)脅迫與對(duì)照差異不顯著;在中度、重度鹽濃度(≥100 mmol/L)脅迫下,隨著脅迫時(shí)間的延長(zhǎng),甜高粱、春小麥處理組顯著低于對(duì)照,表明低鹽脅迫能顯著增加POD活性,高鹽濃度脅迫抑制POD活性,且甜高粱比春小麥響應(yīng)快。

    2.3.2SOD活性NaCl處理下甜高粱、春小麥SOD活性隨鹽濃度升高而增加(圖2-B),甜高粱低鹽濃度(50 mmol/L)脅迫下CAT活性高出對(duì)照73.36%~171.12%,與對(duì)照差異顯著;春小麥低鹽濃度(50 mmol/L) 脅迫下與對(duì)照差異不顯著,表明鹽脅迫能顯著增加SOD活性,甜高粱比春小麥響應(yīng)較快。

    2.3.3CAT活性NaCl處理下甜高粱、春小麥CAT活性隨鹽濃度增加呈先增加后降低的趨勢(shì)(圖2-C),甜高粱低鹽濃度(50 mmol/L)脅迫下CAT活性高出對(duì)照84.67%~14103%,與對(duì)照差異顯著,春小麥低鹽濃度(50 mmol/L)脅迫下高出對(duì)照13.72%~80.85%,與對(duì)照差異顯著;在中度、重度鹽(≥100 mmol/L)脅迫下,隨著脅迫時(shí)間的延長(zhǎng),甜高粱、春小麥處理組顯著低于對(duì)照,說(shuō)明低濃度鹽脅迫顯著增加CAT活性,中度、重度鹽脅迫抑制CAT活性。

    2.3.4APX活性NaCl處理下甜高粱、春小麥APX活性隨鹽濃度升高呈先增加后降低的趨勢(shì)(圖2-D),甜高粱低鹽濃度[JP3](50 mmol/L)脅迫下APX活性高出對(duì)照27.56%~21305%,

    與對(duì)照差異顯著;春小麥低鹽濃度(50 mmol/L)脅迫下,在脅迫初期處理后3~5 d高出對(duì)照135.76%~14333%,與對(duì)照差異顯著,脅迫后期處理7 d與對(duì)照差異不顯著;在中度、重度鹽濃度(≥100 mmol/L)脅迫下,隨著脅迫時(shí)間的延長(zhǎng),甜高粱、春小麥于脅迫后期處理 7 d 處理組顯著低于對(duì)照;表明低濃度鹽脅迫顯著增加APX活性,中度、重度鹽脅迫抑制APX活性。

    2.4[JP3]NaCl脅迫對(duì)甜高粱、春小麥萌發(fā)期抗氧化酶同工酶的影響

    對(duì)甜高粱、春小麥萌發(fā)第3天進(jìn)行抗氧化同工酶測(cè)定,測(cè)定結(jié)果見(jiàn)圖3。在POD同工酶方面,甜高粱處理組P6、P7、P8、P9條帶與對(duì)照組比較色度加深,P5條帶色度隨處理濃度增加而變淺并逐漸消失;春小麥處理組P2、P3、P6條帶色度與對(duì)照組比較加深,并出現(xiàn)新條帶P9。在SOD同工酶方面,甜高粱處理組S2、S4條帶與對(duì)照組比較色度明顯加深,并出現(xiàn)新條帶S3;春小麥處理組S3條帶色度與對(duì)照組比較變深,并出現(xiàn)新的條帶S4、S5。在 CAT同工酶方面,甜高粱C1、C2條帶在(50 mmol/L)處理下色度最深、寬度最大;春小麥C1條帶在200 mmol/L處理下較對(duì)照顏色淺,C2條帶隨處理濃度增加逐漸消失。在APX同工酶方面,甜高粱A1條帶在 100 mmol/L 處理下色度最深,其他條帶與對(duì)照組比較變化不明顯;春小麥A1、A3條帶顏色隨鹽濃度增加呈先加深后變淺趨勢(shì),在 100 mmol/L 處理下達(dá)最深。

    3討論與結(jié)論

    3.1NaCl脅迫下甜高粱、春小麥有機(jī)滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)含量變化特征

    脯氨酸是植物體內(nèi)重要的滲透調(diào)節(jié)物質(zhì),具有維持細(xì)胞的滲透勢(shì)、防止細(xì)胞脫水、穩(wěn)定并保護(hù)生物大分子的結(jié)構(gòu)等功能,脯氨酸含量的增加是植物適應(yīng)鹽漬環(huán)境的特征之一[16]。本試驗(yàn)結(jié)果表明,甜高粱、春小麥在NaCl脅迫下通過(guò)增加脯氨酸的含量來(lái)保持一定的含水量和膨壓,維持細(xì)胞的正常生理功能,且積累量與脅迫時(shí)間和脅迫程度有關(guān),說(shuō)明甜高粱、春小麥都能有效積累脯氨酸提高抗鹽能力;在低鹽濃度 (≤50 mmol/L) 脅迫下甜高粱脯氨酸含量與對(duì)照無(wú)顯著變化,表明正常生理未受到顯著影響,而春小麥已受到傷害,表明甜高粱耐鹽性強(qiáng)于春小麥。

    可溶性糖是合成其他有機(jī)溶質(zhì)的碳架和能量來(lái)源,同時(shí)對(duì)細(xì)胞膜、原生質(zhì)膠體起穩(wěn)定作用,對(duì)酶類(lèi)起保護(hù)作用[17]??扇苄蕴侵饕诿{迫的中后期才開(kāi)始積累,與其他滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)相比表現(xiàn)出一定的滯后性,但糖的物理化學(xué)性質(zhì)決定了它的滲透調(diào)節(jié)能力高于其他滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)[18]。本試驗(yàn)結(jié)果表明,甜高粱、春小麥在NaCl脅迫下可溶性糖含量升高,且在脅迫后期,處理后7 d不同處理組可溶性糖含量大量增加,表明長(zhǎng)時(shí)間鹽分脅迫狀態(tài)下,可溶性糖在滲透調(diào)節(jié)中起主要作用;同時(shí)在低鹽濃度(≤50 mmol/L)脅迫下甜高粱脯氨酸含量與對(duì)照無(wú)顯著變化,表明甜高粱在低鹽濃度脅迫下正常生理未受到顯著影響。

    可溶性蛋白含量的提高可幫助植物細(xì)胞保持較低的滲透勢(shì)來(lái)抵抗水分脅迫導(dǎo)致的傷害,可溶性蛋白含量的多少是衡量植物總代謝水平的重要指標(biāo)之一[19-20]。本試驗(yàn)結(jié)果與戴凌燕的研究結(jié)果[3]相一致,甜高粱、春小麥的可溶性蛋白含量隨著鹽脅迫程度的加劇呈增加的趨勢(shì)。說(shuō)明在鹽脅迫初期植物體內(nèi)的可溶性蛋白增加以增強(qiáng)滲透調(diào)節(jié)能力,而在鹽脅迫后期,處理后7 d脅迫已超過(guò)其忍耐的閾值,其體內(nèi)蛋白酶活性增加,水解加快,鹽脅迫使RNA轉(zhuǎn)錄和翻譯受到抑制,因而蛋白質(zhì)含量降低。

    3.2NaCl脅迫下甜高粱、春小麥丙二醛含量和保護(hù)酶系統(tǒng)變化特征

    鹽害不僅破壞植物細(xì)胞代謝,而且導(dǎo)致體內(nèi)生理功能發(fā)生改變,自由基增加引發(fā)膜質(zhì)過(guò)氧化作用,而膜質(zhì)過(guò)氧化作用的最終產(chǎn)物之一就是MDA,其含量多少可作為細(xì)胞膜質(zhì)損傷程度的參數(shù)和篩選植物抗逆品種的一個(gè)工具[21-22]。相關(guān)研究表明,鹽脅迫下植物細(xì)胞膜透性增加,耐鹽性較強(qiáng)的植物細(xì)胞膜穩(wěn)定性強(qiáng),膜透性增加較少,所受傷害較低,而耐鹽性弱的植物則相反[23]。鹽脅迫下本試驗(yàn)中甜高粱、春小麥MDA含量變化與姜慧等在甜高粱上的研究結(jié)論[24-26]相一致,表現(xiàn)為隨鹽脅迫程度增加而增加,說(shuō)明鹽脅迫使細(xì)胞膜受到損傷,損傷程度與鹽處理濃度呈正相關(guān);且在低鹽濃度 (≤50 mmol/L) 脅迫下甜高粱MDA與對(duì)照差異不顯著,表明甜高粱細(xì)胞膜質(zhì)未受到損傷,耐鹽性強(qiáng)于春小麥。

    抗氧化酶是植物在逆境條件下防御自由基氧化損傷最重要的酶促系統(tǒng)[27]。SOD、CAT、POD、APX等是植物內(nèi)源的活性氧清除劑,在逆境脅迫下只有保持較高的酶活性才能有效地清除活性氧,減少其對(duì)膜結(jié)構(gòu)和功能的破壞。當(dāng)植物受鹽脅迫后,葉片中生成大量活性氧,SOD、CAT、POD、APX等抗氧化酶活性發(fā)生改變,在一定鹽濃度脅迫下POD活性的增加伴隨著CAT、SOD、APX增加或減少,表明抗氧化酶系統(tǒng)是相互協(xié)調(diào)的[28]。本試驗(yàn)結(jié)果表明,甜高粱、春小麥SOD、CAT、POD、APX活性隨鹽濃度升高呈先增加后降低的趨勢(shì),這與王秀玲等在甜高粱的研究結(jié)果[25]相一致。同時(shí)研究發(fā)現(xiàn),在鹽處理后期,甜高粱、春小麥中SOD、CAT、POD、APX對(duì)鹽分脅迫的響應(yīng)不盡相同,在中度、重度鹽濃度(≥100 mmol/L)脅迫下CAT、POD、APX活性低于CK,而SOD活性高于CK,表明中度、重度鹽脅迫下甜高粱、春小麥細(xì)胞膜雖然受到一定損傷,但未超過(guò)SOD活性的忍耐限度,仍具有較高的活性來(lái)清除氧自由基。在低鹽濃度(≤50 mmol/L)脅迫下SOD、CAT、POD、APX活性均高于CK,說(shuō)明甜高粱、春小麥在鹽脅迫下具有較好的清除活性氧能力,輕度鹽脅迫下主要靠4種抗氧化酶協(xié)同作用來(lái)清除自由基,共同抵御鹽害,在中度、高度鹽脅迫下主要靠SOD清除氧自由基。

    3.3[JP3]NaCl脅迫下甜高粱、春小麥抗氧化酶基因表達(dá)的變化特征

    同工酶作為基因表達(dá)的直接產(chǎn)物,具有很高的穩(wěn)定性,是植物體內(nèi)最活躍的酶之一,其合成和活性始終受到遺傳基因的控制和調(diào)節(jié)。逆境引起基因變異而使酶活性及其結(jié)構(gòu)發(fā)生改變,從而導(dǎo)致同工酶酶譜的變化[29]。本試驗(yàn)結(jié)果,鹽脅迫下甜高粱、春小麥抗氧化酶同工酶的表達(dá)不盡相同,甜高粱同工酶P5條帶消失、S3條帶出現(xiàn),表明甜高粱抗鹽害主要受POD、SOD基因表達(dá)進(jìn)行調(diào)控;春小麥同工酶P6、S4、S5條帶出現(xiàn)、C1條帶消失,表明其抗鹽害主要受POD、CAT、SOD基因表達(dá)進(jìn)行調(diào)控;說(shuō)明鹽脅迫使原來(lái)的一些同工酶合成被阻抑或降解,同時(shí)可能活化了某些基因或增加了某些基因的表達(dá),甚至誘導(dǎo)某些基因產(chǎn)生新的譜帶,預(yù)示著甜高粱、春小麥的抗鹽害受抗氧化酶基因表達(dá)調(diào)控,鹽脅迫濃度是抗鹽害基因啟動(dòng)和增強(qiáng)的誘發(fā)因子。

    綜上所述,甜高粱、春小麥萌發(fā)期生理生化特性與鹽脅迫關(guān)系密切,都能通過(guò)調(diào)整自身有機(jī)滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)來(lái)保證植物正常所需水分;提高保護(hù)酶活性,從而有效防止活性氧對(duì)植株造成的傷害來(lái)保證正常細(xì)胞代謝;同時(shí)甜高粱幼苗在低鹽濃度脅迫下未受到傷害,對(duì)鹽脅迫不敏感,其耐鹽性強(qiáng)于春小麥。鹽脅迫早期,甜高粱主要通過(guò)調(diào)控POD、SOD基因表達(dá)來(lái)提高其抗鹽性,而春小麥主要通過(guò)調(diào)控POD、SOD、CAT基因表達(dá)。

    參考文獻(xiàn):

    [1]王越,趙輝,馬鳳江,等. 鹽堿地與耐鹽堿牧草[J]. 山西農(nóng)業(yè)科學(xué),2006,34(1):55-57.

    [2]高鳳菊,曹鵬鵬,王樂(lè)政,等. 鹽脅迫對(duì)不同類(lèi)型甜高粱種子萌發(fā)的影響[J]. 農(nóng)業(yè)與技術(shù),2011,31(4):19-23.

    [3]戴凌燕. 甜高粱苗期對(duì)蘇打鹽堿脅迫的適應(yīng)性機(jī)制及差異基因表達(dá)分析[D]. 沈陽(yáng):沈陽(yáng)農(nóng)業(yè)大學(xué),2012.

    [4][JP3]張梅,劉君,楊志民,等. 高溫脅迫對(duì)草地早熟禾抗氧化酶活性及其同工酶圖譜的影響[J]. 草地學(xué)報(bào),2014,22(6):1308-1317.

    [5]桑子陽(yáng),馬履一,陳發(fā)菊. 干旱脅迫對(duì)紅花玉蘭幼苗生長(zhǎng)和生理特性的影響[J]. 西北植物學(xué)報(bào),2011,31(1):109-115.

    [6]劉海學(xué),王罡,季靜,等. 16個(gè)向日葵品種過(guò)氧化物酶同工酶分析[J]. 中國(guó)油料作物學(xué)報(bào),2007,29(2):170-173.

    [7]隋益虎,李敏,胡能兵,等. 32份辣椒種質(zhì)遺傳多樣性的同工酶分析[J]. 西北植物學(xué)報(bào),2014,34(5):908-914.

    [8]呂維紅,張文嶺,李巖. 不同采收期黃芩根的四種同工酶電泳研究[J]. 河北中醫(yī)藥學(xué)報(bào),2014,29(4):42-44.

    [9]李巖,董喜存,李文建,等. 碳離子輻照對(duì)甜高粱幼苗保護(hù)酶同工酶表達(dá)的影響[J]. 安徽農(nóng)業(yè)科學(xué),2009,37(35):17440-17441,17444.[ZK)]

    [10]吳藹民,夏正俊,顧本康. 棉花不同生育期SOD同工酶與品種抗黃萎病性相關(guān)性的研究[J]. 棉花學(xué)報(bào),1998,10(2):96-1001.

    [11]孫云. 茶葉抗壞血酸過(guò)氧化物酶(APX)的生理學(xué)與分子生物學(xué)研究[D]. 福州:福建農(nóng)林大學(xué),2009.

    [12]胡能書(shū),萬(wàn)賢國(guó). 同工酶技術(shù)及其應(yīng)用[M]. 長(zhǎng)沙:湖南科學(xué)技術(shù)出版社,1985:73-116.

    [13]趙旌旌,丁寶蓮. 現(xiàn)代植物生理學(xué)實(shí)驗(yàn)指南[M]. 北京:科學(xué)出版社,1999:265-266.

    [14]邵巍,賴(lài)鐘雄,賴(lài)呈純,等. 龍眼胚性培養(yǎng)物APX同工酶的分析方法建立及其在龍眼體胚發(fā)生過(guò)程中的變化[J]. 福建農(nóng)林大學(xué)學(xué)報(bào):自然科學(xué)版,2008,37(2):140-144.

    [15]Mittler R,Zilinskas B A. Detection of ascorbate peroxidase activity in native gels by inhibition of the ascorbate-dependent reduction of nitroblue tetrazolium[J]. Analytical Biochemistry,1993,212(2):540-546.

    [16]田曉艷,劉延吉,郭迎春.鹽脅迫對(duì)NHC牧草Na+、K+、Pro、可溶性糖及可溶性蛋白的影響[J]. 草業(yè)科學(xué),2008,25(10):34-38.

    〖FQ(15*5。54,ZX,DY-W〗[KH*4D]

    [17]劉華,舒孝喜,趙銀,等. 鹽脅迫對(duì)堿茅生長(zhǎng)及碳水化合物含量的影響[J]. 草業(yè)科學(xué),1997,14(1):18-20.

    [18]胡義,胡庭興,陳洪,等. 干旱脅迫及復(fù)水對(duì)香樟幼樹(shù)生理特性及生長(zhǎng)的影響[J]. 西北植物學(xué)報(bào),2015,35(2):294-301.

    [19]羅群,唐自慧,李路娥,等. 干旱脅迫對(duì)9種菊科雜草可溶性蛋白質(zhì)的影響[J]. 四川師范大學(xué)學(xué)報(bào):自然科學(xué)版,2006,29(3):356-359.

    [20]劉惠芬,高玉葆,張強(qiáng),等. 不同種群羊草幼苗對(duì)土壤干旱脅迫的生理生態(tài)響應(yīng)[J]. 南開(kāi)大學(xué)學(xué)報(bào):自然科學(xué)版,2004,37(4):105-110.

    [21]Cavalcanti F R,Oliveira J A,Martins-Miranda A S,et al. Superoxide dismutase,catalase and peroxidase activities do not confer protection against oxidative damage in salt-stressed cowpea leaves[J]. New Phytologist,2004,163(3):563-571.

    [22]何若韞. 植物低溫逆境生理[M]. 北京:中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社,1995.

    [23]王寶山,姚敦義. 鹽脅迫對(duì)沙棗愈傷組織膜透性,膜脂過(guò)氧化和SOD活性的影響[J]. 河北農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào),1993,16(3):20-24.

    [24]姜慧. 甜高粱對(duì)鹽脅迫的生理生化響應(yīng)[D]. 沈陽(yáng):沈陽(yáng)師范大學(xué),2012.

    [25]王秀玲,程序,謝光輝,等. NaCl脅迫對(duì)甜高粱發(fā)芽期生理生化特性的影響[J]. 生態(tài)環(huán)境學(xué)報(bào),2010,19(10):2285-2290.

    [26]馬麗,侯振安,梁永超,等. NaCl脅迫對(duì)棉花幼苗生理特性的影響[J]. 石河子大學(xué)學(xué)報(bào):自然科學(xué)版,2008,26(2):180-184.

    [27]史鵬輝,劉自剛,張亞宏,等. 23份油菜的抗氧化酶特性及過(guò)氧化物同工酶分析[J]. 西北農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào),2014,23(1):113-119.

    [28]陳海燕,崔香菊,陳熙,等. 鹽脅迫及La3+對(duì)不同耐鹽性水稻根中抗氧化酶及質(zhì)膜H+-ATPase的影響[J]. 作物學(xué)報(bào),2007,33(7):1086-1093.

    [29]周瑞蓮,楊淑琴,黃清榮,等. 小葉錦雞兒抗沙埋生長(zhǎng)與抗氧化酶及同工酶變化的關(guān)系[J]. 生態(tài)學(xué)報(bào),2015,35(9):3014-3022.

    猜你喜歡
    抗氧化酶同工酶春小麥
    菌源同工酶分析揭示菌源DPP4同工酶是潛在的抗2型糖尿病靶點(diǎn)
    遺傳(2023年8期)2023-08-25 06:59:00
    早春小麥田間管理抓哪些
    缺糖基轉(zhuǎn)鐵蛋白與線粒體同工酶在酒精性肝病中的臨床應(yīng)用
    西藏春小麥SSR遺傳多樣性分析
    [CX2]NaCl脅迫對(duì)萌發(fā)期甜高粱和春小麥生理生化特性的影響
    低溫脅迫對(duì)不同豇豆品種抗寒性生理特性的影響
    遮陽(yáng)網(wǎng)覆蓋對(duì)枇杷幼果抗寒性影響機(jī)理初探
    春小麥復(fù)種大豆高產(chǎn)栽培技術(shù)
    不同養(yǎng)殖環(huán)境中的中華絨螯蟹組織抗氧化劑水平和抗氧化酶活力
    冬小麥和春小麥
    中學(xué)生(2015年4期)2015-08-31 02:53:50
    日本黄大片高清| 22中文网久久字幕| 成人无遮挡网站| 日韩伦理黄色片| 黄色配什么色好看| 精品久久久噜噜| 国产精品蜜桃在线观看| 在线 av 中文字幕| 久久久久网色| 欧美少妇被猛烈插入视频| 少妇被粗大猛烈的视频| 在线观看av片永久免费下载| 久久女婷五月综合色啪小说 | 狂野欧美激情性bbbbbb| 天天躁日日操中文字幕| av在线天堂中文字幕| 久久久久精品久久久久真实原创| 国产成人精品久久久久久| 高清视频免费观看一区二区| 日日啪夜夜爽| 欧美 日韩 精品 国产| 18禁在线无遮挡免费观看视频| 97超视频在线观看视频| 少妇人妻一区二区三区视频| 麻豆久久精品国产亚洲av| 亚洲经典国产精华液单| 亚洲欧美成人精品一区二区| 九九爱精品视频在线观看| 久久精品国产亚洲网站| 久久久久九九精品影院| 国产综合精华液| 久久人人爽人人爽人人片va| 日本午夜av视频| av网站免费在线观看视频| 99精国产麻豆久久婷婷| 日韩,欧美,国产一区二区三区| 久久久a久久爽久久v久久| 超碰97精品在线观看| 亚洲精品第二区| 亚洲国产最新在线播放| 日日摸夜夜添夜夜爱| 国产一区二区在线观看日韩| 国产永久视频网站| 女人久久www免费人成看片| 人妻一区二区av| 国产伦精品一区二区三区四那| 久久久a久久爽久久v久久| 国产乱来视频区| 热99国产精品久久久久久7| 我要看日韩黄色一级片| 一本—道久久a久久精品蜜桃钙片 精品乱码久久久久久99久播 | 夜夜看夜夜爽夜夜摸| 一个人看视频在线观看www免费| 国产亚洲av片在线观看秒播厂| 国产91av在线免费观看| 亚洲久久久久久中文字幕| 嘟嘟电影网在线观看| 国产中年淑女户外野战色| 亚洲国产最新在线播放| 一级二级三级毛片免费看| 国产视频首页在线观看| 国产一区二区亚洲精品在线观看| 亚洲自偷自拍三级| 成人国产av品久久久| 青春草视频在线免费观看| 少妇人妻精品综合一区二区| av国产精品久久久久影院| 亚洲国产欧美在线一区| 只有这里有精品99| 大话2 男鬼变身卡| 麻豆成人av视频| 精品久久久噜噜| 亚洲av不卡在线观看| 2021少妇久久久久久久久久久| av在线天堂中文字幕| 日韩视频在线欧美| 国产精品一二三区在线看| 日韩一区二区视频免费看| 一区二区av电影网| 永久免费av网站大全| 免费观看在线日韩| 插逼视频在线观看| 国产高清不卡午夜福利| 人妻一区二区av| 亚洲三级黄色毛片| 国产精品麻豆人妻色哟哟久久| av在线app专区| videos熟女内射| 高清毛片免费看| 九九爱精品视频在线观看| 欧美极品一区二区三区四区| 91精品国产九色| 亚洲精品中文字幕在线视频 | 99久久精品热视频| 国产男人的电影天堂91| 欧美另类一区| 69人妻影院| 亚洲婷婷狠狠爱综合网| 久久国内精品自在自线图片| 建设人人有责人人尽责人人享有的 | 国产大屁股一区二区在线视频| 可以在线观看毛片的网站| 九九在线视频观看精品| 久久国产乱子免费精品| 各种免费的搞黄视频| 少妇的逼好多水| 777米奇影视久久| 综合色av麻豆| 国产精品精品国产色婷婷| 成人漫画全彩无遮挡| 高清av免费在线| 国产男人的电影天堂91| xxx大片免费视频| 搡女人真爽免费视频火全软件| 在线观看av片永久免费下载| 日本-黄色视频高清免费观看| 精品酒店卫生间| 日韩,欧美,国产一区二区三区| 免费看不卡的av| 久久精品熟女亚洲av麻豆精品| 丝袜喷水一区| 亚洲久久久久久中文字幕| 韩国高清视频一区二区三区| 国产老妇伦熟女老妇高清| 2021少妇久久久久久久久久久| 国产成人免费无遮挡视频| 五月天丁香电影| 久久99热6这里只有精品| 中文字幕亚洲精品专区| 国产精品国产三级国产专区5o| 免费黄网站久久成人精品| 在线观看一区二区三区激情| 欧美一级a爱片免费观看看| 97超碰精品成人国产| 尾随美女入室| 日韩,欧美,国产一区二区三区| 免费大片黄手机在线观看| 国产精品一区二区三区四区免费观看| 三级男女做爰猛烈吃奶摸视频| 夫妻性生交免费视频一级片| 夜夜看夜夜爽夜夜摸| 午夜福利高清视频| 国内少妇人妻偷人精品xxx网站| 亚洲av欧美aⅴ国产| 男人舔奶头视频| 制服丝袜香蕉在线| 三级男女做爰猛烈吃奶摸视频| 波野结衣二区三区在线| 日本-黄色视频高清免费观看| 男女边摸边吃奶| 国产精品秋霞免费鲁丝片| 免费电影在线观看免费观看| 一本—道久久a久久精品蜜桃钙片 精品乱码久久久久久99久播 | 成年女人在线观看亚洲视频 | 亚洲真实伦在线观看| 精品熟女少妇av免费看| 黄色日韩在线| 精品久久久久久久人妻蜜臀av| 黄色视频在线播放观看不卡| av在线播放精品| 亚洲av.av天堂| 国产黄频视频在线观看| 成人高潮视频无遮挡免费网站| 十八禁网站网址无遮挡 | 国产 一区精品| 欧美日韩视频精品一区| 亚洲自偷自拍三级| 亚洲婷婷狠狠爱综合网| 日韩亚洲欧美综合| 秋霞在线观看毛片| 美女视频免费永久观看网站| 久久久久久久亚洲中文字幕| 免费大片黄手机在线观看| 国产亚洲5aaaaa淫片| 久久精品国产亚洲网站| 国产色爽女视频免费观看| 成人免费观看视频高清| 91aial.com中文字幕在线观看| 一边亲一边摸免费视频| 国产精品久久久久久av不卡| 欧美三级亚洲精品| 18禁裸乳无遮挡免费网站照片| av网站免费在线观看视频| 搞女人的毛片| 看十八女毛片水多多多| 熟女电影av网| 亚洲第一区二区三区不卡| 日本-黄色视频高清免费观看| 日韩一本色道免费dvd| 少妇人妻 视频| 免费av毛片视频| 日韩强制内射视频| av卡一久久| 日韩亚洲欧美综合| 日本黄色片子视频| 乱码一卡2卡4卡精品| 成人美女网站在线观看视频| 高清在线视频一区二区三区| 久久久久久久大尺度免费视频| 国产一级毛片在线| 麻豆精品久久久久久蜜桃| 啦啦啦啦在线视频资源| 少妇 在线观看| 久热久热在线精品观看| 极品少妇高潮喷水抽搐| 99久久精品一区二区三区| 欧美变态另类bdsm刘玥| 日韩国内少妇激情av| 看十八女毛片水多多多| 看十八女毛片水多多多| 日日摸夜夜添夜夜添av毛片| 国产毛片在线视频| 成人免费观看视频高清| 人妻夜夜爽99麻豆av| 亚洲真实伦在线观看| 亚洲伊人久久精品综合| 国产亚洲午夜精品一区二区久久 | 免费黄色在线免费观看| 国产久久久一区二区三区| 五月天丁香电影| 国产 精品1| 免费黄色在线免费观看| 免费看日本二区| 内地一区二区视频在线| 国产久久久一区二区三区| 男女那种视频在线观看| 美女被艹到高潮喷水动态| 老女人水多毛片| 九九爱精品视频在线观看| 亚洲国产精品国产精品| 亚洲人成网站在线观看播放| 亚洲国产日韩一区二区| 黄色日韩在线| 国内少妇人妻偷人精品xxx网站| 国产精品偷伦视频观看了| 26uuu在线亚洲综合色| 精品久久久久久电影网| 欧美精品国产亚洲| 久久久精品94久久精品| 久久人人爽av亚洲精品天堂 | 嫩草影院新地址| 麻豆成人午夜福利视频| 久久精品国产亚洲av天美| 欧美日本视频| 高清午夜精品一区二区三区| 只有这里有精品99| 亚洲自偷自拍三级| 少妇 在线观看| 噜噜噜噜噜久久久久久91| 少妇裸体淫交视频免费看高清| 大片免费播放器 马上看| 久久人人爽人人片av| 国产日韩欧美亚洲二区| 国产精品99久久久久久久久| 国产乱人视频| 黑人高潮一二区| 久久97久久精品| 久久人人爽人人片av| 另类亚洲欧美激情| 国产高潮美女av| 99久久精品热视频| 欧美一区二区亚洲| 国产精品嫩草影院av在线观看| 欧美 日韩 精品 国产| 欧美一级a爱片免费观看看| 久久鲁丝午夜福利片| 日韩人妻高清精品专区| 777米奇影视久久| 亚洲最大成人av| 精品久久久精品久久久| 美女高潮的动态| 80岁老熟妇乱子伦牲交| 国产有黄有色有爽视频| 99精国产麻豆久久婷婷| 色网站视频免费| 国产精品国产av在线观看| 精品熟女少妇av免费看| 久久久午夜欧美精品| 九色成人免费人妻av| 少妇猛男粗大的猛烈进出视频 | 丝瓜视频免费看黄片| 在线精品无人区一区二区三 | 天天躁夜夜躁狠狠久久av| 成人特级av手机在线观看| 偷拍熟女少妇极品色| 国模一区二区三区四区视频| 亚洲人与动物交配视频| 狠狠精品人妻久久久久久综合| 亚洲图色成人| 国产精品国产av在线观看| 国产成人精品福利久久| 最近中文字幕2019免费版| 久久久亚洲精品成人影院| 哪个播放器可以免费观看大片| 国国产精品蜜臀av免费| 最近中文字幕高清免费大全6| 久久久久九九精品影院| 久久久久国产精品人妻一区二区| 91精品国产九色| 日韩视频在线欧美| 亚洲欧美日韩东京热| 亚洲第一区二区三区不卡| 国产真实伦视频高清在线观看| av又黄又爽大尺度在线免费看| 综合色丁香网| 久久久色成人| 男女那种视频在线观看| 亚洲无线观看免费| 欧美精品一区二区大全| 日韩不卡一区二区三区视频在线| 日韩强制内射视频| 国内精品宾馆在线| 中文字幕人妻熟人妻熟丝袜美| 女人久久www免费人成看片| 成人毛片a级毛片在线播放| 九色成人免费人妻av| 777米奇影视久久| 日韩强制内射视频| 日韩亚洲欧美综合| 午夜精品一区二区三区免费看| 精品熟女少妇av免费看| av免费观看日本| 一二三四中文在线观看免费高清| 建设人人有责人人尽责人人享有的 | 免费在线观看成人毛片| 在线观看一区二区三区激情| 国产成人一区二区在线| 久久热精品热| 国产亚洲午夜精品一区二区久久 | 女人久久www免费人成看片| 国产精品无大码| av一本久久久久| 麻豆精品久久久久久蜜桃| 天天一区二区日本电影三级| 熟女电影av网| 免费观看a级毛片全部| 欧美性感艳星| 简卡轻食公司| 日韩电影二区| 国产男女超爽视频在线观看| 自拍偷自拍亚洲精品老妇| 精品午夜福利在线看| 五月天丁香电影| 午夜免费男女啪啪视频观看| 国产精品成人在线| 国产精品秋霞免费鲁丝片| 久久午夜福利片| tube8黄色片| 国产有黄有色有爽视频| 亚洲真实伦在线观看| 成人亚洲欧美一区二区av| 精品久久国产蜜桃| 午夜精品国产一区二区电影 | 日本黄大片高清| 国产精品人妻久久久影院| 久久久久精品性色| 免费av观看视频| 3wmmmm亚洲av在线观看| 久久午夜福利片| 精品一区二区三卡| 日韩av不卡免费在线播放| 免费大片18禁| 久热久热在线精品观看| 成人毛片a级毛片在线播放| 久久99热这里只频精品6学生| 尤物成人国产欧美一区二区三区| 一二三四中文在线观看免费高清| 国产淫片久久久久久久久| 精品亚洲乱码少妇综合久久| 日本熟妇午夜| 免费看a级黄色片| 国产精品三级大全| 热99国产精品久久久久久7| 极品少妇高潮喷水抽搐| 色综合色国产| 看非洲黑人一级黄片| 超碰av人人做人人爽久久| 最近的中文字幕免费完整| 亚洲av成人精品一区久久| 亚洲成人av在线免费| 久久精品久久久久久噜噜老黄| 18禁在线播放成人免费| 少妇 在线观看| 国产精品国产av在线观看| 亚洲成人精品中文字幕电影| 99九九线精品视频在线观看视频| 在线免费观看不下载黄p国产| av在线亚洲专区| 亚洲av男天堂| 亚洲精品国产av成人精品| 成年av动漫网址| 岛国毛片在线播放| 亚洲精品日韩av片在线观看| 免费大片18禁| av女优亚洲男人天堂| 亚洲av成人精品一二三区| 久久99热这里只频精品6学生| 久久久久久久国产电影| 内射极品少妇av片p| 亚洲天堂av无毛| 观看美女的网站| 久热久热在线精品观看| 色综合色国产| 亚洲美女视频黄频| 亚洲婷婷狠狠爱综合网| 极品少妇高潮喷水抽搐| 成年女人看的毛片在线观看| 五月玫瑰六月丁香| 在线 av 中文字幕| 男女无遮挡免费网站观看| 两个人的视频大全免费| 精品久久久久久久久av| 亚洲成人久久爱视频| 成年女人在线观看亚洲视频 | 一边亲一边摸免费视频| 久久精品夜色国产| 91精品一卡2卡3卡4卡| 久久99蜜桃精品久久| av国产精品久久久久影院| 蜜桃久久精品国产亚洲av| 波野结衣二区三区在线| 丰满人妻一区二区三区视频av| 一级毛片我不卡| 国产成人精品一,二区| 午夜福利高清视频| 91久久精品国产一区二区三区| 久久精品国产亚洲网站| 久久久久久久久久成人| av免费观看日本| 亚洲最大成人av| 欧美极品一区二区三区四区| av福利片在线观看| 亚洲精品国产成人久久av| 日韩一区二区三区影片| 亚洲性久久影院| 99热国产这里只有精品6| 成人无遮挡网站| 精品一区二区三卡| 亚洲真实伦在线观看| 亚洲,一卡二卡三卡| 观看免费一级毛片| 永久免费av网站大全| 超碰av人人做人人爽久久| 国产91av在线免费观看| 国产精品久久久久久久电影| 啦啦啦在线观看免费高清www| 亚洲精品日本国产第一区| 另类亚洲欧美激情| 久久99精品国语久久久| 久久99热这里只频精品6学生| 亚洲精品一区蜜桃| 天天躁夜夜躁狠狠久久av| 久久综合国产亚洲精品| 亚洲国产精品国产精品| 边亲边吃奶的免费视频| 最近中文字幕高清免费大全6| 精品人妻一区二区三区麻豆| 亚洲精品亚洲一区二区| av又黄又爽大尺度在线免费看| av女优亚洲男人天堂| 高清视频免费观看一区二区| av免费在线看不卡| 少妇 在线观看| 国产白丝娇喘喷水9色精品| 2018国产大陆天天弄谢| 美女视频免费永久观看网站| 肉色欧美久久久久久久蜜桃 | 男人和女人高潮做爰伦理| 人人妻人人看人人澡| 欧美bdsm另类| 国产人妻一区二区三区在| 欧美日韩综合久久久久久| 又粗又硬又长又爽又黄的视频| 国产精品三级大全| 亚洲天堂国产精品一区在线| 精华霜和精华液先用哪个| 亚洲欧美中文字幕日韩二区| 成人鲁丝片一二三区免费| 亚洲国产成人一精品久久久| 国产老妇女一区| 亚洲精品国产成人久久av| 久久精品国产鲁丝片午夜精品| 成人毛片60女人毛片免费| 免费大片18禁| 又黄又爽又刺激的免费视频.| 久久久午夜欧美精品| 欧美xxxx黑人xx丫x性爽| 午夜免费观看性视频| 黑人高潮一二区| 内地一区二区视频在线| 大话2 男鬼变身卡| 久久久色成人| 国产av码专区亚洲av| 少妇裸体淫交视频免费看高清| 国产免费又黄又爽又色| 菩萨蛮人人尽说江南好唐韦庄| 人妻系列 视频| 九九在线视频观看精品| 少妇裸体淫交视频免费看高清| 又黄又爽又刺激的免费视频.| 少妇被粗大猛烈的视频| 熟女人妻精品中文字幕| 全区人妻精品视频| 91在线精品国自产拍蜜月| 国产欧美日韩精品一区二区| 一区二区av电影网| 99热全是精品| 国产免费一级a男人的天堂| 91精品伊人久久大香线蕉| 人人妻人人看人人澡| 免费av毛片视频| 国产精品久久久久久久久免| 22中文网久久字幕| 18禁在线无遮挡免费观看视频| 99re6热这里在线精品视频| 免费不卡的大黄色大毛片视频在线观看| 久久精品久久久久久久性| 日韩人妻高清精品专区| 亚洲最大成人手机在线| 免费大片黄手机在线观看| 国产亚洲最大av| 天堂网av新在线| 免费av毛片视频| 国产欧美日韩一区二区三区在线 | 人人妻人人看人人澡| 日韩大片免费观看网站| 亚洲精品中文字幕在线视频 | 日韩三级伦理在线观看| 亚洲国产成人一精品久久久| 国产乱人视频| 国产亚洲av嫩草精品影院| 久久鲁丝午夜福利片| 国产成人精品婷婷| 直男gayav资源| 国产一区二区在线观看日韩| 欧美xxxx性猛交bbbb| 寂寞人妻少妇视频99o| 国产成人a∨麻豆精品| av在线亚洲专区| 国产高清国产精品国产三级 | 免费少妇av软件| 又大又黄又爽视频免费| 王馨瑶露胸无遮挡在线观看| 秋霞伦理黄片| 免费电影在线观看免费观看| 天堂俺去俺来也www色官网| 欧美精品一区二区大全| 2018国产大陆天天弄谢| 啦啦啦啦在线视频资源| 国产乱人视频| 校园人妻丝袜中文字幕| 真实男女啪啪啪动态图| 69人妻影院| 亚洲精品第二区| 亚洲国产高清在线一区二区三| 亚洲aⅴ乱码一区二区在线播放| 久久久欧美国产精品| 亚州av有码| av黄色大香蕉| 2021天堂中文幕一二区在线观| 黄色视频在线播放观看不卡| 午夜福利在线观看免费完整高清在| 王馨瑶露胸无遮挡在线观看| 久久鲁丝午夜福利片| 美女xxoo啪啪120秒动态图| 免费人成在线观看视频色| 久久精品久久久久久噜噜老黄| 成人二区视频| 国产精品福利在线免费观看| 日韩一区二区三区影片| 日韩av不卡免费在线播放| 久久久色成人| 亚洲国产高清在线一区二区三| 一区二区三区免费毛片| 国产白丝娇喘喷水9色精品| 91在线精品国自产拍蜜月| 欧美人与善性xxx| 偷拍熟女少妇极品色| 国产毛片在线视频| 欧美性猛交╳xxx乱大交人| 97超碰精品成人国产| 丰满乱子伦码专区| 成人欧美大片| 九色成人免费人妻av| 国产成人a区在线观看| 久久久久久久久大av| 国产乱人偷精品视频| 久久99热这里只有精品18| 亚洲精品一区蜜桃| 搡女人真爽免费视频火全软件| 如何舔出高潮| 日韩欧美精品v在线| 亚洲精品456在线播放app| av免费观看日本| 特大巨黑吊av在线直播| 国产真实伦视频高清在线观看| 久久99热6这里只有精品| 2021天堂中文幕一二区在线观| 久久精品久久久久久久性| 国产精品成人在线| 午夜激情福利司机影院| 日韩av不卡免费在线播放| 国产中年淑女户外野战色| 亚洲精品久久久久久婷婷小说| 人妻系列 视频| 欧美日韩在线观看h| 如何舔出高潮| 成人国产麻豆网| 精品人妻一区二区三区麻豆| 99热网站在线观看| 乱码一卡2卡4卡精品| 男女边吃奶边做爰视频| 久久亚洲国产成人精品v| 国产高清有码在线观看视频| 老司机影院毛片|