改良脊髓半橫斷損傷大鼠模型的建立及評(píng)價(jià)

孫德日，胡慧媛，朱悅

（中國(guó)醫(yī)科大學(xué)1.附屬第四醫(yī)院骨科，沈陽(yáng) 110032；2.藥學(xué)院藥物毒理學(xué)教研室，沈陽(yáng) 110122；3.附屬第一醫(yī)院骨科，沈陽(yáng) 110001）

改良脊髓半橫斷損傷大鼠模型的建立及評(píng)價(jià)

孫德日1，胡慧媛2，朱悅3

（中國(guó)醫(yī)科大學(xué)1.附屬第四醫(yī)院骨科，沈陽(yáng) 110032；2.藥學(xué)院藥物毒理學(xué)教研室，沈陽(yáng) 110122；3.附屬第一醫(yī)院骨科，沈陽(yáng) 110001）

目的 建立一種損傷更小、存活率更高、適用范圍更廣的改良的脊髓半橫斷損傷大鼠模型。方法 將20只雌性Sprague?Dawley大鼠隨機(jī)分為常規(guī)脊髓半橫斷模型組和改良脊髓半橫斷模型組，分別采用常規(guī)和改良的脊髓半橫斷法制備大鼠脊髓損傷模型，分別于術(shù)后1 d、3 d、1周和2周通過(guò)Basso?Beattie?Bresnahan（BBB）運(yùn)動(dòng)功能學(xué)評(píng)分評(píng)價(jià)大鼠后肢運(yùn)動(dòng)功能的恢復(fù)情況，并結(jié)合手術(shù)時(shí)間、術(shù)中出血量、術(shù)中脊髓后正中線定位以及二次手術(shù)顯露脊髓的成功率等主要參數(shù)，比較2組間的差異。結(jié)果 改良脊髓半橫斷模型組較常規(guī)脊髓半橫斷模型組手術(shù)時(shí)間更短，術(shù)中出血量明顯減少，BBB運(yùn)動(dòng)功能學(xué)評(píng)分更優(yōu)，術(shù)中脊髓后正中線定位更準(zhǔn)確，二次手術(shù)顯露脊髓的成功率更高。在改良的脊髓半橫斷模型基礎(chǔ)上，成功建立了脊髓瘢痕組織移植模型，成功率可達(dá)70%以上。結(jié)論 改良的脊髓半橫斷模型在手術(shù)時(shí)間、術(shù)中出血量、運(yùn)動(dòng)功能學(xué)評(píng)分、術(shù)中脊髓后正中線定位及二次手術(shù)顯露脊髓方面均表現(xiàn)出明顯優(yōu)勢(shì)，更適用于脊髓損傷研究，尤其是非急性期脊髓損傷研究。

脊髓損傷；大鼠模型；改良

臨床上脊髓損傷后很難實(shí)現(xiàn)功能恢復(fù)，為闡明其具體的機(jī)制，實(shí)驗(yàn)研究中常選擇動(dòng)物作為主要研究對(duì)象。因此，選擇理想的動(dòng)物模型是開(kāi)展疾病研究的前提。理想的動(dòng)物脊髓損傷模型應(yīng)符合以下條件：臨床相似性高，可調(diào)控性強(qiáng)，操作簡(jiǎn)單，可重復(fù)性好，死亡率低，并發(fā)癥少［1］。目前脊髓損傷研究［2?3］主要采用完全橫斷脊髓損傷模型、半橫斷脊髓損傷模型、重物砸擊脊髓損傷模型、化學(xué)損傷脊髓損傷模型以及缺血性損傷、壓迫損傷、鉗夾及火器傷等脊髓損傷動(dòng)物模型，分別用來(lái)模擬不同條件下的脊髓損傷。不同損傷方法對(duì)脊髓造成的損傷程度有所不同，研究者可以根據(jù)研究目的選擇不同的模型制備方法［4?5］。上述動(dòng)物模型的制備過(guò)程中多數(shù)需要咬除椎板，顯露脊髓，然后再分別進(jìn)行不同的損傷處理［6］。而且主要是在制備脊髓損傷模型的同時(shí)給予干預(yù)措施，這并不符合臨床實(shí)際治療情況。臨床上多數(shù)病例很難有機(jī)會(huì)在脊髓損傷的同時(shí)進(jìn)行治療，所以非急性期脊髓損傷的動(dòng)物模型更接近臨床實(shí)際情況，因此具有重要意義。

本研究在常規(guī)的脊髓半橫斷模型基礎(chǔ)上進(jìn)行了改良，建立了一種損傷更小、存活率更高、適用范圍更廣的改良的大鼠脊髓損傷模型。該模型在手術(shù)時(shí)間、術(shù)中出血量、Basso?Beattie?Bresnahan（BBB）運(yùn)動(dòng)功能學(xué)評(píng)分、術(shù)中脊髓后正中線定位及二次手術(shù)顯露脊髓成功率方面均表現(xiàn)出明顯的優(yōu)勢(shì)，取得了較為滿(mǎn)意的結(jié)果。本研究建立的改良的大鼠脊髓損傷模型更適用于脊髓損傷研究，尤其是非急性期脊髓損傷研究。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物、試劑及手術(shù)器材

清潔級(jí)健康成年雌性Sprague?Dawley大鼠，體質(zhì)量200～250 g，由中國(guó)醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物部提供。戊巴比妥鈉（美國(guó)Sigma公司），紅霉素軟膏（北京雙吉制藥），0.2%碘伏消毒液（遼寧衛(wèi)華醫(yī)藥），生理氯化鈉溶液（青島仁華制藥）。高壓消毒鍋（MLS?3020，日本SANYO公司），解剖顯微鏡（上海光學(xué)儀器廠），顯微手術(shù)器械、普通手術(shù)器械、大鼠手術(shù)操作臺(tái)（上海手術(shù)器械廠）。

1.2 動(dòng)物模型的建立及分組

將20只雌性Sprague?Dawley大鼠隨機(jī)分為2組，每組10只。常規(guī)脊髓半橫斷模型組：1%戊巴比妥鈉按40 mg/kg腹腔注射麻醉后，將大鼠俯臥位固定于手術(shù)操作臺(tái)。背部正中皮膚備皮、常規(guī)消毒，計(jì)數(shù)肋骨定位T8水平，以此為中心，在T7～9水平對(duì)應(yīng)后正中線處做縱行直切口切開(kāi)皮膚，在正中線沿棘突向兩側(cè)剝離肌肉至椎板外緣，暴露并咬除T8椎板，顯露脊髓，以脊髓后正中血管為標(biāo)志，用11號(hào)手術(shù)刀片于大鼠T8水平橫斷右半側(cè)脊髓，出血明顯，徹底止血后，再次消毒，逐層縫合肌肉和皮膚，表面涂抹紅霉素軟膏預(yù)防感染。改良脊髓半橫斷模型組：麻醉、固定等步驟同常規(guī)脊髓半橫斷模型組。然后在T8～9水平對(duì)應(yīng)后正中線處做縱行直切口切開(kāi)皮膚，在正中線沿棘突向兩側(cè)剝離肌肉至椎板外緣，將T8棘突尖部剪除，保留棘突根部，可見(jiàn)T8～9間的黃韌帶，將其切斷，顯露深層脊髓，提起T8棘突根部，用25號(hào)注射器針頭將脊髓右側(cè)劃斷，重復(fù)3次，保證半橫斷損傷完全，其余操作同常規(guī)脊髓半橫斷模型組。待大鼠清醒后放回動(dòng)物室單籠飼養(yǎng)。大鼠清醒后可自由進(jìn)食、飲水。術(shù)后每日腹腔注射80萬(wàn)單位青霉素鈉，連續(xù)3 d，預(yù)防感染。保持飼養(yǎng)環(huán)境適宜的溫度和濕度，保證籠具清潔及大鼠身體干燥，每日按壓膀胱輔助排尿3次，直至大鼠恢復(fù)自主排尿反射。

上述2組大鼠在初次術(shù)后2周時(shí)，行二次手術(shù)顯露脊髓損傷區(qū)域。麻醉、固定步驟同初次手術(shù)，備皮、消毒后，取原手術(shù)切口切開(kāi)皮膚，分離肌肉及瘢痕組織，術(shù)中認(rèn)真止血，小心操作，顯露初次脊髓損傷區(qū)。常規(guī)脊髓半橫斷模型組大鼠二次顯露脊髓時(shí)，咬除T7和T9椎板，分別從近、遠(yuǎn)端正常脊髓區(qū)逐漸小心向T8水平的脊髓損傷區(qū)分離，術(shù)中瘢痕出血特別明顯，有些需要終止操作，部分大鼠因術(shù)中出血死亡。改良脊髓半橫斷模型組大鼠在顯露脊髓時(shí)，在咬除T8和T9椎板后，小心分離瘢痕組織，較容易顯露脊髓損傷區(qū)，而且出血也明顯減少。顯露脊髓損傷區(qū)后，再次消毒，逐層縫合肌肉、皮膚。待大鼠清醒后放回動(dòng)物室單籠飼養(yǎng)。

1.3 評(píng)定方法

主要包括手術(shù)相關(guān)指標(biāo)評(píng)定和大鼠脊髓損傷后的運(yùn)動(dòng)功能評(píng)價(jià)。

1.3.1 手術(shù)相關(guān)指標(biāo)評(píng)定：為比較2種大鼠脊髓損傷模型建立方法的優(yōu)缺點(diǎn)，分別從手術(shù)操作的難度、術(shù)中脊髓定位的準(zhǔn)確性和二次顯露脊髓損傷區(qū)的成功率等方面對(duì)2種模型進(jìn)行評(píng)價(jià)。具體方法為在制備脊髓損傷模型的手術(shù)過(guò)程中記錄手術(shù)持續(xù)時(shí)間、術(shù)中出血量、脊髓后正中線定位難易程度以及術(shù)后2周再次顯露脊髓損傷區(qū)時(shí)的手術(shù)成功率。

1.3.2 運(yùn)動(dòng)學(xué)功能評(píng)價(jià)：脊髓損傷動(dòng)物模型建立后，還需要進(jìn)行運(yùn)動(dòng)功能學(xué)評(píng)價(jià)，既可以對(duì)脊髓損傷模型的穩(wěn)定性進(jìn)行評(píng)價(jià)，也可以對(duì)干預(yù)因素的效果進(jìn)行評(píng)估。目前常用的運(yùn)動(dòng)功能學(xué)評(píng)價(jià)方法有Tarlov法、BBB評(píng)分法、步態(tài)分析、斜板實(shí)驗(yàn)、網(wǎng)格爬行等方法［7?8］。每種評(píng)價(jià)方法均有各自的優(yōu)缺點(diǎn)，而且根據(jù)脊髓損傷的特點(diǎn)有著不同的適用范圍。本研究采用了相對(duì)敏感且可靠的BBB評(píng)分法，分別于術(shù)后1 d、3 d、1周和2周對(duì)2組大鼠進(jìn)行運(yùn)動(dòng)功能學(xué)評(píng)分，從而評(píng)價(jià)2組大鼠后肢運(yùn)動(dòng)功能的恢復(fù)情況。評(píng)分采用雙盲法，由經(jīng)過(guò)培訓(xùn)的兩人分別獨(dú)立完成，每只動(dòng)物的觀察時(shí)間為4 min。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

采用SPSS 17.0統(tǒng)計(jì)分析軟件對(duì)各組大鼠手術(shù)相關(guān)參數(shù)及運(yùn)動(dòng)功能學(xué)評(píng)分進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。結(jié)果以x±s表示，2組比較采用t檢驗(yàn)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 改良脊髓半橫斷模型在手術(shù)操作方面具有優(yōu)勢(shì)

首先，改良脊髓半橫斷模型組大鼠在手術(shù)顯露時(shí)間和出血量方面明顯少于常規(guī)脊髓半橫斷模型組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＜0.05）。見(jiàn)表1?？梢?jiàn)顯露脊髓時(shí)，改良脊髓半橫斷模型組脊髓副損傷的概率較常規(guī)脊髓半橫斷模型組明顯降低。

其次，術(shù)中脊髓后正中線的定位，改良脊髓半橫斷模型組較常規(guī)脊髓半橫斷模型組更為簡(jiǎn)單、準(zhǔn)確。常規(guī)脊髓半橫斷模型組半橫斷脊髓前需將椎板咬除，然后顯露脊髓，以脊髓后方的正中血管為標(biāo)志。然而術(shù)中顯示大鼠脊髓后正中血管的變異高達(dá)40%，因此，常規(guī)脊髓半橫斷模型組需要靠相距較遠(yuǎn)的T7和T9上下位脊椎的棘突連線以輔助確定脊髓正中線的位置（圖1A）。改良脊髓半橫斷模型組術(shù)中將顯露脊髓的上位棘突（T8）尖部剪除，保留棘突根部，但并不咬除椎板，切除相鄰節(jié)段之間的黃韌帶即可清晰地看到脊髓后正中血管（圖1B），并且可以憑借更近的上下脊椎（T8、T9）棘突連線確定脊髓中部，進(jìn)行脊髓半切。

表1 常規(guī)脊髓半橫斷模型與改良脊髓半橫斷模型手術(shù)操作相關(guān)指標(biāo)比較Tab.1 Comparison of parameters related with the surgery between standard SCI and improved SCI groups

圖1 2組脊髓半橫斷模型術(shù)中脊髓及正中動(dòng)脈顯露照片F(xiàn)ig.1 Photos of the exposed spinal cord and median artery during the surgery in two SCI groups

再次，改良脊髓半橫斷模型組大鼠在二次顯露脊髓損傷區(qū)時(shí)，明顯易于常規(guī)脊髓半橫斷模型組。常規(guī)脊髓半橫斷模型組因在模型制備時(shí)咬除了椎板，再次顯露脊髓時(shí)手術(shù)難度加大，并且暴露出的脊髓表面有明顯瘢痕粘連形成，且出血明顯。常規(guī)脊髓半橫斷模型組8只大鼠因大量出血放棄二次顯露脊髓，其中1只大鼠死亡，二次手術(shù)成功率僅為20%。改良脊髓半橫斷模型組在第1次顯露脊髓時(shí)保留了椎板，有利于二次手術(shù)的定位和操作。且二次顯露脊髓時(shí)，去除椎板后可見(jiàn)脊髓損傷處與周?chē)M織粘連較輕，出血較少（圖2），改良脊髓半橫斷模型組中僅有2只大鼠顯露脊髓失敗。改良脊髓半橫斷模型組大鼠二次顯露脊髓的成功率明顯高于常規(guī)脊髓半橫斷模型組（P＜0.05，表1）。

圖2 改良脊髓半橫斷手術(shù)組二次顯露脊髓術(shù)中照片F(xiàn)ig.2 Photo of the exposed spinal cord during the second sur?gery in improved SCI group

2.2 改良脊髓半橫斷模型大鼠在術(shù)后運(yùn)動(dòng)功能恢復(fù)方面具有優(yōu)勢(shì)

常規(guī)脊髓半橫斷模型組和改良脊髓半橫斷模型組大鼠在脊髓損傷術(shù)后3 d內(nèi)，運(yùn)動(dòng)功能均未恢復(fù)，BBB運(yùn)動(dòng)功能學(xué)評(píng)分均為零。術(shù)后1周時(shí)，改良脊髓半橫斷模型組大鼠BBB評(píng)分（3.85±0.46）略高于常規(guī)脊髓半橫斷模型組（3.20±0.42），但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。術(shù)后2周時(shí)，改良脊髓半橫斷模型組大鼠BBB運(yùn)動(dòng)功能學(xué)評(píng)分（13.25±1.52）明顯高于常規(guī)脊髓半橫斷模型組大鼠（10.45±1.63），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。可見(jiàn)改良脊髓半橫斷模型組大鼠在術(shù)后運(yùn)動(dòng)功能恢復(fù)方面具有優(yōu)勢(shì)。

3 討論

脊髓損傷研究目前主要在動(dòng)物體內(nèi)進(jìn)行，以期能夠模擬人類(lèi)脊髓損傷時(shí)的演變過(guò)程，從而實(shí)現(xiàn)在動(dòng)物模型中對(duì)脊髓損傷機(jī)制和治療措施進(jìn)行更有針對(duì)性的研究，獲得有價(jià)值的第一手資料，用于指導(dǎo)臨床診治［9?10］。因此，建立理想的動(dòng)物模型是研究脊髓損傷的基本條件。只有應(yīng)用與臨床疾病相似的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型，研究的結(jié)果才更具有參考意義和科學(xué)價(jià)值。本研究建立并評(píng)價(jià)了改良的大鼠脊髓半橫斷模型，研究發(fā)現(xiàn)，改良的脊髓半橫斷模型相對(duì)于常規(guī)脊髓半橫斷模型在手術(shù)操作和術(shù)后運(yùn)動(dòng)功能恢復(fù)方面均具有明顯的優(yōu)勢(shì)，更適于脊髓損傷相關(guān)的實(shí)驗(yàn)研究。

首先，改良脊髓半橫斷模型組大鼠損傷恢復(fù)更好。常規(guī)脊髓半橫斷大鼠模型具備與臨床上脊髓損傷相似的特點(diǎn)，被廣泛用作模擬對(duì)象進(jìn)行實(shí)驗(yàn)研究［11?12］。而改良的脊髓半橫斷模型是在常規(guī)脊髓半橫斷模型的基礎(chǔ)上進(jìn)行手術(shù)細(xì)節(jié)的調(diào)整，對(duì)脊髓的損傷標(biāo)準(zhǔn)沒(méi)有改變。在模型制備術(shù)后對(duì)其功能變化進(jìn)行連續(xù)觀察，并與常規(guī)脊髓半橫斷模型進(jìn)行對(duì)比，二者在脊髓損傷后早期的功能表現(xiàn)上相似，改良脊髓半橫斷模型組與常規(guī)脊髓半橫斷模型組比較，術(shù)后1周內(nèi)BBB運(yùn)動(dòng)功能學(xué)評(píng)分無(wú)明顯差異，均具備脊髓半橫斷損傷的典型表現(xiàn)。從BBB運(yùn)動(dòng)功能學(xué)評(píng)分來(lái)看，改良脊髓半橫斷模型組大鼠損傷恢復(fù)的速度較常規(guī)脊髓半橫斷模型組更快一些，而且每只大鼠BBB評(píng)分的分布更為集中，這說(shuō)明改良脊髓半橫斷模型組大鼠手術(shù)副損傷較小，對(duì)脊髓非損傷區(qū)域干擾小，手術(shù)的穩(wěn)定性更好。

其次，改良脊髓半橫斷模型的手術(shù)操作簡(jiǎn)單、可重復(fù)性、可調(diào)控性強(qiáng)。改良脊髓半橫斷模型組的手術(shù)操作因?yàn)橹恍枰舫齌8脊椎的棘突尖部，不需要咬除椎板，對(duì)脊柱和脊髓周?chē)难芷茐男?，出血量顯著減少，同時(shí)也減少了止血的操作時(shí)間，因此手術(shù)時(shí)間隨之大大縮短。此外，2種方法制備模型手術(shù)過(guò)程中均聯(lián)用棘突連線和脊髓后正中血管確定脊髓后正中線，顯露脊髓時(shí)，改良脊髓半橫斷模型組不需要咬除椎板，從而降低了手術(shù)操作的難度和脊髓副損傷的概率，能更好的保證手術(shù)操作的穩(wěn)定和均衡，更利于研究評(píng)價(jià)。術(shù)中確定脊髓中線時(shí)，在脊髓后正中血管變異的時(shí)候，需要借助上下位棘突水平確定。常規(guī)脊髓半橫斷模型由于已經(jīng)咬除椎板，脊柱穩(wěn)定性減弱，上下位棘突距離又較遠(yuǎn)，定位容易受到一定的影響。但是在改良脊髓半橫斷模型中，可以通過(guò)相鄰、更近的棘突連線確定脊髓中線，能夠更準(zhǔn)確地定位脊髓后正中線，利于準(zhǔn)確實(shí)施脊髓半橫斷損傷的操作。因而，改良脊髓半橫斷模型還具有操作簡(jiǎn)單、可重復(fù)性和可調(diào)控性強(qiáng)等優(yōu)勢(shì)。

再次，改良脊髓半橫斷模型的死亡率低，并發(fā)癥少。改良的脊髓半橫斷模型因手術(shù)時(shí)間縮短，術(shù)中出血量明顯減少，這樣可以降低對(duì)動(dòng)物的打擊，使其能夠更快的恢復(fù)。這種優(yōu)勢(shì)在僅進(jìn)行脊髓半橫斷損傷時(shí)表現(xiàn)的還不明顯，但是對(duì)于需要二次顯露脊髓的手術(shù)，改良手術(shù)的優(yōu)勢(shì)就充分體現(xiàn)出來(lái)。改良的手術(shù)方法并沒(méi)有去除椎板，隔斷了脊髓瘢痕組織與周?chē)渌浗M織的粘連，使得再次顯露脊髓更為容易。且二次手術(shù)術(shù)中不需要?jiǎng)冸x過(guò)多的軟組織瘢痕，自然就減少了術(shù)中出血量，可更大限度地允許手術(shù)的實(shí)施，也能更加保證大鼠的術(shù)后成活率。同時(shí)因?yàn)楦牧技顾璋霗M斷模型組的脊髓瘢痕組織很少與周?chē)浗M織粘連，更容易觀察脊髓損傷區(qū)的位置，這樣更有利于給予治療干預(yù)措施。

總之，改良的脊髓半橫斷模型，無(wú)論是在手術(shù)時(shí)間、術(shù)中出血量及術(shù)中脊髓中線定位，還是在術(shù)后運(yùn)動(dòng)功能學(xué)評(píng)分，尤其是二次顯露脊髓方面，均顯示出明顯的優(yōu)勢(shì)。該模型更加適用于脊髓損傷的研究，尤其適用于非急性期脊髓損傷的治療研究。

［1］KUELL J，OLSON L.Rat models of spinal cord injury：from patholo?gy to potential therapies［J］.Dis Model Mech，2016，9（10）：1125-1137.DOI：10.1242/dmm.025833.

［2］KWON BK，OXLAND TR，TETZLAFF W.Animal models used in spinal cord regeneration research［J］.Spine（Phila Pa 1976），2002，27（14）：1504-1510.

［3］陳偉，羊明智.實(shí)驗(yàn)性脊髓損傷動(dòng)物模型的制備及研究進(jìn)展［J］.中國(guó)矯形外科雜志，2014，22（6）：520-523.DOI：10.3977/j. issn.1005?8478.2014.06.09.

［4］TALAC R，F(xiàn)RIEDMAN JA，MOORE MJ，et al.Animal models of spinal cord injury for evaluation of tissue engineering treatment strategies［J］.Biomaterials，2004，25（9）：1505-1510.

［5］宋偉，段紅梅，饒家聲，等.不同脊髓損傷模型大鼠行為學(xué)及形態(tài)學(xué)的變化［J］.中國(guó)組織工程研究，2015，19（49）：7920-7925. DOI：10.3969/j.issn.2095?4344.2015.49.009.

［6］董賢慧，高維娟.脊髓損傷動(dòng)物模型建立方法研究進(jìn)展［J］.神經(jīng)解剖學(xué)雜志，2014，30（1）：117-120.DOI：10.11670/1000?7547.20 1401023.

［7］BASSO DM，BEATTIE MS，BRESNAHAN JC.A sensitive and reli?able locomotor rating scale for open field testing in rats［J］.J Neu?rotrauma，1995，12（1）：1-21.DOI：10.1089/neu.1995.12.1.

［8］顧兵，金建波，李華南，等.脊髓損傷動(dòng)物模型的運(yùn)動(dòng)功能評(píng)價(jià)［J］.中國(guó)藥理學(xué)通報(bào)，2011，27（7）：893-897.DOI：10.3969/j. issn.1001?1978.2011.07.002.

［9］ROSENZWEIG ES，MCDONALD JW.Rodent models for treatment of spinal cord injury：research trends and progress toward useful re?pair［J］.Curr Opin Neurol，2004，17（2）：121-131.

［10］LEE DH，LEE JK.Animal models of axon regeneration after spinal cord injury［J］.Neurosci Bull，2013，29（4）：436-444.DOI：10.10 07/s12264?013?1365?4.

［11］孫師，萬(wàn)峪岑，趙利娜，等.骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞聯(lián)合超短波對(duì)大鼠脊髓損傷后早期GFAP和ED?1的影響［J］.中國(guó)醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)，2016，45（8）：678-683.DOI：10.12007/j.issn.0258?4646.2016. 08.002.

［12］STEWARD O，WILLENBERG R.Rodent spinal cord injury mod?els for studies of axon regeneration［J］.Exp Neurol，2017，287（Pt 3）：374-383.DOI：10.1016/j.expneurol.2016.06.029.

（編輯 陳 姜）

Establishment and Evaluation of Improved Hemisection Model of Spinal Cord Injury in Rats

SUN Deri1，HU Huiyuan2，ZHU Yue3
（1.Department of Orthopedics，The Fourth Affiliated Hospital，China Medical University，Shenyang 110032，China；2.Department of Pharmaceutical Toxicology，School of Pharmacy，China Medical University，Shenyang 110122，China；3.Department of Orthopedics，The First Hospital，China Medical University，Shenyang 110001，China）

Objective To establish an improved hemisection model of spinal cord injury（SCI）in rats with less severe injury and increased sur?vival rate.Methods Female Sprague?Dawley rats（n=20）were randomly divided into 2 groups：standard and improved hemisection model of SCI.Basso?Beattie?Bresnahan（BBB）scores were carried out to determine the hindlimb locomotor function at 1 d，3 d，1 week and 2 weeks post SCI，respectively.In addition，duration of operation，blood loss，location of posterior midline，and success rate of spinal cord exposure during the second surgery were used as the main parameters to evaluate the significance of the new model.Results Compared with the standard hemisection model，the improved hemisection model of SCI exhibited shorter duration of operation，less blood loss，higher BBB score，more accurate location of posterior midline，and higher success rate of spinal cord exposure during the second surgery.Based on the improved hemisection model of SCI，transplantation model of scar tissue in spine cord was then successfully constructed with a success rate above 70%.Conclusion The improved hemisection model of SCI shows significant advantages in many aspects related to the operation，which is applicable to the study of SCI，especially the non?acute SCI.

spinal cord injury；rat models；modification

R683.2

A

0258-4646（2017）03-0223-05

10.12007/j.issn.0258?4646.2017.03.008

遼寧省自然科學(xué)基金（2013021032）

孫德日（1978-），男，主治醫(yī)師，碩士.

朱悅，E-mail：Zhuyuedr@163.com

2016-11-11

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