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    食品中大腸菌群平板計(jì)數(shù)結(jié)果不確定度的評(píng)定

    2017-02-02 15:49:33方武龍廣東東方縱橫檢測有限公司
    食品安全導(dǎo)刊 2017年27期
    關(guān)鍵詞:大腸菌群乳糖平板

    □ 方武龍 廣東東方縱橫檢測有限公司

    食品中大腸菌群平板計(jì)數(shù)結(jié)果不確定度的評(píng)定

    □ 方武龍 廣東東方縱橫檢測有限公司

    通過對(duì)于有關(guān)標(biāo)準(zhǔn)以及測量的不確定度的評(píng)定形式的參考,能夠有效測定出食品中大腸菌群檢測結(jié)果的不確定度。研究之后能夠明確食品里面大腸菌群平板技術(shù)結(jié)果的不確定度的來源,建立一種簡單適用的大腸菌群平板計(jì)數(shù)不確定度評(píng)定方法。結(jié)果表明,影響食品中大腸菌群平板計(jì)數(shù)結(jié)果不確定度的主要因素為取樣量的不確定度、稀釋倍數(shù)的不確定度、加樣體積的不確定度、平板上大腸菌群數(shù)量的不確定度和煌綠乳糖膽鹽肉湯管產(chǎn)氣比例產(chǎn)生的不確定度,其中后兩者產(chǎn)生的不確定度所占分量最大。

    大腸菌群;平板計(jì)數(shù);不確定度評(píng)定

    腸菌群就是一些有特殊性質(zhì)的細(xì)菌,這些細(xì)菌和糞便污染有比較緊密的聯(lián)系。所以,群數(shù)的高低直接決定了糞便的污染程度,并且也直接反映出了對(duì)人類造成的影響[1]。糞便屬于排泄物,不僅包括無危害的糞便,還包括有病菌的糞便。所以,能夠看出食品里面存在糞便污染,這樣可以明確食品里面有腸道致病菌污染的存在,并可能引發(fā)一定的流行病,從而影響人們的身體健康。

    1 檢測的原理和檢測的形式

    1.1 檢測的原理

    通過把樣品放在乳糖膽鹽里面進(jìn)行發(fā)酵,能夠得到一些顯示出陽性的菌體,之后在進(jìn)行平板培養(yǎng),采取一定的試劑進(jìn)行染色。通過檢查以及乳糖培養(yǎng),如果乳糖管能夠產(chǎn)生氣體,并且染色之后呈現(xiàn)出陰性,這樣的一種桿菌就是大腸菌群。

    1.2 檢測的形式

    通過無菌操作之后,再取樣,把取得的樣品放置在滅菌生理鹽水里面,通過充分?jǐn)嚢韬罂梢缘玫奖容^均勻的稀釋液體,之后再使用滅菌鹽水當(dāng)作稀釋液,通過參考有關(guān)衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)以及對(duì)于樣品的研究分析,選擇出3個(gè)不同的稀釋度,每個(gè)稀釋度分別選擇幾個(gè)樣品[2-3]。放置在恒溫箱里面培養(yǎng)24 h,之后拿出觀察,將產(chǎn)生氣體的發(fā)酵管進(jìn)行轉(zhuǎn)種,將轉(zhuǎn)種的東西放置在伊紅美藍(lán)瓊脂平板上,再放置在恒溫箱里面培養(yǎng)24 h。之后拿出觀察,通過染色以及實(shí)驗(yàn)接種,再放置在恒溫箱里面培養(yǎng)24 h。只要乳糖管產(chǎn)生了氣體,并且革蘭染色顯示出陰性,這樣的桿菌就是大腸菌群陽性。通過對(duì)于呈現(xiàn)陽性管數(shù)的分析,進(jìn)而得到大腸菌的MPN值。通過充分的培養(yǎng)之后再開展對(duì)于不確定度的評(píng)定檢測,對(duì)某冷飲均質(zhì)后重復(fù)10次檢測大腸菌群的數(shù)據(jù)進(jìn)行不確定度評(píng)定。

    2 對(duì)于不確定來源的分析以及對(duì)于不確定來源的評(píng)定

    當(dāng)檢測微生物時(shí),通常能夠人為樣品里面的細(xì)菌分布的均勻性以及細(xì)菌分布的重復(fù)性造成的不確定,直接影響了之后的檢測結(jié)果,降低了準(zhǔn)確度[4]。但不可以忽視樣品的情況、培養(yǎng)的過程、操作人員的情況,這些都會(huì)直接影響不確定度。通過分析工作中的實(shí)際,進(jìn)而分析不確定度產(chǎn)生的原因。

    2.1 均勻性引入的不確定度

    樣品里面的均勻性所造成的不確定度,會(huì)直接影響檢測結(jié)果,實(shí)驗(yàn)時(shí)需要參考相關(guān)規(guī)定[5]。把樣品充分結(jié)合之后再取樣,這樣得到的樣品比較均勻。

    2.2 重復(fù)性檢測引入所造成的不確定度

    重復(fù)性檢測會(huì)造成不確定度,這樣會(huì)直接影響檢測結(jié)果。這些也屬于不確定度。以下對(duì)于樣品進(jìn)行了二十次測定,通過對(duì)于檢測結(jié)果的分析,得到了這些數(shù)據(jù)。

    當(dāng)制取樣品時(shí)引入的不確定度,樣品制取時(shí)涉及了對(duì)于樣品的稱量以及對(duì)于樣品的稀釋。通過分析能夠看出,不確定度是電子天平稱量引入的,并且也可能是玻璃器皿引入的。

    3 討論分析

    本文詳細(xì)分析了實(shí)驗(yàn)過程中產(chǎn)生的不確定度分量,通過有關(guān)的研究能夠看出制備樣品時(shí)會(huì)產(chǎn)生不確定度分量,稀釋、接種以及檢測時(shí),都會(huì)形成不確定度分量。通過對(duì)于這些因素的分析可以看出,這些分類所造成的影響比較小,可以被忽略掉。為了能夠有效減少所存在的不確定度,需要設(shè)置比較統(tǒng)一的操作順序。這個(gè)實(shí)驗(yàn)可以被當(dāng)作是在標(biāo)準(zhǔn)氣溫下進(jìn)行的,可以忽視溶液溫度和校準(zhǔn)的溫度所造成的不確定度,如果溫度達(dá)不到20 ℃,就需要考慮溫度所造成的影響。

    通過分析能夠看出,造成不確定度的因素涉及了樣品的均勻程度、取樣的重復(fù)程度以及人員的操作情況等。實(shí)驗(yàn)時(shí)需要固定的實(shí)驗(yàn)條件,也就是說當(dāng)檢測大腸菌群時(shí),可以進(jìn)行不確定度的評(píng)定,培養(yǎng)時(shí)需要對(duì)于溫度的要求比較高。通過計(jì)算能夠看出,大腸菌群檢驗(yàn)的不確定度分量里面,檢測結(jié)果比較容易產(chǎn)生重復(fù)的情況,所以會(huì)造成不確定度。并且由于檢驗(yàn)結(jié)果的持續(xù)增加,能夠隨時(shí)加入到合并樣本中,重新計(jì)算合并樣本標(biāo)準(zhǔn)差,更新不確定度的取值范圍。正確評(píng)定不確定度,可以提高檢測結(jié)果的有效性、科學(xué)性、公正性和可靠性。

    4 結(jié)語

    測量不確定度和檢測結(jié)果有緊密的聯(lián)系,通過分析測量結(jié)果,能夠明確測量值有一定的分散性。一般是由多個(gè)分量組成,一些分量能夠分析測量結(jié)果的分布情況,用實(shí)驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)偏差表示。

    [1]凌云,王李寶,沈輝,等.食品中大腸菌群平板計(jì)數(shù)結(jié)果不確定度的評(píng)定[J].食品與機(jī)械,2010(5):75-77.

    [2]何曉玲.食品中大腸菌群平板計(jì)數(shù)法不確定度的評(píng)定[J].質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督研究,2014(4):18-20.

    [3]甄珍.食品中大腸菌群測定結(jié)果不確定度的評(píng)定[J].高師理科學(xué)刊,2011(5):63-65.

    [4]胡巔,李素芳,丁武.MPN法檢測結(jié)果的不確定度及其評(píng)定[J].現(xiàn)代預(yù)防醫(yī)學(xué),2013(10):1939-1941.

    [5]王毅謙,吳福平,張洪元,等.方便食品檢驗(yàn)中大腸菌群的不確定度評(píng)定[J].口岸衛(wèi)生控制,2013(3):27-29.

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