不同月齡烏珠穆沁羊MyHC基因與脂肪及共軛亞油酸含量的相關(guān)性

薛寶玲 栗麗萍 楊晶 格日勒圖

摘 要：不同品種羊肉中的共軛亞油酸與肉品質(zhì)關(guān)系密切，能夠影響羊肉的滋味、氣味及營養(yǎng)價(jià)值等品質(zhì)指標(biāo)?；诩∏虻鞍字劓湥╩yosin heavy chain，MyHC）相關(guān)基因在動(dòng)物體骨骼肌中的表達(dá)及肌纖維與MyHC相關(guān)基因的特異性，采用實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)技術(shù)測定烏珠穆沁羊MyHC基因的相對表達(dá)量，測定脂肪含量，用氣相色譜法測定共軛亞油酸總含量。結(jié)果表明：MyHCⅠ基因與MyHCⅡa基因的相對表達(dá)量與脂肪含量及共軛亞油酸總含量的變化趨勢相對一致;MyHCⅡb和MyHCIⅡx基因的表達(dá)量均在12 月齡時(shí)達(dá)到最大值;脂肪含量6～12月齡最高，共軛亞油酸總含量在6 月齡達(dá)到最高值，然后下降且變化顯著（P<0.05）;烏珠穆沁羊6 月齡時(shí)肉質(zhì)相對其他月齡較佳。

關(guān)鍵詞：烏珠穆沁羊;MyHC基因;脂肪;共軛亞油酸

Abstract： Conjugated linoleic acids （CLA） in sheep meat have a close association with meat quality， affecting meat quality parameters like taste， odor and nutritional value. Given the specific expression of the myosin heavy chain （MyHC） genes in the various types of muscle fibers， the MyHC relative expression levels in the skeletal muscle of Ujumqin sheep were determined by real-time PCR， and its lipid content was measured as well as its CLA content by gas chromatography （GC）. The results showed that the relative expression levels of MyHC I and MyHC IIa and lipid and CLA levels exhibited consistent trends with increasing age of sheep. The expression levels of MyHC IIb and MyHC IIx reached the maximum at 12 months of age. The highest lipid content was found in lambs from 6 to 9 months of age; the highest CLA level at 6 months， which then decreased significantly （P < 0.05）. From this study， it is concluded that meat quality in Ujumqin lambs slaughtered at 6 months of ages was better than older and younger ones.

Keywords： Ujumqin sheep; MyHC genes; fatty; conjugated linoleic acid

DOI：10.7506/rlyj1001-8123-20190115-012

中圖分類號：TS251.1? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? 文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A 文章編號：1001-8123（2019）05-0024-05

引文格式：

薛寶玲， 栗麗萍， 楊晶， 等. 不同月齡烏珠穆沁羊MyHC基因與脂肪及共軛亞油酸含量的相關(guān)性[J]. 肉類研究， 2019， 33（5）： 24-28. DOI：10.7506/rlyj1001-8123-20190115-012.? ? http：//www.rlyj.net.cn

XUE Baoling， LI Liping， YANG Jing， et al. Correlation between myosin heavy chain （MyHC） gene expression and lipid and conjugated linoleic acid contents in skeletal muscle during the growth of Ujumqin sheep[J]. Meat Research， 2019， 33（5）：?24-28. DOI：10.7506/rlyj1001-8123-20190115-012.? ? http：//www.rlyj.net.cn

不同的基因能夠編碼相對應(yīng)的肌球蛋白重鏈（myosin heavy chain，MyHC）[1-3]。Chang[4]、Eggert[5]等研究表明，可以將Ⅰ型、Ⅱa型、Ⅱb型和Ⅱx型肌纖維與MyHCⅠ、MyHCⅡa、MyHCⅡb、MyHCⅡx 4種MyHC異構(gòu)體進(jìn)行一一對應(yīng)。肌纖維與MyHC異構(gòu)體分型是依據(jù)肌纖維與MyHC相關(guān)基因的特異性[6-7]以及MyHC相關(guān)基因在骨骼肌中的翻譯表達(dá)[8-10]。

共軛亞油酸是含有共軛雙鍵的混合物的通稱[11-12]，有幾何異構(gòu)體和位置異構(gòu)體2 種[13-14]。羊肉中的脂肪及共軛亞油酸含量直接關(guān)系著羊肉的滋氣味及營養(yǎng)價(jià)值[15-17]，并且對羊肉品質(zhì)而言意義重大。在動(dòng)、植物性產(chǎn)品中共軛亞油酸存在較為普遍，并且其含量在動(dòng)物性產(chǎn)品中較高[18-21]。反芻動(dòng)物自身能夠合成共軛亞油酸，其含量高于其他動(dòng)物[22-23]。

自然放牧條件下的烏珠穆沁羊是蒙古羊系統(tǒng)中的優(yōu)良品種[24-25]。本研究對1～18 月齡（除15 月齡外）的烏珠穆沁羊股二頭肌MyHC基因與脂肪及共軛亞油酸總含量的變化特性進(jìn)行研究，旨在掌握烏珠穆沁羊不同生長階段股二頭肌中MyHC基因與脂肪及共軛亞油酸含量的變化規(guī)律，為改善和提升羊肉肉質(zhì)提供可靠的參考數(shù)據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

除15 月齡外，選取每隔3 月齡的1～18 月齡烏珠穆沁羊股二頭?。╪=3）。迅速分裝樣品，置于凍存管中，在液氮中迅速冷凍，保存于-80 ℃。

核酸染料 北京百奧萊博科技有限公司;反轉(zhuǎn)錄試劑盒、實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（real time-polymerase chain reaction，RT-PCR）試劑盒、Trizol（總RNA抽提試劑）、焦碳酸二乙酯（diethy pyrocarbonate，DEPC） 寶日醫(yī)生物技術(shù)（北京）有限公司;氯仿 廊坊拓迪化工有限公司;異丙醇 南京新源化工有限公司;蔗糖 深圳市康初源有限公司。

1.2 儀器與設(shè)備

TF通風(fēng)柜 山東創(chuàng)博實(shí)驗(yàn)室裝備有限公司;ZYMICRO-I-10T超純水儀 四川卓越水處理設(shè)備有限公司;GC-2014C氣相色譜儀、石英毛細(xì)管柱Rt-2560（100 m×0.25 mm，0.20 μm） 日本島津公司;GC126氫火焰離子檢測器 深圳市三利化學(xué)品有限公司;HJ-6多頭磁力加熱攪拌器 常州亞特實(shí)驗(yàn)儀器有限公司;RE-301旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器 河南省鞏義市瑞力儀器設(shè)備有限公司;SHZ-D Ⅲ循環(huán)水真空泵 江蘇省太倉市三江塑業(yè)有限公司;移液槍 上海心亮實(shí)業(yè)有限公司;GRX-9053A熱風(fēng)消毒箱 上海精密儀器儀表公司;ACCULAB ALC分析天平 北京賽多利斯儀器系統(tǒng)有限公司。

1.3 方法

1.3.1 MyHC相關(guān)基因的相對表達(dá)量測定

1.3.1.1 總RNA的提取（Trizol試劑法）

從骨骼肌提取總RNA，參考Trizol試劑法（低溫離心條件均為4 ℃、12 000 r/min）[26]。

少量多次添加液氮研磨200～300 mg股二頭肌，使樣本處于冷凍狀態(tài);將100 mg樣品放入1.5 mL無酶無菌EP管，加入1 mL Trizol溶液，-4 ℃放置8 min;低溫離心5 min后吸出上層溶液，加入約1/5體積的氯仿，劇烈搖動(dòng)混合物15 s，并室溫靜置至無分相沉淀;低溫離心15 min后，吸出上層溶液并注入等體積異丙醇溶液，室溫靜置10 min;低溫離心10 min，倒掉上層溶液，得白色RNA膠狀沉淀;加入DEPC處理的75%乙醇1 mL，洗滌沉淀;低溫離心5 min后，棄上清;倒置干燥，加入20～50 μL RNase-free水溶解沉淀，-80 ℃靜置;取5 μL RNA與2 μL Loading Buffer溶液混合均勻，以確定總RNA質(zhì)量的完整性、濃度和純度。將樣品RNA的質(zhì)量濃度統(tǒng)一調(diào)至500 ng/μL后，于-80 ℃冰柜中保存。

1.3.1.2 反轉(zhuǎn)錄利用TaKaRa反轉(zhuǎn)錄試劑盒。

第1步：去除基因組DNA：配制總量為10.0 μL的試劑，其中加入2.0 μL 5×gDNA消除緩沖液、1.0 μL gDNA消除液及500 ng/μL的模版RNA，體系最終剩余量加入DEPC處理的去離子水。

第2步：合成cDNA第一鏈：配制總量為20.0 μL的試劑，其中加入4.0 μL 5×緩沖液（用于實(shí)時(shí)熒光定量）、1.0 μL逆轉(zhuǎn)錄酶與1.0 μL混合引物、4.0 μL DEPC處理的去離子水及10.0 μL第1步的反應(yīng)液。

反應(yīng)條件如下：合成cDNA第一鏈需將配制的20.0 μL反應(yīng)物于3 個(gè)梯度下進(jìn)行反應(yīng)：37 ℃恒溫反應(yīng)15 min;85 ℃反應(yīng)5 s;4 ℃時(shí)進(jìn)行無限循環(huán)。

1.3.1.3 引物設(shè)計(jì)及合成

在NCBI中查找綿羊MyHC基因的核苷酸序列[10]，并使用Primer Premier 5.0軟件對引物進(jìn)行分析、設(shè)計(jì)與合成。

1.3.1.4 RT-PCR

利用CFX96 TM Real Time System PCR系統(tǒng)進(jìn)行反應(yīng);以反轉(zhuǎn)錄的cDNA為模板，看家基因β-actin為內(nèi)參，每個(gè)樣品3 個(gè)重復(fù)。PCR程序：95 ℃預(yù)變性30 s，變性5 s，60 ℃退火30 s，共38 個(gè)循環(huán)?；虻南鄬Ρ磉_(dá)量采用公式（1）[27]計(jì)算。公式對所有的測試樣和校準(zhǔn)樣用內(nèi)參基因的循環(huán)閾（cycle threshold，Ct）值歸一目標(biāo)基因的Ct值，最終計(jì)算表達(dá)量。

ΔCt測試樣=Ct目標(biāo)測試樣-Ct內(nèi)參測試樣，ΔCt校準(zhǔn)樣=Ct目標(biāo)校準(zhǔn)樣-

Ct內(nèi)參校準(zhǔn)樣，用校準(zhǔn)樣本的ΔCt值歸一測試樣本的ΔCt值：ΔΔCt=ΔCt測試樣-ΔCt校準(zhǔn)樣。

1.3.2 脂肪含量測定

1.3.2.1 樣品處理

將1 cm3在液氮中速凍的股二頭肌樣品粉碎成末，三角瓶中加入15 g樣品和210 mL氯仿-甲醇（2∶1，V/V），振搖2.5 h，浸泡8～10 h后過濾;加入5 mL 20%的NaCl于濾液中，靜置，棄上清液，加入無水Na2SO4脫水，在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器中45 ℃水浴蒸發(fā)濃縮，得到脂肪[28]。

1.3.2.2 總脂肪含量測定

在15 mL離心管中氮吹干燥濃縮脂肪，離心管質(zhì)量穩(wěn)定時(shí)可按照公式（2）計(jì)算獲得總脂肪的含量。

式中：X總脂肪為試樣中總脂肪酸的含量/（mg/100 g）;Xi為各脂肪酸含量/（mg/100 g）。

1.3.3 共軛亞油酸的測定

采用氣相色譜的方法對共軛亞油酸含量進(jìn)行測定[29]。初始溫度120 ℃，維持8 min，以4 ℃/min升至260 ℃，在此溫度下保持30 min;入口溫度260 ℃，檢測器溫度290 ℃;高純氮（99.999%）作為載氣;氫氣發(fā)生器流速45 mL/min，恒定柱流速1.2 mL/min，分流比22∶1，進(jìn)樣量1.0 μL。

1.4 數(shù)據(jù)處理

采用SAS 9.2與SPSS 19.0統(tǒng)計(jì)軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 總RNA質(zhì)量濃度和純度

OD280 nm是蛋白質(zhì)和酚類物質(zhì)最高吸收峰的光密度值，比值可進(jìn)行核酸樣品純度評估：OD260 nm/OD280 nm=1.8為純DNA，OD260 nm/OD280 nm=2.0為純RNA。若樣品中含有蛋白質(zhì)及苯酚等物質(zhì)，OD260 nm/OD280 nm值會明顯下降。防止蛋白質(zhì)及苯酚殘留污染時(shí)應(yīng)防止移液槍吸入中間層及有機(jī)相，加入氯仿后首先要充分混勻，并且離心分層的離心力和時(shí)間要足夠[30-31]。

由表1可知，所有月齡的烏珠穆沁羊股二頭肌樣品OD260 nm/OD280 nm值均介于1.8～2.0，表明提取的RNA在隨后的實(shí)驗(yàn)中可用。

2.2 RNA的質(zhì)量評定

由圖1可知，采用瓊脂糖凝膠電泳檢測總RNA的質(zhì)量，可以觀察到3 個(gè)條帶，分別為28S核糖體RNA、18S核糖體RNA和5S核糖體RNA，3 個(gè)條帶中上面2 個(gè)較為清晰的條帶為28S核糖體RNA和18S核糖體RNA。28S和18S核糖體RNA條帶明亮、濃度較大，在18S核糖體RNA條帶下方可觀察到稍微擴(kuò)散的條帶，它由低分子質(zhì)量的RNA組成，說明RNA幾乎沒有被降解，在反轉(zhuǎn)錄的合成和RT-PCR中可使用。

2.3 引物設(shè)計(jì)及合成

MyHCⅠ、MyHCⅡa、MyHCⅡb、MyHCⅡx和β-actin基因上游與下游的引物序列、產(chǎn)物片段大小和退火溫度如表2所示。

2.4 MyHC基因的RT-PCR產(chǎn)物

RT-PCR總體系為25 μL，其中含滅菌的ddH2O 8.5 μL、cDNA模板2 μL、上游引物（10 μmol/L）1 μL、下游引物（10 μmol/L）1 μL、SYBR Premix Ex TaqⅡ（2×）12.5 μL。由圖2可知，β-actin、MyHCⅠ、MyHCⅡa、MyHCⅡb及MyHCⅡx基因產(chǎn)物的長度分別為233、165、200、216、284 bp，且從Marker上進(jìn)行對比可知，擴(kuò)增出的目的基因大小與預(yù)期相一致，且沒有其他雜帶，表明目的基因片段產(chǎn)生了明顯的特異性擴(kuò)增條帶，所設(shè)計(jì)的引物特異性較好，符合后續(xù)的實(shí)驗(yàn)要求。

2.5 MyHC基因的RT-PCR擴(kuò)增曲線

由圖3～4可知，β-actin、MyHCⅠ、MyHCⅡa、MyHCⅡb和MyHCⅡx基因的RT-PCR擴(kuò)增曲線及溶解峰表明，MyHC相關(guān)基因和看家基因序列都沒有產(chǎn)生重峰，均為單峰，MyHC相關(guān)基因的引物特異性良好，沒有出現(xiàn)非特異性擴(kuò)增序列，也沒有產(chǎn)生引物二聚體。

2.6 MyHC基因的相對表達(dá)量

由表3可知：MyHCⅠ基因的相對表達(dá)量為6 月齡>3 月齡>1 月齡>9 月齡>12 月齡>18 月齡，在1～6 月齡的股二頭肌中呈上升趨勢;MyHCⅡb基因的相對表達(dá)量在12 月齡達(dá)到最高值，6 月齡為最低值;MyHCⅡa基因的相對表達(dá)量在18 月齡達(dá)到最高值，1 月齡為最低值;MyHCⅡx基因的相對表達(dá)量6 月齡達(dá)到最低值，經(jīng)過6 個(gè)月后12 月齡達(dá)到最高值。

2.7 股二頭肌的脂肪含量

由表4可知，烏珠穆沁羊股二頭肌脂肪含量在6～12 月齡達(dá)到最高值，1 月齡為最低值，且差異顯著（P<0.05），可知隨著月齡的增加，股二頭肌脂肪含量總體呈現(xiàn)增加趨勢。

2.8 股二頭肌的共軛亞油酸總含量

由表5可知，不同月齡烏珠穆沁羊股二頭肌中共軛亞油酸總含量隨著月齡的增加先上升后降低，在6 月齡時(shí)達(dá)到最高值。共軛亞油酸能夠影響羊肉的滋味、氣味及肉質(zhì)等多種特性[32-33]，根據(jù)烏珠穆沁羊不同月齡股二頭肌中共軛亞油酸的總含量，可推測6 月齡時(shí)烏珠穆沁羊羊肉品質(zhì)優(yōu)于其他月齡。

3 結(jié) 論

對不同月齡段烏珠穆沁羊股二頭肌MyHC相關(guān)基因相對表達(dá)量、脂肪與共軛亞油酸總含量進(jìn)行測定，結(jié)果表明：MyHCⅠ基因的表達(dá)水平在6 月齡達(dá)到最高值，隨后開始降低;MyHCⅡa基因的表達(dá)水平在18 月齡達(dá)到最高值;MyHCⅡb和MyHCⅡx基因的表達(dá)水平在12 月齡時(shí)達(dá)到最高值。股二頭肌脂肪含量在6～12 月齡最高，共軛亞油酸總含量在6 月齡達(dá)到最大值，隨后下降，可見月齡是對烏珠穆沁羊肌肉中的脂肪與共軛亞油酸含量具有顯著影響的因素。

每年年初，烏珠穆沁地區(qū)進(jìn)入冬季產(chǎn)羔季節(jié)，1～18 月齡的烏珠穆沁羊要經(jīng)過一個(gè)比較寒冷的階段。外界環(huán)境、不同生長階段及羊群的活動(dòng)等因素變化，可能導(dǎo)致共軛亞油酸總含量的變化與不同MyHC基因之間的不規(guī)律轉(zhuǎn)化。隨著月齡的增加，烏珠穆沁羊MyHCⅠ基因與MyHCⅡa基因的相對表達(dá)量、脂肪含量及共軛亞油酸總含量的變化相對一致。烏珠穆沁羊6 月齡時(shí)的肉質(zhì)相對其他月齡較佳。

參考文獻(xiàn)：

[1] 沈潔， 徐大剛， 朱道立. 家兔骨骼肌肌球蛋白重鏈構(gòu)成的電泳[J]. 安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)， 2008， 36（1）： 46-49. DOI：10.13989/j.cnki.0517-6611.2008.01.008.

[2] 李長強(qiáng)， 陳強(qiáng)， 賴樺， 等. 肌纖維類型轉(zhuǎn)化與肉品質(zhì)的關(guān)系[J].?云南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)， 2006， 21（5）： 641-645. DOI：10.16211/j.issn.1004-390x（n）.2006.05.021.

[3] 王立克， 金光明， 胡亞民， 等. 固始雞肌纖維生長發(fā)育規(guī)律研究[J]. 安徽技術(shù)師范學(xué)院學(xué)報(bào)， 2001， 15（4）： 45-47.

[4] CHANG K C， DA COSTA N， BLACKLEY R， et al. Relationships of myosin heavy chain fiber types to meat quality traits in traditional and modem pigs[J]. Meat Science， 2003， 64（1）： 93-103. DOI：10.1016/S0309-1740（02）00208-5.

[5] EGGERT J M， DEPREUX F F S， SCHINEKEL A P， et al. Myosin heavy chain isoforms account for variation in pork quality[J]. Meat Science， 2002， 61（2）： 117-126. DOI：10.1016/s0309-1740（01）00154-1.

[6] 葛長榮， 馬美湖. 肉與肉制品工藝[M]. 北京： 中國輕工業(yè)出版社， 2002： 32-35.

[7] 蘇雅拉， 侯小偉， 格日勒圖. 烏珠穆沁羊生長過程中骨骼肌肌內(nèi)結(jié)締組織的結(jié)構(gòu)及特性變化[J]. 食品科學(xué)， 2011， 46（1）： 10-13.

[8] 沈霞芬. 家畜組織學(xué)與胚胎學(xué)[M]. 北京： 中囯農(nóng)業(yè)出版社， 2001： 26-27.

[9] 川井田博， 郁明發(fā). 豬肉肌纖維粗細(xì)與肉質(zhì)的關(guān)系[J]. 國外畜牧學(xué)（豬與禽）， 1983（3）： 51-54.

[10] 趙珺， 李金泉， 張文廣， 等. 影響山羊肉質(zhì)差異候選基因的研究進(jìn)展[J]. 安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)， 2013（16）： 7180-7184. DOI：10.13989/j.cnki.0517-6611.2013.16.126.

[11] 楊龍江， 南慶賢. 共軛亞油酸的功能來源及其影響因素[J]. 肉類工業(yè)， 2001（11）： 43-46.

[12] 吉爾嘎拉， 雙金， 劉常樂， 等. 蘇尼特肉羊的肌肉和脂肪組織中脂肪酸組成的研究[J]. 內(nèi)蒙古農(nóng)牧學(xué)院學(xué)報(bào)， 1994， 15（3）： 59-63.

[13] 陳忠周. 共軛亞油酸的性質(zhì)及合成[J]. 中國油脂， 2000， 25（5）： 41-45.

[14] 莎麗娜， 靳燁， 高金龍. 內(nèi)蒙古蘇尼特羊不同生長階段肌肉脂肪酸特性的研究[J]. 黑龍江畜牧獸醫(yī)， 2009（12）： 84-85. DOI：10.13881/j.cnki.hljxmsy.2009.12.018.

[15] 邵群， 張慧， 邊際. 功能性油脂： 共軛亞油酸研究進(jìn)展[J]. 食品科學(xué)， 2002， 23（2）： 164-166.

[16] 胡猛， 張文舉， 尹君亮， 等. 品種對牛肉中c9，t11-共軛亞油酸含量的影響研究[J]. 食品工業(yè)， 2013（6）： 215-217.

[17] 周玉香， 吳志廣， 李如沖， 等. 共軛亞油酸對灘羊免疫功能及生產(chǎn)性能的影響[J]. 飼料研究， 2012（1）： 7-9. DOI：10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2012.01.004.

[18] 葛長榮， 蘇子峰， 曹正輝. 多不飽和脂肪酸免疫功能的研究進(jìn)展[J]. 飼料工業(yè)， 2005， 26（8）： 1-4.

[19] 楊龍江， 南慶賢. 共軛亞油酸的功能來源及其影響因素[J]. 肉類工業(yè)， 2001（11）： 43-46.

[20] 楊春芳， 覃小麗， 王永華， 等. 不同部位豬脂的總脂肪酸組成及Sn-2位脂肪酸成分分析[J]. 中國油脂， 2011（1）： 73-76.

[21] 李華， 榮群， 張曉萍， 等. 四個(gè)部位的馬脂肪中脂肪酸成分的研究[J]. 新疆農(nóng)業(yè)科學(xué)， 2009（6）： 1341-1344.

[22] 羅軍， 單翠燕， 王海濱， 等. 共軛亞油酸對奶山羊公羔肉用性能及肌肉和脂肪中脂肪酸組成的影響[J]. 飼料與畜牧， 2011（1）： 24-28.

[23] 張根旺， 楊天奎， 郭諍. 生物活性物質(zhì)共軛亞油酸（CLA）的研究： CLA的生理活性和應(yīng)用前景[J]. 中國油脂， 2000， 25（6）： 13-16.

[24] 佚名. 烏珠穆沁羊繁育基地建設(shè)情況[J]. 新疆畜牧業(yè)， 2009（增刊2）： 43-44.

[25] 劉震乙， 文浴蘭， 沙里， 等. 烏珠穆沁羊品種志[J]. 內(nèi)蒙古農(nóng)牧學(xué)院學(xué)報(bào)， 1982（1）： 1-6.?

[26] 于寒松， 彭帥， 謝遠(yuǎn)紅， 等. 一種RNA提取試劑盒： Trizol的使用方法初探[J]. 食品科學(xué)， 2005， 26（11）： 39-42.?

[27] 楊明娟， 陳宏. 牛MRFs基因家族研究進(jìn)展[J]. 中國牛業(yè)科學(xué)， 2010（6）： 51-55.

[28] OFALLON J V， RUSBOOM J， NELSON M L， et al. A direct method for fatty acid methyl ester synthesis： application to wet tissues oil and feedstuffs[J]. Journal of Animal Science， 2007， 85： 1511-1521. DOI：10.2527/jas.2006-491.

[29] 烏蘭塔娜， 瑪麗娜， 德力格爾桑， 等. 氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法分析蘇尼特羔羊肉中共軛亞油酸含量[J]. 食品研究與開發(fā)， 2005（4）： 117-122.?

[30] HU Hongmei， WANG Jiying， ZHU Rongsheng， et al. Effect of myosin heavy chain composition of muscles on meat quality in Laiwu pigs and Duroc[J]. Science in China Series C： Life Sciences， 2008， 51（2）：?127-132. DOI：10.1007/s11427-008-0016-x.?

[31] 呼紅梅， 王繼英， 朱榮生， 等. 萊蕪豬和杜洛克豬肌肉肌球蛋白重鏈組成對肉質(zhì)性狀的影響[J]. 中國科學(xué)C輯： 生命科學(xué)， 2008， 38（1）： 60-65. DOI：10.1360/zc2008-38-1-60.?

[32] 韓正強(qiáng)， 張志成. 日糧中脂肪酸對羊牛豬肉中長鏈多不飽和脂肪酸和共軛亞油酸的影響[J]. 中國畜牧獸醫(yī)， 2006（4）： 9-12.

[33] QUIST P， 武書庚. 奶牛瘤胃及內(nèi)源合成共軛亞油酸[J]. 國外畜牧業(yè)， 2002， 29（1）： 10-11. DOI：10.3969/j.issn.1671-7236.2002.01.004.

收稿日期：2019-01-15

第一作者簡介：薛寶玲（1988—）（ORCID： 0000-0002-8877-8639），女，講師，碩士，研究方向?yàn)檗r(nóng)產(chǎn)品加工及貯藏工程。E-mail： xuebaoling880212@163.com