質(zhì)譜儀在乳腺癌生物標(biāo)記物研究中的應(yīng)用

唐武芳，吳超超，范海偉，高強(qiáng)

1.江蘇鹽城市城南醫(yī)院 設(shè)備處，江蘇鹽城 224001；2.浙江佰辰醫(yī)療科技有限公司 研發(fā)部，浙江 杭州 310030

質(zhì)譜儀在乳腺癌生物標(biāo)記物研究中的應(yīng)用

唐武芳1，吳超超2，范海偉2，高強(qiáng)2

1.江蘇鹽城市城南醫(yī)院 設(shè)備處，江蘇鹽城 224001；2.浙江佰辰醫(yī)療科技有限公司 研發(fā)部，浙江 杭州 310030

乳腺癌是一種威脅女性健康的常見惡性腫瘤，目前臨床上主要依據(jù)組織病理學(xué)要素對(duì)乳腺癌進(jìn)行病情預(yù)測(cè)和治療。以生物標(biāo)記物的發(fā)現(xiàn)和確認(rèn)為核心的臨床蛋白質(zhì)組學(xué)研究逐漸成為了乳腺癌研究的主流方向，這大大提升了臨床對(duì)乳腺癌分子機(jī)理的認(rèn)識(shí)，并推動(dòng)了對(duì)乳腺癌的臨床診斷及預(yù)后。本文主要對(duì)質(zhì)譜儀在乳腺癌生物標(biāo)記物研究中的應(yīng)用進(jìn)展進(jìn)行綜述。首先介紹了基于質(zhì)譜的蛋白質(zhì)組學(xué)的基本概念，然后具體闡述了質(zhì)譜技術(shù)中的一些最新研究進(jìn)展以及相關(guān)技術(shù)在乳腺癌生物標(biāo)記物研究中的應(yīng)用，并且還分析了一些利用質(zhì)譜技術(shù)尋找到的潛在乳腺癌生物標(biāo)記物及其應(yīng)用前景，最后對(duì)質(zhì)譜技術(shù)應(yīng)用于該領(lǐng)域的局限性以及未來發(fā)展趨勢(shì)進(jìn)行了展望。

質(zhì)譜分析；乳腺癌；生物標(biāo)記物；蛋白質(zhì)組學(xué)；同位素標(biāo)記

引言

乳腺癌是一種威脅女性健康的常見惡性腫瘤，是女性中致死率第二高的癌癥[1]。隨著乳房X射線透視技術(shù)應(yīng)用于乳腺癌篩查工作以及乳腺癌綜合治療的開展，自20世紀(jì)90年代開始，全球乳腺癌死亡率呈現(xiàn)出下降趨勢(shì)[2-3]。然而，至少有20%的病人仍然出現(xiàn)了癌細(xì)胞的轉(zhuǎn)移，最終導(dǎo)致嚴(yán)重的后果。目前臨床上主要依據(jù)組織病理學(xué)要素對(duì)乳腺癌進(jìn)行病情預(yù)測(cè)和治療，包括腫瘤大小、腫瘤級(jí)別、結(jié)節(jié)狀態(tài)以及性激素和人類表皮生長因子受體II狀態(tài)等。而，即使乳腺癌病人在腫瘤組織學(xué)上相似，最終病情發(fā)展卻不盡相同，呈現(xiàn)出高度的異質(zhì)性。所以針對(duì)乳腺癌，臨床上仍然需要合適的生物標(biāo)記物來進(jìn)行早期診斷、病人分型、預(yù)后、療效監(jiān)測(cè)以及復(fù)發(fā)風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估[4-5]。

近年來，隨著二代測(cè)序技術(shù)的快速發(fā)展，基因組表達(dá)譜被認(rèn)為是一種可以實(shí)現(xiàn)癌癥分類和預(yù)后的可靠方法，該方法基于基因?qū)用娴牟町惐磉_(dá)分析，從而實(shí)現(xiàn)不同類型癌癥、癌癥不同時(shí)期的區(qū)分。Perou等[6]在2000年分析了8102個(gè)基因的互補(bǔ)DNA（cDNA）芯片，將乳腺癌分為4個(gè)分子亞型。然而，基因功能最終是通過翻譯成的活性蛋白質(zhì)體現(xiàn)的，而且在關(guān)鍵生物進(jìn)程中往往還存在著RNA的可變剪切以及蛋白質(zhì)的翻譯后修飾（例如磷酸化、糖基化、泛素化、乙酰化、甲基化等）。蛋白質(zhì)是基因表達(dá)的最終產(chǎn)物，因此針對(duì)蛋白質(zhì)組學(xué)的研究可以更加直觀和深入地了解癌癥發(fā)病的分子機(jī)理和進(jìn)程。此外，蛋白質(zhì)往往通過特定的通路展現(xiàn)生物功能，針對(duì)腫瘤發(fā)生所關(guān)聯(lián)的特定蛋白通路研究對(duì)癌癥治療具有重要的意義。因此，以生物標(biāo)記物的發(fā)現(xiàn)和確認(rèn)為核心的臨床蛋白質(zhì)組學(xué)研究逐漸成為了乳腺癌研究的主流方向，這大大提升了臨床對(duì)乳腺癌分子機(jī)理的認(rèn)識(shí)，并推動(dòng)了對(duì)乳腺癌的臨床診斷及預(yù)后。

相比較于傳統(tǒng)的以電泳法以及免疫反應(yīng)法為核心的蛋白質(zhì)組分析平臺(tái)，以質(zhì)譜為核心的新分析平臺(tái)逐漸顯現(xiàn)出其獨(dú)特的優(yōu)勢(shì)。質(zhì)譜技術(shù)可以實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床上多種樣品進(jìn)行微量檢測(cè)，包括血清或血漿、唾液、乳汁溢液和尿液等；同時(shí)質(zhì)譜可以對(duì)未知蛋白進(jìn)行研究，并不需要像酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)、免疫組化或免疫印跡等方法那樣需要特異性的抗體；此外，質(zhì)譜分析技術(shù)還具有高精準(zhǔn)度、高重復(fù)性、高通量等優(yōu)勢(shì)。事實(shí)上，基于質(zhì)譜技術(shù)的蛋白質(zhì)組學(xué)分析已廣泛運(yùn)用于乳腺癌研究領(lǐng)域，通過對(duì)不同樣品進(jìn)行蛋白質(zhì)組學(xué)分析，從而篩選得到能夠用于診斷、治療監(jiān)測(cè)以及預(yù)后判斷的乳腺癌潛在生物標(biāo)記物。本文就目前質(zhì)譜在乳腺癌生物標(biāo)記物研究中的應(yīng)用和進(jìn)展進(jìn)行總結(jié)。

1 應(yīng)用于乳腺癌生物標(biāo)志物研究的質(zhì)譜技術(shù)

1.1 多重反應(yīng)監(jiān)測(cè)

多重反應(yīng)監(jiān)測(cè)（Multiple Reaction Monitoring，MRM）技術(shù)作為一種高特異性、高靈敏度的質(zhì)譜數(shù)據(jù)獲取方式，逐步受到生物標(biāo)志物研究者們關(guān)注，成為定量蛋白質(zhì)組學(xué)研究中的重要技術(shù)[7]。在三重四級(jí)桿質(zhì)譜中，利用第一重四級(jí)桿篩選出符合設(shè)定（質(zhì)荷比，m/z）的母離子進(jìn)入碰撞室，在碰撞室（第二重四級(jí)桿）內(nèi)完成母離子碎裂后，通過第三重四級(jí)桿進(jìn)行子離子的篩選，只讓特定質(zhì)荷比的子離子通過，結(jié)合母離子和子離子的雙重選擇，去除了其他背景干擾離子，大大提高了檢測(cè)靈敏度和準(zhǔn)確性。該種掃描模式可以同時(shí)監(jiān)測(cè)多個(gè)母離子/子離子對(duì)，從而實(shí)現(xiàn)與同一疾病相關(guān)的多個(gè)生物標(biāo)記物的同時(shí)檢測(cè)。同時(shí)，該技術(shù)可以針對(duì)某一目標(biāo)蛋白的多個(gè)肽段進(jìn)行監(jiān)測(cè)，這就可以實(shí)現(xiàn)對(duì)發(fā)生翻譯后修飾的蛋白進(jìn)行鑒定[7-8]。

該技術(shù)在癌癥蛋白組學(xué)研究中的應(yīng)用已日漸成熟，在許多乳腺癌的研究中都已經(jīng)采用該技術(shù)對(duì)血清和組織樣品中的潛在生物標(biāo)記物進(jìn)行定量檢測(cè)[9-10]。同時(shí)，該技術(shù)也不斷在發(fā)展，已有研究將免疫法與MRM進(jìn)行結(jié)合，在進(jìn)行MRM掃描定量前，先利用特異性蛋白抗體進(jìn)行免疫富集[10]。此外，針對(duì)乳腺癌動(dòng)物模型以及細(xì)胞系，也都已有利用MRM技術(shù)進(jìn)行蛋白質(zhì)組定量分析的研究報(bào)道[11-12]。

1.2 同位素標(biāo)記相對(duì)和絕對(duì)定量

同位素標(biāo)記相對(duì)和絕對(duì)定量（isobaric Tags for Relative and Absolute Quantitation，iTRAQ）作為一種蛋白標(biāo)記技術(shù)，利用多種同位素試劑標(biāo)記蛋白多肽N末端或賴氨酸側(cè)鏈基團(tuán)，經(jīng)高精度質(zhì)譜儀串聯(lián)分析，可同時(shí)比較多達(dá)8種樣品之間的蛋白表達(dá)量，是近年來定量蛋白質(zhì)組學(xué)常用的高通量篩選技術(shù)。該技術(shù)先是將蛋白質(zhì)裂解為肽段，然后用iTRAQ試劑（AB Sciex）特異性標(biāo)記多肽的氨基基團(tuán)，用串聯(lián)質(zhì)譜方法對(duì)在第一級(jí)質(zhì)譜檢測(cè)到前體離子進(jìn)行碰撞誘導(dǎo)解離，產(chǎn)物離子通過第二級(jí)質(zhì)譜進(jìn)行分析。二級(jí)質(zhì)譜中由于質(zhì)量平衡基團(tuán)丟失，產(chǎn)生了不同質(zhì)荷比的報(bào)告離子，通過對(duì)不同報(bào)告基團(tuán)離子強(qiáng)度的檢測(cè)就實(shí)現(xiàn)了對(duì)它所標(biāo)記的多肽的相對(duì)豐度檢測(cè)。因此，該技術(shù)可以實(shí)現(xiàn)多個(gè)樣品蛋白含量的直接比較以及樣品的重復(fù)分析比較[13]。

一項(xiàng)針對(duì)20組受試者的乳腺癌病例對(duì)照研究中，利用了iTRAQ技術(shù)對(duì)受試者血清標(biāo)記物進(jìn)行了定量，結(jié)果發(fā)現(xiàn)共有32個(gè)蛋白至少在14組受試者中發(fā)生了變化，而其中有4個(gè)蛋白在陽性受試者的血清中出現(xiàn)顯著的改變[14]。而另一項(xiàng)研究中，利用iTRAQ標(biāo)記技術(shù)對(duì)3類乳腺癌組織樣本進(jìn)行了比較，分別是非轉(zhuǎn)移性原位組織、轉(zhuǎn)移性原位組織和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組織[15]。通過蛋白差異分析最后鑒定出了一些潛在的與癌癥轉(zhuǎn)移相關(guān)的蛋白，然而由于樣品量限制，降低了這一研究結(jié)果的可靠性。相關(guān)的研究還有很多，比如iTRAQ技術(shù)已經(jīng)用于乳腺癌細(xì)胞模型研究，用于鑒定出一些與治療抗性或藥物敏感性相關(guān)的潛在生物標(biāo)記物[16-17]。

1.3 表面增強(qiáng)激光解析電離質(zhì)譜相關(guān)技術(shù)

表面增強(qiáng)激光解析電離質(zhì)譜相關(guān)技術(shù)（Surface-enhanced Laser Desorption Ionization-time of Flight Mass Spectrometry，SELDI-TOF-MS）是一種可以實(shí)現(xiàn)樣品一步分離以及高通量檢測(cè)的蛋白質(zhì)組分析方法。利用具有不同化學(xué)表面的芯片，選擇性的結(jié)合一組蛋白質(zhì)，然后利用激光束能量進(jìn)行分子電離并送入質(zhì)量分析器。該技術(shù)將表面增強(qiáng)的選擇性捕獲與高分辨率的飛行時(shí)間質(zhì)譜法相結(jié)合，以獲得蛋白質(zhì)圖譜和發(fā)現(xiàn)生物標(biāo)志物。該技術(shù)甚至可以對(duì)50～100個(gè)腫瘤細(xì)胞或是0.1血漿（5L血漿稀釋50倍）實(shí)現(xiàn)高質(zhì)量檢測(cè)[18]，因此在臨床、蛋白質(zhì)組學(xué)等研究領(lǐng)域得到廣泛地應(yīng)用。

SELDI-TOF-MS已經(jīng)廣泛應(yīng)用于乳腺癌的血清、乳汁溢液、組織和乳腺導(dǎo)管灌洗液的標(biāo)記物檢測(cè)。Li等[19]采用該技術(shù)鑒定出了3個(gè)血清生物標(biāo)記物，經(jīng)驗(yàn)證其敏感性和特異性分別為93%和91%。

1.4 質(zhì)譜成像技術(shù)

質(zhì)譜成像技術(shù)（Imaging Mass Spectrometry，IMS）是一種新型的組織成像技術(shù)，該技術(shù)使用基質(zhì)輔助激光解析電離飛行時(shí)間質(zhì)譜對(duì)直接來源于組織切片中的肽和蛋白質(zhì)進(jìn)行剖析和成像，以便獲得有關(guān)這些肽和蛋白質(zhì)局部相對(duì)豐度和空間分布的精確信息。該技術(shù)已經(jīng)發(fā)展成為包括乳腺癌在內(nèi)眾多癌癥生物標(biāo)記物發(fā)現(xiàn)的有效手段[20-21]。

Bauer等[22]通過利用IMS技術(shù)，比較了來自于新輔助紫杉醇治療和放射治療后病情完全緩解的乳腺癌病人和仍然有殘留病灶的乳腺癌病人的組織切片，結(jié)果發(fā)現(xiàn)Defensin家族蛋白可以作為乳腺癌病人病理完全緩解的一個(gè)標(biāo)志；另外一項(xiàng)研究則利用IMS技術(shù)探究HER2陽性乳腺癌組織中的蛋白標(biāo)記物，最終鑒定到一個(gè)富含半胱氨酸蛋白1（CRIP1），作為判斷HER2陽性型乳腺癌的一個(gè)高靈敏性和特異性的標(biāo)記物[20]。隨著激光技術(shù)的發(fā)展，使得質(zhì)譜成像技術(shù)具有更大的數(shù)據(jù)獲取量，預(yù)示著這項(xiàng)技術(shù)在今后的生物標(biāo)記物開發(fā)領(lǐng)域中會(huì)具有更為廣泛的應(yīng)用。

2 乳腺癌相關(guān)生物標(biāo)記物

對(duì)于目前乳腺癌的臨床蛋白質(zhì)組學(xué)研究，主要集中在兩個(gè)方面：一是針對(duì)乳腺癌尋找新的生物標(biāo)記物研究；另一個(gè)則是針對(duì)引起乳腺癌以及癌癥病情發(fā)展相關(guān)的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的研究，借此篩選用于預(yù)后和治療效果預(yù)測(cè)的標(biāo)記物以及新的藥物靶點(diǎn)。這些研究為今后乳腺癌的藥物治療研發(fā)以及提升治療效果提供了堅(jiān)實(shí)的基礎(chǔ)。其中，有相當(dāng)大一部分研究都采用了質(zhì)譜技術(shù)對(duì)乳腺癌病人特異的蛋白質(zhì)譜進(jìn)行分析。

2.1 用于乳腺癌的分型

S?rlie等[23]利用cDNA微陣列芯片技術(shù)，根據(jù)基因表達(dá)差異將乳腺癌分為4種新的亞型，分別為Luminal A型、Luminal B型、ERBB2陽性型以及Basal-like型。相比較于Luminal型，ERBB2陽性型以及Basal-like型的病人存活期更短。Brozkova等[24]利用質(zhì)譜技術(shù)從蛋白質(zhì)組層面證實(shí)了這一分類，并發(fā)現(xiàn)其中ANX V和HSP27蛋白可以作為乳腺癌的潛在生物標(biāo)記物。這一新分類與當(dāng)前根據(jù)組織病理學(xué)分類有所不同，能夠更好地解釋為何具有相似組織病理的病例卻有不同病情發(fā)展的原因。通過基因表達(dá)譜和蛋白質(zhì)表達(dá)譜的交叉驗(yàn)證，使我們對(duì)乳腺癌的分型有了更加全面和深入的認(rèn)識(shí)，對(duì)臨床診斷具有重要的意義。

2.2 用于乳腺癌的預(yù)后

相比針對(duì)乳腺癌診斷方面研究，用于乳腺癌預(yù)后的生物標(biāo)記物研究相對(duì)較少。有一項(xiàng)研究報(bào)道，通過利用臨床蛋白質(zhì)組學(xué)研究方法對(duì)乳腺癌細(xì)胞系進(jìn)行了分析，最終發(fā)現(xiàn)靜止素硫基氧化酶1（QSOX1）蛋白在惡性乳腺癌細(xì)胞增殖前、侵染前的進(jìn)程中扮演著重要的角色，可以作為評(píng)估乳腺癌復(fù)發(fā)風(fēng)險(xiǎn)以及低存活率Luminal B型乳腺癌預(yù)后的一種新的生物標(biāo)記物[25]。而在另一項(xiàng)研究中，研究團(tuán)隊(duì)利用質(zhì)譜對(duì)乳腺癌組織與正常乳腺組織分別進(jìn)行蛋白定量（同位素標(biāo)記技術(shù)），并結(jié)合大群體（n=967）的組織芯片驗(yàn)證，試圖篩選出能夠用于乳腺癌監(jiān)測(cè)以及預(yù)后的新型生物標(biāo)記物，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，在淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的病人中核心蛋白聚糖（Decorin，DCN）具有顯著的高表達(dá)，在出現(xiàn)遠(yuǎn)距離轉(zhuǎn)移的病人中內(nèi)質(zhì)網(wǎng)素（Endoplasmin，HSP90B19）具有顯著的高表達(dá)[26]。此外，該研究還表明，通過對(duì)DCN和HSP90B19高表達(dá)的病人進(jìn)行激素治療，可以顯著提升總存活率。而就像其他基于質(zhì)譜技術(shù)的生物標(biāo)記物發(fā)現(xiàn)報(bào)道的一樣，這些發(fā)現(xiàn)的潛在生物標(biāo)記物需要在獨(dú)立人群中進(jìn)行下一步的驗(yàn)證和確認(rèn)。

研究人員曾經(jīng)利用傳統(tǒng)的蛋白質(zhì)組學(xué)研究方法，篩選出尿激酶纖維蛋白溶酶原激活劑（uPA）以及纖溶酶原激活物抑制劑1（PAI-1）等蛋白標(biāo)記物用于淋巴結(jié)陰性乳腺癌患者的預(yù)后，而后通過運(yùn)用質(zhì)譜分析技術(shù)，同樣篩選出鐵蛋白輕鏈（Ferritin Light Chain，F(xiàn)TL），這一標(biāo)記物被用于淋巴結(jié)陰性乳腺癌患者的預(yù)后[27]。在這一涉及多個(gè)中心的研究當(dāng)中，成功地驗(yàn)證了鐵蛋白輕鏈作為乳腺癌預(yù)后標(biāo)記物的重要價(jià)值，F(xiàn)TL的高表達(dá)往往預(yù)示著該乳腺癌亞型具有更強(qiáng)烈的侵襲性表征[28]。此外，該研究還表明FTL儲(chǔ)存于乳腺腫瘤組織相關(guān)巨噬細(xì)胞中，因此針對(duì)臨床上檢測(cè)發(fā)現(xiàn)淋巴結(jié)陰性乳腺癌病人的腫瘤FTL高表達(dá)以及巨噬細(xì)胞中富含鐵蛋白，就可以針對(duì)性地進(jìn)行更高頻次的監(jiān)測(cè)以及輔助性治療。

2.3 用于乳腺癌的治療監(jiān)測(cè)

乳腺癌的治療監(jiān)測(cè)主要包括術(shù)后的腫瘤復(fù)發(fā)風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估以及藥物療效監(jiān)測(cè)等，通過對(duì)相應(yīng)生物標(biāo)記物的跟蹤監(jiān)測(cè)，隨時(shí)調(diào)整治療方案，這對(duì)臨床乳腺癌的治療具有重要的意義。He等[29]通過質(zhì)譜分析以及ELISA驗(yàn)證，篩選出血清CD14蛋白可作為乳腺癌復(fù)發(fā)風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估的潛在生物標(biāo)記物，若血清中CD14顯著降低，可表明病人具有較高復(fù)發(fā)風(fēng)險(xiǎn)。這一研究表明CD14可以在預(yù)后困難的乳腺癌亞型病人的復(fù)發(fā)預(yù)測(cè)中扮演重要的角色，而針對(duì)該標(biāo)記物的臨床轉(zhuǎn)化，有多個(gè)研究團(tuán)隊(duì)正在進(jìn)行驗(yàn)證。

在針對(duì)治療響應(yīng)相關(guān)的標(biāo)志物研究中，視黃酸受體（Recombinant Retnoid Acid Receptor，RARA）值得更多的關(guān)注。在一項(xiàng)研究中，研究人員對(duì)乳腺癌細(xì)胞系進(jìn)行了蛋白質(zhì)組定量從而篩選出RARA蛋白作這一標(biāo)記物，并在兩個(gè)獨(dú)立的病人群體中進(jìn)行了驗(yàn)證[30]。研究結(jié)果表明了RARA在他莫昔芬抗性病人中扮演著重要的角色，而該蛋白可以作為ER陽性型乳腺癌的預(yù)測(cè)標(biāo)記物，同時(shí)RARA也是一個(gè)潛在藥物靶點(diǎn)。該研究采用了對(duì)藥物他莫昔芬有響應(yīng)和無響應(yīng)的兩種細(xì)胞系，利用質(zhì)譜分別進(jìn)行蛋白質(zhì)組學(xué)分析從而篩選出差異蛋白，并通過Western Blotting、ELISA和IHC方法在病人樣品上進(jìn)行驗(yàn)證。通過兩個(gè)獨(dú)立的病人群體試驗(yàn)，結(jié)果顯示在接受他莫昔芬輔助治療的ER陽性型乳腺癌病人中，腫瘤中RARA含量越高，相應(yīng)病人的無復(fù)發(fā)生存期就會(huì)縮短。但是仍然需要后續(xù)大樣本的驗(yàn)證，并且清楚RARA蛋白與他莫昔芬抗性之間生物學(xué)關(guān)系，才能將這一標(biāo)記物應(yīng)用于臨床?？傊?，該試驗(yàn)是蛋白質(zhì)組學(xué)研究中的一個(gè)典型，其基于乳腺癌細(xì)胞系進(jìn)行標(biāo)記物差異表達(dá)分析，并在病人群體中得到了后續(xù)驗(yàn)證。這一發(fā)現(xiàn)對(duì)指導(dǎo)高表達(dá)RARA的抗他莫昔芬乳腺癌病人用藥具有重要的價(jià)值。

3 總結(jié)

乳腺癌作為一種集復(fù)雜性以及異質(zhì)性為一體的典型疾病，針對(duì)其的蛋白質(zhì)組學(xué)研究日漸重要。而伴隨著以質(zhì)譜為主的蛋白質(zhì)組研究工具的不斷發(fā)展，對(duì)于低豐度蛋白也可以實(shí)現(xiàn)大批量、高通量的檢測(cè)、鑒定以及功能分析，進(jìn)而產(chǎn)生了海量的蛋白質(zhì)組學(xué)數(shù)據(jù)以揭示乳腺癌分子水平的特征。然而，針對(duì)乳腺癌的蛋白質(zhì)組學(xué)研究目前存在主要的局限性還是在于該癌癥復(fù)雜的生理生化進(jìn)程，我們?nèi)匀粺o法真正明確究竟是哪些蛋白才是正在觸發(fā)癌癥發(fā)生通路的，哪些蛋白是通路激活后發(fā)生特異性變化的。這些問題都亟待新的研究去解決。細(xì)胞以及腫瘤微環(huán)境水平的蛋白質(zhì)組定量研究揭示了腫瘤發(fā)生隨著時(shí)間推移的分子譜變化，以及在某一時(shí)間點(diǎn)上細(xì)胞內(nèi)哪些蛋白質(zhì)以一種怎樣的方式發(fā)生著改變，這為我們真正理解乳腺癌發(fā)生發(fā)展的進(jìn)程提供了可能。

不同亞型的乳腺癌一般具有不同的病情發(fā)展和結(jié)局，而如何區(qū)分不同的亞型一直以來是臨床上需要面對(duì)的難題，通過基于質(zhì)譜的蛋白質(zhì)組學(xué)研究揭示乳腺癌的分子特征是一種非常重要且有效的手段。本文對(duì)質(zhì)譜技術(shù)的發(fā)展以及乳腺癌生物標(biāo)記物的研究進(jìn)行了回顧性綜述，進(jìn)一步明確了如何利用蛋白質(zhì)組學(xué)進(jìn)行乳腺癌分型、診斷、預(yù)后、生物標(biāo)記物篩選、不同亞型治療藥物響應(yīng)研究等。雖然篩選出的生物標(biāo)記物距離真正的臨床應(yīng)用還有一段距離，但是卻給我們指明了研究的方向。相信隨著質(zhì)譜技術(shù)的進(jìn)一步發(fā)展以及多醫(yī)學(xué)中心的聯(lián)合努力，包括乳腺癌在內(nèi)的多種腫瘤標(biāo)記物的發(fā)現(xiàn)、驗(yàn)證以及臨床轉(zhuǎn)化都會(huì)更進(jìn)一步。

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本文編輯 劉峰

Application of Mass Spectrometer in the Study of Breast Cancer Biomarkers

TANG Wu-fang1, WU Chao-chao2, FAN Hai-wei2, GAO Qiang2
1. Department of Equipment, Yancheng Chengnan Hospital, Yancheng Jiangsu 224001, China; 2. Department of Research and Development, Biozon Medical Science & Technology Co., Ltd., Hangzhou Zhejiang 310030, China

Breast cancer is a kind of common malignant tumor threatening women's health. At present, histopathological factor is the main clinical basis for breast cancer forecast and treatment. Discovery and confirmation of biomarkers based on clinical proteomics study has gradually become the mainstream of breast cancer research, which greatly enhances clinical understanding of molecular mechanism of breast cancer, and promotes the clinical diagnosis and prognosis of breast cancer. This article mainly reriewed the application progress of mass spectrometry in the study of breast cancer biomarkers. Firstly, it introduced basic concept of proteomics based on mass spectrometry, then detailed the latest research progress on mass spectrometry techniques and related application in breast cancer biomarker research, furthermore it also listed some potential breast cancer biomarkers with mass spectrometry as well as their application prospect. Finally, the limitations and future development trend of mass spectrometry in breast cancer biomarker study were also discussed.

mass spectrometry; breast cancer; biomarker; proteomics; isotope labeling

TB774；R737.9

A

10.3969/j.issn.1674-1633.2017.02.025

1674-1633(2017)02-0091-05

2016-10-19

2016-11-15

作者郵箱：yctwf@163.com