柿葉的研究概況

陳科成 甄丹丹 甄漢深 韋錦梅 黃鳳音

廣西中醫(yī)藥大學(xué)，廣西 南寧 530001

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柿葉的研究概況

陳科成 甄丹丹*甄漢深 韋錦梅 黃鳳音

廣西中醫(yī)藥大學(xué)，廣西 南寧 530001

柿葉作為我國的傳統(tǒng)中藥材，資源非常豐富，其營養(yǎng)價值和保健價值越來越引起人們的重視。柿葉中含有黃酮類、三萜類、多糖類、多酚類及揮發(fā)類等多種成分，抗老化、抗菌為柿葉中藥效成分的主要藥理作用。為使柿葉資源更好地深入利用和開發(fā)，文章對柿葉的有效成分種類、提取分離和檢測方法、提取物的藥理作用及研究過程中的不足之處和展望進行綜述。

柿葉；有效成分；藥理作用

柿葉為柿樹科(Ebenaceae)柿樹屬(Diospyros)植物柿(DiospyroskakiL.f.)的新鮮或干燥葉。柿資源在我國很多地區(qū)均有分布[1]，其營養(yǎng)價值和保健價值較高，近年來越來越引起人們的關(guān)注。現(xiàn)代研究表明柿葉的有效成分很多，其中黃酮類和三萜類成分研究較多，不僅有學(xué)者深入研究其藥理作用，而且這些藥效成分的提取方法和含量檢測的研究也很多。對多酚類、多糖類、揮發(fā)類等藥效成分主要進行提取方法的研究，抗癌、抗氧化、抗老化、抗菌為柿葉中藥效成分的主要藥理作用；超臨界二氧化碳提取法、大孔樹脂提取法是近代使用的創(chuàng)新型提取方法，超聲波提取法、微波提取法和溶劑提取法是一直使用至今并且使用較廣泛的方法，提取的效果也比較明顯[2]?？茖W(xué)研究者們也正在研發(fā)新的提取方法和優(yōu)化提取條件。傳統(tǒng)的中藥材分析中，柿葉研究只是其中一小部分，筆者對柿葉的研究概況進行整理，現(xiàn)綜述如下。

1 有效成分種類和藥理作用

1.1 黃酮類化合物 黃酮類化合物作為柿葉中含量較高的藥效成分之一，其藥理作用非常明顯，也是科研者研究較多的藥效成分。黃酮苷類和黃酮醇類化合物是柿葉中主要的黃酮類化合物，其中主要的黃酮苷類成分有蘆丁、山萘酚3-O-β-D-葡萄糖苷及異槲皮素等；主要的黃酮醇類成分為榭皮素、楊梅黃酮及金絲桃苷等；張勝海等[3]提取并鑒定黃酮類成分為：染料木素、異鼠李素、榭皮素、蘆丁等。提取柿葉中黃酮類化合物的方法有很多，研究者在不斷優(yōu)化這些提取方法的提取條件，如董江濤等[4]為探討超聲波輔助提取法提取黃酮的最佳提取條件，采用響應(yīng)面曲線法優(yōu)化改法的提取條件；岳紅等[5]不僅深入地探討新型超臨界萃取技術(shù)的影響因子，而且還得出了超臨界萃取技術(shù)的最佳提取工藝。除了以上使用的提取方法，還可以采用溶劑提取法、微波提取法和大孔樹脂提取法。有研究者測定柿葉中黃酮類成分的含量經(jīng)常用到光譜法，有使用簡單便捷的紫外-可見吸光光譜法和色譜法，有分離測定效果較好的高效液相色譜法，如劉紹雄等[6]測定黃酮的含量用紫外-可見吸光光譜法；王麗峰等[7]測定黃酮的含量用反向高效液相色譜法；孫彩云等[8]用創(chuàng)新的半仿生提取法，提取并研究了黃酮類成分抗氧化和抗菌作用；馬新博等[9]還研究了黃酮成分的抗癌作用。

1.2 多糖類化合物 柿葉中含有豐富的降血糖和免疫調(diào)節(jié)等藥理作用明顯的多糖類化合物，多糖類成分的研究較少以單個多糖成分作為研究對象，科研研究者多以總多糖成分為對象研究其藥理作用，其中葡萄糖、鼠李糖及半乳糖等是主要的多糖類成分。根據(jù)以往文獻表明，多糖類化學(xué)成分的提取方法很多，超聲波提取法、微波提取法和溶劑提取法是常見的方法，李志平等[10]用傳統(tǒng)的微波輔助提取法來提取柿葉中的多糖，并探討影響改法的因素，用正交試驗優(yōu)化了影響因素；谷維娜等[11]創(chuàng)新了多糖類成分的提取方法，用水提醇沉法，因為多糖具有熱水溶性，為了減少脂溶性物質(zhì)溶出,水提醇沉法用熱水提取，相對于其他提取方法成本較低[12]；鄧航等[13]用昆明種小鼠進行多糖的藥理作用研究，得出多糖類化合物具有降血糖作用的結(jié)論。

1.3 多酚類化合物 柿葉中含有豐富的具有很強的抗氧化作用的多酚類化合物,該類化合物也含有很多單體成分，研究者分離鑒定出多種單體成分，其中主要的單體成分有食子酸、咖啡酸、綠原酸及肉桂酸等。大孔樹脂提取法和溶劑提取法等傳統(tǒng)提取法可用于很多藥理成分的提取，不僅可以用于柿葉中黃酮類、多糖類成分，還可以用于柿葉中多酚類成分的提取。魯軍等[14]先用溶劑提取法提取，并用大孔樹脂進行純化柿葉中多酚成分，用純化的多酚類成分進行研究，證明了柿葉的多酚類化合物具有較強的抗氧化作用。含量測定方法主要是UV-Vis和HPLC，兩者相比來說，研究者常用UV-Vis的方法。趙豐麗等[15]探討了FC法顯色的最佳條件，并用該方法測定柿葉多酚類化合物的含量，對多酚類化合物進行抗氧化實驗，證明了柿葉多酚類化合物具有較強的抗氧化作用。

1.4 三萜類化合物 齊墩果酸和熊果酸是柿葉中主要的三萜類化合物，這兩種成分的抗炎保肝、降血糖、降血脂及抗腫瘤的作用明顯[16-18]；除上述的三萜類單體成分，研究者還鑒定了其他的單體成分，包括19A- 羥基烏蘇酸、烏蘇酸、烏蘇醇及白樺脂酸等成分。三萜類化合物中藥理成分齊墩果酸和熊果酸也可以用傳統(tǒng)的超聲波提取法和溶劑提取法。如周江煜等[19]篩選和探討了影響提取齊墩果酸和熊果酸的因素，采用正交試驗得到最佳的提取因素；董海麗等[20]不僅比較證明了超聲波輔助提取熊果酸優(yōu)于微波輔助提取，而且通過單因素和正交試驗優(yōu)化最佳的提取工藝；盛曉靜等[21]采用方法簡單準(zhǔn)確，重現(xiàn)性好的HPLC-ELSD對齊墩果酸和熊果酸進行含量測定，可用于柿葉質(zhì)量控制；柿葉中三萜類成分具有降血糖和抗腫瘤的藥理作用，鄧航等[22-23]用柿葉中三萜類化合物對糖尿病和腫瘤小鼠進行治療實驗，證明了三萜類化合物具有明顯的降血糖和抗腫瘤的藥理作用。

1.5 揮發(fā)性化合物 柿葉中的醛和醇類揮發(fā)性化合物,因其具有較好的香味和抗菌作用,可進一步開發(fā)為香料和抗菌藥物；而研究者通過各種方法鑒定了其主要的單體醛類揮發(fā)性成分為(E)-2- 己烯醛和(Z)-2- 己烯醛等，單體醇類揮發(fā)性成分為3,7,11,15- 四甲基 -2- 十六烯 -1- 醇和(E)-3- 己烯 -1- 醇。很多中藥材都含有揮發(fā)性成分，而且揮發(fā)性成分的提取較容易，研究者對該成分的提取方法進行了很多研究，并優(yōu)化了其工藝條件，如張穎等[24]探討了揮發(fā)油的攪拌提取法以及影響該法的提取工藝條件，優(yōu)化了該法提取工藝條件；岳虹等[25]探討了影響超臨界CO2萃取技術(shù)的因素，通過單因素和正交試驗優(yōu)化了該技術(shù)的工藝條件。GS-MS法是分離測定柿葉揮發(fā)性成分的主要方法，安秋榮等[26]對柿葉揮發(fā)性成分進行分離鑒定用GS-MS法，這種方法不僅能夠進行分離鑒定，也能夠測定該成分的含量。柿葉的揮發(fā)油主要的藥理作用是抗菌作用，研究者也對抗菌活性進行研究，陳靜等[27]使用水蒸氣蒸餾法提取柿葉揮發(fā)性成分，并探討了該成分對各種細(xì)菌的抗菌，認(rèn)為該成分可能是一種作用顯著的臨床抗菌藥物；馮鞏等[28]總結(jié)了幾種常用和效果較好的提取揮發(fā)性成分的方法。

1.6 其他成分 柿葉含有的成分很多，以上概述的5種成分是研究較多的常見成分，柿葉中還含有主要單體成分是維生素C和琥珀酸的有機酸類成分、主要單體成分是棕櫚酸和油酸的脂肪酸類成分、主要單體成分是油菜甾醇和豆甾醇的植物甾醇類成分、主要成分是6- 羥基 -7- 甲氧基香豆素和莨蓉亭的香豆素類成分、β- 胡蘿卜素、纖維素、粗蛋白以及粗脂肪等其他成分；柿葉中其他藥效成分也有明顯的藥理作用，這些成分的主要藥理作用沒有概述的5種主要成分那么明顯，導(dǎo)致這些成分被研究和發(fā)表的文章的機會比較少，但這些成分仍具有抗氧化、抗菌、抗壞血酸、降血脂及抗腫瘤藥理作用[29]，具有較高的研究價值，期望研究者加強對這些成分的研究。

2 資源開發(fā)的可能性以及現(xiàn)狀

以柿葉的提取物作為食品添加劑、保健品以及藥品的可能性非常大，原因有：柿葉中各種藥效成分的的作用非常明顯，而且利用這些成分開發(fā)的產(chǎn)品，可產(chǎn)生明顯的治療作用及非常小的副作用，非常綠色健康；我國柿資源非常豐富，原材料來源方便且經(jīng)濟成本低；隨著科技的進步，對柿葉的研究越來越深入和系統(tǒng)，開發(fā)利用柿葉資源的可能性增大，前景廣闊。以前對柿葉研究不充分，所以絕大部分的柿葉沒有得到利用，但隨著科技的進步，該資源的藥效作用得到了系統(tǒng)地研究，越來越多的柿葉產(chǎn)品面向市場，但多是以保健產(chǎn)品的形式；其中柿葉茶是開發(fā)較早的產(chǎn)品，開發(fā)柿葉茶最早的國家并不是柿資源最豐富的中國而是日本，日本人很早就以柿葉作為茶飲用，由于其制作工藝簡單且沒有其他茶產(chǎn)品的副作用，被當(dāng)作純天然的保健產(chǎn)品[30]；柿葉還用于保健食品的制作，柿葉蛋糕就是其代表，不僅可以作為食物的作用，又可以起到保健作用[31]；柿葉還可以用于復(fù)方制劑的開發(fā)，中成藥“腦心清”[32]和“柿葉口服液”就是其代表，其中，“腦心清”獲得澳大利亞 TGA 成功列冊，面向國際，其主要用于脈絡(luò)瘀阻、胸痛心痛、胸中憋悶、心悸見短引起的冠心病、腦動脈硬化。除了上述產(chǎn)品外，柿葉還用于飲料、祛斑膏及柿葉晶等產(chǎn)品；隨著國內(nèi)外對柿葉資源的開發(fā)會越來越完善，會有更多高效低毒的柿葉產(chǎn)品面世。

3 研究中存在問題

3.1 有效成分的利用率較低 柿葉作為我國傳統(tǒng)的藥材，其營養(yǎng)和保健價值值得深入研究，其提取分離和鑒定方法、藥效成分的種類以及藥理作用一直都是研究者不斷進行深入研究的方向。經(jīng)過研究者多年來的研究，已經(jīng)對柿葉提取分離和鑒定方法、藥效成分的種類以及藥理作用有了初步了解，科研者可以以此為基礎(chǔ)進一步探討和研究柿葉，推動柿葉更加成熟的發(fā)展；但柿葉的來源非常豐富，據(jù)研究表明柿樹科在全球已達6屬450余種，其中我國有2屬50多種[29]，但是科研工作者沒有探討出柿葉不同生長期、不同產(chǎn)地和不同品種的有效成分含量差異的規(guī)律。因此，目前不能充分利用柿葉中的主要藥效成分，使更高質(zhì)量的柿葉系列產(chǎn)品的開發(fā)不足。

3.2 柿葉復(fù)方制劑開發(fā)極少 柿葉中有明顯藥理作用的成分非常豐富，而且柿葉產(chǎn)品副作用小，安全有效且健康，非常吻合人們所追求的安全、健康和環(huán)保的消費理念。目前柿葉主要用于開發(fā)飲品、化妝品、保健品、飼料和食品包裝等領(lǐng)域，但是這些領(lǐng)域的產(chǎn)品都與柿葉的各種明顯藥效作用沒有較大關(guān)聯(lián)，沒有充分地利用這些藥效成分，與藥用產(chǎn)品的作用相比較低下，復(fù)方制劑的開發(fā)和臨床應(yīng)用一系列藥用產(chǎn)品的研發(fā)比較缺乏和空白，民間流傳著各種柿葉的偏方，這就導(dǎo)致柿葉利用率低下，使得柿產(chǎn)品的購買說服力比較低下；柿葉中藥理作用明顯的功效成分沒有得到充分地利用，不利于開發(fā)柿葉的企業(yè)的高效和可持續(xù)發(fā)展。

4 建議

4.1 加強不同品種、不同產(chǎn)地和不同生長期柿葉的有效成分的含量差異研究 不同生長期、產(chǎn)地和品種的柿葉含有的藥效成分具有明顯差異，而且很多研究者對這方面的研究重視不夠。故需要加強研究，探討不同生長期、產(chǎn)地和品種的柿葉的活性成分含量變化的規(guī)律，得出柿葉各種主要藥效成分含量最佳的生長期、品種和地區(qū)。這不僅能夠為柿葉的各種活性成分的高效、合理應(yīng)用提供科學(xué)依據(jù)，也可更好地研究柿葉開發(fā)復(fù)方制劑，使柿葉中藥理作用顯著的成分得到充分利用，大大地提高柿葉的利用率。而且根據(jù)含量變化的規(guī)律選擇藥效成分含量高的優(yōu)良品種、地區(qū)和最佳生長期的葉用柿，并以這些柿葉進行科研實驗，可以明顯地提高科研的成功率再對其進行培育，推動更高質(zhì)量的柿葉系列產(chǎn)品的開發(fā)。

4.2 加強對柿葉復(fù)方制劑的開發(fā) 目前國內(nèi)企業(yè)多數(shù)以柿葉作為原材料進行生產(chǎn)，主要生產(chǎn)用于安全和綠色健康保健品，以柿葉的活性成分開發(fā)復(fù)方制劑較少，且制劑產(chǎn)品主要有用于皮膚過敏和面部色素異常的柿葉祛斑膏、用于血小板減少性紫癜和胃出血的柿葉口服液和對心腦血管疾病療效顯著的腦心清等，這些制劑相比柿葉茶和柿葉飲品來說更有藥用價值，能夠更充分利用柿葉中高效的藥效成分。

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壯瑤-藥協(xié)同創(chuàng)新中心(桂教科研[2013]20號)；廣西壯瑤藥重點實驗室(桂科基字[2014]32號)；廣西重點學(xué)科壯藥學(xué)(桂教科研[2013]16號)；廣西八桂學(xué)者中藥創(chuàng)新理論與藥效研究(J13162)的項目資助。

陳科成(1993-)，男，漢族，碩士研究生，研究方向為藥學(xué)和中藥學(xué)。E-mail:1969970192@qq.com

甄丹丹(1983-)，女，漢族，碩士，研究方向為中醫(yī)藥的教學(xué)和科研。E-mail：413523094@qq.com

R282.6

A

1007-8517(2017)13-0060-04

2017-04-28 編輯：梁志慶)